ENZIMOLOGIA, 7

Autor: MORENO PARRA ALBERTO.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA .
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTA TESIS DOCTORAL SE HA DESCRITO POR PRIMERA VEZ UNA NUEVA CLASE DE ALCOHOL DESHIDROGENASA: LA ADH CLASE IV DE ESTOMAGO. LOS ESTUDIOS REALIZADOS SE HAN CENTRADO EN EL ENZIMA HUMANO, EL CUAL SE HA PURICADO, SE HA CARACTERIZADO ESTRUCTURAL Y CINETICAMENTE, SE HA CLONADO Y CARACTERIZADO SU CDNA, SE HAN ESTUDIADO SUS RELACIONES ESTRUCTURA-FUNCION, SE HA INVESTIGADO SU ACTIVIDAD Y DISTRIBUCION TISULAR Y SE HA DETERMINADO SU CONTRIBUCION AL METABOLISMO GASTRICO DEL ETANOL. ASIMISMO SE HA ESTUDIADO LA POSICION DE LA CLASE IV EN LA EVOLUCION DEL SISTEMA ADH. PARA ELLO, SE HA PURIFICADO Y SECUENCIADO LA ADH CLASE IV DE ESTOMAGO DE RATA Y SE HAN ESTUDIADO LAS RELACIONES ESTRUCTURA-FUNCION DE ESTE ENZIMA, SE HA PURIFICADO E INICIADO LA CARACTERIZACION ESTRUCTURAL DE LA ADH DE ESTOMAGO DE RANA Y SE HA INVESTIGADO LA POSIBLE PRESENCIA DE ADH CLASE IV EN INVERTEBRADOS (CEFALOPODOS). FINALMENTE, SE HA ANALIZADO LA EXISTENCIA DE ADH CLASE IV EN DISTINTAS LINEAS CELULARES.

Autor: PEREZ GILABERT MANUELA.
Año: 1994.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR (A) PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HA CARACTERIZADO LA ACTIVIDAD HIDROPEROXIDASA DE LIPOXIGENASA DE SOJA MEDIANTE EL USO DE DISTINTOS SUSTRATOS NO FENOLICOS DONADORES DE ELECTRONES Y DE INTERES FISIOLOGICO. ESTE ESTUDIO SE HA LLEVADO A CABO TANTO EN MEDIOS ACUOSOS TAMPONADOS COMO EN SISTEMAS MICELARES. EN MEDIOS ACUOSOS TAMPONADOS SE HA ESTUDIADO LA OXIDACION DE FENOTIAZINAS, UN GRUPO DE AGENTES ANTIPSICOTICOS AMPLIAMENTE UTILIZADOS EN EL TRATAMIENTO DE LA ESQUIZOFRENIA, LLEGANDOSE A LA CONCLUSION DE QUE ESTA OXIDACION ES FUERTEMENTE DEPENDIENTE DE LOS SUSTITUYENTES EN POSICION 2- Y 10- DEL ANILLO DE TIAZINA Y ESTABLECIENDOSE UNA GRAFICA, A LA QUE DENOMINAMOS "ENZIMATICA-QUIMICA", QUE RELACIONA LA KM PARA CADA FENOTIAZINA CON LA K'APP DE DESCOMPOSICION DEL RADICAL CATION. TAMBIEN SE HA ESTUDIADO EL MECANISMO DE N-DESMETILACION DE AMINOPIRINA POR LA ACTIVIDAD HIDROPEROXIDASA DE LIPOXIGENASA, LO QUE NOS HA PERMITIDO PROPONER UN NUEVO MODELO DE EVOLUCION DEL RADICAL. ESTE MODELO ES CAPAZ DE EXPLICAR EL EFECTO DEL PH SOBRE LA K'APP DE DESCOMPOSICION DEL RADICAL CATION PREVIAMENTE DESCRITO EN LA BIBLIOGRAFIA PARA OTROS SISTEMAS ENZIMATICOS CON UN GRUPO HEMO EN SU CENTRO ACTIVO. COMO PASO PREVIO PARA EL ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD HIDROPEROXIDASA DE LIPOXIGENASA EN MEDIOS NO CONVENCIONALES, CARACTERIZAMOS LA ACTIVIDAD DIOXIGENASA DE ESTA ENZIMA EN UN SISTEMA TERNARIO DE AOT/H2O / ISOOCTANO. PARA ENTENDER EL COMPLEJO COMPORTAMIENTO DE LIPOXIGENASA EN ESTE SISTEMA DESARROLLAMOS UNA HERRAMIENTA GRAFICA (LA "GRAFICA DE LA FASE ACTIVA") QUE EXPLICA EL EFECTO DE LA VARIACION DEL TAMAÑO ( ) Y LA CONCENTRACION DE MICELAS (0) SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA. LA ACTIVIDAD HIDROPEROXIDASA DE LIPOXIGENASA EN MICELAS INVERSAS DE AOT/H2O/ISOOCTANO FUE ESTUDIADA UTILIZANDO NUEVAMENTE AMINOPIRINA COMO SUSTRATO DONADOR DE ELECTRONES. AL ANALIZAR EL EFECTO DEL TAMAÑO MICELAR O DE LA CONCENTRACION DE MICELAS SE OBTENIA UNA RESPUESTA ACAMPANADA SI EL ESTUDIO SE LLEVABA A CABO VARIANDO SIMULTANEAMENTE AMBOS PARAMETROS. ESTAS RESPUESTAS ACAMPANADAS DESAPARECIAN FIJANDO UNO DE LOS DOS PARAMETROS MICELARES Y VARIANDO EL OTRO. ESTE HECHO EXPERIMENTAL PODRIA SER EL ORIGEN DE LAS DISCREPANCIAS DESCRITAS EN LA BIBLIOGRAFIA PARA ESTOS EFECTOS ACAMPANADOS.

Autor: RODRIGUEZ RODRIGUEZ VERONICA.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR II PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN LA PRESENTE TESIS DOCTORAL SE HA INTENTADO DE MODO PARTICULAR ABORDAR EL PROBLEMA DE LA ESTABILIZACION DE ENZIMAS QUE INTERVIENEN EN PROCESOS DE ENORME INTERES COMO ES LA OBTENCION DE 7-ACA A PARTIR DE CEFALOSPORINA C, PARA LA SINTESIS DE ANTIBIOTICOS BETA-LACTAMICOS. ESTAS ENZIMAS PRESENTAN BUENAS CARACTERISTICAS INTRINSECAS COMO CATALIZADORES PERO SU COMPLEJIDAD DE ESTRUCTURA (SON ENZIMAS DIMERICAS CON COFACTORES) Y SU SUSCEPTIBILIDAD A SER INACTIVADAS POR EL PEROXIDO DE HIDROGENO PRESENTE EN LA REACCION QUE CATALIZAN, AUMENTAN RESPECTO A OTRAS ENZIMAS LA DIFICULTAD DE SU ESTABILIZACION. AL ENFRENTARNOS A LA ESTABILIZACION DE DOS D-AMINOACIDO OXIDASAS PROCEDENTES DE DISTINTA FUENTE Y UNA GLUTARIL ACILASA, HEMOS DESARROLLADO DISTINTAS ESTRATEGIAS DE INMOVILIZACION Y ENTRECRUZAMIENTO PARA ESTABILIZAR SU ESTRUCTURA CUATERNARIA, EN ESTE SENTIDO LOS RESULTADOS OBTENIDOS NOS HAN PROPORCIONADO MUY BUENOS PARAMETROS DE ESTABILIDAD EN LAS TRES ENZIMAS ESTUDIADAS. HEMOS ESTUDIADO LOS DISTINTOS MECANISMOS ENCARGADOS DE SU INACTIVACION PARA PODER APLICAR LAS METODOLOGIAS ADECUADAS DE ESTABILIZACION FRENTE A CADA UNO DE ESTOS, CON EL FIN DE SEGUIR MEJORANDO SU ESTABILIDAD GLOBAL. FRENTE AL PROBLEMA QUE REPRESENTA SU BAJA ESTABILIDAD EN PRESENCIA DE PEROXIDO DE HIDROGENO, HEMOS APLICADO ESTRATEGIAS DE MODIFICACION QUIMICA DE SU SUPERFICIE EXTERNA PARA DISMINUIR LA ACCESIBILIDAD DE ESTE AGENTE QUIMICO, OBTENIENDO CON ESTA METODOLOGIA UNA ESTABILIZACION CONSIDERABLE. POR ULTIMO HEMOS REALIZADO LA OPTIMIZACION DE ESTOS CATALIZADORES PARA PODER EXTRAPOLAR SU UTILIZACION A NIVEL INDUSTRIAL, OBTENIENDO CATALIZADORES CON GRAN ACTIVIDAD Y ESTABILIDAD, EN PRINCIPIO CON BUENAS CARACTERISTICAS PARA PODER REALIZAR ESTE PROCESO BIENZIMATICO A ESCALA INDUSTRIAL Y CON ENORMES VENTAJAS FRENTE A LOS METODOS QUIMICOS COMUNMENTE UTILIZADOS PARA LA OBTENCION DE 7-ACA. ESTE TRABAJO PRETENDE QUE LAS METODOLOGIAS EMPLEADAS PUEDAN SERVIR COMO BASE PARA LA ESTABILIZACION DE CUALQUIER ENZIMA DE INTERES, QUE PUEDAN PRESENTAR PROBLEMAS SIMILARES A LOS QUE AQUI SE ESTUDIAN.

Autor: SORET LAFRAYA BEATRIZ.
Año: 1994.
Universidad: PUBLICA DE NAVARRA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: PRODUCCION AGRARIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA AGRARIA.

Resumen: SE HA REALIZADO LA CARACTERIZACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA LIPGENICA (ENZIMAS LIPOPROPROTEIN LIPASA, LPL, EC 3.1.1.34; GLICEROL3FOSFATO DESHIDROGENASA, G3PDH, EC1.1.1.8; SINTETASA DE ACIDOS GRASOS, FAS, EC, 2.3.1.85; GLUCOSA6FOSFATO DESHIDROGENASA, G6PDH, EC1.1. 1.49; ENZIMA MALICO, EM, EC 1.1.1.40; ISOCITRATO DESHIDROGENASA, ICDH, EC 1.1.1.41) DE DISTINTOS DEPOSITOS GRASOS (OMENTAL, MESENTERICO, PELVICORRENAL, SUBCUTANEO E INTERMUSCULAR) DE LOS CORDEROS LECHALES DE RAZA LACHA Y TERNASCOS DE RAZA RASA ARAGONESA Y SE HA ESTUDIADO LA EVOLUCION DURANTE LAS FASES DE CRECIMIENTO Y CEBO (12, 18, 24 Y 36 KG DE PESO VIVO) DE LOS CORDEROS DE AMBAS RAZAS. AL EVALUAR LOS RESULTADOS SE HA OBSERVADO QUE LAS HEMBRAS PRESENTARON MAYOR CANTIDAD DE GRASA Y UNA MAYOR ACTIVIDAD DE SINTESIS TOTAL DE TRIGLICERIDOS. LA SINTESIS DE ACIDOS GRASOS "DE NOVO" FUE SEMEJANTE EN LOS DOS SEXOS, LO QUE CONDUCE A PENSAR QUE LAS DIFERENCIAS SE DEBEN A LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA LPL. TAMBIEN SE HA OBSERVADO EN AMBAS RAZAS EN EL PERIODO COMPRENDIDO ENTRE 24 Y 36 KG DE PESO VIVO UN ELEVADO AUMENTO EN EL DESARROLLO Y EN LA ACTIVIDAD METABOLICA DEL TEJIDO GRASO, QUE FUERON SUPERIORES EN LOS CORDEROS DE RAZA RASA ARAGONESA. LA SINTESIS DE ACIDOS GRASOS "DE NOVO" FUE SUPERIOR EN LOS CORDEROS DE RAZA LACHA, LO QUE SUGIERE QUE EN LOS CORDEROS DE RAZA RASA ARAGONESA LA CAPTACION DE ACIDOS GRASOS EXOGENOS ES MAS ELEVADA

Autor: ALVAREZ VILLAFAÑE M. ESTHER .
Año: 1993.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: ASPECTOS BASICOS EN BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HAN PURIFICADO DOS FORMAS ISOENZIMATICAS DE LA ISOCITRATO DESHIDROGENASA DEPENDIENTE DE NAD (IDH I E IDH II) DE MICELIO DE PHYCOMYCES BLAKESLEEANUS NRRL 1555(-), CON UN RENDIMIENTO PROXIMO AL 10%. DE LAS DIFERENCIAS OBTENIDAS ENTRE LAS DOS ISOENZIMAS EN EL ESTUDIO DE PARAMETROS FISICO-QUIMICOS, SE HA ESTIMADO QUE LA IDH II POSEE UNA CARGA NETA NEGATIVA SUPERIOR A LA QUE POSEE LA IDH I. LA FORMA ACTIVA DEL ISOCITRATO ES LA TRIBASICA PARA LAS DOS ISOENZIMAS. A PH 7,6, EL MECANISMO CINETICO PERMITE LA FORMACION DEL COMPLEJO ACTIVO ENZIMA-MAGNESIO-ISOCITRATO MEDIANTE DOS VIAS ALTERNATIVAS, SIENDO LA CONCENTRACION DE MG2+ LA QUE DETERMINA EL PROCESO PREDOMINANTE. SE OBTUVO CINETICA SIGMOIDE PARA LA FORMA ACTIVA DEL ISOCITRATO COMO SUSTRATO, CON DIFERENTES VALORES DE NH PARA LAS DOS ISOENZIMAS. PARA EL NAD SE OBTUVO CINETICA DE MICHAELIS-MENTEN. EL CITRATO ES UN ACTIVADOR ALOSTERICO PARA LAS DOS ISOENZIMAS, Y EL AMP LO ES PARA LA IDH I. CITRATO Y AMP SE UNEN A CENTROS DIFERENTES EN LA IDH I EL NADH ES UN INHIBIDOR ALOSTERICO MAS POTENTE DE LA IDH II QUE DE LA IDH I.

Autor: BERNET PRIETO DIEGO .
Año: 1993.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA DINUCLEOSIDO-TRIFOSFATASA (NP3NASA; EC 3.6.1.29) ES UNA ENZIMA QUE HIDROLIZA ESPECIFICAMENTE DINUCLEOSIDO-TRIFOSFATOS, COMO DIADENOSINA-TRIFOSFATO (AP3A) PRODUCIENDO ADP Y AMP COMO PRODUCTOS. SE CONOCIA LA EXISTENCIA DE FORMAS CITOPLASMATICA Y MITOCONDRIAL DE NP3NASA. EN ESTA TESIS SE HA ESTUDIADO LA LOCALIZACION SUBMITOCONDRIAL DE ESTA, POR MEDIDAS DE LATENCIA, PRECIPITABILIDAD Y EXTRACCION CON DIGITONINA, EN MITOCONDRIAS PURIFICADAS DE HIGADO DE RATA. POR COMPARACION CON MARCADORES ENZIMATICOS DE FRACCIONES SUBMITOCONDRIALES SE HA DEMOSTRADO QUE LA NP3NASA MITOCONDRIAL ESTA LOCALIZADA EN LA MATRIZ DE DICHO ORGANULO. LA ADP-RIBOSA PIROFOSFATASA (ADPRIBASA; EC 3.6.1.13) HIDROLIZA ADP-RIBOSA LIBRE, NO LIGADA A PROTEINAS, PRODUCIENDO AMP Y RIBOSA-5-FOSFATO. SE CONOCIA LA EXISTENCIA DE TRES ADPRIBASAS CON DIFERENTES ESPECIFICIDADES DE SUSTRATO Y CATION DIVALENTE ACTIVADOR EN LA FRACCION SOLUBLE DE HIGADO DE RATA: ADPRIBASA-I, ADPRIBASA-MN Y ADPRIBASA-II. EN ESTA TESIS SE HA DEMOSTRADO QUE EXISTE UNA ADPRIBASA, PARECIDA A LA ADPRIBASA-I, QUE SE MANTIENE ASOCIADA A MITOCONDRIAS SOMETIDAS A CENTRIFUGACION EN GRADIENTES DE SACAROSA Y ESTA LOCALIZADA EN LA MATRIZ MITOCONDRIAL. ESTA ADPRIBASA MITOCONDRIAL SE HA PURIFICADO Y CARACTERIZADO PARCIALMENTE. SE HAN DESCRITO PROPIEDADES DE ESTA ENZIMA QUE NO ERAN CONOCIDAS PARA LA ADPRIBASA-I. POR ELLO SE HAN REALIZADO ESTUDIOS COMPARATIVOS CON ESTA, QUE HAN LLEVADO A LA CONCLUSION DE QUE SE TRATA DE ENZIMAS PARECIDAS, CON DISTINTA LOCALIZACION SUBCELULAR Y, QUIZAS, CON ALGUNA LIGERA DIFERENCIA DE PROPIEDADES CINETICAS Y/O MOLECULARES.

Autor: CASTELLS HERRERO JOSEP.
Año: 1993.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENT DE QUIMICA INORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: PROGRAMA DE DOCTORAT 320A.

Autor: DIAZ ALEJO BUA NURIA.
Año: 1993.
Universidad: ALICANTE.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: NEUROQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIAS.

Resumen: SE HA DETECTADO Y PARCIALMENTE CARACTERIZADO UNA ACTIVIDAD ORGANOFOSFORO HIDROLASA EN PLASMA, HIGADO Y CEREBRO DE RATA Y GALLINA; Y EN PLASMA DE CONEJO Y HUMANO. ESTA ACTIVIDAD HIDROLIZA EL O HEXIL 0 2,5 DICLOROFENIL FOSFORAMIDATO (HDCP) Y LA DENOMINAM HDCPASA. ESTA ACTIVIDAD MUESTRA ESTEREOESPECIFICIDAD EN LA FRACCION PARTICULADA DE HIGADO Y EN LA FRACCION SOLUBLE DE CEREBRO. LA PARCIALIDAD DEL EFECTO ACTIVADOR E INHIBIDOR DE CATIONES, EDTA Y REACTIVOS ORGANICOS SOBRE LA ACTIVIDAD HDCPASA, JUNTO CON SU DIFERENTE RESPUESTA EN LOS TEJIDOS ESTUDIADOS, APOYAN LA EXISTENCIA DE MAS DE UNA ENZIMA O ISOENZIMA CON ACTIVIDAD HDCPASA. SE HA DESARROLLADO UN METODO CROMATOGRAFICO POR HPLC QUE NOS PERMITIO CUANTIFICAR LOS ESTEREOISOMEROS DEL HDCP. EL ESTEREOISOMERO MAS POTENTE INHIBIDOS "IN VITRO" FRENTE NTE, EL HDCP 2 O S HDCP ES SELECTIVAMENTE DESTRUIDO "IN VIVO" EN LA FRACCION PARTICULADA DE HIGADO. POR TANTO EL ESTEREOISOMERO QUE PREVALECE "IN VIVO", EL HDCP 1 O RHDCP, ES MENOS POTENTE INHIBIDOR FRENTE A NTE, INDUCE LA REACCION DE ENVEJECIMIENTO Y ES EL RESPONSABLE DE LOS EFECTOS OBSERVADOS "IN VIVO".

Autor: FERNANDEZ GONZALEZ SUSANA.
Año: 1993.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: QUIMICA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA ORGANICA E INORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA ORGANOMETALICA.

Resumen: EN ESTA MEMORIA SE DESCRIBE LA UTILIZACION DE ENZIMAS EN DISOLVENTES ORGANICOS APLICADA A LA SINTESIS Y RESOLUCION DE PRODUCTOS DE INTERES FISIOLOGICO. EN LA PRIMERA PARTE, SE ESTUDIAN REACCIONES QUIMICAS Y ENZIMATICAS SOBRE AMINOALCOHOLES. EN EL PRIMER CAPITULO, SE HA ESTUDIADO LA SINTESIS DE AMIDAS Y CARBAMATOS DE FORMA QUIMIOSELECTIVA EN AMINOALCOHOLES, UTILIZANDO ESTERES DE OXIMA. ESTA METODOLOGIA HA SIDO APLICADA EN LA ACETILACION DE LA NORADRENALINA. EN EL SEGUNDO CAPITULO, SE LLEVA A CABO UN ESTUDIO SOBRE LA RESOLUCION DE 2-AMINO-1-ALCOHOLES. SE HA COMPROBADO COMO LOS AMINOALCOHOLES N-PROTEGIDOS CON EL GRUPO BENCILOXICARBONILO SON SUSTRATOS ADECUADOS PARA LA RESOLUCION DE 2-AMINO-1-ALCOHOLES A TRAVES DE UN SIMPLE PROCESO ENZIMATICO DE TRANSESTERIFICACION. POR OTRA PARTE, SE HAN RESUELTO ESTOS AMINOALCOHOLES N-PROTEGIDOS POR MEDIO DE UNA REACCION DE ALCOXICARBONILACION ENZIMATICA CON UN CARBONATO DE OXIMA. EN LA SEGUNDA PARTE DE ESTA MEMORIA, SE HA LLEVADO A CABO UN ESTUDIO DE LA ACILACION ENZIMATICA DEL ANILLO A DE LA 1 ,25-(OH)2-D3, FORMA HORMONALMENTE ACTIVA DE LA VITAMINA D3 ENCONTRANDOSE QUE LA CVL ES LA ENZIMA MAS ADECUADA PARA ESTE TIPO DE PROCESOS. ASI MISMO, SE HAN INVESTIGADO LAS ACILACIONES ENZIMATICAS SOBRE EL ENANTIOMERO DE ESTE FRAGMENTO Y SOBRE SUS DIASTEROISOMEROS, CON EL FIN DE PREPARAR NUEVOS ANALOGOS DE LA VITAMINA D3.

Autor: GARRIDO DEL SOLO CARMELO.
Año: 1993.
Universidad: CASTILLA-LA MANCHA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA-FISICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA-FISICA E INGENIERIA QUIMICA.

Resumen: EN LA PRIMERA PARTE DE LA MEMORIA SE DESARROLLA UN PROGRAMA DE ORDENADOR DESTINADO A SIMULAR EL COMPORTAMIENTO CINETICO DE LAS REACCIONES ENZIMATICAS A PARTIR DEL CORRESPONDIENTE SISTEMA DE ECUACIONES DIFERENCIALES. ESTE PROGRAMA PERMITE, ENTRE OTRAS COSAS, GENERAR CURVAS DE PROGRESO SIMULADAS PARA LOS ANALISIS CINETICOS. EN LA SEGUNDA PARTE SE REALIZA UN ESTUDIO CINETICO DE SISTEMAS ENZIMATICOS DONDE SON INESTABLES: (A) LA ENZIMA, (B) EL SUSTRATO, (C) EL PRODUCTO, (D) SUSTRATO Y PRODUCTO SIMULTANEAMENTE, (E) UN MODIFICADOR IRREVERSIBLE. SE PROPONE UN DISEÑO EXPERIMENTAL UTIL PARA, A PARTIR DE LOS DATOS EXPERIMENTALES, ANALIZAR LOS MECANISMOS ANTERIORES, IDENTIFICAR ALGUNOS DE SUS CASOS PARTICULARES Y EVALUAR LOS CORRESPONDIENTES PARAMETROS CINETICOS.

Autor: LOURO CARBALLEIRA M. OLGA.
Año: 1993.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: SE DETERMINARON EN DISTINTAS SITUACIONES FISIOPATOLOGICAS (ARTRITIS REUM MATEOIDE, DIABETES MELLITUS, TUMORES CEREBRALES, EMBARAZO, NEONATALIDAD Y DISTROFIA MUSCULAR DE DUCHENNE), LA CERULOPLASMINA INMUNOREACTIVA, ACTIVIDAD OXIDASICA DE LA CERULOPLASMINA, COBRE TOTAL Y COBRE NO CERULOPLASMINICO EN SUERO. LOS AUMENTOS O DISMINUCIONES DE LA ACTIVIDAD OXIDASICA ESPECIFICA DE LA CERULOPLASMINA (ACTIVIDAD POR UNIDAD DE MASA PROTEICA) SE RELACIONARON CON MODIFICACIONES DEL COCIENTE ENTRE LAS FORMAS APO/HOLO. SE INVESTIGO LA POSIBLE RESPUESTA COMO REACTANTE DE FASE AGUDA DE LA CERUROPLASMINA Y SU ACCION COMO AGENTE CIRCULANTE INHIBIDOR DE LOS PROCESOS DE LIPOPEROXIDACION. EL ESTUDIO REALIZADO HA PERMITIDO SUGERIR LA REGULACION Y EL SIGNIFICADO FUNCIONAL DE LA MODIFICACION DE LOS NIVELES SERICO DE CERULOPLASMINA EN LAS DISTINTAS SITUACIONES ESTUDIADAS.

Autor: MARTINEZ REINA M. GRACIA.
Año: 1993.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: QUIMICA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA AGRICOLA GEOLOGIA Y EDAFOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA AGRICOLA Y ALIMENTARIA.

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA LLEVADO A CABO LA PURIFICACION A HOMOGENEIDAD DE LA MALONIL ACC TRANSFERASA OBTENIDA DE HIPOCOTILOS DE VIGNA RADIATA. ESTA ENZIMA CATALIZA LA CONVERSION DE 1-AMINOCICLOPROPANO CARBOXILICO, ACC (PRECURSOR DEL ETILENO, HORMONA VEGETAL QUE REGULA MUCHOS ASPECTOS DEL CRECIMIENTO Y DESARROLLO DE LAS PLANTAS) EN MALONILACC. SE HA ENSAYADO LA IDONEIDAD DE DIVERSAS TECNICAS ESCOGIENDOSE FINALMENTE, EL SIGUIENTE PROCEDIMIENTO: PRECIPITACION FRACCIONADA CON SULFATO AMONICO (30-70%) Y CROMATOGRAFIA SOBRE LAS COLUMNAS: PHENYL SEPHAROSE, HIDROXIAPATITO, SUPEROSE 12 Y MONOQ. LA ULTIMA ETAPA CONSISTIO EN UNA CROMATOGRAFIA ELECTROFORETICA (HPEC). TAMBIEN SE HA REALIZADO UN ESTUDIO DE LAS DIVERSAS CARACTERISTICAS BIOQUIMICAS DE ESTA ENZIMA QUE HAN PERMITIDO DESARROLLAR UNA HIPOTESIS SOBRE EL MECANISMO DE CONVERSION DE ACC EN MACC. EL PESO MELECULAR DE LA ACC-N-MALONIL TRANSFERASA, DE ESTRUCTURA MONOMERICA, HA SIDO ESTIMADO EN 37+- 3 KDA POR ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA. LOS VALORES DE KM PARA EL ACC Y EL MALONILCOA HAN SIDO 68 UM Y 74 UM, RESPECTIVAMENTE. SE HA ENCONTRADO TAMBIEN QUE EL COENZIMA A LIBRE, PRODUCTO DE LA REACCION, ES UN INHIBIDOR NO COMPETITIVO CON RESPECTO A MALONILCOA. TAMBIEN SE HA COMPROBADO QUE LA ENZIMA PUEDE UTILIZAR SUCCINILCOA COMO DADOR DEL GRUPO ACILO EN LUGAR DE MALONILCOA. TAMBIEN SE HA VERIFICADO QUE LOS D-ENANTIOMEROS DE AMINOACIDOS NO POLARES INHIBEN LA MALONIZACION DEL ACC. POR ULTIMO, SE HA REALIZADO LA SECUENCIACION DE ALGUNOS DE LOS PEPTIDOS QUE SE OBTIENEN COMO RESULTADO DE LA HIDROLISIS ENZIMATICA DE LA MALONIL TRANSFERASA. EL CONOCIMIENTO DE PARTE DE SU SECUENCIA HA PERMITIDO VERIFICAR QUE NO PRESENTA HOMOLOGIA CON NINGUNA OTRA ENZIMA PURIFICADA HASTA LA FECHA.

Autor: MONTERO MARTIN ANGEL.
Año: 1993.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: FISIOLOGIA Y FARMACOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: ENZIMOLOGIA Y REGULACION METABOLICA.

Resumen: LA ENDOTELINA-1 PROVOCA, DE FORMA DEPENDIENTE DE LA CONCENTRACION, LA CONTRACCION Y LA PROLIFERACION DE LAS CELULAS MESANGIALES DE RATA EN CULTIVO. AMBOS EFECTOS DEPENDEN DE LA ENTRADA DE CALCIO DESDE EL EXTERIOR CELULAR, YA QUE SE BLOQUEAN POR VERAPAMIL. LA PROLIFERACION, PERO NO LA CONTRACCION, DEPENDE DE LA SALIDA DE CALCIO DESDE EL RETICULO SARCOPLASMICO, YA QUE ES BLOQUEADA POR TMB-8. OTRO MECANISMO INVOLUCRADO EN LA PROLIFERACION ES LA ACTIVACION DE PROTEINCINASA C (PRC) TAMBIEN SE OBSERVO LA EXPRESION DEL GEN DE RESPUESTA INMEDIATA C- OS EN RESPUESTA A ENDOTELINA-1. OTRO MECANISMO IMPLICADO EN LA RESPUESTA A ENDOTELINA-1 ES LA SINTESIS Y LIBERACION DE FACTOR ACTIVADOR DE LAS PLAQUETAS-(PMF) POR LAS CELULAS MESANGIALES.

Autor: PULIDO FERNANDEZ ROSALINO.
Año: 1993.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: QUIMICA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA ORGANICA E INORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA ORGANOMETALICA.

Resumen: EN ESTA MEMORIA SE DESCRIBEN NUEVOS PROCESOS DE ACILACION Y ALCOXICARBONILACION REGIOSELECTIVA DE HIDRATOS DE CARBONO A TRAVES DE CATALISIS ENZIMATICA LA EXPOSICION DEL TRABAJO SE HA REALIZADO EN TRES CAPITULOS. EN EL CAPITULO 1 SE TRATAN LAS ACILACIONES REGIOSELECTIVAS DE ALDO Y CETOHEXOSAS, ASI COMO LAS DE ALDOPENTOSAS, UTILIZANDO ESTERES DE OXIMA COMO AGENTES DE ACILACION Y LIPASAS COMO CATALIZADORES. POR PRIMERA VEZ, A TRAVES DE ESTE METODO SE HA CONSEGUIDO LA ACILACION ENZIMATICA REGIOSELECTIVA DE PENTOSAS LIBRES. LOS RESULTADOS FORMAN PARTE DE LAS PUBLICACIONES "J. CHEM.SOC., PERKIN TRANS. 1,1991 491" Y "J. CHEM. SOC., PERKIN TRANS 1, 1992, 2891. EN EL CAPITULO 2 SE ESTUDIAN LAS ALCOXICARBONILACIONES REGIOSELECTIVAS DE MONOSACARIDOS CATALIZADAS POR ENZIMAS. LOS PROCEDIMIENTOS DESCRITOS PERMITEN LA INTRODUCCION REGIOSELECTIVA DE DIFERENTES RESTOS ALCOXICARBONILO EN CONDICIONES SUAVES. PARTE DE LOS RESULTADOS EXPUESTO HAN SIDO PUBLICADOS EN "J. CHEM. SOC., PERKIN TRANS 1, 1993, 589. EN EL CAPITULO 3 SE APLICAN LAS ANTERIORES TRANSFORMACIONES A LA ACILACION REGIOSELECTIVA DE LOS HIDROXILOS SECUNDARIOS DE 2-DESOXI-D-HEXOSAS.

Autor: SABATEL HERNANDEZ GERTRUDIS.
Año: 1993.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PROGRAMA DE DOCTORADO: MEDICINA INTERNA.

Resumen: EL N-ACETIL BETA-GLUCOSAMINIDASA (N.A.G.) ES UN ENZIMA LISOSOMICO RENAL QUE SE EXCRETA POR LA ORINA Y SE ALTERA EN ALGUNAS NEFROPATIAS PARENQUIMATOSAS. SE ESTUDIA EN LA NEFROPATIA DIABETICA EN DIFERENTES ESTADIOS DE LA CLASIFICACION DE MOGENSEN. OBSERVAMOS UN AUMENTO EN LA EXCRECION DE N.A.G. EN LA NEFROPATIA DIABETICA, SIENDO MAYOR EN LAS FASES AVANZADAS DE LA ENFERMEDAD. SU ASCENSO EN LOS ESTADIOS I Y II DE MOGENSEN, ES MAS PRECOZ QUE LA PRESENCIA DE MICROALBUMINURIA, POR LO QUE SE PUEDE UTILIZAR EN EL DIAGNOSTICO DE LA NEFROPATIA DIABETICA INCIPIENTE.

Autor: VILLA TANACA LOURDES.
Año: 1993.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA FUNCIONAL PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: PARA PROFUNDIZAR EN EL CONOCIMIENTO DEL FENOMENO DE LA PROTEOLISIS, MECANISMO CENTRAL DE CONTROL POST-TRADUCCIONAL EN LA CELULA EUCARIOTA, ES NECESARIA LA CARACTERIZACION PREVIA DE LAS PEPTIDASAS IMPLICADAS EN EL MISMO. HEMOS AISLADO MUTANTES QUE CARECEN DE ACTIVIDAD DIPEPTIDIL AMINOPEPTIDASICA. SU ANALISIS BIOQUIMICO Y GENETICO MOSTRO QUE POSEIAN DEFECTOS EN SU GEN ESTRUCTURAL DAP1+, LOCALIZADO EN EL CROMOSOMA III DE LA LEVADURA DE FISION. HEMOS AISLADO TAMBIEN, MEDIANTE COMPLEMENTACION FUNCIONAL, EL GEN APE1+, QUE CODIFICA A LA AMINOPEPTIDASA MAYORITARIA DE SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE. HEMOS SECUENCIADO LAS DOS HEBRAS DE UN FRAGMENTO DE DNA DE 4 KB QUE CONTIENE EL GEN Y LAS ZONAS FLANQUEANTES. HEMOS DETECTADO UNA PAUTA ABIERTA DE LECTURA DE 2646 BP QUE CODIFICA UNA PROTEINA DE 882 AMINOACIDOS CON UNA MASA MOLECULAR DE 99130 DA. LA SECUENCIA DE AMINOACIDOS DEDUCIDA MUESTRA UN ALTO GRADO DE HOMOLOGIA CON LA DE OTRAS AMINOPEPTIDASAS DE DIFERENTES ORGANISMOS.

Autor: ZURERA DELGADO JESUS M..
Año: 1993.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE ACEPTA DE MODO GENERAL QUE EL ETANOL EJERCE SU ACCION PRINCIPAL A NIVEL DE LAS MEMBRANAS DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL, TAL QUE LA INGESTION PROLONGADA DEL MISMO INDUCE ALTERACIONES EN LA COMPOSICION LIPIDICA Y EN LA FLUIDEZ DE LAS MEMBRANAS. LOS RESULTADOS INDICAN QUE SE PRODUCEN CAMBIOS ESPECIFICOS EN LOS DISTINTOS COMPONENTES LIPIDICOS DE MITOCONDRIAS DE ORIGEN NEURONAL, Y COMO CONSECUENCIA SE ALTERA LA FLUIDEZ DE LAS MEMBRANAS Y LA FUNCIONALIDAD DE LOS SISTEMAS DE TRANSPORTE ELECTRONICO MITOCONDRIAL Y MICROSOMAL, ASI COMO EN LOS PROCESOS DE REMODELADO DE LOS LIPIDOS DE ESTAS MEMBRANAS. SE COMPRUEBA IGUALMENTE, QUE LA EXPOSICION DE ESTAS MEMBRANAS AL ETANOL "IN VITRO" LLEVA CONSIGO UNA CONSIDERABLE FLUIDIFICACION TANTO DEL NUCLEO HIDROFOBICO COMO DE LA SUPERFICIE DE LAS MEMBRANAS. DEL MISMO MODO, SE OBSERVA UNA MODULACION ESPECIFICA DE LOS SISTEMAS ENZIMATICOS ANALIZADOS. SE HA COMPROBADO QUE LA ADMINISTRACION PROLONGADA INDUCE CAMBIOS ADAPTATIVOS QUE SE TRADUCEN EN UNA RESPUESTA DIFERENCIAL AL ETANOL "IN VITRO".

Autor: ALBERDI ALFONSO ELENA M..
Año: 1992.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: EN LA BUSQUEDA DE NUEVOS INHIBIDORES DE FOSFODIESTERASAS DE NUCLEOTIDOS CICLICOS CON ACTIVIDAD INODILATADORA, HEMOS ENSAYADO MAS DE 200 PRODUCTOS DIFERENTES SOBRE LA CGI-PDE CARDIACA SINTETIZADOS POR EL DEPARTAMENTO DE QUIMICA ORGANICA Y FARMACEUTICA DE LA UNIVERSIDAD DE NAVARRA, PERTENECIENTES A 3 LINEAS DE SINTESIS DIFERENTES: DERIVADOS ABIERTOS DE INDOL, DERIVADOS DE PIRIMIDOINDOL Y DERIVADOS DE PIRIDAZINOINDOL. PARA REALIZAR ESTE ESTUDIO HEMOS SEPARADO Y CARACTERIZADO CINETICAMENTE LAS ISOENZIMAS PRESENTES EN CORAZON Y AORTA DE PERRO, Y EN PLAQUETAS HUMANAS. LOS INHIBIDORES MAS POTENTES DE LA CGI-PDE CARDIACA SE HAN PROBADO EN EL RESTO DE LAS ISOENZIMAS PRESENTE EN CORAZON PARA ESTUDIAR SU SELECTIVIDAD. DEBIDO A LA IMPORTANCIA QUE TIENE EL GMPC EN EL MECANISMO DE LA DILATACION DEL MUCULO LISO VASCULAR, HEMOS PROBADO LOS MEJORES INHIBIDORES DE LA CGI-PDE EN LAS ISOENZIMAS DE FOSFODIESTERASA DEL MUSCULO LISO VASCULAR Y HEMOS ENCONTRADO COMPUESTOS QUE INHIBEN POTENTE Y SELECTIVAMENTE A LA ISOENZIMA QUE HIDROLIZA ESPECIFICAMENTE ESTE NUCLEOTIDO CICLICO.

Autor: BENDALA TUFANISCO ELENA.
Año: 1992.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR. PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA CLINICA Y MEDICA.

Resumen: LA TESIS DOCTORAL CONSTA DE TRES APARTADOS: 1) INACTIVACION OXIDATIVA DE LA CARBAMIL FOSFATO SINTETASA; 2) LOCALIZACION DEL SITIO DE UNION DEL ACTIVADOR ALOSTERICO DE LA CARBAMIL FOSFATO SINTETASA, EL N-ACELIL-L-GLUTAMATO; 3) LOCALIZACION DEL SITIO DE UNION DEL INHIBIDOR DE LA CARBAMIL FOSFATO SINTETASA DE E. COLI, EL UMP; QUE SE HAN DESARROLLADO SEPARADAMENTE CON INTRODUCCION, MATERIAL Y METODOS, RESULTADOS Y DISCUSION, ADEMAS DE UNA INTRODUCCION GENERAL. EN LA PRIMERA PARTE SE COMPRUEBA LA OXIDACION DE LAS CISTEINAS 1327 Y 1337 EN LA INACTIVACION OXIDATIVA EN PRESENCIA DE N-ACETIL-L-GLUTAMATO, Y QUE ESTOS GRUPOS NO SON OXIDADOS EN PRESENCIA DE ATP Y AUSENCIA DE MG 2+. TAMBIEN SE DESCRIBE LA ROTURA QUIMICA DE LA CARBAMIL FOSFATO SINTETASA I ENCONTRADA POR VEZ PRIMERA, COMO CONSECUENCIA DE LAS FORMAS DE OXIGENO ACTIVO GENERADAS EN EL LUGAR DE UNION DEL ATPB POR EL COMPLEJO ATPFE+2. POR ULTIMO, SE ANALIZA LA POSIBLE FUNCION DE ALGUNO DE LOS TIPOS DE INACTIVACION OXIDATIVA PREVIAMENTE DESCRITOS COMO MARCADOR FISIOLOGICO PARA LA DEGRADACION DE LA ENZIMA EN ALGUNO DE LOS COMPARTIMENTOS CELULARES. EN LA SEGUNDA PARTE, SE ACOTA POR METODOS DE QUIMICA DE PROTEINAS, EL LUGAR DE LA MARCA PARA EL N-ACETIL-L-GLUTAMATO, ACTIVADOR FISIOLOGICO DE LA CARBAMIL FOSFATO SINTETASA I, ENTRE LOS RESIDUOS 1351 Y 1397 Y SE PROPONE QUE EL PENTAPEPTIDO (1988) LFATE SEA EL QUE CONTIENE LA MARCA. EN LA TERCERA PARTE, SE LOCALIZA LA MARCA PRODUCIDA TRAS IRRADIACION DEL ENZIMA DE E. COLI CON UMP, POR MEDIOS Y PROCEDIMIENTOS SIMILARES A LOS USADOS EN EL SEGUNDO APARTADO, EN EL PENTADECAPEPTIDO (989) LVNKVHEGRPHIQDR.

Autor: BENITEZ MORENO M. JOSE.
Año: 1992.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA FISICA APLICADA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA FISICA APLICADA.

Resumen: LA TESIS PRESENTA UN ESTUDIO DE VARIAS CONDICIONES EXPERIMENTALES PARA ENSAYAR BETA-LACTAMASAS DEPENDIENTES DE ZN2+. A CONTINUACION SE REALIZA UN ESTUDIO CINETICO DE LA MODIFICACION DE LA CISTEINA QUE POSEE LA ENZIMA, Y DE LA CONSIGUIENTE INACTIVACION, PERMITIENDO OBTENER CONCLUSIONES ACERCA DE LA FUNCION DEL ZN2+ EN LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA. SE REALIZA UN ESTUDIO DE LA INTERACCION DE POLILISINA CON SUBSTRATOS DE CASEINA QUINASA II QUE PERMITE CONCLUIR QUE ESTE ACTIVADOR DE LA ENZIMA PRODUCE CAMBIOS IMPORTANTES EN LA ESTRUCTURA DE SUS SUBSTRATOS. SE ESTUDIA POR PRIMERA VEZ LA MODIFICACION QUIMICA DE LOS RESTOS DE CISTEINA QUE POSEE LA CASEINA QUINASA II, DANDO LUGAR A LA INACTIVACION DE LA ENZIMA.