ENZIMOLOGIA, 8

Autor: BERMEJILLO EGUIA M. JOSE.
Año: 1992.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: SE HA LLEVADO A CABO UN ESTUDIO DE LOS CAMBIOS REDOX QUE EXPERIMENTA EL COMPLEJO F1-ATPASA MITOCONDRIAL Y MEDIANTE MODIFICACION QUIMICA SE HAN DETERMINADO LOS GRUPOS IMPLICADOS EN DICHOS CAMBIOS. LOS RESULTADOS INDICAN QUE DISTINTAS SITUACIONES REDOX CONDUCEN A DIFERENTES CONFORMACIONES QUE SE MANIFIESTAN POR SU DISTINTA ACTIVIDAD HIDROLITICA. PREPARACIONES DE F1-ATPASA SOMETIDAS A CONDICIONES REDUCTORAS ESTABLES EXPERIMENTAN CAMBIOS CONFORMACIONALES CICLICOS A LO LARGO DEL TIEMPO. EN LA BASE DE ESTOS CAMBIOS CONFORMACIONALES SE ENCUENTRA LA RUPTURA DE UNO O MAS PUENTES DISULFURO QUE PROVOCAN LA LIBERACION DE GRUPOS SH ESENCIALES PARA LA ACTIVIDAD ATPASA. LOS DISTINTOS CAMBIOS REDOX SON DIFERENCIABLES MEDIANTE ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA Y SE HA REVELADO LA EXISTENCIA DE UN COMPLEJO ALFA-GAMMA EN CONDICIONES NO REDUCTORAS. EL ESTADO REDOX TAMBIEN MODIFICA EL GRADO DE UNION DEL PEPTIDO AL COMPLEJO ATPSINTASA ASI COMO LA REACTIVIDAD DE LAS TIROSINAS ESENCIALES. SE SUGIERE QUE LA SUBUNIDAD GAMMA PUEDE ESTAR ASOCIADA ALTERNATIVAMENTE CON CADA SUBUNIDAD ALFA, DIFERENCIANDO ASI UNO DE LOS PARES ALFA/BETA.

Autor: BUENO LARAÑO PABLO.
Año: 1992.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTA TESIS DOCTORAL, POR PRIMERA VEZ SE LLEVA A CABO LA PURIFICACION HASTA HOMOGENEIDAD Y LA POSTERIOR CARACTERIZACION DE UNA SUPEROXIDO DISMUTASA PEROXISOMAL (CU, ZN-SOD II) A PARTIR DE COTILEDONES DE SANDIA (CITRULLUS VULGARIS, SCHRAD.). LA OBTENCION DE LA SOD PURA DE ORIGEN PEROXISOMAL HA PERMITIDO PREPARAR UN ANTICUERPO POLICLONAL FRENTE A LA ENZIMA Y ESTUDIAR SU REACTIVIDAD INMUNOLOGICA FRENTE A DIFERENTES CLASES DE SODS Y EXTRACTOS CRUDOS DE DIVERSOS ORIGENES, TANTO VEGETALES COMO ANIMALES. LA MASA MOLECULAR DE LA ENZIMA NATIVA, LA COMPOSICION EN SUBUNIDADES Y EL ESPECTRO DE ABSORCION VISIBLE Y ULTRAVIOLETA DE LA SUPEROXIDO DISMUTASA GLIOXISOMAL SON SIMILARES A LOS DE LA MAYORIA DE LAS CU, ZN-SODS CARACTERIZADAS DE DISTINTOS ORIGENES, AUNQUE SOLO CONTIENE 1 CU Y 1 ZN.

Autor: FUENTES RODRIGUEZ JOSE MANUEL.
Año: 1992.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE HAN ESTUDIADO LAS PROPIEDADES FISICO-QUIMICAS, CINETICAS Y DE REGULACION DE DOS FORMAS ISOENZIMATICAS, POCO CONOCIDAS, DE LA ANGINASA EN TEJIDOS DE RATA, LA ARGINASA ASOCIADA A MEMBRANA PLASMATICA DE HEPATOCITOS Y LA ARGINASA DE GLANDULA MAMARIA EN LACTACION. OTROS ASPECTOS DESARROLLADOS HAN SIDO SU CARACTERIZACION INMUNOLOGICA, COMPOSICION DE SUBUNIDADES Y PAPEL DE MANGANESO COMO COFACTOR DE LA ENZIMA. DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS PARA LA ARGINASA ASOCIADA A MEMBRANA PLASMATICA DE HEPATOCITOS DESTACAMOS LA POSIBLE EXISTENCIA DE DOS ISOENZIMAS EN FORMA DE OLIGOMEROS DISTINTOS, O BIEN DE DOS CENTROS ACTIVOS, CON DIFERENTE AFINIDAD POR EL SUSTRATO, EN LA MISMA CADENA POLIPEPTIDICA. SU PAPEL FISIOLOGICO NO HA PODIDO SER ACLARADO. CON RESPECTO A LA ARGINASA DE GLANDULA MAMARIA EN LACTACION SEÑALAR QUE ES UNA ENZIMA INDUCIBLE, IMPLICADA EN LA SINTESIS DE PAROLINA, GLUTAMICO Y POLIAMINAS, SIENDO EL PESO MOLECULAR TANTO DE LA ENZIMA NATIVA, 176.000 D, COMO EL DE SUS SUBUNIDADES, 66.200 D, NOTABLEMENTE DISTINTO AL DE LAS ARGINASAS DESCRITAS HASTA LA FECHA. DE LOS ESTUDIOS DE RECONSTITUCION EN PRESENCIA DE MANAGNESO DE LA ENZIMA DIALIZADA EN AUSENCIA DE CATIONES, SE DEDUCE LA EXISTENCIA O BIEN DE UN FENOMENO COOPERATIVO PARA LA UNION DEL MANGANESO, O BIEN DE DOS CENTROS DE UNION INDEPENDIENTES ENTRE SI Y CON DISTINTA AFINIDAD POR EL CATION. FINALMENTE SEÑALAR LA INCOMPATIBILIDAD INMUNOLOGICA TOTAL ENCONTRADA PARA AMBAS ENZIMAS FRENTE A LA ARGINASA DE HIGADO DE RATA, EVIDENCIADA POR SU FALTA DE REACTIVIDAD FRENTE A ANTICUERPOS OBTENIDOS PARA ESTA.

Autor: MARTIN ROMERO M. TERESA.
Año: 1992.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA FISICA Y TERMODINAMICA APLICADA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA FISICA.

Resumen: EN ESTA MEMORIA, ELEGIDA UNA ENZIMA MODELO, -QUIMIOTRIPSINA, SU INMOVILIZACION EN UN SOPORTE, SEFAROSA 6B, CON DISTINTOS TRATAMIENTOS FISICOS Y QUIMICOS CON OBJETO DE OBTENER UN DERIVADO INMOVILIZADO OPTIMO. PARA ELLO, EL TRABAJO QUE SE HA PRESENTADO QUIERE CONTRIBUIR Y REALIZAR UN ESTUDIO QUIMICO-FISICO DE LA INFLUENCIA DE DIFERENTES MEDIOS ORGANICOS ELEGIDOS - DMF, THF Y ACETONITRILO - EN EL COMPLEJO SISTEMA ENZIMA-SOPORTE -MEDIO. CON ESTE OBJETIVO SE HA DISEÑADO Y PUESTO A PUNTO LA METODOLOGIA DE MICROCALORIMETRIA DE FLUJO DE ADSORCION PARA ENZIMAS INMOVILIZADAS, DETERMINANDO DE FORMA CUANTITATIVA LAS INTERACCIONES QUE DICHOS MEDIOS PARCIALMENTE ORGANICOS TIENEN CON EL SOPORTE Y LA ENZIMA, MODIFICANDO EL MICROENTORNO DE ESTA ULTIMA. DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS SE PUEDE INFERIR LA RECUPERACION DEL SISTEMA ENZIMATICO EN BASE AL EFECTO PRODUCIDO POR LOS MEDIOS ORGANICOS ESTUDIADOS. SE ENCUENTRA UNA RELACION ENTRE DICHAS INTERACCIONES Y LAS ACTIVIDADES SINTETASICAS DE LOS DERIVADOS INMOVILIZADOS EN DICHOS MEDIOS.

Autor: MINGUEZ DE LA CRUZ MILAGROS.
Año: 1992.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR II PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL OBJETIVO DE ESTE TRABAJO HA SIDO LA CARACTERIZACION DE LA ENZIMA GGT HEPATICA Y RENAL EN EL MODELO EXPERIMENTAL DE TIOACETAMIDA. LA ACTIVIDAD GGT HEPATICA INCREMENTA DURANTE LA ADMINISTRACION DE TIOACETAMIDA (TAM), LA CONTRIBUCION DE LA FORMA SIALIZADA Y NO SIALIZADA DE LA ENZIMA VARIA SEGUN EL PERIODO DE 3 O 30 DIAS DE INTOXICACION CON TAM. EL INCREMENTO EN LA ACTIVIDAD ASIALO-GGT HEPATICA, PRODUCIDO POR LA ADMINISTRACION DE TIOACETAMIDA, ES DEBIDO A UN PROCESO DE INDUCCION EN LA SINTESIS DE LA PROTEINA ENZIMATICA. LAS DOS FORMAS DE GGT HEPATICA NO REVELAN MODIFICACIONES EN EL PESO MOLECULAR ENTRE LA ENZIMA DE ANIMALES CONTROL Y TAM. LA ACTIVIDAD GGT RENAL DECRECE DURANTE LA ADMINISTRACION DE TAM, TANTO EN EL PERIODO DE 3 DIAS COMO EN EL DE 30, ESTA DISMINUCION ES MAYOR EN LA INTOXICACION A CORTO PLAZO Y EL DESCENSO SE LOCALIZA MAS MARCADAMENTE SOBRE LA FORMA DE LA ENZIMA CON MENOR CONTENIDO EN ACIDO SIALICO. EL VALOR DE PH OPTIMO DE LA ACTIVIDAD GGT HEPATICA Y RENAL ES DE 8-8,5 EN TODOS LOS CASOS. LA ENZIMA MOSTRO TERMOESTABILIDAD A 50 C. EN TODOS LOS CASOS, LA ENZIMA GGT DE ANIMALES INTOXICADOS MUESTRA UN COMPORTAMIENTO TERMICO SIMILAR AL DE LA ENZIMA DE ANIMALES CONTROL CON LA EXCEPCION DE LA GGT DE HOMOGENADO HEPATICO DE ANIMALES INTOXICADOS 30 DIAS CON EL HEPATOTOXICO QUE PRESENTA MAYOR TERMOSENSIBILIDAD QUE LA DE ANIMALES CONTROL. LA SIALIZACION DE LA ENZIMA NO EJERCE NINGUN EFECTO SOBRE LA TERMOESTABILIDAD DE LA MISMA A NIVEL RENAL, MIENTRAS QUE A NIVEL HEPATICO IMPLICA UNA PERDIDA DE LA ESTABILIDAD TERMICA. PARA EL SUSTRATO ALFA-GLUTAMIL-RO-NITROANILIDA, LA ENZIMA GGT RENAL DE ANIMALES CONTROL E INTOXICADOS CON TAM PRESENTA UN COMPORTAMIENTO CATALITICO SEMEJANTE, EN EL CASO DE LA ENZIMA HEPATICA, SOLO SE OBSERVARON DIFERENCIAS EN EL PERIODO DE 30 DIAS DE ADMINISTRACION DE TAM. CONSIDERANDO LOS ESTUDIOS CINETICOS REALIZADOS PARA EL SUSTRATO DADOR Y ACEPTOR, SE PODRIA POSTULAR QUE LA GGT DE ANIMALES INTOXICADOS PRESENTARIA DESFAVORECIDA LA REACCION DE TRANSPEPTIDACION, DESPLAZANDOSE SU ACCION A LAS REACCIONES DE HIDROLISIS Y/O AUTOTRANSPEPTIDACION.

Autor: RODRIGUEZ MOYA FERRAN.
Año: 1992.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y FISIOLOGIA. UNIDAD B PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Autor: RODRIGUEZ SANCHEZ M. ROCIO.
Año: 1992.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA VEGETAL Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: EL TRANSPORTE DE NITRATO MUESTRA UN MARCADO REQUERIMIENTO POR IONES SODIO, DEPENDE DEL MANTENIMIENTO DEL GRADIENTE ELECTROQUIMICO DE ESTE ION Y MUESTRA INHIBICION POR SUSTRATO, EL REQUERIMIENTO POR SODIO PERMITE INTERPRETAR EL FENOMENO DE INHIBICION POR SUSTRATO OBSERVADO EN TERMINO DE UN SIMPORTE NA+/NO-3. ESTE SIMPORTE NA+/NO3 SUMINISTRA UNA BASE FISICA PARA EL ACOPLAMIENTO DEL GRADIENTE ELECTROQUIMICO DE SODIO Y EL TRANSPORTE DE NITRATO. EL TRANSPORTE DE NITRATO SE ENCUENTRA SOMETIDO AL MISMO CONTROL POR AMONIO QUE LOS ENZIMAS IMPLICADOS EN SU REDUCCION: NITRATO Y NITRITO REDUCTASA. SE HA IDENTIFICADO UN POLIPERTIDO DE 47 RDA EN LA MEMBRANA PLASMATICA DE ANALYSTIS NIDULANS IMPLICADO EN DICHO TRANSPORTE. EN LA MEMBRANA PLASMATICA DE ANIDULANS EXISTE UNA ACTIVIDAD PROTEINAKINASA, SENSIBLE AL AMONIO QUE PUEDE ESTAR IMPLICADA EN EL EFECTO DEL AMONIO SOBRE EL TRANSPORTE DE NITRATO.

Autor: SERRADILLA CASTAÑO M. CARMEN .
Año: 1992.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR IV. PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR..

Resumen: EL OBJETIVO DE ESTE TRABAJO CONSISTE EN APORTAR UNA SERIE DE DATOS EXPERIMENTALES QUE LLEVEN A CARACTERIZAR LA PIRUVATOQUINASA Y LA FOSFOFRUCTOQUINASA DE MUSCULO BLANCO DE LUBINA, ENZIMAS CLAVES DE LA GLICOLISIS. LOS RESULTADOS DE ESTOS EXPERIMENTOS CONDUCIRAN A UN MAYOR CONOCIMIENTO DE LA BIOQUIMICA DE ESTA ESPECIE QUE PODRIA SER UTILIZADO PARA UNA MEJORA DE SU CULTIVO CONTROLADO. PARA ESTO EN PRIMER LUGAR SE HAN DETERMINADO LAS CONCENTRACIONES INTRACELULARES DE LOS COMPUESTOS QUE PUEDAN INFLUIR EN LA REGULACION DE LA FOSFOFRUCTOQUINASA Y LA PIRUVATOQUINASA Y POSTERIORMENTE SE HAN AISLADO, PURIFICADO Y CARACTERIZADO ESTAS ENZIMAS. DEL CONJUNTO DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS PODEMOS CONCLUIR QUE EL MUSCULO BLANCO DE LUBINA POSEE UNA GRAN ACTIVIDAD GLICOLITICA, CON UN ELEVADO POTENCIAL ANAEROBICO, AMBAS ENZIMAS SON ALOSTERICAS Y MUESTRAN UNA LIGERA TERMORREGULACION PRESENTANDO LA FOSFOFRUCTOQUINASA EN ESTE TEJIDO DOS FORMAS ENIMATICAS DIFERENTES.

Autor: ALHAMA CARMONA JOSE.
Año: 1991.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA. UNIVERSIDAD DE CORDOBA.

Resumen: SE HA EMPLEADO LA CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD DE ALTA PRESION (HPLAC) PARA LA PURIFICACION Y CUANTIFICACION DE DISTINTAS ENZIMAS, UTILIZANDO COLUMNAS PREEMPAQUETADAS CON UN GRAMO DE SILICE ACTIVADA CON GRUPOS EPOXIDO, COMO SOPORTE PARA LA UNION DE LOS LIGANDOS DE AFINIDAD. UNA COLUMNA SE DERIVATIZO CON UN ANALOGO DEL NADP+ (AHC8-ATPR). LA COLUMNA DE AFINIDAD RETENIA ESPECIFICAMENTE DESHIDROGENASAS DEPENDIENTES DE NADP+, Y SE EMPLEO PARA PURIFICAR LA GLUTATION REDUCTASA Y GLUCOSA-6-FOSFATO DESHIDROGENASA DE EXTRACTOS CRUDOS DE LEVADURA DE PANADERIA, HIGADO DE LISA Y HEMOLISADO DE ERITROCITOS DE CONEJO, CON RECUPERACIONES Y FACTORES DE PURIFICACION ELEVADOS. UNA SEGUNDA COLUMNA DE SILICE SE DERIVATIZO CON ANTICUERPOS POLICLONALES ANTIGLUTAMINA SINTETASA (GS) DE SYNECHOCYSTIS Y SE EMPLEO PARA PURIFICAR DICHA ENZIMA. LA ENZIMA PURIFICADA PRESENTABA UNA ACTIVIDAD ESPECIFICA DE 72 U/MG Y ERA ELECTROFORETICAMENTE HOMOGENEA. LA COLUMNA SE EMPLEO CON FINES ANALITICOS PARA LA CUANTIFICACION DE LA CANTIDAD DE PROTEINA GS PRESENTE EN EXTRACTOS CRUDOS DE SYNECHOCYSTIS, OBTENIENDOSE UN VALOR COMPARABLE AL CALCULADO MEDIANTE INMUNOELECTROFORESIS CUANTITATIVA.

Autor: BUSTO NUÑEZ M. DOLORES.
Año: 1991.
Universidad: VALLADOLID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA, BIOLOGIA MOLECULAR Y FISIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA Y MEDIO AMBIENTE.

Resumen: EN ESTE TRABAJO DE TESIS DOCTORAL SE REALIZO UNA INVESTIGACION ORIENTADA A (I) LA INDUCCION DE LA SINTESIS DE ENZIMAS CELULOLITICOS EN CELULAS MICROBIANAS, (II) EL AISLAMIENTO DE LAS PROTEINAS ENZIMATICAS INDUCIDAS, (III) LA EXTRACCION, MEDIANTE TECNICAS SELECTIVAS, DE ENZIMAS CELULOLITICOS A PARTIR DE MUESTRAS EDAFICAS, (IV) EL ESTUDIO DE LAS MEJORES CONDICIONES DE INMOVILIZACION DE LOS ENZIMAS AISLADOS, (V) LA CARACTERIZACION ADECUADA DE LOS ENZIMAS INMOVILIZADOS Y (VI) LA APLICACION DE LAS CELULASAS AISLADAS E INMOVILIZADAS EN LA DEGRADACION ACELERADA DE PAJA DE TRIGO Y DE CELULASAS COMERCIALES.

Autor: COMPANY BARAHONA MAR.
Año: 1991.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA FISICA APLICADA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA FISICA APLICADA.

Resumen: SE PRESENTA EL DESARROLLO DE DOS SISTEMAS MODELO PARA EL MECANISMO DE ACCION Y REGULACION ENZIMATICA. UN MODELO NO ENZIMATICO COMPUESTO POR EL COMPLEJO TRIS-ZN2+ QUE SIMULA LA ACCION DE LAS SERINA B-LACTAMASAS Y EN PARTICULAR LA B-LACTAMASA 1 DE BACILUS CEREUS. SE HAN REALIZADO TAMBIEN ESTUDIOS DE MODIFICACION QUIMICA DE B-LACTAMASA I ALTERANDO SELECTIVAMENTE SU ACTIVIDAD FRENTE A DISTINTOS TIPO DE ANTIBIOTICOS. CON EL SEGUNDO MODELO SE RELACIONAN LOS EQUILIBRIOS DE AGREGACION DIMERO-TETRAMERO DE FOSFORILASA B CON LOS MECANISMOS DE REGULACION DE ESTA ENZIMA, MOSTRANDOSE QUE LA EXISTENCIA DE ESTE EQUILIBRIO ES UN MECANISMO DE AMPLIFICACION DE LA SENSIBILIDAD. PARA EL DESARROLLO DE ESTE MODELO SE HA MEDIDO ACTIVIDAD DE FOSFORILASA B A ALTA CONCENTRACION DE ENZIMA UTILIZANDO UN EQUIPO DE STOPPED-FLOW Y UN METODO DE ENSAYO ESPECTROFOTOMETRICO CONTINUO DESARROLLADO POR NOSOTROS.

Autor: DOMINGUEZ GONZALEZ HERMINIA.
Año: 1991.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: INGENIERIA QUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA 49-2.

Resumen: A LO LARGO DE ESTE TRABAJO SE HA ESTUDIADO EL EFECTO DEL TRATAMIENTO ENZIMATICO APLICADO A DOS SEMILLAS OLEAGINOSAS REPRESENTATIVAS DE CULTIVOS OLEAGINOSAS DE ALTO Y BAJO CONTENIDO GRASO, DE INDUDABLE IMPORTANCIA COMERCIAL POR SU VOLUMEN DE PRODUCCION MUNDIAL. EL TRATAMIENTO, CON EL FIN DE AUMENTAR EL RENDIMIENTO DE EXTRACCION DE ACEITE Y LA CALIDAD NUTRITIVA DE LA PROTEINA, SE HA INCORPORADO EN DIFERENTES ETAPAS DE PROCESOS CONVENCIONALES O ALTERNATIVOS EN FUNCION DE LAS CARACTERISTICAS DE CADA SEMILLA Y DEL PROCESO PRODUCTIVO INDUSTRIAL QUE SE PRETENDE MEJORAR. DENTRO DE LOS PROCESOS CONVENCIONALES DE EXTRACCION DE ACEITES SE HA APLICADO LA TECNOLOGIA ENZIMATICA A PROCESOS DE PRESION Y DISOLVENTES PARA SEMILLAS DE ELEVADO CONTENIDO GRASO, Y A LOS DE EXTRACCION DIRECTA POR DISOLVENTES DE LAS DE MENOS ACEITE. ASIMISMO SE HA APLICADO DURANTE PROCESOS ALTERNATIVOS DE EXTRACCION, CON EL FIN DE OBTENER PRODUCTOS DE ELEVADO CONTENIDO PROTEICOAPTOS PARA CONSUMO HUMANO. OTRO DE LOS ESTUDIOS REALIZADOS PRETENDE EL APROVECHAMIENTO INTEGRAL DE LAS SEMILLAS DE GIRASOL, TRAS LA REALIZACION DE UN PRETRATAMIENTO QUE FAVOREZCA LA REALIZACION DE LA HIDROLISIS ENZIMATICA DE LA FRACCION CELULOSA.

Autor: FERNANDEZ LAFUENTE ROBERTO.
Año: 1991.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Autor: GARCIA DIAZ MIGUEL.
Año: 1991.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA. PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA..

Resumen: SE HAN ESTUDIADO DOS CLASES DE REACCIONES ENZIMATICAS CUYOS PRODUCTOS SE DETECTARON Y ANALIZARON POR CROMATOGRAFIA DE LIQUIDOS DE ALTA PRESION (HPLC). (I) TRANSFERENCIAS DE FOSFATO EN LAS QUE EL DONANTE ES EL 1,3-BISFOSFOGLICERATO Y LOS ACEPTORES SON NUCLEOSIDO 5'-POLIFOSFATOS, CATALIZADAS POR LA FOSFOGLICERATO QUINASA (EC 2.7.2.3) DE LEVADURA Y MUSCULO. LOS PRODUCTOS SON NUCLEOSIDO 5'-TETRAFOSFATOS Y PENTAFOSFATOS, QUE FUERON IDENTIFICADOS POR HPLC, ANALISIS ENZIMATICO Y ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA. (II) ESTERIFICACIONES O ALCOHOLISIS DE NUCLEOSIDO 5'-POLIFOSFATOS EN LAS QUE SE FORMAN ESTERES ALQUILICOS DE 5'-NUCLEOTIDOS (NMP-O-ALQUILOS) POR 5'-NUCLEOTIDO FOSFODIESTERASA (EC 3.1.4.1) O NUCLEOTIDO PIROFOSFATASA (EC 3.6.1.9). LOS NMP-O-ALQUILOS SE CARACTERIZARON POR HPLC, ANALISIS ENZIMATICO, ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA Y RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR. SE REALIZARON ESTUDIOS CINETICOS QUE PROPORCIONAN INFORMACION SOBRE EL MECANISMO DE ACCION DE LA FOSFODIESTERASA DE VENENO. SUBVENCIONADO POR DGICYT (PB87-1029) Y CICYT (SAL91-1081).

Autor: GONZALEZ GARCIA M. ANGELA.
Año: 1991.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA CLINICA Y BIOLOGIA MOLECULAR - FACULTAD DE MEDICINA DE SEVILLA.

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE REALIZAN DOS DIFERENTES GRUPOS DE TECNICAS EXPERIMENTALES ORIENTADAS A UN MISMO OBJETIVO. POR UN LADO, LA OBTENCION DE UN METODO DE CULTIVO QUE PERMITA LA MANIPULACION DE LA GLANDULA PINEAL Y POR OTRO, LA PUESTA A PUNTO DE LOS METODOS DE ANALISIS DE LAS ACTIVIDADES TIROXINA 5'-DESYODASA TIPO II (5'-D) Y N-ACETILTRANSFERASA (NAT). UNA VEZ CONSEGUIDOS ESTOS, PODEMOS PASAR AL ESTUDIO DE LA REGULACION DE LAS ACTIVIDADES 5'-D Y NAT DE PINEALES EN CULTIVO QUE ES EL OBJETIVO FINAL DE ESTE TRABAJO. DENTRO DE ESTE OBJETIVO SE DISEÑAN DOS GRUPOS DE EXPERIMENTOS. PRIMERO, EL ESTUDIO DEL EFECTO DEL FORSKOLIN SOBRE LAS ACTIVIDADES 5'-D Y NAT. SEGUNDO, EL EFECTO DE LAS HORMONAS TIROIDEAS SOBRE LA ACTIVACION POR FORSKOLIN DE DICHOS ENZIMAS. LAS CONCLUSIONES A LAS QUE HEMOS LLEGADO SON: 1. EL FORSKOLIN (F) ESTIMULA LA ACTIVIDAD DEL ENZIMA 5'-D EN CULTIVO DE GLANDULA PINEAL, ALCANZANDO SU MAXIMA ACTIVIDAD TRAS 4H DE INCUBACION Y DESTACAN QUE TRAS 8H PROSEGUIA LA ACTIVACION DEL ENZIMA. 2. EL F ESTIMULA LA ACTIVIDAD DEL ENZIMA NAT EN CULTIVO DE GLANDULA PINEAL. LA NAT COMIENZA SU ACTIVACION A LAS 2H DE INCUBACION Y ALCANZA SU MAXIMA ACTIVIDAD A LAS 8H. 3. LA PRESENCIA DE DTT EN EL MEDIO DE INCUBACION INHIBE DE FORMA SIGNIFICATIVA LA ACTIVACION DEL ENZIMA 5'-D POR EL F. 4. LA ACTIVIDAD 5'-D EN PRESENCIA DE F NO SE INHIBE NI POR EL PROPRANOLOL NI POR EL PRAZOSIN. 5. EL ENZIMA 5'-D SE INHIBE EN PRESENCIA DE DIFERENTES CONCENTRACIONES DE T4. 6. EL ENZIMA NAT NO PRESENTA NINGUNA VARIACION EN SU ESTIMULACION FRENTE AL F EN PRESENCIA DE T4. 7. EL HIPOTIROIDISMO EN LA RATA DA LUGAR A UN AUMENTO DE LA ACTIVIDAD BASAL DEL ENZIMA 5'-D EN LA GLANDULA PINEAL EN CULTIVO. EL F ESTIMULA SIGNIFICATIVAMENTE LA ACTIVIDAD DEL ENZIMA 5'-D MAS EN EL HIPO QUE EN EL EUTIROIDISMO.

Autor: GOÑI CEPERO M. PILAR.
Año: 1991.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA ENZIMA MODIFICANTE DE AMINOGLICOSIDOS AAC(6') /APH(2") SE CARACTERIZA POR PRESENTAR DOS ACTIVIDADES QUE NUNCA SE HAN ENCONTRADO SEPARADAS, LA AAC(6') Y LA APH(2"). EL TRABAJO CONSISTE EN EL ESTUDIO DE UN GRUPO DE CEPAS DE ESTAFILOCOCOS EN QUE NO SE HA DETECTADO LA ACTIVIDAD APH(2") POR TRES CAMINOS: 1.- CARACTERIZACION DE LAS CEPAS. SE HA OBTENIDO COMO RESULTADO UNA RELACION EPIDEMIOLOGICA ENTRE LAS CEPAS DE S.AUREUS ESTUDIADAS MEDIANTE LA DETERMINACION DE SU BIOTIPO Y SU FAGOTIPO. TODAS LAS CEPAS SON MULTIRESISTENTES PRESENTANDO PATRONES DE RESISTENCIA MUY SIMILARES. 2.- CARACTERIZACION DE LOS GENES DE RESISTENCIA EL GEN AACA QUE PORTAN ESTAS CEPAS SE ENCUENTRA LOCALIZADO EN EL CROMOSOMA, EN FORMA DE UNA COPIA UNICA DE 1.7 KB COMO SE DEMUESTRA POR TECNICAS DE HIBRIDACION. ESTO INDICA LA PRESENCIA DEL GEN APHD. 3.- CARACTERIZACION DE LA ENZIMA AAC(6'), PARA LO CUAL FUE NECESARIO CLONAR EL GEN EN E. COLI. SE OBTIENE PARA LA ENZIMA UN PESO MOLECULAR DE 60.000 D Y UN PL DE 4.7. TAMBIEN SE ESTUDIARON LAS CONDICIONES OPTIMAS PARA SU ESTABILIDAD Y ACTIVIDAD MAXIMA Y SU MECANISMO CINETICO DE ACTUACION.

Autor: IGEÑO GONZALEZ M. ISABEL.
Año: 1991.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR, FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: RHODOBACTER CAPSULATUS E1F1, UNA BACTERIA ROJA FOTOSINTETICA, CARECE DE GLUTAMATO DESHIDROGENASA Y UTILIZA COMO RUTA ALTERNATIVA PARA LA ASIMILACION DE AMONIO, CUANDO LA VIA GS/GOGAT SE ENCUENTRA INACTIVA, LA CATALIZADA POR LA L-ALANINA DESHIDROGENASA ACOPLADA A LA L-ALANINA:2-OXOGLUTARATO AMINOTRANSFERASA. ESTA RUTA TAMBIEN SE UTILIZA PARA LA DESANIMACION DE GLUTAMATO. LA REGULACION DE LA RUTA DE ASIMILACION DEL AMONIO EN R. CAPSULATUS E1F1 DEPENDE FUNDAMENTALMENTE DEL BALANCE C/N. LA GS Y LA ADH RESPONDEN INMEDIATA Y SIGNIFICATIVAMENTE A LAS FLUCTUACIONES EN ESTE BALANCE MEDIANTE CAMBIOS EN LA ACTIVIDAD (GS) Y EN LA EXPRESION GENICA (GS Y ADH). LA ACTIVIDAD GOGAT DEPENDE MAS BIEN DE FACTORES CINETICOS COMO LA CONCENTRACION DE GLUTAMINA. LA ENZIMA PRESENTA DOS VALORES DE KM PARA ESTE SUSTRATO (0,7 Y 3,4 MM), QUE PUEDEN INTERPRETARSE EN TERMINOS DE COOPERATIVIDAD NEGATIVA, LO QUE PERMITE QUE EL SUMINISTRO DE GLUTAMATO PARA LA SINTESIS DE AMINOACIDOS NO SUFRA LAS GRANDES FLUCTUACIONES QUE, SIN DUDA, SUFRE IN VIVO LA CONCENTRACION DE GLUTAMINA. LAS KM PARA EL 2-OXOGLUTARATO Y PARA EL NADPH SON 15 Y 20 UM, RESPECTIVAMENTE. LA GLUTAMATO SINTASA DE R. CAPSULATUS E1F1 SE HA PURIFICADO HASTA HOMOGENEIDAD ELECTROFORETICA POR UN PROCEDIMIENTO QUE TIENE COMO PASO PRINCIPAL UNA CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD A TRAVES DE UN GEL DE RED-120 AGAROSE. LA PROTEINA NATIVA ESTA FORMADA POR DOS SUBUNIDADES DIFERENTES CON MASAS MOLECULARES DE 175 Y 53 KDA. LA PROTEINA PRESENTA DIFERENTES ESTADOS DE AGREGACION DEPENDIENDO DE LA FUERZA IONICA DEL MEDIO. ES UNA ENZIMA SIMILAR A LAS DESCRITAS EN OTRAS BACTERIAS, PERO POSEE CARACTERISTICAS PECULIARES POR LO QUE SE REFIERE A SU CONTENIDO EN GRUPOS PROSTETICOS (4 MOLES DE FAD Y 4 ATOMOS DE HIERRO POR MOL DE PROTEINA). LA LOCALIZACION DEL GRUPO PROSTETICO DE FLAVINA SUGIERE UN PAPEL MUY IMPORTANTE DE LA SUBUNIDAD PEQUEÑA EN LA TRANSFERENCIA DE LOS ELECTRONES DESDE EL NADPH A LOS DIFERENTES ACEPTORES. IN VITRO, LA GLUTAMATO SINTASA DE R. CAPSULATUS E1F1 SE INACTIVA RAPIDA E IRREVERSIBLEMENTE EN PRESENCIA DE NADPH DEBIDO, PROBABLEMENTE, A LA FORMACION DE PEROXIDO DE HIDROGENO EN AUSENCIA DEL SUSTRATO ACEPTOR DE ELECTRONES. DADO QUE LA BACTERIA POSEE ACTIVIDAD CATALASA CUALESQUIERA QUE SEAN LAS CONDICIONES DE CRECIMIENTO, ESTE PROCESO DE INACTIVACION NO DEBE TENER LUGAR IN VIVO, NI AUN EN CULTIVOS AEROBICOS.

Autor: IRABURU ELIZALDE M. JOSE.
Año: 1991.
Universidad: NAVARRA .
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA ABORDADO EL ESTUDIO DE LA ENZIMA CF1 DE CLOROPLASTOS, EN LO REFERENTE AL NUMERO Y CARACTERISTICAS DE SUS CENTROS DE UNION DE NUCLEOTIDOS Y EN LO RELACIONADO CON LOS MECANISMOS DE REGULACION DE LA ENZIMA. LOS ESTUDIOS CINETICOS CON DISTINTOS MODULADORES, LLEVADOS A CABO EN LA ENZIMA ACTIVADA POR PROTEOLISIS, INDICAN QUE EXISTEN EN CF1 CENTROS REGULADORES UNIDORES DE NUCLEOTIDOS Y OTROS SITIOS DE NATURALEZA CATIONICA A LOS QUE SE ENLAZAN DISTINTOS ANIONES. LA ACTIVIDAD CA2+ - ATPASICA DE LA ENZIMA ACTIVADA POR DTT, MUESTRA UNA CINETICA MONOFASICA CUANDO NO SE ELIMINA EL EXCESO DE REACTIVO, Y BIFASICA CUANDO SE ELIMINA MEDIANTE FILTRACION EN GEL. ESTOS RESULTADOS PUEDEN SER DEBIDOS A DIFERENTES FORMAS ACTIVAS DE LA ENZIMA QUE DEPENDEN DEL ESTADO REDOX. AMBAS FORMAS ACTIVAS PUEDEN DIFERENCIARSE DESDE UN PUNTO DE VISTA ESTRUCTURAL, CUANDO SE SOMETEN A ELECTROFORESIS EN GELES DE POLIACRILAMIDA. SE HA DETECTADO TAMBIEN EN CF1 UNA ACTIVACION POR PROTEOLISIS ESPONTANEA, QUE PODRIA TENER ALGUN SIGNIFICADO FISIOLOGICO.

Autor: MOYANO CAÑETE ENRIQUETA.
Año: 1991.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y FISIOLOGIA, FACULTAD DE CIENCIAS, UNIVERSIDAD DE CORDOBA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HAN AISLADO Y PURIFICADO TRES ISOENZIMAS DE LA GLUTAMATO DESHIDROGENASA DE CHLAMYDOMONAS REINHARDTII INESPECIFICAS PARA EL PIRIDIN NUCLEOTIDO Y QUE RESPONDEN DE MODO DIFERENTE A DIVERSAS CONDICIONES AMBIENTALES Y DE ESTRES. ESTAS TRES ISOENZIMAS SE HAN PURIFICADO HASTA HOMOGENIDAD ELECTROFORETICA Y PRESENTAN CARACTERISTICAS FISICOQUIMICAS Y CINETICAS SIMILARES A LAS DE OTRAS GLUTAMATO DESHIDROGENASAS EN PLANTAS SUPERIORES Y ALGAS VERDES UNICELULARES. LA SINTESIS DE LAS TRES ISOENZIMAS ESTA LOCALIZADA EN EL CITOPLASMA, MIENTRAS QUE SU ACTIVIDAD SE LOCALIZA EN MITOCONDRIAS, COMO OCURRE PARA LA GDH CONSTITUTIVA DE ALGAS Y PLANTAS SUPERIORES. LAS TRES ISOENZIMAS DE LA GDH DE CHLAMYDOMONAS REINHARDTII JUEGAN UN PAPEL IMPORTANTE EN EL METABOLISMO DEL NITROGENO Y DEL CARBONO Y, POSIBLEMENTE SON ENZIMAS ANAPLEROTICAS RELACIONADAS CON EL APORTE DE 2-OXOGLUTARATO Y/O GLUTAMATO PARA EL MANTENIMIENTO DEL CICLO GLUTAMINA SINTETASA/GLUTAMATO SINTASA O PARA EL SUMINISTRO DE CARBONO AL CICLO DE LOS ACIDOS TRICARBOXILICOS EN CONDICIONES DE DISMINUCION O CARENCIA DEL MISMO EN CIERTAS CONDICIONES FISIOLOGICAS.

Autor: MUÑOZ ALAMILLO JOSEFA.
Año: 1991.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y FISIOLOGIA. FACULTAD DE CIENCIAS. UNIVERSIDAD DE CORDOBA..

Resumen: LA URATO OXIDASA DEL ALGA VERDE UNICELULAR C. REINHARDTI SE HA PURIFICADO A HOMOGENEIDAD. LAS CARACTERISTICAS MOLECULARES MAS IMPORTANTES DE LA ENZIMA SON QUE ES UNA PROTEINA DE 124 KDA. DE MASA MOLECULAR, FORMADA POR CUATRO SUBUNIDADES DE 31 KDA., Y QUE CONTIENE CUATRO ATOMOS DE COBRE POR MOLECULA DE ENZIMA, PROBABLEMENTE UNO POR SUBUNIDAD. LA URATO OXIDASA DE C. REINHARDTI ES EXTREMADAMENTE ESPECIFICA PARA SUS DOS SUSTRATOS, OXIGENO Y URATO, QUE SON UTILIZADOS ESTEQUIOMETRICAMENTE EN LA REACCION. LA ENZIMA TIENE UN COMPORTAMIENTO CINETICO MICHAELIANO PARA EL URATO Y UNA CINETICA SIGMOIDAL PARA EL OXIGENO, CON SQ.5 DE 3,7. LA OXIDACION DEL URATO CATALIZADA POR ESTA ENZIMA TRANSCURRE MEDIANTE LA FORMACION AL AZAR DE UN COMPLEJO TERNARIO. EN LA ACCION CATALITICA DE LA ENZIMA ESTAN IMPLICADOS RESIDUOS DE ARGININA Y DE HISTIDINA DE LA ENZIMA, Y EL COBRE DE LA MISMA, QUE SE UNEN PROBABLEMENTE A LOS GRUPOS CARBONILOS EN C-2, C-8 Y C-6 Y AL NH2 DE LA POSICION 7 DE LA MOLECULA DE URATO. LA URATO OXIDASA DE C. REINHARDTII ES UNA ENZIMA CONSTITUTIVA QUE SE SINTETIZA EN FORMA INACTIVA Y QUE SE ACTIVA EN PRESENCIA DE URATO. EN CELULAS SOMETIDAS A CARENCIA DE NITROGENO, LA DEGRADACION ENDOGENA DE NUCLEOTIDOS DA LUGAR A LA PRODUCCION DE URATO LIBRE QUE ACTIVA A LA URATO OXIDASA Y SIRVE COMO FUENTE DE NITROGENO. SE HA PURIFICADO TAMBIEN LA XANTINA DESHIDROGENASA DEL MISMO ORGANISMO. ESTA ENZIMA ES UN DIMERO CON DOS SUBUNIDADES IGUALES DE 166 KDA. CADA UNA. LA INACTIVACION POR SUSTRATO DE LA XANTINA DESHIDROGENASA DE C. REINHARDTII ESTA MEDIADA POR LA REDUCCION DE LA ENZIMA, SOBRE TODO A NIVEL DE LA FLAVINA Y DEL MOLIBDENO.