ESTUDIOS SOBRE LA SIALILTRANSFERASA DE ESCHERICHIA COLI K-235: BIOSINTESIS DE ACIDO COLOMINICO IN
VITRO. Autor: ORTIZ GUTIERREZ ANA ISABEL.
Año: 1987.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: VETERINARIA
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Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR DE LA UNIVERSIDAD DE LEON.
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Resumen: SE HA ESTUDIADO EL COMPLEJO ENZIMATICO SIALILTRANSFERASA
OBTENIDO DE ESCHERICHIA COLI K-235, CRECIDO EN UN MEDIO QUIMICAMENTE DEFINIDO (IDEAL PARA LA SINTESIS DE ACIDO COLOMINICO). LA VIDA MEDIA CALCULADA IN VIVO PARA ESTA ENZIMA ES DE 20 H. LOS ESTUDIOS CINETICOS HAN REVELADO (A 33 C Y PH 8,3) UN
COMPORTAMIENTO HIPERBOLICO RESPECTO AL CMP-NEU5AC (KM:250 UM) Y UNA TEMPERATURA DE TRANSICION DE 31,3 C. LA ENZIMA ES INHIBIDA POR NH+4, DIVERSOS CATIONES DIVALENTES Y POR ALGUNOS AGENTES QUE REACCIONAN CON LOS GRUPOS -SH (N-EILMALEIMIDA). LOS
DETERGENTES Y LOS ACIDOS GRASOS PRODUCEN INACTIVACION DE LA ACTIVIDAD SIALILTRANSFERASICA.
EN LAS PREPARACIONES DE MEMBRANA DE E. COLI K-235 SE HA IDENTIFICADO UN COMPLEJO PROTEINA-NEU5AC IMPLICADO EN LA BIOSINTESIS DEL ACIDO COLOMINICO. ESTE COMPUESTO TIENE UN PESO MOLECULAR (ESTIMADO POR ELECTROFORESIS EN GELES DE POLIACRILAMIDA EN
PRESENCIA DE SDS Y POSTERIOR AUTORRADIOGRAFIA) APROXIMADO DE 100.000, Y JUEGA EL PAPEL DE INICIADOR O DE PRIMER (ACEPTOR ENDOGENO) EN LA SINTESIS DEL ACIDO COLOMINICO. EL ANTIBIOTICO TUNICAMICINA INHIBE LA BIOSINTESIS DE ACIDO COLOMINICO AFECTANDO
LA SINTESIS DEL INTERMEDIARIO PROTEINA-(NEU5AC)N. LA SINTESIS DE ACIDO COLOMINICO ES INHIBIDA IN VITRO POR EL CMP AL BLOQUEAR LA INCORPORACION DE NEU5AC EN EL COMPLEJO PROTEICO INTERMEDIARIO Y EN CONSECUENCIA EN EL POLIMERO LIBRE. EL CDP Y EL CTP
TAMBIEN INHIBEN PERO CON MENOR EFECTIVIDAD, MIENTRAS QUE LA CITOSINA Y LA CITIDINA NO PRODUCEN NINGUN EFECTO. LA INHIBICION DEL CMP ES DE TIPO COMPETITIVO CON UNA KI: 30 UM. LA INCUBACION DE PROTEINA-(NEU5AC) CON CMP, CDP O CTP PRODUCE SINTESIS DE
NOVO DE CMP-NEU5AC. LA PRESENCIA DE ACIDO COLOMINICO QUE NORMALMENTE DESPLAZA LA REACCION HACIA LA SINTESIS DEL POLIMERO, NO AFECTA LA FORMACION DE NOVO DE CMP-NEU5AC.