LIPIDOS, 3

Autor: PUERTOLLANO MORO ROSA.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: Durante el presente trabajo se ha llevado a cabo la caracterización de un nuevo componente de la maquinaria de transporte apical denominado MAL. Dicha proteína se caracteriza por hallarse presente en células polarizadas y por ser capaz de incorporarse a unos microdominios específicos de la membrana enriquecidos en glicoesfingolípidos y colesterol previamente implicados en los procesos de transporte apical. Tanto la incorporación a dichos microdominios como la localización intracelular de la proteína se halla severamente regulada por múltiples señales de distribución o "sorting" localizadas en el extremo carboxilo terminal. Además, se ha demostrado que MAL es una proteína itinerante que cicla continuamente entre la membrana plasmática y el TGN. La sobreexpresión de MAL en células de insecto mediante la infección con baculovirus recombinantes indujo la formación de una enorme cantidad de vesículas, sugiriendo una implicación de MAL en los procesos de vesiculación. Finalmente, la depleción de la proteína MAL endógena en células MDCK mediante la transfección con oligonucleótidos antisentido, afectó claramente al transporte de la proteína hemaglutinina del virus influenza, tanto en su velocidad de llegada a membrana plasmática como en su transporte a la membrana apical. En suma, los resultados sugieren que MAL es un componente de la maquinaria de transporte posiblemente implicada en la vesiculación de los microdominios ricos en glicoesfingolípidos y en la captación de proteínas para su transporte a la membrana apical..

Autor: MILLAN MARTINEZ JAIME.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: El proteolípido MAL, que fue clonado inicialmente como una molécula que se expresa selectivamente durante la ontogenia de los linfocitos T. También se expresa en otros tejidos como el cerebro y el riñon, así como en algunas células epiteliales prevenientes de este órgano. Tanto en estas células epiteliales polarizadas como en linfocitos T MAL es un componente de los microdominios de membrana ricos en glicolípidos y colesterol residentes en la Red del trans-Golgi y en el compartimento endosomal. En estas membranas MAL está asociado a proteínas ancladas por GPI y a tirosina quinasas Src. Además, MAL parece participar en la circulación versicular de las proteínas ancladas por GPI cuando es estimulada la endocitosis de éstas..

Autor: DIAZ SASTRE CARMEN.
Año: 1998.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Está clara la relación entre niveles séricos altos de colesterol y desarrollo de enfermedad cardiovascular. Sin embargo, la asociación entre hipo-hipercolesterolemia y patología psiquiátrica es menos clara, a pesar de los múltiples trabajos que se llevan realizando desde la década de los 60. Los primeros trabajos sobre niveles de colesterol y conducta suicida se iniciaron e la década de los 90. En este trabajo se realiza un estudio observacional analítico de casos y controles de direccionalidad simultánea y temporalidad concurrente. La muestra está compuesta por 176 pacientes con intento de suicidio valorado en las primeras 24 horas, a los que se les pasó varios instrumentos de valoración suicida. Los controles fueron obtenidos de los donantes voluntarios del Banco de Sangre. Se parearon por edad y sexo en la proporción 1:1. Tanto los casos como éstos últimos fueron recogidos en el Hospital Ramón y Cajal durante 1996-1997, determinándoseles el perfil lipídico. Obtuvimos una asociación significativa entre hipocolesterolemia y los intentos de suicidio; teniendo en cuenta el sexo, persisten estas diferencias a expensas de los varones. El riesgo de realizar una tentativa de suicidio es 2.62 veces superior en pacientes con niveles de colesterol menores de 150 mg/dl. La relación más plausible entre la conducta suicida y la hipocolesterolemia es la de causa-efecto basada en la hipótesis de disfunción derotoninérgica asociada a hipocolesterolemia.#

Autor: EGUINOA ANCHO M. PAULA.
Año: 1998.
Universidad: PUBLICA DE NAVARRA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: ESCUELA TECNICA SUPERIOR DE INGENIEROS AGRONOMOS.

Resumen: En la presente Tesis Doctoral se ha realizao la caracterización de la cantidad de grasa (10ª costilla), contenido en grasa quimica, tamaño de los adipocitos y actividad de las principales enzimas lipogenicas de los depositos grasos omental (OM), perirrenal (PR),subcutaneo (SC) e intermuscular (IM), de los terrenos machos y hembras de la raza Pirenaica y Frisona. Para la caracterización de los depositos grasos antes señalados se utilizaron 30 animales de raza Pirenaica, 15 machos y 15 hembras, y 28 animales de raza Frisona, 15 machos y 13 hembras. Los animales se sacrificaron a las edades y pesos propios de cada raza (tipo comercial "añojo"). Los terneros tanto de raza Pirenaica como Frisona, sacrificados aproximadamente a los 13 meses de edad se alimentaron una vez destelados con pienso concentrado comercial y paja de cebada tratada con amoniaco, ambos "ad libitum" hasta el momento de sacrificio. Despues del sacrificio de los terneros se tomaron muestras de los diferentes depositos grasos para la determinación del tamaño de los adipocitos mediante la tecnica de fijacion con tretóxido de osmio y posterior medida por Analisis de Imagen; contenido en grasa quimica(metodo Soxhlet); y cuantificación de la actividad de las diferentes enzimas lipogenicas: glicerol 3-fosfato deshidrogenasa (G3PDH,EC.1.1.1.8; metodo de Wisse y Green, 1979), sintetasa de acidos grasos (FAS,EC.2.3.1.85; metodo de Halestrap y Denton, 1973), NADP-malato deshidrogenasa o Enzima málico (EM;EC.1.1.1.40; metodo de Ochoa, 1955), glucosa 6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH;EC.1.1.1.42; metodo de Glock and McLean,1953), y NADP-isocitrato deshidrogenasa(ICDH,EC.1.1.1.50; metodo de Plaut, 1962). La cantidad de grasa se determinó por disección de la 10ª costilla. Para el parametro cantidad de grasa se estudió la influencia de la raza y el sexo. Para el tamaño de los adipocitos y actividad de las enzimas lipogénicas se estudió los efectos raza, sexo y tipo de deposito graso. En cuanto a los resultados obtenidos en la caracterización de los depositos grasos de los terneros machos y hembras de las razas Pirenaica y Frisona, no se observaron diferencias en la cantidad de grasa entre genotipos, lo que indicaría que las canales de los terneros Frisones cuyo peso fue menor al de los Pirenaicos presentarían un mayor estado de engrasamiento. Sin embargo, si se observaron diferencias entre sexos (P

Autor: GALVE ROPERH ISMAEL.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: La regulación de los niveles extracelulares del factor de crecimiento nervioso (NGF) es esencial para el adecuado funcionamiento del sistema nervioso, estando su síntesis regulada de modo preciso. La presente tesis doctoral utilizando un modelo celular de astrocitos en cultivo primario, ha profundizado en el conocimiento de las bases moleculares de control de la expresión de esta proteína. El estudio se centra en la función de distintos mensajeros intracelulares lipídicos, fundamentalmente la recientemente descrita vía de las ceramidas en la regulación de la expresión del NGF. Se han estudiado algunos de los posibles sistemas de fosforilación de proteínas implicados, así como la posible relación con un importante factor de transcripción nuclear. En resumen los resultados obtenidos atribuyen un papel a la vía de generación de las ceramidas en la regulación de la síntesis del NGF, la cascada de MAP quinasas y permiten postular un posible papel de la proteína PKC Z. Además se pone en evidencia la coordinación entre los sistemas de transducción de señales que implican glicero y esfingolípidos.

Autor: GATA PIZARRO JOSE LUIS .
Año: 1997.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA FISICA (BIOFISICA MOLECULAR).

Resumen: Uno de los factores que determina la calidad sensorial del jamón Ibérico, es el aroma. Sin embargo, el conocimiento que actualmente se tiene de la generación de compuestos volátiles responsables de ese atributo sensorial, son muy escasos, por lo cual su control resulta muy difícil. Resulta, por tanto, de gran importancia el estudio de los mecanismos implicados en la generación de la fracción volátil, ya que de esta forma se podrían diseñar herramientas tecnológicas que permitan la homogeneización de la calidad del producto. El jamón Ibérico presenta un contenido en grasa poliinsaturada intramuscular mucho mayor que la mayoría de los jamones curados elaborados a partir de cerdos de otras razas. Además, su perfil aromático indica que durante el proceso de curación tiene lugar una importante oxidación de la fracción lipídica, siendo el hexanal el compuesto mayoritario. Dicho perfil presenta una buena analogía con el obtenido por acción de la enzima lipoxigenasa en otros productos estudiados. Por tanto, resulta de gran interés determinar la posible presencia de esta enzima en el músculo de cerdo Ibérico, y estudiar su actividad durante el proceso de maduración, ya que la manipulación de la misma podría ser un punto tecnológico de control muy efectivo. En este trabajo se ha llevado a cabo la purificación y caracterización de la enzima lipoxigenasa procedente de los músculos Biceps femoris y Semimembranosus. Posteriormente se realizó un seguimiento de la actividad de la enzima a lo largo de todo el procesado del jamón, correlacionando la actividad enzimática con el perfil aromático lipídico del jamón Ibérico a lo largo del proceso de maduración. Hemos determinado para la enzima purificada un peso molecular de 90 kDa y un pH óptimo de 5.5. Los valores de kM obtenidos para los ácidos linoleico, linolénico y araquidónico ponen de relieve que es el ácido linoleico el principal sustrato de la enzima, en contraste con la mayoría de las lipoxigenasas de mamífero, que utilizan el ácido araquidónico como sustrato. La pérdida de actividad enzimática a lo largo del proceso de curado no depende del pH ni de la temperatura, pero si del contenido acuoso, lo que se traduce en un mayor tiempo de permanencia de actividad en el músculo B. Femoris que en el Semimembranosus al ser el primero un músculo más profundo con una velocidad de deshidratiación mas lenta. El estudio del perfil aromático pone de manifiesto que la generación del aroma en el jamón Ibérico se debe en gran medida a la degradación oxidativa de los ácidos grasos poliinsaturados, siendo el hexanal y el pentanal dos de los compuestos mayoritarios obtenidos. El estudio de evolución realizado pone de manifiesto que durante el período de post-salado la enzima alcanza la máxima actividad, originando hidroperóxidos que actuan como iniciadores del periodo de inducción de la reacción de autooxidación. Asimismo el hecho de que en las etapas finales del proceso de curado la enzima mantenga una actividad residual del 20% y que, según hemos determinado mediante la incubación de la enzima con ácido linoleico y posterior análisis mediante espacio dinámico de cabeza, los compuestos mayoritarios obtenidos sean hexanal y pentanal, permite sugerir una participación directa de la enzima lipoxigenasa en la generación del perfil aromático lipídico del jamón Ibérico.

Autor: HERNANDEZ PEREZ PILAR.
Año: 1997.
Universidad: POLITECNICA DE VALENCIA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: CIENCIA ANIMAL PROGRAMA DE DOCTORADO: CIENCIA ANIMAL.

Resumen: Se ha estudiado la composición de los lípidos de la carne de cerdo, así como sus actividades lipolíticas, en el músculo Longissimus dorsi y comparando este músculo con otros músculos de distinto perfil oxidativo. Se ha puesto de manifiesto que la carne de cerdo es una carne magra, con una elevada cantidad de ácidos grasos insaturados (40%), particularmente ácido oleico (39%), y con moderado contenido en colesterol (46-52 mg/100g), por lo que puede ser considerada muy adecuada para el consumidor desde el punto de vista nutritivo. Se han estudiado también dos procesos habituales de conservación, como son la congelación y el cocinado de la carne, observándose fenómenos de lipolisis y oxidación. En los lípidos, durante la congelación de la carne no se produjo una inhibición total de la lipolisis, generándose ácidos grasos libres (114 mg/100 BS a los 6 meses de congelación) como consecuencia de la actuación de los enzimas lipolíticos, que permanecieron estables durante todo el proceso. Como consecuencia del cocinado, se produjo un aumento de la oxidación de los lípidos (IP= 3.02-3.87 mEq/Kglípido; TBA= 0.29-1.33 mgMDA/Kg), siendo las mayores alteraciones fundamentalmente la fosfatidiletanolamina, en la carne asada al horno y recalentada posteriormente en horno microondas. Se estudiaron dos productos cárnicos, el lomo embuchado y el lomo adobado, observándose una gran liberación de ácidos grasos preferentemente poliinsaturados, y una gran estabilidad de los enzimas lipolíticos. En el lomo embuchado, la fracción lipídica más afectada fué la de los fofolípidos, observándose descensos tanto en la fosfatidiletanolamina como en la fasfatidilcolina, descensos del 9 y 6%, respectivamente.

Autor: MARTINEZ BOTAS MATEO JAVIER.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: En esta, tesis hemos estudiado el papel del colesterol y el de los derivados no esteroídicos del mevalonato en la proliferación y la progresión del ciclo celular, así como el efecto de los oxiesteroles y de los antioxidantes en dicho proceso. En células MOLT-4 y HL-60 la deficiencia de colesterol ocasiona la parada del ciclo celular en la fase G2, efecto que se acompaña de la pérdida de actividad de la quinasa p34cdc2. El suministro de colesterol LDL o colesterol libre, evita dichos efectos y permite superar la fase G2, restableciéndose el ciclo celular. Por tanto el colesterol no solo tiene un papel estructural como componente de las membranas, si no que tiene también un papel regulador del ciclo celular. La inhibición de la HMG-CoA reductasa por la lovastatina conduce a la parada del ciclo celular en las fases G1 y G2/M. El acúmulo de células en G2/M se debe propiamente a la deficiencia de colesterol mientras que la parada en G1 se atribuye a la carencia de mevalonato y/o algún derivado no esteroídico del mismo. Las concentraciones elevadas de LDL son menos eficaces que las intermedias para revertir el efecto de la lovastatina, efecto que se atribuye a la retrorregulación de la HMG-CoA reductasa por el colesterol y que se previene en parte por antioxidantes. De forma análoga, los oxiesteroles 25-hidroxicolesterol y 7-cetocolesterol inhiben fuertemente la proliferación celular a través de la inhibición de la síntesis de mevalonato y de colesterol. A dosis bajas, su efecto también es contrarrestado por antioxidantes como ocurría con concentraciones elevadas de colesterol LDL.

Autor: MUNILLA SUAREZ M. ANGELES.
Año: 1997.
Universidad: SAN PABLO CEU.
Centro de lectura: CIENCIAS EXPERIMENTALES Y TECNICAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: CIENCIAS BIOMEDICAS PROGRAMA DE DOCTORADO: AVANCES EN CIENCIAS EXPERIMENTALES Y TECNICAS.

Resumen: La gestación constituye un estado fisiológico en el que se producen fuertes cambios metabólicos tanto en la madre como en el feto. En el último tercio de gestación, la madre sufre hiperisulinemía, resistencia insulínica y en general una modificación de todo el perfil lipoproteico. Al administrar a la rata dos dietas semisintéticas claramente hiperlipemiantes, una dieta rica en colesterol (DRC) y una dieta rica en sacarosa (DRS), se producen cambios metabólicos similares a los anteriormente mencionados, que son diferentes según si la rata esá preñada o no. La administración de una DRC produce mayor respuesta hiperlipedíca en la rata preñada (P) que en la virgen (V), incrementando las condiciones de hiperlipidemía que ya existen durante la gestación. La DRC PRODUCE hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, una fuerte modificación del perfil lipoproteico y un acumulo de colesterol y triglicéridos en los tejidos. Al contrario de lo que ocurre con la DRC, la administración de DRS produce mayor respuesta hiperlipidémica en la rata V que en la P, aunque los efectos metabólicos debidos a esta dieta dependen del tiempo de tratamiento. La hipertigliceridemia debida a la DRS se ajusta a un patrón multifástico, y es más intensa a mayor tiempo de ingesta, generando en la rata P un incremento de todas las estructuras maternas con un exagerado aumento del tamaño del hígado y del tejido adiposo a los 110 días de tratamiento. A pesar de los efectos metabólicos que ambas dietas producen en la madre, ninguna de ellas afecta al desarrollo fetal ni a los niveles de colesterol y triglicéridos plasmáticos o al perfil de lipoproteínas en los fetos de 20 días, lo cual reafirma la impermeabilidad de la placenta al paso de estos lípidos.

Autor: PEREZ CAMIÑA JESUS.
Año: 1997.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: QUIMICA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA ANALITICA, NUTRICION Y BROPMATOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA ANALITICA.

Resumen: Se ha conseguido la purificación completa de un fosfolípido complejo bioactivo a partir de muestras de humor vítreo humano patológico, así como el aislamiento de un compuesto emparentado a partir de humor vítreo bovino. En ambos casos se ha caracterizado el mecanismo de señalamiento intracelular, que implica la activación de un receptor acoplado a proteínas G (Gi), que activa una fosfolipasa C específica de fosfatidilcolina (PC-PLC) y una diacilglicerol quinasa (DAGK), dando lugar a la generación de ácido fosfatídico, que induce liberación de calcio al citosol a partir de depósitos intracelulares sensibles a este fosfolípido. Los compuestos aislados y caracterizados bioquímicamente son fosfolípidos complejos de elevado peso molecular, representando una nueva clase de lípidos con actividad movilizadora de calcio intracelular.

Autor: VELASCO DIEZ GUILLERMO.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: En la presente Tesis Doctoral se ha llevado a cabo un estudio detallado sobre las posibles bases bioquímicas de la regulación a corto plazo e independiente de malonil-CoA de la carnitina palmitoiltransferasa I (CPT-I). En primer lugar se describen los efectos del ATP extracelular y los cambios en el volumen celular sobre la CPT-I; que utilizan la vía independiente de malonil-CoA. A continuación se utilizó el ácido okadaico como herramienta para el estudio de los posibles mecanismos intracelulares que podrían determinar la regulación independiente de malonil-CoA. Por último, se apuntan las posibles implicaciones fisiológicas de este mecanismo, tanto a nivel de su potencial implicación en procesos de malignización celular como de su coordinación con el mecanismo clásico dependiente de malonil-CoA.

Autor: ARISTEGUI URRESTARAZU ROSA .
Año: 1996.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: CADA INDIVIDUO PRESENTA UN PATRON CARACTERISTICO DE DISTRIBUCION DE LAS PARTICULAS LDL EN SUBFRACCIONES QUE DIFIEREN EN SU COMPOSICION LIPIDICA Y PROTEICA Y QUE POR LO TANTO PRESENTAN DIFERENTES TAMAÑOS Y DENSIDADES HACIENDO ESTO POSIBLE SU SEPARACION POR ULTRACENTRIFUGACION SECUENCIAL. PARA VER CUAL ES LA INFLUENCIA DE LA COMPOSICION TANTO LIPIDICA COMO PROTEICA ASI COMO DEL CONTENIDO EN ANTIOXIDANTES DE LA LIPOPROTEINA LDL EN SU RESISTENCIA A LA OXIDACION IN VITRO POR LA ACCION DE IONES COBRE Y SU IMPLICACION EN LA ARTERIOSCLEROSIS, HEMOS ESTUDIADO EL PROCESO EN TRES GRUPOS DIFERENTES DE INDIVIDUOS: CONTROL, DEPORTISTAS E HIPERCOLESTEROLEMICOS, INTENTANDO ESTABLECER LAS DIFERENCIAS ENTRE LAS DIFERENTES SUBPOBLACIONES LDL DE CADA INDIVIDUO, ASI COMO LAS VARIACIONES ENTRE LOS GRUPOS. PARA ELLO, SE REALIZO UN MINUCIOSO ANALISIS DE LA PARTICULA LDL, PARA PODER INTENTAR ESTABLECER SU RELACION CON EL MECANISMO INTRINSECO DE LA LIPOPROTEINA HACIA SU SUSCEPTIBILIDAD A PROCESOS OXIDATIVOS.

Autor: CARMENA RAMON RAFAEL.
Año: 1996.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA MEDICA Y CLINICA 30B.

Resumen: CONOCIDA LA VARIABILIDAD EXISTENTE EN LA RESPUESTA DE LOS LIPIDOS PLASMATICOS A LAS MODIFICACIONES DE LA DIETA EN LA HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR (HF) NOS HEMOS PLANTEADO LA HIPOTESIS DE SI LAS MUTACIONES DE 3 GENES (APOE, APOA-I Y APOA-IV) QUE INTERVIENEN EN LAS VIAS DE ABSORCION, LIPOLISIS Y CATABOLISMO DE LAS LIPOPROTEINAS INFLUYEN SOBRE DICHA RESPUESTA. HEMOS ESTUDIADO 69 SUJETOS HETEROCIGOTOS HF (DIAGNOSTICO GENETICO), 25 HOMBRES Y 44 MUJERES, (EDAD MEDIA 33,8 Y 38,1 AÑOS, RESPECTIVAMENTE) EN SITUACION BASAL (DIETA LIBRE DURANTE 4 SEMANAS) Y TRAS UNA DIETA HIPOLIPEMIANTE (RECOMENDACIONES S.E.A. 1994) DURANTE 2-3 MESES, SIN MODIFICACION DEL IMC. EN TODOS LOS PACIENTES SE ESTUDIO EN AMBOS PERIODOS EL CT, TG, LDL-C, VLDL-C, HDL-C Y APO B. TRAS EL PERIODO DIETETICO HUBO UN DESCENSO SIGNIFICATIVO (P

Autor: COLOME MONTERO CRISTINA.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: La aterosclerosis es una efermedad vascular muy frecuente en la sociedad occidental. En condiciones de hipercolesterolemia, uno de los factores de riesgo para el desarrollo de la placa de ateroma, se incrementan los niveles plasmáticos de lipoproteínas de baja densidad (LDL). Nuestros resultados muestran que las LDL modificadas minimamente (mmLDL) presentan un incremento significativo de los niveles de oxidación. Por el contrario, la modificación de las LDL en presencia de los antioxidantes U74500A e hidroxitolueno butilado (uLDL, BHT-LDL) bloquea la modificación oxidativa de las LDL. Concentraciones aterogénicas de todas las LDL incrementan significativamente la adhesión de monocitos a las células endoteliales. Sin embargo las mmLDL inducen un incremento de la adhesión superior. Al modificar las LDL en presencia de un antioxidante (uLDL y BHT-LDL) se reduce la adhesión de monocitos. El antioxidante U74500A es más eficaz que el BHT en bloquear la modificación de las LDL así como en reducir la adhesión de monocitos. Las células endoteliales tratadas con concentraciones aterogénicas de LDL muestran a las 24 y 48 horas de tratamiento una disminución significativa de los niveles de proteína y de mRNAcodificantes para óxido nítrico sintasa endotelial (eNOS), que requiere síntesis de RNA y de proteína de novo. Por el contrario, las HDL no afectan a la regulación de la eNOS.

Autor: CRISTOBAL BARRAGAN SUSANA.
Año: 1996.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: FISIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA.

Resumen: SE HA PURIFICADO UNA COLESTEROL ESTER HIDROLASA (CEH) DE MICROSOMAS DE HIGADO DE RATA EN SIETE ETAPAS. LA SOLUBILIZACION OPTIMA DE LA ACTIVIDAD SE PUEDE LLEVAR A CABO MEDIANTE DOS PROCEDIMIENTOS ALTERNATIVOS: ULTASONACION O TRATAMIENTO DE LAS MEMBRANAS CON EL DETERGENTE NO IONICO N-OCTIL BETA-D-GLUCOPIRANOSIDO (OG). LA ULTASONACION PERMITE LA SOLUILIZACION DE LA ACTIVIDAD CEH PRESENTE EN 100MG DE PROTEINA MICROSOMAL EN MENOS DE 8 MIN RECUPERANDO EL 95% DE LA ACTIVIDAD CEH EN EL 34% DE LA PROTEINA. EL 100% DE LA ACTIVIDAD CEH ASOCIADA AL 42% DE LAS PROTEINAS SE SOLUBILIZA TAMBIEN TRATANDO LOS MICROSOMAS CON EL DETERGENTE OG A CONCENTRACION 30 MM MANTENIENDO EN 4 LA PROPORCION EN PESO ENTRE DETERGENTE Y PROTEINA. LA ACTIVIDAD CEH DE MICROSOMAS DE HIGADO DE RATA SE PURIFICA EN LAS SIGUIENTES ETAPAS: SEPARACION DE MEMBRANAS MICROSOMALES POR FRACCIONAMIENTO SUBCELULAR, LAVADO DE MEMBRANAS, SOLUBILIZACION POR ULTRASONACION, PRECIPITACION AL 7% (P/V) DE PEG, ACLARAMIENTO CON CRISTALES DE HIDROXIAPATITOAL AL 0,1% (P/V), CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO EN COLUMNAS HITRAP Q Y CROMOGRAFIA EN HIDROXIAPATITO. EL PODER MAS RESOLUTIVO DE ESTA PURIFICACION RECAE SOBRE LA ETAPA DE INTERCAMBIO IONICO, GRACIAS A LA UTILIZACION DE UN INUSUAL PROCESO DE ELUCION, EN EL QUE SE APLICAN ESCALONES DE FUERZA IONICA CRECIENTE PARTIENDO EN CADA CASO DESDE EL 0% DEL ELUYENTE SALINO. DADA LA MARCADA INESTABILIDAD DE LA MUESTRA PURIFICADA, EL RENDIMIENTO ERA DEL 3,21% Y EL FACTOR DE PURIFICACION DE 12,4 VECES Y REPRESENTANBA EL 0,25% DE LA PROTEINA MICROSOMAL DE PARTIDA. EL SEGUIMIENTO DE LAS ACTIVIDADES TRIGLICERIDO LIPASA (TGL) Y ESTERASA INESPECIFICA (EL) A LO LARGO DE LA PURIFICACION REFLEJABAN QUE LA ACTIVIDAD CEH HABIA SIDO PURIFICADA 141 VECES RESPECTO A LA EL Y 55,8 VECES RESPECTO A LA TGL. LA CARACTERIZACION DE LA ACTIVIDAD CEH PURIFICADA REFLEJA QUE COMPARTE CARACTERISTICAS PROPIAS DE LAS CEH DE HIGADO, COMO UNA MASA MOLECULAR EN TORNO A 65.000, AUNQUE SE DISTINGUE POR: ESTAR ASOCIADA A MEMBRANAS MICROSOMALES Y TENER UN CARACTER MUY HIDROFOBICO: SER MARCADAMENTE INESTABLE Y REQUERIR LA ADICION DE BSA AL 0,5% (P/V) PARA SU ALMACENAMIENTO A -20 C; ACTUAR A PH OPTIMO 6, SER INDEPENDIENTE DE SALES BILIARES, RESPONDER A UNA CINETICA MICHAELIANA SOLO HASTA LA CONCENTRACION DE OLEATO DE COLESTEROL 150 UM A LA QUE SE DETECTA LA ACTIVIDAD MAXIMA Y TENER UNA KM EN TORNO A 10 MICRO M. EL EFECTO DE ALGUNOS COMPUESTOS EN LA CEH PURIFICADA LA CARACTERIZAN RESPECTO A OTRAS ACTIVIDADES HIDROLITICAS DE HIGADO. EL CATION MG2+ NO AFECTA A LA ACTIVIDAD, LO QUE LA DIFERENCIA DE LA CEH SOLUBLE DEPENDIENTE DE SAL BILIAR, QUE ES FUERTEMENTE ACTIVADA. SE DISTINGUE DE LA CEH ACIDA DE LISOSOMAS POR NO VERSE AFECTADA POR EL CATION CA2+, SER COMPLETAMENTE INHIBIDA POR ZN2+ Y ESCASAMENTE AFECTADA POR HG2+. EL NAC1 1 M INHIBE COMPLETAMENTE LA ACTIVIDAD MICROSOMAL A DIFERENCIA DE LA LIPASA HEPATICA NEUTRA, QUE ES RESISTENTE A LA PRESENCIA DEL CATION. SE ALEJA DE LA RETINIL PALMITATO HIDROLASA NEUTRA Y DE VARIAS CARBOXILESTERASAS MICROSOMALES POR LA FALTA DE EFECTO DEL IONF-, CONOCIDO INHIBIDOR DE LAS ANTERIORES. LA AUSENCIA DE REACTIVIDAD DE LA CEH PURIFICADA DE MICROSOMAS CON LAS INMUNOGLOBULINAS CONTRA LA CEH PURIFICADA DE PANCREAS LA DIFERENCIAN DE UN GRAN NUMERO DE ENZIMAS PERTENECIENTES A LA FAMILIA DE LAS LIPASAS.

Autor: LOPEZ SORIANO JOAQUIN.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA .

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE ANALIZA LA IMPLICACION DEL FACTOR NECROTICO TUMORAL (TNF) EN LAS ALTERACIONES DEL METABOLISMO LIPIDICO DURANTE LA CAQUEXIA CANCEROSA. EN ANIMALES PORTADORES DEL TUMOR ASCITICO YOSHIDA AH-130 SE PRODUCEN NOTABLES ALTERACIONES: HIPERTRIGLICERIDEMIA, REDUCCION EN LA ACTIVIDAD LIPOPROTEINA LIPASA (LPL) DEL TEJIDO ADIPOSO BLANCO E INCREMENTOS EN LA LIPOLISIS DE ESTE TEJIDO Y DE LA LIPOGENESIS HEPATICA. LA ADMINISTRACION DE ANTICUERPOS ANTI-TNF REVIERTE PARCIALMENTE ESTAS ALTERACIONES, SUGIRIENDO UN PAPEL ESENCIAL DE ESTA CITOQUINA EN LA CAQUEXIA CANCEROSA. SIMILARES RESULTADOS SE OBTUVIERON EN RATONES TRANSGENICOS Y KNOCKOUT PARA EL RECEPTOR DE TIPO I DEL TNF, CONFIRMANDO LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON ANTICUERPOS. OTROS MEDIADORES, COMO LAS CATECOLAMINAS VIA RECEPTORES ALFA-ADRENERGICOS, TAMBIEN SON CAPACES DE INDUCIR VARIACIONES EN LA HIPERTRIGLICERIDEMIA DEL ESTADO CAQUECTICO EN RATAS. ASIMISMO, EL TNF NO PARECE IMPLICADO EN LAS ANOMALIAS METABOLICAS DEL ESTADO DE OBESIDAD EN ANIMALES DE LA CEPA ZUCKER, COMO SE DEMUESTRA MEDIANTE LA ADMINISTRACION DE LOS MISMOS ANTICUERPOS CONTRA EL TNF.

Autor: MARTIN DE VALMASEDA GUIJARRO EVA M..
Año: 1996.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: 9102501 ENZIMOLOGIA Y REGULACION METABOLICA.

Resumen: EL ALMACENAMIENTO DE LAS PLAQUETAS PRODUCE CAMBIOS MORFOLOGICOS Y BIOQUIMICOS QUE CONDUCEN A LA PERDIDA DE SU FUNCION. EN ESTE ESTUDIO SE HAN INVESTIGADO LAS ALTERACIONES PRODUCIDAS EN LAS BICAPAS LIPIDICAS DE LAS MEMBRANAS DE LAS PLAQUETAS DURANTE SU ALMACENAMIENTO A 4 GRADOS CEN EL MEDIO SINTETICO SETO, COMPARANDO ESTOS RESULTADOS CON LOS OBTENIDOS DURANTE EL ALMACENAMIENTO EN EL PLASMA. EL PROCESO TRANSCURRE CON FORMACION DE AGREGADOS Y LIBERACION DE VESICULAS EN AMBOS MEDIOS, ANALIZANDOSE TAMBIEN LA COMPOSICION LIPIDICA DE ESTAS ESTRUCTURAS. EL ALMACENAMIENTO EN EL PLASMA PRODUCE UN DESCENSO EN LOS CONTENIDOS DE FOSFATIDILETANOLAMINA Y FOSFATIDILSERINA+FOSFATIDILINOSITOL, PERDIDA EN ACIDOS GRASOS POLIINSATURADOS, AUMENTO DE LA RAZON COLESTEROL/FOSFOLIPIDOS E INCREMENTO DE LA FLUIDEZ EN LA REGION CENTRAL DE LAS MEMBRANAS PLAQUETARIAS, ALTERACIONES QUE PODRIAN SER EN PARTE IMPUTABLES A LA PEROXIDACION LIPIDICA DETECTADA DURANTE EL ALMACENAMIENTO. EL SETO TIENE CARACTER PROTECTOR EN LA CONSERVACION DE LAS PLAQUETAS A 4 GRADOS C, YA QUE IMPIDE LA ALTERACION DE SU PATRON DE FOSFOLIPIDOS, ALARGA EL TIEMPO NECESARIO PARA QUE SE PRODUZCAN LOS CAMBIOS LIPIDICOS DETECTADOS Y RETRASA LOS PROCESOS DE AGREGACION Y LOS CAMBIOS MORFOLOGICOS QUE SUFRE LA PLAQUETA ALMACENADA.

Autor: PEREIRA RIOS FRANCISCA.
Año: 1996.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA FUSION DE LAS MEMBRANAS CONSTITUYE UNA ETAPA LIMITANTE A NIVEL MOLECULAR PARA LA ENTRADA EN LA CELULA DEL VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (VIH). LA INCORPORACION DEL PEPTIDO DE FUSION DEL VIH-1 EN LA MEMBRANA BLANCO PERMITIRIA LA INTERACCION SIMULTANEA DE LA PROTEINA GP41 CON LA MEMBRANA VIRAL Y LA MEMBRANA CELULAR. UNA CUESTION NO RESUELTA ES SI LA FUNCION DE ESTA SECUENCIA SERIA UNICAMENTE LA DE ACTUAR COMO UN ANCLAJE INERTE QUE POSIBILITA DICHA INTERACCION O SI, ADEMAS, SERIA CAPAZ DE PERTURBAR LA ORGANIZACION LAMELAR DE LA MEMBRANA CELULAR DANDO INICIO AL PROCESO DE FUSION VIRAL. EL OBJETIVO PRIMORDIAL DE ESTA TESIS ES ESTUDIAR EL EFECTO DESESTABILIZANTE DEL PEPTIDO DE FUSION CON MEMBRANAS MODELO COMO UNA FORMA DE AYUDAR A ESTABLECER SU FUNCION IN VIVO.

Autor: RIBALTA VIVES JOSEP.
Año: 1996.
Universidad: ROVIRA I VIRGILI.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: CIENCIES MEDIQUES BASIQUES PROGRAMA DE DOCTORADO: METODOLOGIA DE LA INVESTIGACIO BIOMEDICA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE INVESTIGA LA BASE GENETICA DE LA HIPERLIPEMIA FAMILIAR MAS FRECUENTE ENTRE PACIENTES DE INFARTO AGUDO DE MIOCARDIO: EN CONCRETO, EN RELACION AL CLUSTER AI-CIII-AIV. SE HAN ESTUDIADO DOS POLIFORMISMOS EN ESTA REGION Y SE HAN EVALUADO POSIBLES ALTERACIONES DE LOS SISTEMAS DE REGULACION GENICA DEPENDIENTES DE ACIDO RETINOICO, EN BASE A LAS CONCENTRACIONES PLASMATICAS DE SU PRECURSOR, LA VITAMINA A, EN ESTOS PACIENTES. LOS RESULTADOS INDICAN UNA ASSOCIACION SIGNIFICATIVA ENTRE UN POLIMORFISMO DEL GEN DE LA APO C-III Y LOS PARAMETROS RELACIONADOS CON EL METABOLISMO DE LOS TRIGLICERIDOS EN ESTOS PACIENTES: SUGIRIENDO QUE ESTA REGION GENETICA ACTUARIA COMO UN FACTOR DE PREDISPOSICION A DESARROLLAR HIPERLIPEMIA EN ESTOS SUJETOS. ADEMAS, LA EXISTENCIA DE CONCENTRACIONES PLASMATICAS DE RETINOL SIGNIFICATIVAMENTE MAS BAJAS ENTRE PACIENTES CON HIPERLIPEMIA FAMILIAR COMBINADA SUGIERE QUE LOS MECANISMOS DE REGULACION GENICA DEPENDIENTES DE ACIDO RETINOICO PUEDE HALLARSE ALTERADOS EN ESTA PATOLOGIA.

Autor: RUANO RAMOS M. JOSE.
Año: 1996.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: ENZIMOLOGIA Y REGULACION METABOLICA.

Resumen: ESTE TRABAJO SE ENCUADRA EN UNA LINEA DE INVESTIGACION DE NUESTRO LABORATORIO QUE PRETENDE PROFUNDIZAR EN EL ESTUDIO DE LOS GANGLIOSIDOS Y DE SU METABOLISMO EN DETERMINADAS CONDICIONES PATOLOGICAS, COMO ES EL CASO DEL ALCOHOLISMO. EN UN TRABAJO PREVIO ENCONTRAMOS QUE LA INGESTION CRONICA DE ETANOL O DE GLUCIDOS (SACAROSA) PROVOCA CAMBIOS EN EL PATRON DE GANGLIOSIDOS DE HIGADO, QUE PODRIAN SER DEBIDOS A LA INHIBICION DE LA GD3 SINTASA. POR ELLO, DECIDIMOS REALIZAR UN ESTUDIO DE ESTA ENZIMA EN ANIMALES SOMETIDOS A LAS CONDICIONES ANTERIORMENTE SEÑALADAS. DESPUES DE UN LARGO PROCESO DE PUESTA A PUNTO DE LAS TECNICAS NO SE PUDO DETECTAR LA GD3 SINTASA DEBIDO A LA EXISTENCIA DE UN POLIMORFISMO GENETICO, EN LAS RATAS UTILIZADAS, RESPONSABLE DE LA AUSENCIA DE LA ENZIMA. EL TRABAJO SE CONTINUO CON EL ESTUDIO DE LA ACETILCOLINESTERASA DE DIFERENTES AREAS ENCEFALICAS Y DE HIGADO DE LOS MISMOS ANIMALES UTILIZADOS PARA EL ESTUDIO DE LA GD3 SINTASA YA QUE LA ACHE PODRIA ESTAR MODULADA POR GANGLIOSIDOS Y SER SENSIBLE, EN ESTOS ORGANOS, AL ETANOL Y A LA INGESTION DE GRANDES CANTIDADES DE GLUCIDOS.