FOTOSINTESIS

Autor: HERNÁNDEZ PEMÁN JOSÉ ANGEL.
Año: 2003.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS .

Resumen: Aunque el hierro es un elemento muy abundante en la naturaleza, la deficiencia de hierro es uno de los estreses más frecuentes en los organismos que viven en medios acuosos. Por esta razón, muchas bacterias ven limitado su crecimiento y se desencadenan mecanismos encaminados a capturar el poco hierro presente o a obtenerlo a partir de las ferroproteínas presentes en otras bacterias. Paradójicamente, un exceso de hierro puede ser tóxico, debido a su capacidad para catalizar reacciones de formación de radicales libres, los cuales son capaces de producir daño oxidativo en todas las estructuras celulares. Por ello, la incorporación y el metabolismo del hierro deben estar muy finamente regulados. En los procariotas existe un regulador de la homeostasis de hierro denominador Fur (ferric uptake regulator), que asociado a hierro reconoce una serie de secuencias muy específicas en los promotores de determinados genes diana. Cuando el hierro no está presente o es escaso, Fur no puede unirse al DNA y se produce la expresión de estos genes. Las secuencias reconocidas por Fur se denominan "iron-boses", y están presentes en los promotores de los genes regulados por esta proteína. En los últimos años se han identificado gran cantidad de genes controlados por este regulador, y gran número de reguladores pertenecientes a la familiar Fur. De hecho, en todos los organismos procariotas cuyo genoma completo se conoce, se halla presente al menos una proteína tipo Fur, y en la mayoría de ellos se localizan varios homólogos. El trabajo en esta tesis doctoral comenzó con la localización, clonaje, sobreexpresión en E. Coli y purificación de la proteína recombinante FurA de anabaena sp. PCC7119 y PCC7120. La obtención de la proteína purificada a homogeneidad permitió la obtención de anticuerpos policlonales y el inicio de una serie de estudios bioquímicos encaminados a determinar múltiples características de esta proteína, como pueden ser su masa molecular, punto isoeléctrico, estado de los grupos - SH, grado de oligomerización y su variación en distintas condiciones, contenido en metales o posibles fosforilaciones en las proteínas nativa y recombinante. Del mismo modo, se analizó su funcionalidad a través de ensayos de retardo en gel en presencia de diferentes agentes, se comprobó la influencia del grupo hemo en su actividad de unión al DNA, y se localizó la secuencia protegida por la proteína en el promotor de genes regulados por la misma mediante técnica de "footprinting". Con vistas a determinar la estructura proteica, se pusieron en marcha las estrategias posibles para alcanzar este fin, como son la cristalización y el RMN bidimensional, en colaboración con otros laboratorios. Igualmente, se aplicaron varias técnicas espectroscópicas y analíticas con el fin de obtener información acerca del plegamiento de la proteína, que abarcan desde desnaturalizaciones químicas y térmicas hasta espectos de RMN mododimensional. Posteriormente, tras la liberación del genoma completo de Anabaena sp. PCC712O, se localizaron dos nuevos genes de la familia Fur en esta cianobacteria, que denominamos FurB y FurC, los cuales se clonaron y sobreexpresaron en E. Coli. Se procedió entonces al análisis de su transcripción en distintas condiciones de hierro y nitrógeno en el medio de cultivo, y de la posible influencia del regulador global del metabolismo NtcA en su expresión. Igualmente, se mapearon los tres genes homólogos de Fur en la cianobaceria Anabaena sp. PCC712O, empleando la técnica de extensión de cebadores. La determinación de genes cuya expresión está regulada por FurA se abordó por medio de aproximaciones in vitro e in silico. Mediante la primera de ellas, se preparó una genoteca que contuviera fragmentos representando a todo el genoma de Anabaena sp. PCC712O, para mediante diversos ciclos de retardo en gel y amplificación por PCR, localizar varias secuencias seleccionadas por la proteína. A través de la segunda aproximación, nos basamos en las cajas Fur determinadas experimentalmente para buscar secuencias similares en los promotores de distintos genes, y chequear posteriormente su reconocimiento in vitro por parte de la proteína FurA. De este modo, ambas aproximaciones conjuntas nos han permitido tener varios genes candidatos a formar parte del regulón de FurA. Por último, se llevó a cabo la preparación de mutantes de Anabaena sp. PCC712O que incorporaran una casete de resistencia a antibióticos interrumpiendo la lectura del gen FurA. Los mutantes preparados parecen indicar que se trata de un gen esencial para la cianobacteria, de modo que no es viable su inactivación. Igualmente, los mutantes creados de este mismo modo permitieron estudiar el patrón transcipcional existente en la región del gen FurA, sugiriendo la existencia de una regulación mediante un RNA antisentido del propio gen FurA, que constituye el primer ejemplo de regulación postranscripcional de un miembro de esta familia.

Autor: PÉREZ BUENO M. LUISA .
Año: 2002.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FAC. DE CIENCIAS, UGR.

Resumen: En trabajos previos al presente habíamos demostrado que la infección por tobamovirus induce una inhibición del fotosistema II (PSII), localizada en el complejo de oxidación/fotolisis del agua (OEC). En plantas infectadas disminuían los niveles de las proteínas constituyentes del OEC. Por ello, en esta Tesis Doctoral nos planteamos en primer lugar, la caracterización de las secuencias codificadoras de las tres proteínas PsbO, PsbP y PsbQ que constituyen el OEC, para posteriormente caracterizarlas. Las proteínas OEC de Nicotiana benthamiana resultaron ser familias proteicas, codificadas por familias proteicas, codificadas por familias multigénicas. En segundo lugar, investigamos los procesos que conducen a la caída en los niveles de proteínas OEC durante la infección viral. El análisis del contenido de sus mRNAs reveló que, en el caso de PsbP y PsbQ, los niveles de éstos son paralelos a los de la proteína correspondiente, lo que indica una inhibición de la transcripción de estos genes, atribuíble a la presencia viral. Asimismo, durante la infección viral se produce una inhibición de la expresión de los genes nucleares lhbd, psaK, nbcS, rca y gox, más acusada en la fases iniciales de la infección que en el caso de los genes psbO, psbP y psbQ. Asimismo, observamos una disminución del contenido de los mRNAs cloroplastídicos psbA y rbcL, en fases más tardías de la infección, que va seguida de un incremento en las tasas de acumulación de los RNAs virales. Las técnicas de imagen han sido de gran utilidad en nuestro estudio para realizar un seguimiento de la infección viral y de los mecanismos de defensa que el cloroplasto desarrolla durante ésta. Las técnicas de fluorescencia de imagen (Chl FI) han revelado una heterogeneidad con un patrón muy definido de la eficiencia fotosintética en la hoja asintomática infectada. El patrón de NPQ, que mide la energía disipada y no utilizada en fotosíntesis, muestra que estos procesos son más intensos en las zonas de expansión del virus. Los estudios por microscopía electrónica de transmisión de la ultraestructura de cloroplastos de hojas de plantas infectadas, muestran cambios asociados normalmente a situaciones de estrés vegetal: presencia de numerosos granos de almidón, de plastoglóbulos y desorganización de la estructura tilacoidal. El sistema húesped patógeno utilizado en estos estudios ha sido Nicotiana benthamiana infectada por las cepas españolas e italiana del virus del moteado suave del pimiento (PMMoV-S, PMMoV-I).

Autor: BOZA BARCENAS MIGUEL.
Año: 2001.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Resumen: Numerosos estudios realizados en la última década han establecido un modelo general de regulación in vivo de la actividad nitrato reductasa foliar en función de las condiciones de fijación de CO2 de la hoja. La NR foliar se inactiva de forma rápida y reversible por oscuridad o inhibición de la fijación de CO2. En hojas de espinaca, la inactivación por oscuridad de la NR implica la fosforilación el enzima y su unión, en presencia de Mg2+, a una proteína inhibidora (NIP), dando lugar a un complejo NR-fosforilada/Mg2+/NIP, inactivo. En cebada, no hay evidencias sobre la actuación de un mecanismo de regulación similar al descrito para la NR de espinaca. La inactivación in vivo de la NR de hojas de cebada es independiente de Mg2+, aunque el enzima si se inhibe in vitro por este ion. En este estudio se han obtenido resultados que muestran que los cambios en los niveles de azúcares-fosfato, y concretamente en G6P, en el citoplasma celular son la señal reguladora que coordina la actividad de la NR con la asimilación de carbono en hojas de cebada. Dependiendo de los niveles de azucares-fosfato se extraen dos formas de NR que se distinguen por sus propiedades cinéticas y sensibilidad a la inhibición in vitro por Mg2+. De hojas con altos niveles de azucares-fosfato se obtiene una NR con mayor Vmax, mayor Km para el nitrato y menor sensibilidad a la inhibición in vitro por Mg2+, mientras que de hojas con bajos niveles de estos azucares se extrae una NR con menor Vmax, menor Km para el nitrato y mayor sensibilidad al Mg2+. Por otra parte se ha analizado in vitro la acción del Mg2+ y la G6P como efectores de la NR. Los resultados ponen de manifiesto que el Mg2+ es un efector negativo de la NR que disminuye la eficiencia catalítica de las dos formas del enzima, aunque en mayor medida la de la forma con menor Vmax, y que además requiere un factor proteico para ejercer su acción sobre el enzima. La G6P uniéndose a la NR ejerce in vitro una doble acción sobre el enzima, aumentando su eficiencia catalítica y compitiendo con el Mg2+ por su interacción con el mismo.

Autor: CERÓN GARCÍA M. CARMEN.
Año: 2001.
Universidad: ALMERIA.
Centro de lectura: CIENCIAS EXPERIMENTALES.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE ALMERÍA.

Resumen: En este trabajo se ha demostrado que el cultivo mixotrófico de microalgas para la producción de sustancias bioactivas es más que una alternativa al cultivo fotoautotrófico. La microalga utilizada fue Phaeodactylum tricornutum UTEX 640, una especie muy utilizada por ser una fuente potencial de ácido eicosapentaenoico (EPA). La fase de selección del nutriente orgánico y su concentración en el medio de cultivo señaló al glicerol, adicionado a la concentración de 0.1M, como el nutriente orgánico con mayor potencialidad, muy por encima del control fotoautotrófico. Adicionalmente, se hicieron cultivos fed-batch empleando urea y cloruro amónico como fuentes de nitrógeno complementarias y glicerol (0.1M) como fuente orgáncia de carbono. La productividad máxima de biomasa fue 8 veces superior al control realizado glicerol y nitrato sódico como fuente de nitrógeno. La productividad máxima de EPA supuso una mejora sobre el control (fotoautotrófico) de 10 veces. Se realizó un análisis para cuantificar la interrelación que existe entre la disponibilidad de luz y el consumo de sustrato y la eficacia con la que es utilizado por las microalgas. Como paso previo al escalado de fotobiorreactores a nivel de laboratorio (columnas de burbuejo de 2 litros de capacidad), y basándose en el conocimiento de las concentraciones de trabajo óptimas de sustrato y de la cuantificación de requerimientos de sustrato y luz, se diseñó una estrategia de adición de nutriente y suministro de irradiancia para maximizar el crecimiento. Los rendimientos de biomasa y EPA fueron muy superiores a los del control fotoautotrófico. Utilizando la mejor estrategia de adición de nutriente, se realizaron experimentos en modo semicontinuo con distintas velocidades de dilución. Las productividades de biomasa y EPA fueron del orden de 2gL-1 d-1 y 52 mg L-1 d-1, respectivamente. Estos valores son comparables con los publicados para esta microalga cultivada en modo fotoautotrófico, bajo condiciones de irradiancia solar, y en fotobiorreactores tubulares de escala piloto (50 litros y 200 litros de capacidad, con 3 cm y 6 cm de diámetro interno, respectivamente). Finalmente, el estudio se completó con ensayos en condiciones externas bajo luz solar y a nivel de planta piloto en fotobiorreactores tipo columna de burbujero (60 litros de volumen útil y 20 cm de diámetro interno). La productividad máxima de biomasa y EPA fueron de 1,87 g L-1 d-1 y 50,5 mg L-1 d-1, respectivamente, superando al control fotoautotrófico en 4 y 6 veces, respectivamente. Estos valores alcanzados en columnas de burbujeo de gran diámetro tienen una extraordinaria importancia, ya que posibilitan el cultivo masivo de microalgas en fotobiorreactores verticales, con un diámetro considerable, aumentando considerablemente la productividad de biomasa y del metabolito de interés por unidad de área de tierra ocupada.

Autor: VILAGROSA CARMONA ALBERTO.
Año: 2001.
Universidad: ALICANTE.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIV. ALICANTE.

Resumen: Los ecosistemas mediterráneos presentan una gran variabilidad litológica, edáfica, topográfica, climática y vegetal que ha favorecido una gran diversificación de sus hábitats naturales. Sin embargo, estas características también les han conferido una enorme fragilidad frente a las perturbaciones del medio. La intensa antropización que han sufrido desde antiguo ha condicionado que la cubierta vegetal haya estado sometida a intensas alteraciones. En la Comunidad Valenciana, la protección, la restauración y la mejora de la cubierta vegetal constituyen líneas de actuación de la gestión forestal (Ley 3/1993 Forestal de la Comunidad Valenciana). En el pasado, las reforestaciones se basaron en la introducción de coníferas como el pino carrasco (Pinus halepensis), debido a la rusticidad de esta especie y la escasa tecnología necesaria para su cultivo. Sin embargo, las directrices de la Unión Europea tienden a valorar el papel protector de los bosques mediterráneos. Por estos motivos, el Plan de Reforestación de la Comunidad Valenciana 1994-1999 establece que la necesidad de avanzar en la diversificación y mejora de los ecosistemas requiere la introducción de otras especies en los lugares done su adaptación sea posible. Dentro del programa de investigación dirigido por el CEAM desde 1991, se han seleccionado diversas especies arbustivas y se ha analizado la respuesta tras la repoblación forestal. Los principales resultados genéricos mostraron que la mayor mortalidad se produce durante el primer verano después de la plantación. Por lo tanto, el déficit hídrico estival se apunta como uno de los principales factores limitantes para el establecimiento de las especies. Como han señalado diversos autores, el agua es el principal factor que regula la actividad de las plantas en los ecosistemas mediterráneos. La regulación estomática de las pérdidas de agua puede afectar a la supervivencia y el crecimiento de las especies, siendo el estadio de plántula cuando las limitaciones ambientales son más intensas. Este tesis consta de dos partes: En la primera se analiza cual es la respuesta del lentisco (Pistacia lentiscus) y la coscoja (Quercus coccifera) a la reforestación en ambiente semiárido en la zona sur de la provincia de Alicante. Se estudian diversos aspectos como la supervivencia, el crecimiento y el desarrollo del sistema radical en el hoyo de la plantación. En la segunda parte se analiza exhaustivamente la resistencia al déficit hídrico en ambas especies. En esta segunda parte se abordan temas que van desde la estrategia que desarrolla cada especie en relación con la disponibilidad de agua hasta que esta se agota completamente, la resistencia del xilema a la cavitación, la arquitectura hidráulica de los plantones, o la resistencia simplasma a condiciones de baja disponibilidad hídrica. Finalmente, se discute los resultados en relación con los patrones de supervivencia observados en campo y la capacidad de resistencia al déficit hídro de cada especie.

Autor: PAGANO EDUARDO ANTONIO.
Año: 1999.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: ESTACION EXPERIMENTAL DEL ZAIDIN.

Resumen: La tiorredoxinas(Trxs) son proteínas de bajo peso molecular (alrededor de 12 Kda) de presencia ubicua. Dos Trxs cloroplastídicas han sido descritas en plantas superiores: la Trx f, involucrada en la activación de la fructosa-1,6-bisfosfatasa(FBPasa) y otras enzimas del ciclo de Calvin, y la Trx m, especializada en la modulación de la NADP-malato deshidrogenasa(NADP-MDH). Debido a su bajo potencial rédoz(entre-200 y -300 mV) y alto polimorfismo, las Trxs podrían ejercer cierto tipo de acción protectora frente a radicales libres de oxígeno generados dentro de los cloroplastos. En el presente trabajo se analizaron los niveles de expresión transcripcional (mRNA) de Trxs f y m,y de las proteínas sobre las cuales ejercen su actividad moduladora, FBPasay NADP-MDH, durante la ontogenia y en diferentes órganos de plantas de guisante, y en hojas de plantas crecidas bajo estrés lumínico y lumínico/térmico. Las Trxs f y m y sus proteínas diana, FBPasa y NADP-MDH, mostraron expresión transcripcional, analizada mediante la técnica de RT-PCR sobre mRNA total, tanto en órganos fotosintéticos como no fotosintéticos. Sin embargo, mientras la Trx m y ambas enzimas fueron pobremente expresadas en tejidos no fotosintéticos, el contenido de mRNA específico de la forma precursora de la Trx f fue alto en raíces. Por el contrario, la expresión traduccional, determinada por western-blotting, fue baja en estos órganos. Esto parece indicar la participación de la Trx f en otros procesos, además de la modulación de la FBPasa. Se encontró una elevada actividad de la FBPasa, medida en condiciones fisiológicas(pH 7,9) en granos inmaduros comparada con la presente en hojas, lo que podría estar relacionado con una elevada tasa de síntesis de almidón enlos primeros y una alto ritmo de síntesis de sacarosa en las últimas. Durante la ontogenia los mayores niveles de expresión se encontraron en floración; sin embargo las actividades enzimáticas FBPasa y NADP-MDH fueron las menores en este estado fisiológico, posiblemente debido a la función exportadora de fotosintato de las hojas en ese momento. En las plantas sometidas a estrés lumínico las hojas inferiores mostraron, con respecto al control, mayores niveles de mRNA para las proteínas estudiadas no correspondidos a nivel de expresión traduccional. En las plantas sometidas a estrés lumínico las hojas inferiores mostraron, con respecto al control, mayores niveles de mRNA para las proteínas estudiadas, no correspondidos al nivel de expresión traduccional. Estudios de microscopía electrónica mostraron grandes desórdenes estructurales en los cloroplatos de hojas provenientes de tratamientos de estrés lumínico. La expresión trnascripcional de FBPasa y NADP-MDH, y en una menor medida e Trxs f y m, fue inhibida por baja irradiancia, tanto en normal como alta temperatura. Por el contrario, hojas de plantas crecidas a baja temperatura mostraron un alto nivel de transcriptos para las Trxs y sus proteínas diana, FBPasa y NADP-MDH, especialmente con baja irradicia. Aunque en una menor medida, un similar perfil se observó en el nivel de cada proteína, analizado mediante ELISA. Se concluye que con independencia del estado fisiológico en que se encuentra planta, el grado de expresión transcripcional y traduccional de FBPasa, NADP-MDH, Trx f y Trx m, obedece a mecanismos paralelos de regulación y posiblemente, dichas proteínas actúen como factores de expresión de unas respecto de otras. En relación a la participación de las Trxs f y m en mecanismos de defensa anti-estrés, ello estaría más relacionado con el proceso de aclimatación que con una respuesta inmediata a condiciones ambientales desfavorables.

Autor: RAHOUTEI JABER.
Año: 1999.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: ESTACIÓN EXPERIMENTAL DEL ZAIDÍN.

Resumen: El Fotosistema II de plantas superiores es uno de los puntos más susceptibles del cloroplasto a situaciones adversas que condicionan su metabolismo. Su terogeneidad y gran dinámica ofrece la posibilidad de una rápida adaptación del aparato fotosintético a diversos cambios en el medio y mecanismos de reparación si éstos son nocivos. Numerosos factores de estrés para las plantas tienen un efecto primario sobre el proceso fotosintético. En el presente trabajo se pretende estudiar el efecto de la infección viral como agente de estrés biótico, sobre la estructura y función del cloroplasto de la planta huésped. Investigaremos el efecto sobre la fotosíntesis y más concretamente sobre el transporte electrónico y el Fotosistema II, de la infección por tobamovirus. Analizaremos asimismo los posibles mecanismos de compensación desarrollados por el aparato fotosintético para reparar o evitar los daños ocasionados por la infección viral. En el caso de una infección viral, resulta extraño que, siendo la fotosíntesis el proceso esencial del metabolismo vegetal, existan muy pocos estudios que evalúen los daños causados por los virus en el aparato fotosintético, y relacionen éstos con la aparación de los síntomas de la infección en las plantas. Las lesiones creadas en las cosechas por los virus del moteado suave del pimiento y de la paprika con los que trabajaremos, han ocasionado espectaculares pérdidas económicas en la última década. En un solo año éstas han llegado a alcanzar la cifra de 1500 millones de pesetas en la provincia de Almería, debido a la infecciónpor el primero de los viros. Ambos virus están extendidos por todo el planeta y existen sólo algunas variedades comerciales de plantas resistentes, pero en su mayoría o bien son de elevadísimo coste o el fenómeno de resistencia resulta ser bastante inestable. Por ello, el bloqueo de la aparición de síntomas de la infección y la resistencia resulta ser bastante inestable. Por ello, el bloqueo de la aparición de síntomas de la infección y la resistencia a ésta ha sido el objetivo perseguido por muchos estudios. Los objetivos concretos de nuestros experimentos son: -Conocimiento del mecanismo específico de inhibición del transporte electrónico fotosintético, especialmente en el Fotosistema II, por tobamovirus(virus del moteado suave del pimiento y de la paprika) y su incidencia en el desarrollo de los síntomas de la enfermedad. -Estudio de los mecanismos principalmente de defensa generados en el transporte electrónico fotosintético como respuesta a la infección virál. Los datos resultados de nuestros estudios proporcionarían una base indispensable para la manipulación genética de las plantas para la obtención de variedades resistentes a la infección por tobamovirus.

Autor: OREA GARCIA ALICIA.
Año: 1999.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUIMICA.

Resumen: Lotus japonicus es una leguminosa que gracias a sus características bioquímicas, genéticas y fisiológicas ha sido considerada como planta modelo. Se ha estudiado la fisiología de la asimilación de nitrato en esta planta mediante el uso de plantas transgénicas, modificadas en la expresión de la nitrato reductasa(NADH-NR, primera enzima que participa en la asimilación de nitrato), así como la clonación y estudios de expresión de la nitrito reductasa (Fd-NiR,segunda enzima que participa en el proceso de la asimilación de nitrato), y se ha desarrollado un programa de mutagénesis convencional para la búsqueda de mutantes afectados en la asimilación de nitrato. La asimilación de nitrato en Lotus japonicus tiene lugar principalmente en las raices pero, a diferencia de lo descrito para leguminosas de clima templado, grupo al cual pertenece, el aumento de la concentración de nitrato en el medio de cultivo no conduce a un desplazamiento de la asimilación de nitrato hacia la parte aerea de la planta. Mediante manipulación con plantas transgenicas se ha conseguido el cambio de expresión de la nitrato reductasa en L. Japonicus, pero en ningún caso la actividad nitrato reductasa de hoja superaba a la de raíces. Se postula, pues, la existencia de un mecanismo de regulación en esta planta que la imposibilita para asimilar una mayor cantidad de nitrato en hojas. Por otra parte, la clonación de la nitrito reductada de raices de L.japonicus ha revelado que no es necesario una estructura o secuencia particular en las Fd-NiR de raices diferente a las de hojas, para poder funcionar con el donador de electrones de raices, hecho que se ve apoyado por la existencia de un unico gen por genoma haploide en L. Japonicus. Sin embargo si se observan diferencias en cuanto a la regulación de la expresión por luz de esta enzima, respecto a las de plantas asimiladoras en hojas. En relación con la búsqueda de mutantes afectados en la asimilación de nitrato se ha utilizado como método de selección de resistencia a clorato y la búsqueda de mutantes fotorrespiratorios afectados en la asimilación de amonio. Se han podido aislar dos mutantes resistentes a clorato(clor1 y clor2) que podrían estar afectados en alguno de los sistemas bifuncionales de transporte de clorato/nitrato de baja afinidad. También se han podido aislar 3 mutantes fotorrespiratorios de glutamina sistetasa(pr1,pr2 y pr3) afectados específicamente en la isoforma plastídica, siendo L. Japonicus la segunda especie vegetal y la primera leguminosa donde se logran este tipo de mutantes, confirmando el papel clave de dicha isoforma en la reasimilación del amonio fotorrespiratorio en plantas leguminosas que asimilan en raices. Estos mutantes proporcionan una oportunidad única de estudiar si la Gs plastídica guarad alguna relación con el proceso de fijación simbiótica de dinitrógeno.

Autor: CAMPO LÓPEZ EVA M. DEL.
Año: 1999.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE ALCALÁ.

Resumen: En el genoma de cloroplastos se ha descrito la presencia de 11 genes que codifican para polipéptidos como homología a los correspondientes del complejo I de mitocondrias. Son los denominados genes ndh. Este hecho sugería la existencia de un complejo NAD(P)H-deshidrogenosa que podría participar en clorrespiración. En plantas superiores estos genes se transcriben muy activamente y algunos de ellos sufren procesamientos psot-transcripcionales como: corte del transcrito, splicing y editing, para dar lugar al transcrito maduro susceptible de ser traducido. Seis de los 11 genes ndh identificados en el genoma de cloroplastos estan situados en la región SSC del genoma y se transcriben como una unidad transcipcional, junto con el gen psaC (operon ndhH-ndhD). Por ensayos de Westem blot hemos identificado la presencia del polipéptido NDHA en nuestras condiciones de cultivo de cebada hemos secuenciado 8.125 nucleotidos entre los que se encuntra el opero completo, la secuencia la depositamos en el Banco de Secuencias EMBL/GeneBanck/DDBJ con los numeros de Acceso AJ001848 yHVU011848. Igualmente se ha descrito pro primera vez la existencia de un punto de editing en el transcrito del gen ndhD de cebada. Ensayos de Northen blot con sondas, cien por cien homólogas, correspondientes para los distintos ndh de lo perón, nos han permitido identificar al menos 22 transcritos diferentes en distinto grado de maduración, entre ellos hemos identificado los correspondientes transcritos maduros así como el intrón (libre de los dos exones) correspondiente al gen ndh-a. Para poder estudiar en que etapa del procesamiento tienen lugar el splicing y el editing, hemos tendio que poner a punto una técnica novedosa que nos ha permitido aislar los transcritos ocurre en las primeras etapas de la maduración salvo para el caso del punto III, (situado en el segundo exón del gen ndhA) que no tiene lugar hasta que ha ocurrido el splicing. El intrón del ndhA es típico de tipo II de auto-splicing, presentando los 6 domínios característicos asi como las secuencias consenso de la zona catalítica y la de unión de los extremos 5' y 3' de intron. La configuración secundaria que adquiere el intrón cuando está unido al segundo exónno permite la actuación de la maquinaria de edición sobre el punto III, quedando en cambio accesible cuando se ha perdido el intrón.

Autor: CRISTINA PAU XAVIER.
Año: 1999.
Universidad: GIRONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAT DE CIENCIES, UNIVERSITAT DE GIRONA.

Resumen: Este trabajo de investigacion se estructuro en dos partes, Ecologia Microbiana de consorcios fotosinteticos moviles y aplicación de la citometria de flujo al estudio de las bacterias fototroficas del azufre. La primera parte se fundamento en el estudio de la Ecologia Microbiana de los consorcios fotosinteticos moviles. En este estudio, a partir del analisis de un elevado numero de muesras naturales obtenidas en lagos donde se desarrollaban poblaciones de consorcios fotosinteticos se han podido obtener numerosos datos relevantes. Se ha determinado una elevada diversidad de morfotipos de estos consorcios y se han podido describir con detalle dos nuevos consorcios fotosinteticos "Chlorochromatium lunatum", de pigmentacion verde, y "Pelochromatium selenoides" de pigmentacion marron. Tanto la forma de los consorcios como la de los epibiontes fotosinteticos no se habian descrito previamente en el grupo de las bacterias verdes del azufre. Dentro de este estudio morfologico, se han identificado dos tipos de cubiertas externas en los consorcios, una capa amorfa de glucopolisacaridos (capsula bacteriana) y una cubierta de estructura polihexagonal de la familia de las Capa-S. Se han postulado en este trabajo los posibles funciones de estas estructuras en los consorcios y su relacion con la estabilidad de los consorcios en su nicho y durante su duplicacion. Mediante la hibridacion in-situ (FISH) de los consorcios, se han identificado a sus epibiontes como pertenecientes al grupo de las bacterias verdes del azufre y la celula central al grupo beta de las Proteobacterias. Finalmente se ha realizado un trabajo estadistico de los datos obtenidos en 32 lagos que ha permitido determinar que los dos principales parametros que definen el nicho ecologico de los consorcios fotosinteticos son la concentracion de sulfhidrico y la profundidad donde se desarrollan. Estrechamente ligados a estos parametros, tambien la cantidad y calidad de la luz definen la estrategia pigmentaria de estos consorcios. Una segunda parte del trabajo se ha ocupado en la aplicación por primera vez de la tecnica de la citometria de flujo para el estudio de bacterias fotosinteticas. Utilizando un laser de 488 nm se han diferenciar entre especies de bacterias verdes, entre estas y Cromatiaceas, Cianobacterias y Bacteria según sus particularidades morfologicas y/o pigmentarias. Para detectar todos estos grupos se han combinando citogramas de dispersion de luz (FSC o SSC) y emision de fluorescencia (FL2 o FL3). Los estudios con la citometria de flujo han permitido determinar diferencias en la fluorescencia especifica de bacterias verdes y marrones. Tambien se ha determinado que la acumulacion de azufre en las Cromatiacias se traduce en un aumento de la dispersion de la luz, comparable a la cinetica de acumulacion y consumo de este azufre. Se ha descrito el efecto que sobre la emision de autofluescencia tienen los fijadroes con base aldehida (formaldehido, glutaraldehido) y los compuestos reducidos (sulfhidrico, ditionito). Finalmente se ha aplicado con éxito la tecica de la citometria de flujo al estudio de poblaciones naturales de bacterias fotosinteticas. Estos resultados han permitido validar la tecnica y rutinizar su uso en los estudios de Ecologia y Fisiologia de bacterias fotosinteticas.

Autor: HOYOS SAAVEDRA OLGA LUCIA.
Año: 1999.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: QUIMICA.

Resumen: El objetivo de la presente memoria es el de profundizar en la química de coordinación de metales de interés en los sistemas biológicos, mediante el estudio de complejos de diferentes metales que puedan ser utilizados, posteriormente, como modelos para la comprensión del comportamiento de diferentes metaloenzimas. Se diseñaron dos nuevos ligandos tipo base de Schiff con grupos amida, de los cuales se obtuvieron catorce compuestos con diferentes sustituyentes, la mitad son compuestos asimétricos potencialmente pentadentados y trianiónicos, y los restantes, simétricos hexadentados y tetraaniónicos. Con estos nuevos ligandos se sintetizaron complejos de manganeso por métodos químicos diferentes, obteniéndose tanto para la base de Schiff asimétrica como para la simétrica complejos de Mn(III). Por síntesis electroquímica fue posible obtener complejos de Mn(III) únicamente para el ligando asimétrico; con el ligando simétrico los complejos presentan el manganeso en estado de oxidación II. Adicionalmente se realizó un estudio del comportamiento coordinante del ligando hidrazona H4daps, frente a los metales Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn y Cd, encontrándose que la gran flexibilidad y versatilidad de este ligando produce complejos donde el metal adopta geometrías diferentes y muy interesantes. Las técnicas utilizadas para la caracterización de los complejos fueron: análisis elemental, espectroscopía infrarroja, espectrometría de masas FAB(+), medidas de susceptibilidad magnética, medidas de conductividad, y en algunos casos RMN de 1H y voltametría cíclica. Se realizaron estudios estructurales por difracción de rayos X de los compuestos cristalizados.

Autor: GONZALEZ NOYA ANA M..
Año: 1998.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: QUIMICA.

Resumen: El objetivo de esta memoria es la síntesis de complejos de manganeso en estados de oxidación elevados, capaces de mimetizar el comportamiento de sistemas biológicos e intervenir como catalizadores en reacciones de oxidación. Se sintetizaron 22 ligandos tipo bases de Schiff: 4 de ellos simétricos y dianiónicos, mientras que los 18 restantes son asimétricos derivados de amidas y potencialmente trianiónicos. Con los ligandos simétricos se prepararon complejos de manganeso(III) con acetilacetonato y con ácidos dicarboxílicos. Se encontraron modos de coordinación novedosos para el ligando ácido ftálico coordinado. Con los ligandos asimétricos se sintetizaron complejos de Mn(III) empleando cuatro métodos de síntesis diferentes: método electroquímico, método de Boucher, y utilizando como sales de partida el acetilacetonato y el acetato de manganeso(III). Se obtuvieron resultados muy interesantes tanto por síntesis electroquímica como por el método de Boucher, lográndose con estos nuevos ligandos la formación de complejos neutros de Mn(III). Todas estas series de complejos fueron caracterizadas por análisis elemental, espectrofotometría infrarroja, espectrometría de masas FAB, medidas de susceptibilidad magnética, RMN de 1H, voltametría cíclica, medidas de conductividad, así como por difracción de rayos X de los compuestos cristalizados. Finalmente se estudió el comportamiento catalítico de los complejos como activadores de la descomposición fotoquímica del agua, en pruebas de catalasa y en procesos de epoxidación de olefinas. De estos estudios podemos destacar la elevada actividad como catalasa que presentan los complejos acetilacetonatos preparados con las bases de Schiff asimétricas.

Autor: PELAEZ RIVERA HORACIO.
Año: 1998.
Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.

Resumen: Se han estudiado los efectos del régimen hídrico y del sistema de conducción en la capacidad de absorber la radiación fotosintéticamente activa, PAR, en la conducta ecofisiológica y en la respuesta agronomica. En una primera parte se caracteriza la forma geométrica que adquieren, y se definen los distintos estimadores que determinan el desarrollo foliar total, externo y expuesto. En una segunda parte, se explica el balance de radiaciónfotosintéticamente activa, PAR. En la tercera parte se define el microclima luminoso foliar en cada uno de los tratamientos. En la cuarta parte, se estudian los parámetros fisiológicos: potencial hídrico foliar antes del amanecer, fotosíntesis neta y conductancia estomática, así como la respuesta fotosintética a la luz. En la última parte del trabajo se evalúa la capacidad productiva global, la materia seca producida por los diferentes órganos renovables de la planta, la respuesta agronómica en cuanto a producción de uva y peso de madera de poda, y la calidad del mosto obtenido en cuanto a grado probable, pr y acidez total. El regadio provoca, como era de esperar, una mayor producción de materia seca, un mayor rendimiento y un mayor desarrollo vegetativo, pero si se equilibra la planta en cuanto al área foliar desarrollada en función del rendimiento producido se producen mostos con parámetros no muy dispares entre secano y regadio.

Autor: SANCHEZ RODRIGUEZ JUAN M..
Año: 1997.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .

Resumen: Hemos estudiado el efecto de la sequía y la fuente de nitrógeno sobre la fotosíntesis en Casuarina equisetifolia Forst. & Forst. La sequía disminuyó el crecimiento de las plantas porque redujo la superficie verde y la asimilación fotosintética por unidad de superficie. Con la sequía aumentó la adscripción de biomasa a las raíces a expensas de los órganos aéreos. Para diferenciar los efectos estomáticos y no estomáticos del estrés hídrico sobre la fotosíntesis, hemos utilizado la fluorescencia de la clorofila. Esta técnica nos permite medir el CO2 intercelular sin los errores introducidos por la apertura heterogénea de los estomas debida a la sequía. Hemos observado, por primera vez, una disminución de la actividad FBPasa del cloroplasto provocada por la sequía, aunque no siempre limita la regeneración de RuBP. La sequía altera las concentraciones de almidón, pero la sacarosa permanece estable. La fuente de N modificó la superficie verde y la distribución de biomasa dentro de las plantas. Con NO3 las plantas destinaron a la raíz mayor fracción de los fotoasimilados que con otras fuentes de N. El crecimiento, a corto plazo, puede ser más rápido en las plantas con NH4+, pero a largo plazo el NO3- es mejor fuente de N. El NH4+ disminuyó el consumo de agua de las plantas, al disminuir la transpiración y la conductancia de los estomas, tanto cuando estimula su crecimiento, como cuando lo inhibe. El menor crecimiento con amonio no se debió a una disminución en la concentración de cationes en la raíz; tampoco estuvo asociado con la falta de carbohidratos, que incluso aumentaron con NH4+. El NH4+ limitó la fotosíntesis tanto cuando mejoró el crecimiento de la planta como cuando lo inhibió. En el primer caso, la inhibición se debe a un cierre de los estomas y en el segundo, a disminuciones de la actividad Rubisco y la regeneración de RuBP.

Autor: AURED GALVE MARIA.
Año: 1996.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR.

Resumen: A PARTIR DEL COMPLEJO OEC DE LA CIANOBACTERIA TERMOFILA P. LAMINOSUM SE HA OBTENIDO UNA PREPARACION DEL CENTRO DE REACCION DEL FOTOSISTEMA II DE GRAN CALIDAD, QUE CONTRASTA CON LAS DESCRITAS POR OTROS AUTORES EN CUANTO A ACTIVIDAD, CONTENIDO EN POLIPEPTIDOS Y COMPOSICION DE PIGMENTOS. EN BASE A TODOS ESTOS PARAMETROS SE PUEDE AFIRMAR QUE LA PREPARACION DESCRITA EN ESTE TRABAJO ES CON DIFERENCIA LA MEJOR PREPARACION OBTENIDA HASTA EL MOMENTO A PARTIR DE UNA CIANOBACTERIA. LA ACTIVIDAD DE ESTE CENTRO DE REACCION ES APROXIMADAMENTE UN 25% MAS ACTIVO QUE EL AISLADO DE PLANTAS SUPERIORES. EL PROCESO DE SEPARACION DE CARGAS PARECE TENER LUGAR EN EL ORDEN DE ALGUNOS PICOSEGUNDOS, TAL COMO SE DESPRENDE DE LOS TIEMPOS DE VIDA DE LAS CINETICAS DE FLUORESCENCIA. LAS CARACTERISTICAS ESPECTROSCOPICAS DEL CENTRO DE REACCION OBTENIDO DE P. LAMINOSUM SON EN GENERAL PARECIDOS A LAS QUE SE PRESENTAN EN EL CENTRO DE REACCION DE PLANTAS SUPERIORES. LOS METODOS DESARROLLADOS PARA P. LAMINOSUM HAN SIDO APLICADOS CON BASTANTE EXITO A OTRA CIANOBACTERIA, SYNECHOCYSTIS, QUE ES MUY INTERESANTE PARA ESTUDIOS DE BIOLOGIA MOLECULAR. SIGUIENDO LOS METODOS DESCRITOS SE PODRA AISLAR EL CENTRO DE REACCION DEL FOTOSISTEMA II DE MUTANTES OBTENIDOS POR BIOLOGIA MOLECULAR CON POTENCIAL INTERES EN ESTUDIOS DEL FOTOSISTEMA II. UTILIZANDO LOS COMPLEJOS OEC Y DE CENTRO DE REACCION HEMOS SIDO CAPACES DE OBTENER POR PRIMERA VEZ ESPECTROS DE RESONANCIA RAMAN EXCITANDO EN LA TRANSICION QY DE LOS PIGMENTOS DENTRO DE LOS COMPLEJOS. EN EL CASO DEL CENTRO DE REACCION NO SOLO SE OBSERVARON LAS BANDAS DE LA CHL A SINO QUE TAMBIEN FUERON EVIDENTES LAS DE PHEO A. LA UTILIZACION DE SUPERFICIES METALICAS ACTIVAS EN SERRS PERMITIERON REDUCIR CONSIDERABLEMENTE EL RENDIMIENTO DE LA FLUORESCENCIA Y ASI OBTENER ESPECTROS VIBRACIONALES DE LOS PIGMENTOS UNIDOS A PROTEINAS. ESTOS RESULTADOS ABREN LAS PUERTAS A FUTUROS ESTUDIOS SOBRE LOS ESTADOS VIBRACIONALES QUE ACOMPAÑAN A LA TRANSICION QY, LA CUAL JUEGA UN PAPEL FUNDAMENTAL EN FOTOSINTESIS.

Autor: BORREGO MORE CARLES.
Año: 1996.
Universidad: GIRONA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: INSTITUTO DE ECOLOGIA ACUATICA PROGRAMA DE DOCTORADO: LIMNOLOGIA GENERAL Y APLICADA.

Resumen: LAS BACTERIAS VERDES POSEEN UNO DE LOS SISTEMAS ANTENA MAS COMPLEJOS DENTRO DEL GRUPO DE LOS MICROORGANISMOS FOTOSINTETICOS. UNA DE LAS RAZONES DE DICHA COMPLEJIDAD ES LA PRESENCIA DE DIFERENTES HOMOLOGOS DE LAS BACTERIOCLOROFILAS (BCLS), DISPUESTAS ORDENADAMENTE EN EL INTERIOR DE LOS CLOROSOMAS. ESTA DIVERSIDAD PIGMENTARIA DIFICULTA ENORMEMENTE EL ANALISIS Y IDENTIFICACION MEDIANTE LAS TECNICAS ESPECTROFOTOMETRICAS TRADICIONALES. PARA SOLUCIONAR ESTE PROBLEMA SE DISEÑO UN METODO DE HPLC QUE PERMITIO SEPARAR LAS DISTINTAS BCLS Y SUS CORRESPONDIENTES HOMOLOGOS. ADEMAS, EL METODO PERMITE LA SEPARACION DE UNA GRAN DIVERSIDAD DE PIGMENTOS FOTOSINTETICOS, TANTO BACTERIANOS (BCL A, BCL G, CLOROBACTENO, ISORENIERATENO, OKENONA) COMO ALGALES (CL A, ALFA Y BETA-CAROTENO, ETC). POR OTRA PARTE, EL METODO DESARROLLADO PERMITIO INVESTIGAR, DESDE EL PUNTO DE VISTA FISIOLOGICO, LA CONTRIBUCION DE CADA UNO DE LOS HOMOLOGOS EN EL PROCESO DE ADAPTACION DE LAS BACTERIAS VERDES DEL AZUFRE A LAS BAJAS INTENSIDADES DE LUZ. DICHA ADAPTACION TUVO LUGAR MEDIANTE DOS MECANISMOS: UNO, CUANTITATIVO, BASADO EN EL INCREMENTO DEL CONTENIDO ESPECIFICO DE PIGMENTOS ANTENA Y OTRO, CUALITATIVO, BASADO EN EL AUMENTO DEL CONTENIDO DE HOMOLOGOS MAS ALQUILADOS. ESTE REAJUSTE DEL CONTENIDO DE HOMOLOGOS CAUSO UN DESPLAZAMIENTO DEL MAXIMO DE ABSORCIO IN VIVO DEL CULTIVO HACIA LONGITUDES DE ONDA MENOS ENERGETICAS QUE, A PESAR DE NO TRADUCIRSE EN UN BENEFICIO NETO EN LA ABSORCION LUMINICA, SI CONTRIBUYO A MEJORAR EL RENDIMIENTO DEL COMPLEJO ANTENA MEDIANTE LA OPTIMIZACION DEL PROCESO DE TRANSFERENCIA DE ENERGIA. LA SEGUNDA FASE DE LA INVESTIGACION SE CENTRO EN EL ESTUDIO DE LAS VARIACIONES DE LOS PIGMENTOS ANTENA EN POBLACIONES DE BACTERIAS FOTOSINTETICAS VERDES DESARROLLADAS EN LAGOS ESTRATIFICADOS. TODAS LAS POBLACIONES INVESTIGADAS MOSTRARON VARIACIONES EN EL CONTENIDO DE HOMOLOGOS, TANTO CON LA PROFUNDIDAD COMO TEMPORALMENTE. LAS VARIACIONES EN PROFUNDIDAD SE ATRIBUYERON A LA SEGREGACION VERTICAL DE LAS CELULAS DE ACUERDO A SU ESTADO FISIOLOGICO. LAS VARIACIONES TEMPORALES SE ATRIBUYERON A LA ADAPTACION DE LA POBLACION A LOS CAMBIOS EN EL REGIMEN LUMINICO DURANTE EL CRECIMIENTO ESTACIONAL. LAS INVESTIGACIONES LLEVADAS A CABO PROPORCIONAN, EN DEFINITIVA, ALGUNAS CLAVES PARA COMPRENDER LAS RAZONES DE LA MEJOR ADAPTACION DE ALGUNAS ESPECIES DE BACTERIAS VERDES A LAS BAJAS INTENSIDADES DE LUZ, AL MISMO TIEMPO QUE PROFUNDIZAN EN EL CONOCIMIENTO DE LAS BASES ECO-FISIOLOGICAS DE DICHA ADAPTACION.

Autor: LEON BAÑARES ROSA M..
Año: 1996.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA VEGETAL Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL ALGA VERDE UNICELULAR DE AGUA DULCE CHLAMYDOMONAS REINHARDTII ES CAPAZ DE TOLERAR CONCENTRACIONES SALINAS DE HASTA 200MM DE NACL Y EN ESTAS CONDICIONES ACUMULA GLICEROL COMO METABOLICO OSMORREGULADOR, LO QUE LE PERMITE REESTABLECER EL BALANCE OSMOTICO CON EL MEDIO EXTERNO. LA MAYOR PARTE DE ESTE GLICEROL ES EXCRETADO POR LAS CELULAS, QUE DEBEN POR TANTO SINTETIZARLO CONSTANTEMENTE PARA MANTENER LA CONCENTRACION INTRACELULAR NECESARIA. EN CONDICIONES OPTIMAS PUEDE LLEGAR A ALCANZARSE UNA CONCENTRACION DE GLICEROL EN EL MEDIO DE HASTA 4G 1 DESPUES DE 5 D, LO QUE HACE DE ESTE MICROALGA UN SISTEMA MUY ATRACTIVO PARA LA FOTOPRODUCCION BIOTECNOLOGICA DE GLICEROL. EL ALGINATO CALCICO SE HA ELEGIDO COMO SOPORTE MAS ADECUADO PARA LA INMOVILIZACION DE CELULAS DE CHLAMYDOMONAS REINHARDTII POR SU COMPATIBILIDAD CON LA VIABILIDAD CELULAR (CRECIMIENTO Y ACTIVIDAD FOTOSINTETICA) Y LA FOTOGPRODUCCION LA FOTOPRODUCCION DE GLICEROL, LA FACILIDAD DE LA TECNICA DE INMOVILIZACION Y SU ALTA CAPACIDAD DE RETENCION CELULAR. LA LUZ Y EL CO2 SON JUNTO CON LA SALINIDAD LOS FACTORES QUE MAS INFLUYEN EN LA SINTESIS DE GLICEROL POR CHLAMYDOMONAS REINHARDTII. EL APANTALLAMIENTO CELULAR Y LA INTERACCION ENTRE EL ESTRES SALINO Y LA FOTOINHIBICION DE LA FOTOSINTESIS HACEN QUE PARA LA FOTOPRODUCCION DE GLICEROL SEA PARTICULARMENTE INTERESANTE EL DISEÑO DE BIORREACTORES CON UNA ALTA RELACION SUPERFICIE/VOLUMEN, EN LOS QUE APROVECHAMIENTO DE LA LUZ SEA MAXIMO.

Autor: LOPEZ JARAMILLO F. JAVIER.
Año: 1995.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: EXPERIMENTACION Y METODOLOGIA EN SIST. BIOL. MOLECULARES.

Resumen: MEDIANTE TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR AISLA UN ADNC QUE CODIFICA LA TIORREDOXINA M DE GUISANTE. EXPRESA EN ESCHERICHIA COLI LAS TIORREDOXINAS M Y F Y LA FRUCTOSA-1, 6-BISFOSFATASA DE GUISANTE Y LAS PURIFICAN. PARALELAMENTE CONSTRUYE PROTEINAS QUIMERICAS HIBRIDAS-ENTRE LAS TIORREDOXINAS M Y F. ANALIZA EL EFECTO MODULADOR DE LAS TIORREDOXINAS M, F, EL HIBRIDO M/F Y LA TIORREDOXINA DE ESCHERICHIA COLI SOBRE LA FRUCTOSA-1,6-BISFOSFATASA Y LA NADP-MALATO DESHIDROGENASA. REALIZA UN ESTUDIO DE LAS CARACTERISTICAS DIFERENCIALES DE LAS MOLECULAS DE TIORREDXONA A NIVEL DE PROPIEDADES FISICOQUIMICA Y DE ESTRUCTURAS PRIMARIA, SECUNDARIA Y TERCIARIA. REALIZA MUTACIONES DE CYS POR SER PARA LOCALIZAR LAS CYS RESPONSABLES DE LA FORMACION DE PUENTE DISULFURO EN LA MOLECULA DE LA FRUCTUOSA-1, 6-BISFOSFATASA SOBRE EL QUE ACTUA LA TIORREDOXINA. ESTUDIA LAS ESTRUCTURAS TERCIARIA Y CUATERNARIA DE LA FRUCTUOSA-1, 6-BISFOSFATASA.

Autor: FILELLA CUBELLS IOLANDA .
Año: 1994.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA VEGETAL PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA DE LES PLANTES I L AMBIENT.

Resumen: LA ESPECTRORADIOMETRIA ES UNA TECNICA BASADA EN LA INFORMACION QUE PROPORCIONA EL ESPECTRO DE REFLECTANCIA SOBRE LAS CARACTERISTICAS DE LA SUPERFICIE QUE SE ESTA MIDIENDO. SU APLICACION EN EL ESTUDIO DE LA VEGETACION ES MUY INTERESANTE YA QUE PERMITE VARIAR DE ESCALA DESDE NIVEL FOLIAR HASTA NIVEL DE PLANETA. EL ESTRES TANTO BIOTICO COMO ABIOTICO VARIA LAS CARACTERISTICAS FISIOLOGICAS Y ESTRUCTURALES DE LA PLANTA, QUE A SU VEZ VARIAN EL ESPECTRO DE REFLECTANCIA. EL OBJETIVO DE ESTA TESIS FUE DEFINIR INDICES DE VEGETACION DE ALTA RESOLUCION BASADOS EN ESTOS CAMBIOS FISIOLOGICOS PARA EVALUAR EL ESTRES QUE ESTA ACTUANDO. SE DEFINIERON NUEVOS INDICES BASADOS EN LA VARIACION DE LA CONCENTRACION DE CLOROFILA A Y CAROTENOIDES PARA EVALUAR EL ESTADO NUTRICIONAL Y FENOLOGICO. EN OTRO CAPITULO SE PRESENTO UN INDICE BASADO EN LA REFLECTANCIA EN LA ZONA DE 530 NM PARA LA ESTIMACION DE LA EFICIENCIA FOTOSINTETICA. EN OTRO CAPITULO SE DEFINIO UN INDICE PARA LA EVALUACION DEL ESTADO HIDRICO BASADO EN LA BANDA DE ABSORCION DEL AGUA A 970 NM. FINALMENTE, SE ESTUDIO LA APLICABILIDAD DE ESTOS INDICES EN SITUACIONES EN QUE ACTUAN OTROS ESTRESES (DAÑO POR OZONO, ATAQUE DE PLAGAS Y SITUACIONES DE ELEVADA SALINIDAD EN LOS CULTIVOS).

Autor: ORTIZ DE ZARATE AVILA IÑAKI.
Año: 1994.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL DESPLAZAMIENTO HACIA EL AZUL Y EL HIPOCROMISMO QUE EL LDAO PRODUCE EN LA BANDA DE ABSORCION B850 DE LA ANTENA THII DE ECTOTHIORHODOSPIRA SP. NO SONDOS EXPRESIONES SIMULTANEAS DEL MISMO FENOMENO SINO DOS FENOMENOS DISTINTOS E INDEPENDIENTES. ESTOS CAMBIOS ESPECTRALES SON DEBIDOS A ALTERACIONES EN LA ORIENTACION RELATIVA DE LOS PIGMENTOS (PUESTO QUE EN ESTE CASO SE OBSERVARIA DESPLAZAMIENTOS VARIABLES ENTRE LAS BANDAS DE ABSORCION Y EL CD). LOS EXPERIMENTOS RAMAN INDICAN QUE SON DEBIDOS A LA RUPTURA DE, PROBABLEMENTE, UN UNICO PUENTE DE HIDROGENO ENTRE EL GRUPO ACETILO-2 DE UNA DE LAS DOS BCH1850 DEL DIMERO Y UN RESIDUO AMINOACIDICA DE LA CADENA X. ESTOS CAMBIOS PRODUCIDOS POR EL LDAO POSEIAN SER DEBIDOS AL CAMBIO CONFORMACIONAL QUE PROVOCA EN LA ESTRUCTURA DE LA PROTEINA. EL NAC1, POR EL CONTRARIO, PODRIA REEMPLAZAR EL PUENTE DE HIDROGENO ALTERANDO SOLO LA CONFORMACION DE LA CADENA LATERAL DEL AMINOACIDO IMPLICADO, POR LO QUE ESTOS CAMBIOS TAN LOCALES Y RESTRINGIDOS NO SE REFLEJARIAN EN EL ESPECTRO DE UVCD. LAS VARIACIONES EN EL ESTADO DE AGREGACION TAMPOCO AFECTAN A LAS PROPIEDADES ESPECTRALES LA ANTENA LHII DE ECTOTHIORHODOSPIRA SP. NI DE LA ANTENA LHI DE RS. RUBRUM. LA INTENSIDAD DE LA SEÑAL DE CD DE B800 SE PUEDE SIMULAR SATISFACTORIAMENTE TANTO TOMANDO COMO MODELO UN DIMERO O UNA ESTRUCTURA EN ANILLO. SIN EMBARGO, ESTA ULTIMA ES LA QUE MEJOR CONSIGUE SIMULAR LA AUSENCIA DE DESPLAZAMIENTO ENTRE EL MAXIMO DE LA BANDA DE ABSORCION Y EL CENTRO DE LA SEÑAL DE CD. LAS IMAGENES OBTENIDAS A TRAVES DE MICROSCOPIA ELECTRONICA INDICAN QUE LA MUESTRA DE LHII DE ECTOTHIORHODOSPIRA SP. ESTARIA FORMADA POR UN OCTAMERO, ES DECIR, 8 DIMEROS ESTE DATO CORRESPONDE TAMBIEN CON LOS VALORES OBTENIDOS MEDIANTE POLARIZACION DE FLUORESCENCIA EXCITADA SELECTIVAMENTE), PERO LA SIMETRIA ENCAJA MAS CON UAN ESTRUCTURA DEL TIPO QUE UNA . ESTO CONTRASTA CON RP. ACIDOPHILA EN DONDE TODOS LOS DIMEROS SON EQUIVALENTES.