ENZIMOLOGIA, 9

Autor: PANISELLO ROYO JOSEFA M..
Año: 1991.
Universidad: BARCELONA .
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA Y CIRUGIA (DIVISION VII) PROGRAMA DE DOCTORADO: REALIZADOS CURSOS MONOGRAFICOS DE DOCTORADO.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HAN ANALIZADO LAS ACTIVIDADES ENZIMATICAS Y LOS PATRONES ENZIMATICOS DEL ALCOHOL Y DE LA ALCOHOL DESHIDROGENASA EN 124 PACIENTES, ALCOHOLICOS Y NO ALCOHOLICOS, CON DIFERENTES GRADOS DE ENFERMEDAD HEPATICA (HISTOLOGIA NORMAL, HEPATOPATIA NO CIRROTICA Y CIRROSIS HEPATICA). LOS RESULTADOS DEMUESTRAN QUE LA ACTIVIDAD DE ESTOS DOS SISTEMAS DISMINUYE DE FORMA PARALELA A MEDIDA QUE VA AVANZANDO EL DAÑO HEPATICO.

Autor: RUA RODRIGUEZ M. LUISA.
Año: 1991.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA AGRICOLA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HA ABORDADO LA PURIFICACION DE UNA LIPASA EXTRACELULAR PRODUCIDA POR LA LEVADURA CANDIDA RUGOSA. SE HAN AISLADO DOS ISOENZIMAS PRINCIPALES QUE POSEEN DIFERENTE ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO. SUS SECUENCIAS N-TERMINALES, PESO MOLECULAR Y CONTENIDO EN AMINOACIDOS TOTALES ES MUY SIMILAR, DIFIEREN EN EL PUNTO ISOELECTRICO Y EN SU HIDROFOBICIDAD. TAMBIEN POSEEN DIFERENTE CONTENIDO EN AZUCARES NEUTROS. EL OLIOOSACARIDO UNIDO A LAS LIPASAS ES DEL TIPO RICO EN MANOSA Y ESTA UNIDO N-GLICOSIDICAMENTE A LA PROTEINA. LA CARACTERIZACION CINETICA DE ESTAS ISOENZIMAS FUE REALIZADA EN FASE ACUOSA Y EN UN SISTEMA DE MICROEMULSION W/O (AGUA/AOT/N-HEPTANO). EN AMBOS MEDIOS LAS LIPASAS MUESTRAN DIFERENCIAS EN SU ESPECIFICIDAD: LA LIPASA A POSEE UN MAYOR CARACTER ESTERASICO, MIENTRAS QUE LA LIPASA B ES UN MEJOR CATALIZADOR PARA SUSTRATOS LIPASICOS.

Autor: VAZQUEZ MOLINI ANA M..
Año: 1991.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HA REALIZADO EL ANALISIS CINETICO DE MECANISMOS DE REACCION DE DIVERSOS SISTEMAS ENZIMATICOS ACOPLADOS, DEDUCIENDO EXPRESIONES ANALITICAS EXPLICITAS QUE DESCRIBEN LA APARICION DE PRODUCTO FRENTE AL TIEMPO, EN FUNCION DE LAS CONCENTRACIONES INICIALES DE LOS REACTIVOS Y DE LAS CONSTANTES CINETICAS CORRESPONDIENTES. SE HA ESTABLECIDO UN DISEÑO EXPERIMENTAL UTIL PARA IDENTIFICAR ALGUNOS DE SUS CASOS PARTICULARES Y DETERMINAR LAS CORRESPONDIENTES CONSTANTES CINETICAS, INCLUIDAS EN LAS ECUACIONES DEDUCIDAS PREVIAMENTE. SE HA APLICADO ESTA METODOLOGIA AL ESTUDIO DE VARIOS SISTEMAS ENZIMATICO-ENZIMATICO, CON ACTIVACION DE ZIMOGENES EN CONDICIONES DE EXCESO DE ZIMOGENO O DE ENZIMA ACTIVANTE, ASI COMO UN PROCESO DE AUTOACTIVACION, DENOMINADO GLOBALMENTE ACTIVACION DE ZIMOGENOS EN CASCADA. ENTRE LOS SISTEMAS ENZIMATICO-QUIMICO ESTUDIADOS, SE ENCUENTRA LA OXIDACION DE DIVERSAS FENOTIAZINAS POR PEROXIDO DE HIDROGENO-PEROXIDASA, Y LA OXIDACION DE CLORPROMAZINA POR PEROXIDO DE HIDROGENO-HEMOGLOBINA. PUBLICACIONES: - VARON ET AL. MATH. BIOSCI. 1987, 87, 31-45. - VARON ET AL. J. THEOR. BIOL. 1988, 132, 51-59. - VAZQUEZ ET AL. ANALES DE QUIMICA (RSEQ) 1990, 86(7), 797-800. - VARON ET AL. J. THEOR. BIOL. 1990 145, 123-131. - VARON ET AL. J. MOL. CATAL. 1991, 66, 409-419. - VAZQUEZ ET AL. J. BIOCHEM. BIONYS. METHODS, ACEPTADO, EN PRENSA, 1991. - VARON ET AL. J. THEOR. BIOL. 1991, ACEPTADO, EN PRENSA.

Autor: AGUILAR URBANO MIGUEL.
Año: 1990.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DPTO. DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y FISIOLOGIA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE REALIZA UN ESTUDIO DE ALGUNAS DE LAS PROPIEDADES MAS IMPORTANTES DEL COFACTOR DE MOLIBDENO EN EL ALGA VERDE CHLAMYDOMONAS REINHARDTII, EN COMPARACION CON EL COFACTOR DE MOLIBDENO DE OTRAS FUENTES. SE REALIZA, ASIMISMO, UNA CARACTERIZACION BIOQUIMICA Y GENETICA DE DIVERSAS ESTIRPES MUTANTES DE ESTE ALGA AFECTADAS EN EL PROCESO DE BIOSINTESIS DEL COFACTOR DE MOLIBDENO. LOS RESULTADOS DE ESTE ESTUDIO APOYAN LA IDEA DE UNIVERSALIDAD DE LA ESTRUCTURA BASICA DEL COFACTOR DE EUCARIOTAS. ASIMISMO, SE PROPONE UNA FUNCION PARA LA DENOMINADA PROTEINA PORTADORA DE COFACTOR DE MOLIBDENO, EN CUALQUIER CASO NO PROTECTORA DEL COFACTOR ACTIVO. SE DESCRIBE UN NUEVO LOCUS, DENOMINADO NIT-7, RELACIONADO CON LA SINTESIS DEL COFACTOR DE MOLIBDENO EN ESTE ALGA, Y SE PROFUNDIZA EN LA CARACTERIZACION BIOQUIMICA DE ESTIRPES MUTANTES AFECTADAS EN ESTE LOCUS Y EN OTROS PREVIAMENTE DESCRITOS. ELLO HA PERMITIDO SU DISTINCION FENOTIPICA, Y SU RELACION CON ETAPAS DIVERSAS DEL PROCESO DE BIOSINTESIS DEL COFACTOR DE MOLIBDENO EN CHLAMYDOMAS REINHARDTII.

Autor: BENLLOCH MARIN TERESA.
Año: 1990.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOMECICAS Y DEPARTAMENTO BIOQUIMICA DE LA FACULTAD MEDICINA DE LA UAM..

Autor: BRU MARTINEZ ROQUE.
Año: 1990.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA CINETICA DE ENZIMAS SOLUBILIZADOS EN MICELAS INVERSAS HA SIDO INVESTIGADA DESDE EL PUNTO DE VISTA TEORICO Y PRACTICO. SE HA ELABORADO UN MODELO TEORICO BASADO EN EL FENOMENO DE COMPARTIMENTACION DE SOLUTOS INHERENTE AL SISTEMA DE MICELAS INVERSAS. EL MODELO SIMULA EL EFECTO DE LOS PARAMETROS MICELASRES W. (AGUA)/(SURFACTANTE) (TAMAÑO DE LA MICELA INVERSA) Y O=%AGUA V/V (CONCENTRACION DE MICELAS INVERSAS) SOBRE LA VELOCIDAD DE LA REACCION ENZIMATICA. EL ESTUDIO EXPERIMENTAL DE TIROSINASA EN MICELAS INVERSAS DE BRIJ 96/CICLOHEXANO Y DE COLESTEROL OXIDASA Y QUIMOTRIPSINA EN AEROSOL OT/ISOOCTANO, REVELA LA CAPACIDAD DEL MODELO PARA DESCRIBIR EL COMPORTAMIENTO DEL ENZIMA EN ESTOS SISTEMAS: ENTRE OTROS ASPECTOS CABE DESTACAR LA DESCRIPCION SATISFACTORIA DE LA SUPERACTIVACION DE ENZIMAS Y DE DEPENDENCIAS APARENTES TIPO ACAMPANADO DE LA VELOCIDAD DE REACCION RESPECTO DEL TAMAÑO DE LA MICELA INVERSA DEBIDO A EFECTOS DE DILUCION. TRIPSINA Y SU INHIBIDOR MACROMOLECULAR DE SEMILLA DE SOJA SE ESTUDIARON EN MICELAS INVERSAS PARA DEMOSTRAR QUE LA INTERACCION ENTRE MACROMOLECULAS EN ESTOS SISTEMAS ES DEPENDIENTE DEL TRANSPORTE DE MATERIA EN EL SISTEMA VIA FUSION DE MICELAS INVERSAS, MIENTRAS QUE PARA PEQUEÑAS MOLECULAS EL PROCESO ES INDEPENDIENTE DEL TRANSPORTE.

Autor: CANO LOPEZ JOSE MIGUEL.
Año: 1990.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA UNIVERSIDAD AUTONOMA DE MADRID PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA .

Resumen: SE AISLAN CELULAS DE EPITELIO DE REVESTIMIENTO DE MUCOSA GASTRICA DE CERDO. UNA VEZ AISLADAS Y PUESTOS A PUNTO LOS METODOS ADECUADOS, SE VALORAN EN ELLAS UNAS CUARENTA ACTIVIDADES ENZIMATICAS. LOS ENZIMAS ESTUDIADOS SE PUEDEN REUNIR EN DOS GRANDES GRUPOS, A SABER: A) ENZIMAS RELACIONADOS CON LA BIOSINTESIS DE MUCINA. B) ENZIMAS RELACIONADOS CON EL METABOLISMO QUE PROPORCIONA EL SOPORTE ENERGETICO PRECISO PARA DICHA BIOSINTESIS. SE DISEÑA UNA ESTRATEGIA PARA APLICAR ESTA METODOLOGIA A MUESTRAS (P.E. BIOPSIAS) PARA PERCIBIR PRECOZMENTE ALTERACIONES EN LOS PATRONES ENZIMATICOS QUE ADVIERTAN SOBRE LA "DESVIACION" IRREVERSIBLE HACIA LA MALIGNIDAD EN ESTOMAGOS HUMANOS CON LESIONES "PRECANCEROSAS".

Autor: CENTENO VELAZQUEZ FRANCISCO.
Año: 1990.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA.

Resumen: LOS OBJETIVOS DE ESTE ESTUDIO HAN SIDO LA LOCALIZACION DE LOS CENTROS FUNCIONALES EN CITOCROMO P-450 Y EN LA NADPH-CITOCROMO P-450 REDUCTASA, ASI COMO LA ELABORACION DE UN MODELO PARA LA LOCALIZACION DE AMBAS PROTEINAS EN LA MEMBRANA MICROSOMAL QUE TENGA EN CUENTA LAS EXIGENCIAS FUNCIONALES DEL SISTEMA. SE HAN PURIFICADO NADPH-CITOCROMO P-450 REDUCTASA Y CITOCROMO P-450 A PARTIR DE MICROSOMAS DE HIGADOS DE RATAS INDUCIDAS CON FENOBARBITAL. LA LOCALIZACION DE CENTROS FUNCIONALES EN AMBAS PROTEINAS SE HA ABORDADO MEDIANTE TRANSFERENCIA DE ENERGIA DE FLUORESCENCIA Y RECONSTITUCION EN VESICULAS LIPIDICAS DE COMPOSICION CONOCIDA. LOS RESULTADOS OBTENIDOS MUESTRAN QUE LOS GRUPOS FAD Y FMN DE LA NADPH-CITOCROMO P-450 REDUCTASA SE ENCUENTRAN RELATIVAMENTE ALEJADOS DE LA INTERFASE LIPIDO-AGUA, Y QUE AMBOS GRUPOS SE HALLAN EMBEBIDOS EN LA ESTRUCTURA PROTEICA, SIENDO LA DISTANCIA ESTIMADA ENTRE AMBOS GRUPOS DE 20 A. SE APORTAN EVIDENCIAS EXPERIMENTALES DIRECTAS QUE MUESTRAN QUE FAD ES MENOS ACCESIBLE AL MEDIO ACUOSO QUE FMN Y QUE CONTRIBUYE CON APROXIMADAMENTE EL 84+-3% A LA FLUORESCENCIA TOTAL DE FLAVINAS EN LA NADPH-CITOCROMO P-450 REDUCTASA NATIVA, ADEMAS DE LA PRESENCIA DE UN DOMINIO DE UNION DE ESTEROIDES EN CITOCROMO P-450. LA DISTANCIA ESTIMADA ENTRE EL GRUPO HEMO DE CITOCROMO P-450 Y LAS CABEZAS POLARES DE LOS LIPIDOS EN SISTEMAS RECONSTITUIDOS ES DE 48-50 A, SIENDO LA DISTANCIA DEL GRUPO HEMO AL SITIO DE UNION DEL SUSTRATO MENOR DE 53 A. POR ULTIMO, SE PROPONE UN MODELO PARA LA LOCALIZACION DE LOS CENTROS FUNCIONALES DE AMBAS PROTEINAS EN LA MEMBRANA MICROSOMAL.

Autor: CORDERO TORRES REMIGIO.
Año: 1990.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: FACULTAD DE MEDICINA (UNIVERSIDAD DE EXTREMADURA).

Resumen: EN 90 PACIENTES A LOS QUE SE REALIZO BIOPSIA HEPATICA CON FINALIDAD DIAGNOSTICA, SE SEPARO UN FRAGMENTO DE 5 MMS PARA DETERMINAR PRODUCTOS DE PEROXIDACION LIPIDICA (MALONDIALDEHIDO Y ACIDOS GRASOS) POR HPLC Y ACTIVIDAD DE ENZIMAS ANTIOXIDANTES (SUPEROXIDO DISMUTASA, CATALASA Y GLUTATION PEROXIDASA). SIMULTANEAMENTE SE REALIZO EXTRACCION DE SANGRE PERIFERICA DETERMINANDOSE PRODUCTOS DE PEROXIDACION LIPIDICA (MALONDIALDEHIDO Y ACIDOS GRASOS) POR HPLC Y CROMATOGRAFIA DE GASES Y ACTIVIDAD DE ENZIMAS ANTIOXIDANTES (SOD, CAT Y GSH-PX) EN ERITROCITOS. SE DETERMINO BIOQUIMICA HABITUAL Y ESTUDIO MORFOLOGICO CUANTITATIVO POR PARAMETROS. LOS RESULTADOS PUSIERON DE MANIFIESTO QUE LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS ANTIOXIDANTES SE MODIFICA EN LOS DISTINTOS TIPOS DE ENFERMEDAD HEPATICA REDUCIENDOSE LA CATALASA HEPATICA Y AUMENTANDO LA SOD Y GSHPX DESDE LOS PRIMEROS ESTADIOS DE DAÑO CELULAR EN LA HEPATOPATIA ALCOHOLICA. EN LA ESPEATOSIS SE EVIDENCIA QUE LOS RADICALES LIBRES SON MEDIADORES DE LA LESION HEPATICA. EN LA HEPATOPATIA VIRICA LOS RADICALES LIBRES SON CONSECUENCIA DE LA MUERTE CELULAR. EN LA HEPATITIS ALCOHOLICA SE PRODUCE UNA DISMINUCION DE LA ACTIVIDAD SOD HEPATICA CON AUMENTO DE LA ACTIVIDAD SOD ERITROCITARIA. EN LA CIRROSIS HEPATICA SE PRODUCE UN AGOTAMIENTO DE LOS SISTEMAS ANTIOXIDANTES ENZIMATICOS HEPATICOS.

Autor: CORROZA MURO MANUEL.
Año: 1990.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA Y ALIMENTACION.

Resumen: EL FADH2 ES UN MODULADOR DE LA ACTIVIDAD HIDROLITICA DE LA ENZIMA ATPASA. EN LA ATPASA EN SU FORMA F1-SOLUBLE, EL FADH2 ES UN ESTIMULADOR DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA, EN TANTO QUE EN PARTICULAS SUBMITOCONDRIALES (PSM) EL FADH2 INHIBE NOTABLEMENTE LA CATALISIS ENZIMATICA. EN AMBOS CASOS EL EFCTO MODULADOR ES MAS ACUSADO CUANDO LAS CONCENTRACIONES DE SUSTRATO ATP.MG SON MAS PEQUEÑAS (DEL ORDEN DE 0.06 NM). EN PSM, POR OTRO LADO, EL ADP SE COMPORTA COMO UN MODULADOR BIFASICO ACTIVADOR/INHIBIDOR, PERO ESTE NUCLEOSIDO DIFOSFATO NO ES CAPAZ DE REVERTIR LA INHIBICION OCASIONADA POR EL FADH2. EL ATP, SIN EMBARGO, ES CAPAZ DE CONVERTIR LA INHIBICION ORIGINADA POR EL FADH2 EN UNA POTENTE ACTIVACION, SIEMPRE EN PSM. ADEMAS, CONCENTRACIONES DE ATP QUE POR SI SOLAS RESULTAN INHIBIDORAS DE LA ACTIVIDAD ATPASA RESULTAN SER NETAMENTE ACTIVADORAS CUANDO SE AÑADEN CONJUNTAMENTE CON FADH2 AL MEDIO DE INCUBACION DE LAS PSM. DE TODOS ESTOS RESULTADOS SE FORMULA UNA HIPOTESIS DE SITIOS DE UNION DEL FADH2 A LA MOLECULA DE LA ATPASA. ADEMAS, SE POSTULA UN SENTIDO FISIOLOGICO PARA LA MODULACION DE LA ENZIMA POR EL FADH2 EN RELACION CON EL FLUJO INVERSO DE ELECTRONES EN FUNCION DEL VALOR DEL COCIENTE ATP/ADP Y A LA LUZ DE LA TEORIA DEL ACOPLAMIENTO REDOX DE SANTIAGO Y LOPEZ-MORATALLA.

Autor: DONAIRE GONZALEZ ANTONIO .
Año: 1990.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE QUIMICA INORGANICA DE LA FACULTAD DE QUIMICAS DE LA UNIVERSITAT DE VALENCIA..

Resumen: SE HA ESTUDIADO LA INTERACCION DE LA CARBOXIPEPTIDASA A CON INHIBIDORES INORGANICOS TALES COMO CLORURO, AZIDA, FOSFATO Y PIROFOSFATO, ASI COMO EL EFECTO QUE CIERTOS AMINOACIDOS Y CARBOXILATOS (L-FENILALANINA, D-FENILALANINA, FENILACETATO, ACETATO) PRODUCEN EN DICHA UNION. SE HAN UTILIZADO LAS TECNICAS DE ESPECTROSCOPIA UV-VISIBLE, RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR DE 35CL, 31P, 1H Y 13C Y DICROISMO CIRCULAR. A PARTIR DEL ESTUDIO DE LA VARIACION ESPECTROSCOPICA DEL DERIVADO DE CO(II), COCPA, Y DE COMPLEJOS BINARIOS Y TERNARIOS SUYOS CON EL PH SE HA ASIGNADO A LA MOLECULA DE AGUA COORDINADA AL ION METALICO COMO GRUPO RESPONSABLE DEL 2PKA DEL ENZIMA NATIVO, QUE REGULA LA ACTIVIDAD CATALITICA DE CPA A PH ALTO. LA UNION DE AMINOACIDOS Y CARBOXILATOS EN LA CAVIDAD ENZIMATICA PRODUCE UNA DISMINUCION DEL VALOR DE ESTE 2PKA, ASI COMO UN AUMENTO DRASTICO EN LA AFINIDAD DE LOS ANIONES CLORURO Y AZIDA AL ENZIMA. LOS ANIONES FOSFATO Y PIROFOSFATO SE UNEN AL ENZIMA SIN NECESIDAD DE LA PRESENCIA DE ESTOS AMINOACIDOS EN LA CAVIDAD. ESTOS ANIONES SE UNEN DIRECTAMENTE AL ION METALICO DE CPA. SE HA CARACTERIZADO EL DERIVADO METALOSUSTITUIDO DE NI(II), NICPA, ASIGNANDO LAS SEÑALES DEL ESPECTRO 1H NMR A PROTONES DE LAS HISTIDINAS COORDINADAS AL ION METALICO. A PARTIR DE ESTE ESTUDIO SE SUGIERE UNA GEOMETRIA OCTAEDRICA PARA EL NIQUEL EN NICPA. LOS AMINOACIDOS L-FENILALANINA Y D-FENILALANINA FORMAN COMPLEJOS DE ESTEQUIOMETRA 1:1 Y 1:2 CON NICPA. LA PRIMERA POSICION DE UNION DE ESTOS AMINOACIDOS ES UNA POSICION NO METALICA, PROBABLEMENTE LA ARGININA 145, MIENTRAS QUE LA SEGUNDA POSICION ES LA PROPIA ESFERA DE COORDINACION DEL ION METALICO.

Autor: FERNANDEZ SALGUERO PEDRO M..
Año: 1990.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA.

Resumen: LOS OBJETIVOS DEL PRESENTE TRABAJO SON LOS SIGUIENTES: EN PRIMER LUGAR LA CARACTERIZACION DE LA INTERACCION CON PESTICIDAS DEL CITOCROMO P450 MICROXOMAL OBTENIDO TRAS EL TRATAMIENTO DE ANIMALES CON DIFERENTES XENOBIOTICOS, EN SEGUNDO LUGAR LA INMOVILIZACION Y ESTABILIZACION DE ESTE SISTEMA ENZIMATICO A DISTINTOS SOPORTES (POLIACRILAMIDA Y BIORREACTORES DE FIBRA POROSA. LOS RESULTADOS OBTENIDOS MUESTRAN QUE: (I) EL HERBICIDA PARAQUAT ES UN SUSTRATO SUICIDA QUE DESNATURALIZA LA DOTACION NATIVA DE CITOCROMO P450 E INHIBE FUERTEMENTE LA ACTIVIDAD NADPH REDUCTASA, (II) LA TOXICIDAD NO ES PRODUCIDA POR ALTERACION DE LOS PARAMETROS QUIMICO-FISICOS DE LA BICAPA LIPIDICA; (III) LA INMOVILIZACION DE CITOCROMO P450 POR UNION A GELES DE ACRILAMIDA ES MENOS IDONEA QUE LA INMOVILIZACION EN BIORREACTORES DE FIBRA POROSA PRESENTANDO EN ESTE CASO LA ENZIMA UNA MAYOR ESTABILIDAD FRENTE AL TIEMPO, LA FUERZA IONICA DEL MEDIO Y LA TEMPERATURA, OPERANDO LA REACCION CATALITICA BAJO CONTROL CINETICO. DE ESTE MODO EL CITOCROMO P450 INMOVILIZADO EN BIORREACTORES PUEDE SER EMPLEADO EN LA ELIMINACION DE COMPUESTOS TOXICOS DEL SISTEMA CIRCULATORIO DE MAMIFEROS, DE MODO SIMILAR A COMO SE REALIZAN LOS PROCESOS DE HEMODIALISIS.

Autor: JIMENO CUELLAR M. PILAR.
Año: 1990.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: ESTUDIOS ENZIMATICOS LLEVADOS A CABO EN POBLACIONES DE MEDULA OSEA ENRIQUECIDAS EN PRECURSORES ERITROIDEOS Y EN POBLACIONES DE SANGRE CIRCULANTE CON DISTINTO CONTENIDO EN RETICULOCITOS Y ERITROCITOS, HA PUESTO DE MANIFIESTO EL DESCENSO DE ACTIVIDAD DE LAS QUINASAS GLUCOLITICAS (HK, PFK, PGK Y PK), Y EL AUMENTO DE LA BPGM, A MEDIDA QUE AVANZAN LOS PROCESOS DE DIFERENCIACION Y MADURACION ERITROCITARIA. EL ANALISIS ISOENZIMATICO DE LAS QUINASAS REGULADORAS GLUCOLITICAS DURANTE LOS MISMOS, HA DEMOSTRADO LA PRESENCIA DE DISTINTAS ISOENZIMAS PARA HK Y PK, Y UNA AMPLIA VARIEDAD ISOENZIMATICA PARA PFK. EL EMPLEO DE LA TECNICA DE DISTRIBUCION EN CONTRACORRIENTE EN SISTEMAS BIFASICOS HA PERMITIDO EL FRACCIONAMIENTO ESPECIFICO EN FUNCION DE LA EDAD DE ERITROCITOS HUMANOS Y DE RATA, ENCONTRANDOSE UN DESCENSO EN LA ACTIVIDAD DE LAS TRES ENZIMAS REGULADORAS Y UNA CONSTANCIA DE LA MISMA PARA BPGM Y PGK, DURANTE DICHO PROCESO. FINALMENTE SE HA INICIADO UN ESTUDIO DE LAS CARACTERISTICAS ESTRUCTURALES Y METABOLICAS DE ERITROCITOS MODIFICADOS CON UN REACTIVO BIFUNCIONAL, EL DIMETILSUBERIMIDATO, CON VISTAS A SU POSIBLE UTILIZACION COMO VECTORES TERAPEUTICOS.

Autor: LAIZ TROBAJO LEONILA.
Año: 1990.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: ECOLOGIA, GENETICA Y MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: FINALIZO LOS CURSOS DE DOCTORADO EN EL CURSO ACADEMICO 1986-87..

Resumen: LA BIOSINTESIS DE CEFAMICINA C POR NOCARDIA LACTAMDURANS TIENE LUGAR A TRAVES DE UNA VIA BIOSINTETICA QUE SE INICIA CON LA FORMACION DEL TRIPEPTIDO (L-ALFA-AMINOADIPIL) - L-CISTEINIL-DVALINA (ACV) POR LA ENZIMA ACV SINTETASA, SEGUIDA DE LA CICLACION DE ESTE TRIPEPTIDO A ISOPENICILINA N POR LA ISOPENICILINA N SINTASA (IPNS). A CONTINUACION, LA ISOPENICILINA N EPIMERASA (IPNE) CONVIERTE ISOPENICILINA N A PENICILINA N. ESTA ULTIMA ENZIMA ES MUY LABIL. LA IPNS DE N. LACTAMDURANS ES UN MONOMERO, YA QUE EL PESO MOLECULAR DE LA FORMA NO DESNATURALIZADA DE LA ENZIMA, CALCULADO POR FILTRACION EN GEL ES IDENTICO AL DETERMINADO POR SDS-PAGE: 37500 DA. SU PUNTO ISOELECTRICO ES 5.5 LA IPNE DE N. LACTAMDURANS FUE PURIFICADA 93.2 VECES. ES ESTABILIZADA POR FOSFATO DE PIRIDOXAL Y TIENE UN PESO MOLECULAR CALCULADO POR FILTRACION EN GEL DE 59000. UNA BANDA PROTEICA DE 59000 DA. Y PI 5.1 - 5.26, SE ENRIQUECE EN FRACCIONES ACTIVAS ANALIZADAS EN SDS-PAGE. POR OTRA PARTE, N. LACTAMDURANS VAR. AMY-, UNA CEPA QUE NO PRODUCE CEFAMICINA C, POSEE IPNS E IPNE ANTIGENICAMENTE SIMILARES A LAS DE LA CEPA AMY+ , PROTEINAS QUE SE VISUALIZAN EN ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL.

Autor: LEON RAMOS JOSE.
Año: 1990.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA VEGETAL Y BIOLOGIA MOLECULAR, FACULTAD DE QUIMICA, UNIVERSIDAD DE SEVILLA.

Resumen: SE HAN SEPARADO Y PURIFICADO DOS ISOENZIMAS CON ACTIVIDAD O-ACETIL-L-SERINA SULFHIDRILASA A PARTIR DE CELULAS DE CHLAMYDOMONAS REINHARDTII, UTILIZANDO COMO ETAPA BASICA LA CROMATOGRAFIA HIDROFOBICA EN FENIL-SEFAROSA. LA RELACION DE ACTIVIDADES OASS1/OASS2 ES DE 3 LO QUE SUGIERE QUE OASS1 ES LA ISOENZIMA BASICA EN LA SINTESIS DE L-CISTEINA. AMBAS ISOENZIMAS MUESTRAN PARAMETROS CINETICOS SIMILARES Y UN PESO MOLECULAR DE 65.000, Y SE INHIBEN POR LOS SUSTRATOS DE LA REACCION Y POR L-METIONINA, QUE SE COMPORTA COMO UN INHIBIDOR NO COMPETITIVO CON KI DE 6,5 MM. POR OTRO LADO, AMBAS ISOENZIMAS SE INHIBEN POR HIDROXILAMINA Y AMIMOOXIACETATO LO QUE, JUNTO CON EL ESPECTRO DE ABSORCION CON MAXIMOS A 280 Y 390 NM, SUGIERE QUE CONTIENEN PIRIDOXAL-5-FOSFATO COMO GRUPO PROSTETICO. LA INHIBICION POR L-CISTEINA, QUE A UNA CONCENTRACION DE 5 MM INHIBE UN 50% LA ACTIVIDAD OASS1 Y NO AFECTA A OASS2 Y LA ESTIMULACION DE LA ACTIVIDAD OASS1 EN CELULAS DEFICIENTES EN AZUFRE, EN LAS QUE OASS1/OASS2 ES DE 10,6, SUGIEREN UNA DIFERENTE REGULACION PARA AMBAS ISOENZIMAS. LA SOBREEXPRESION DE OASS1 PARECE ESTAR REPRIMIDA POR ALGUN PRODUCTO DE LA INCORPORACION DE AZUFRE, QUIZAS LA L-CISTEINA, Y REQUIERE LA PRESENCIA DE CO2 Y LUZ. POR OTRO LADO, LA CARENCIA DE AZUFRE DISMINUYE HASTA UN 40% LA ACTIVIDAD FOTOSINTETICA Y HASTA UN 50% EL CONSUMO DE NITRATO O NITRITO DE C. REINHARDTII. ADEMAS, CELULAS DEFICIENTES EN AZUFRE MOSTRARON ACTIVIDADES NITRATO Y NITRITO REDUCTASA UN 85% Y UN 50%, RESPECTIVAMENTE, MENORES QUE LAS MOSTRADAS POR CELULAS CULTIVADAS CON SULFATO. FINALMENTE, LA INMOVILIZACION DE O-ACETIL-L-SERINA SULFHIDRILASA ALTERO SU CINETICA, RESPECTO A O-ACETIL-L-SERINA, MOSTRANDO UNA DEPENDENCIA SIGMOIDAL Y LA NITRITO REDUCTASA INMOVILIZADA MOSTRO UN MENOR VALOR DE KM APARENTE PARA FERREDOXINA REDUCIDA Y UNA MAYOR ESTABILIDAD QUE LA ENZIMA SOLUBLE.

Autor: MARTINEZ RIVAS JOSE MANUEL .
Año: 1990.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA VEGETAL Y BIOLOGIA MOLECULAR, FACULTAD DE QUIMICA, UNIVERSIDAD DE SEVILLA..

Resumen: EN CULTIVOS SINCRONICOS DE C. REINHARDTII OBTENIDOS MEDIANTE CICLOS 12 H LUZ - 12 H OSCURIDAD, LAS ENZIMAS DEL SISTEMA REDUCTOR DE NITRATO SOLO SON OPERATIVAS DURANTE LAS PRIMERAS 8 H DEL PERIODO DE LUZ. SIN EMBARGO, LAS ENZIMAS IMPLICADAS EN LA ASIMILACION DE AMONIO MANTIENEN NIVELES ALTOS DURANTE TODO EL CICLO CELULAR. TODAS LAS ENZIMAS DE LA ASIMILACION DE NITROGENO SE ACTIVAN DURANTE EL PERIODO DE LUZ, AL IGUAL QUE LA NADP-ISOCITRATO DESHIDROGENASA (NADP-IDH). POR EL CONTRARIO, LA NAD-ISOCITRATO DESHIDROGENASA (NAD-IDH) LO HACE DURANTE EL PERIODO DE OSCURIDAD. SE HA ESTUDIADO TAMBIEN EL EFECTO DE DISTINTAS CONDICIONES DE CULTIVO SOBRE LAS ACTIVIDADES NADP-IDH, NAD-IDH E ISOCITRATO LIASA (ICL), COMPROBANDOSE QUE LA CARENCIA DE NITROGENO PRODUCE UN AUMENTO DE 2 VECES EN LAS ACTIVIDADES NAD- Y NADP-IDH. POR OTRO LADO, CUANTAS CELULAS CRECIENDO AUTOTROFICAMENTE SE TRANSFIEREN A CONDICIONES HETEROTROFICAS SE PRODUCE LA INDUCCION DE LA ICL, UNA INACTIVACION DE UN 40% DE LA NAD-IDH Y LA ACTIVIDAD NADP-IDH SE DUPLICA. POR OTRA PARTE, SE HAN CARACTERIZADO EN EXTRACTO DE ESTE ALGA DOS ENZIMAS CON ACTIVIDAD IDH: NAD-IDH Y NADP-IDH, LAS CUALES SE HAN PURIFICADO, SEPARANDOSE MEDIANTE CROMATOGRAFIA HIDROFOBICA. ASIMISMO SE HAN AISLADO DOS ISOENZIMAS CON ACTIVIDAD NADP-IDH QUE SE SEPARAN MEDIANTE CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD. PARA TODAS ESTAS ENZIMAS SE HAN ESTUDIADO SUS PROPIEDADES CINETICAS Y MOLECULARES, DESTACANDO COMO PROPIEDAD DIFERENCIAL ENTRE IDH1 E IDH2, QUE ESTA ULTIMA SE ACTIVA MUCHO MAS POR TIOLES. TODOS ESTOS DATOS INDICAN QUE LAS ISOENZIMAS CON ACTIVIDAD NADP-IDH ESTAN IMPLICADAS EN EL SUMINISTRO DE 2-OXOGLUTARATO PARA LA ASIMILACION DE AMONIO, MIENTRAS QUE LA NAD-IDH LO APORTA PARA SU DEGRADACION VIA CICLO DE KREBS.

Autor: MATEOS NEVADO ALONSO M. DOLORES .
Año: 1990.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DPTO. DE BIOQUIMICA, BROMATOLOGIA Y TOXICOLOGIA.

Resumen: LA PERDIDA DE ACTIVIDAD ENZIMATICA, UNO DE LOS PROCESOS MAS CARACTERISTICOS DEL ENVEJECIMIENTO, SE HA ESTUDIADO PRINCIPALMENTE EN PROTEINAS INTRACELULARES. SI ESTE FENOMENO ES UNA DE LAS PRINCIPALES CAUSAS QUE CONDUCE A LA FORMACION DE PROTEINAS INACTIVAS O CON MENOR ACTIVIDAD, DEBE DARSE EN OTRO TIPO DE PROTEINAS. POR ELLO, HEMOS ESTUDIADO EL COMPLEJO SACARASA-ISOMALTASA (SI), DISACARIDASA DE LA MEMBRANA DEL BORDE EN CEPILLO DE LAS VELLOSIDADES INTESTINALES. HEMOS OBSERVADO UNA PERDIDA DE ACTIVIDAD ESPECIFICA DEL 27-30% DURANTE EL PROCESO DE ENVEJECIMIENTO, PERDIDA QUE ES MAS PRONUNCIADA A PARTIR DE LOS 20 MESES DE EDAD, EN RATAS WISTAR. LA EXISTENCIA DE MOLECULAS "ALTERADAS" SE PUSO DE MANIFIESTO MEDIANTE INMUNOTITULACION, YA QUE NECESITAMOS MAYOR CANTIDAD DE ANTICUERPO EN VIEJOS QUE EN JOVENES PARA INMUNOTITULAR UNA DETERMINADA CANTIDAD DE ACTIVIDAD (SACARASA O ISOMALTASA). ESTA PERDIDA DE ACTIVIDAD VA ASOCIADA A MODIFICACIONES DE CIERTOS RESTOS AMINOACIDICOS, PRINCIPALMENTE RESTOS DE LISINA E HISTIDINA, LOS CUALES PUEDEN DAR LUGAR A LA FORMACION DE SUS CORRESPONDIENTES DERIVADOS CARBONILICOS, YA QUE HEMOS VISTO QUE LOS GRUPOS CARBONILICOS DEL COMPLEJO-SI SE INCREMENTAN CON LA EDAD, SOBRE TODO EN LAS ETAPAS FINALES DE LA VIDA DE LA RATA. ESTE ACUMULO DE ENZIMAS ALTERADAS CON LA EDAD PUEDE SER DEBIDA A LA DISMINUCION DE ACTIVIDAD PROTEASICA ENCONTRADA EN RATAS VIEJAS. LA SUBUNIDAD SACARASA ES MAS SENSIBLE A LAS PROTEASAS PANCREATICAS QUE LA ISOMALTASA, CUANDO EL COMPLEJO ESTA UNIDO A LA MEMBRANA, SENSIBILIDAD QUE SE INVIERTE EN EL COMPLEJO PURIFICADO, TODO ELLO EN PRESENCIA DE UNA CONCENTRACION ALTA DE TRIPSINA. APARTE DE LA OXIDACION, LA DESGLUCOSILACION PARECE ESTAR IMPLICADA EN LA INACTIVACION O DEGRADACION DEL COMPLEJO ALTERADO, YA QUE ESTA CONDUCE A SENSIBILIDADES SEMEJANTES A LA DEL COMPLEJO OXIDADO, Y CUANDO LA DESGLUCOSILACION VA SEGUIDA DE LA OXIDACION DEL COMPLEJO, SU SENSIBILIDAD FRENTE A PROTEASAS SE DISPARA RAPIDAMENTE, SIENDO POSIBLEMENTE ESTO, LA CAUSA DE NO ENCONTRAR FORMAS DESGLUCOSILADAS ESTABLES EN LAS MUESTRAS ESTUDIADAS.

Autor: PEREZ PONS JOSEP ANTONI.
Año: 1990.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: LAS B-GLUCOSIDASAS CATALIZAN LA HIDROLISIS DE CELOBIOSA Y CELOOLIGOSACARIDOS Y PRODUCEN GLUCOSA. ESTOS ENZIMAS INTERVIENEN EN LA DEGRADACION ENZIMATICA DE LA CELULOSA Y SON UNO DE SUS FACTORES LIMITANTES. STREPTOMYCESSP. QM-B814 (ATCC 11238) PRESENTA UN SISTEMA B-GLUCOSIDASA B-GLU INTRACELULAR E INDUCIBLE CON CELOBIOSA Y CARBOXIMETILCELULOSA. LA INDUCCION MAXIMA SE ALCANZA AL CABO DE 6-8 HORAS DE LA ADICION DEL INDUCTOR (CELOBIOSA). LA INDUCCION IMPLICA SINTESIS PROTEICA DE NOVO. EL SISTEMA B-GLU DE STREPTOMYCESSP. QM-B814 ESTA APARENTEMENTE FORMADO POR DOS COMPONENTES MAYORITARIOS CON IGUAL PATRON DE INDUCCION Y SIMILAR ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO: LA B-GLU-1 Y LA B-GLU-2 DE 62 Y 35 KDA. RESPECTIVAMENTE. UTILIZANDO COMO CEPAS RECEPTORAS MUTANTES "B-GLU NEGATIVOS" DE STREPTOMYCES LIVIDANS 1326 CEPA SALVAJE (S LIVIDANS AG-11 Y AG-12) SE HA AISLADO EN EL PLASMIDO RECOMBINANTE PJC910 UN FRAGMENTO DE APROXIMADAMENTE 4.2 KB, PROCEDENTE DEL DNA DE STREPTOMYCES SP. QM-B814 CEPA DONANTE , QUE EXPRESA ACTIVIDAD B-GLU INTRACELULAR Y DE FORMA CONSTITUTIVA EN LOS MUTANTES Y EN LA CEPA SALVAJE. POR MOVILIDAD ELECTROFORETICA Y MASA MOLECULAR (54 KDA), LA B-GLU CLONADA NO CORRESPONDE A LAS B-GLU-1 Y -2 OBSERVADAS EN LA CEPA DONANTE. SE LA DENOMINO B-GLU-3. LAS B-GLU-1 Y -3 SE HAN PURIFICADO A PARTIR DE EXTRACTOS CRUDOS DE STREPTOMYCES SP. QM-B814 Y S. LIVIDANS AG-11 PJC910 , RESPECTIVAMENTE. AMBOS ENZIMAS PRESENTAN CARACTERISTICAS FISICO-QUIMICAS Y FUNCIONALES DISTINTAS SI BIEN EL ANALISIS DE SUS PROPIEDADES CATALITICAS PERMITE CONCLUIR QUE SE TRATA DE B-GLUCOSIDASAS EC 3.2.1.21. UTILIZANDO COMO CEPA RECEPTORA EL MUTANTE S. LIVIDANS AG-12 SE HA AISLADO EN EL PLASMIDO RECOMBINANTE PJC2510 UN FRAGMENTO DE APROXIMADAMENTE 14 KB, PROCEDENTE DEL DNA DE STREPTOMYCES SP. QM-B814, QUE COMPLEMENTA LA MUTACION RESTAURANDO LA EXPRESION DE LA B-GLU CARACTERISTICA DE LA CEPA SALVAJE S. LIVIDANS 1326. LOS RESULTADOS SON COMPATIBLES CON UNA COMPLEMENTACION IN TRANS. PARALELAMENTE A LA EXPRESION DE ACTIVIDAD B-GLU, EL PLASMIDO PJC2510 ESTIMULA EN EL MUTANTE S. LIVIDANS AG-12 LA PRODUCCION DE GRAN CANTIDAD DE PIGMENTO AZUL DIFUSIBLE (ACTINORRODINA). EL PLASMIDO NO COMPLEMENTA AL MUTANTE S. LIVIDANS AG-11. ESTOS RESULTADOS PERMITEN CONCLUIR QUE LOS DOS MUTANTES SON DIFERENTES Y SUGIEREN QUE EL FRAGMENTO DE DNA CLONADO EN PJC2510 CONTIENE SECUENCIAS GENICAS CON EFECTO PLEOTROPICO AL MENOS SOBRE LA BIOSINTESIS DE PIGMENTO Y LA EXPRESION Y/O REGULACION DE LA ACTIVIDAD B-GLU.

Autor: REYES LORITE PRESENTACION.
Año: 1990.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: INSTITUTO DE CATALISIS-CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS-. DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA, BIOLOGIA MOLECULAR, GENETICA, MICROBIOLOGIA Y F..

Resumen: LA ACTIVIDAD HIDROGENASA DE BRADYRHIZOBIUM JAPONICUM EN VIDA LIBRE ES INDUCIBLE EN CIERTAS CONDICIONES DE CULTIVO QUE INCLUYEN LA PRESENCIA DE HIDROGENO, BAJAS CONCENTRACIONES DE OXIGENO Y LA AUSENCIA DE DETERMINADAS FUENTES DE CARBONO. EL ESTUDIO DE LAS ACTIVIDADES HIDROGENASA DE INTERCAMBIO ISOTOPICO CON TRITIO Y DE CONSUMO Y DESPRENDIMIENTO DE HIDROGENO EN CELULAS ENTERAS (BACTEROIDES Y CELULAS CRECIDAS EN VIDA LIBRE) Y EN MEMBRANAS, HA DEMOSTRADO POR PRIMERA VEZ LA REVERSIBILIDAD DE LA HIDROGENASA DE B. JAPONICUM. CELULAS VEGETATIVAS, BACTEROIDES Y MEMBRANAS A BAJOS POTENCIALES REDOX, SON CAPACES DE DESPRENDER HIDROGENO. LA MAXIMA ACTIVIDAD DE DESPRENDIMIENTO DE HIDROGENO EN LOS TRES CASOS OCURRE A VALORES DE PH EN LOS CUALES HAY CONSUMO DE HIDROGENO, POR TANTO EXISTE EN ESTE INTERVALO DE PH ACTIVIDAD DE INTERCAMBIO. CON EL FIN DE ESTUDIAR LOS COMPONENTES QUE FORMAN PARTE DE LA CADENA TRANSPORTADORA DE ELECTRONES ASOCIADA A LA HIDROGENASA, SE REALIZARON ESPECTROS DIFERENCIALES EN CELULAS VEGETATIVAS DE B. JAPONICUM CRECIDAS BAJO CONDICIONES DE INDUCCION. LOS ESPECTROS DE ABSORCION MUESTRAN QUE UBIQUINONA Y COTOCROMOS B Y C SUFREN UNA REDUCCION DEPENDIENTE DE HIDROGENO. EL ANALISIS FISIOLOGICO Y GENETICO DE CEPAS AISLADAS DE CAMPO DE BRADYRHIZOBIUM SP (VIGNA) REVELO QUE EL 100% DE LOS AISLAMIENTOS PRESENTABAN ACTIVIDAD HIDROGENASA Y SECUENCIAS DE DNA HUP ALTAMENTE CONSERVADO.

Autor: SOLA PUIG MIQUEL.
Año: 1990.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: UNIVERSITAT AUTONOMA DE BARCELONA. FACULTAT DE CIENCIES SECCIO QUIMIQUES.

Resumen: EN ESTA TESIS SE HAN REALIZADO CALCULOS MECANO-CUANTICOS CON EL PROPOSITO DE ESTUDIAR EL MECANISMO GLOBAL DE LA REACCION DE HIDRATACION DEL CO2 EN PRESENCIA DE ANHIDRASA CARBONICA, Y CON LA FINALIDAD DE COMPRENDER EL MECANISMO A TRAVES DEL CUAL SE PRODUCE LA INHIBICION DE ESTE ENZIMA. SE HA ELEGIDO COMO MODELO DE CENTRO ACTIVO DE LA CA LA ESPECIE (NH3)3ZN(H2O). LA BASE DE CALCULO UTILIZADA HA SIDO DE CALIDAD DOBLE ZETA, Y LA METODOLOGIA DE TIPO AB INITIO. SE HA INTRODUCIDO EL EFECTO DEL ENTORNO PROTEICO MEDIANTE UN METODO CONTINUO. SE HA DIVIDIDO EL ESTUDIO DEL MECANISMO EN CUATRO ETAPAS GENERALES. EN LA PRIMERA, QUE CORRESPONDE A LA DESPROTONACION DEL AGUA UNIDA AL ZN(II), SE HA COMPROBADO LA POSIBILIDAD DE QUE LA HIS-64 SEA EL GRUPO ACEPTOR INTERMEDIO. EN LA SEGUNDA, QUE SUPONE LA INTERACCION INICIAL DEL CO2 CON EL CENTRO ACTIVO, SE HA OBSERVADO QUE EL ATAQUE NUCLEOFILICO SOBRE EL CO2 SE ENCUENTRA YA PRACTICAMENTE TERMINADO. EN LA TERCERA QUE CONCLUYE CON LA FORMACION DEL BICARBONATO, SE HA ENCONTRADO QUE LOS DOS MECANISMOS HASTA AHORA PROPUESTOS, LOS LLAMADOS MECANISMOS DE LIPSCOMB Y LINDSKOG, SON IGUALMENTE PROBABLES, Y QUE LAS FLUCTUACIONES DEL MEDIO PUEDEN GOBERNAR LA CINETICA DE LA REACCION. FINALMENTE, EN LA CUARTA ETAPA, QUE SUPONE LA RECUPERACION DEL ENZIMA EN SU FORMA INICIAL, SE HA VISTO QUE EL INTERCAMBIO DE BICARBONATO POR AGUA SE PRODUCE CON FORMACION DE UN COMPLEJO PENTACOORDINADO, Y QUE SOLO PUEDE ENTENDERSE SI SE TIENE EN CUENTA EL EFECTO DEL MEDIO CIRCUNDANTE.