PEPTIDOS, 3

Autor: ROIG MORENO XAVIER.
Año: 1999.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: La fiebre aftosa o glosopeda es una importante enfermedad vírica que afecta un ungulados domésticos y salvajes. Es especialmente temida por las graves consecuencias económicas que comportan para la ganadería. Por lo que respecta a su distribución mundial, es endémica en América del Sur, África y Asia. En Europa occidental se considera erradicada desde 1989. La enfermedad se ha controlado tradicionalmente mediante la vacunación y el sacrificio de animales infectados. En el presente Trabajo se han planteado tres objetivos: 1,- preparación de una vacuna sintética contra el virus de la fiebre aftosa para dos serotipos C-S8 y C3 Argentina 85. 2,- estudio estructural de péptidos que mimetizan mutaciones que aparecen en el bucle inmunodominante del virus de serotipo C-S8c1. 3,- estudio conformacional de péptidos que mimetizan el bucle inmunodominante del virus C-S8c1. Para el desarrollo las vacunas se han sintetizado químicamente péptidos quiméricos que contienen los lugares antigénicos A y C del virus (epítopos B). En dos contrucciones peptídicas se han incorporado, además, epítopos T de bovinos para mejorar la respuesta inmune de los huéspedes contra una infección experimental con virus homólogo. Los péptidos fueron sintetizados en fase sólida, de manera automatizada sobre un soporte polimérico de tipo metilbenzhidrilamina y siguiendo una táctica de síntesis Boc/bencilo. Posteriormente, fueron purificados con métodos cromatográficos y caracterizados mediante espectrometría de masas. La evaluación inmunológica de los inmunógenos peptídicos fue llevada a cabo en colaboración con dos laboratorios veterinarios de España y Argentina. La eficacia de las vacunas sintéticas fue modesta debido a la limitada representación de lugares antigénicos en los péptidos y a la aparición de virus mutantes durante la infección experimental de los animales. Uno de los problemas que dificulta el control de la enfermedad es la variabilidad genética del virus de la fiebre aftosa. Aquélla se manifiesta en una notable diversidad antigénica: aparecen mutaciones en aminoácidos de ciertas regiones de la cápside viral, de manera que el virus escapa a la vigilancia inmunitaria. Las mutaciones pueden ser mimetizadas específica y cuantitativamente mediante péptidos sintéticos que producen lugares antigénicos de la cápside viral. Se han estudiado las mutaciones en las posiciones 146 y 147 de la proteína VP1, pertenecientes al sitio antigénico A, mediante ensayos inmunoquímicos y los resultados se han correlacionado con las tendencias conformacionales de péptidos que incluyen las mutaciones, elucidadas mediante dicroísmo circular. Los resultados indican cambios estructurales muy sutiles o inexistentes asociados a cambios drásticos en la reactividad de los péptidos con anticuerpos monoclonales anti-virus. El análisis de rayos-X del virus presenta una difracción difusa en la zona inmunodominante (bucle-G-H, sitio antigénico A) para todos los serotipos víricos. Por ese motivo se desconoce su estructura y se le supone una elevada movilidad. Para contribuir a la elucidación estructural de dicho bucle, se han sintetizado tres péptidos de 15 aminoácidos que cubren toda la secuencia del bucle del virus C-S8c1 y se ha llevado a cabo un estudio conformacional mediante dicroísmo circular y resonancia magnética nuclear de patrón. De estos estudios se desprende que el bucle presentaría una conformación extendida en el segmento N-terminal, un giro en el sitio de unión al receptor celular, y una hálice en su extremo C-terminal, una estructura compatible con datos de rayos-X obtenidos de virus modificados y de complejos péptidos-fragmento Fab de anticuerpo monoclonal dirigido contra el bucle

Autor: GRAU BONETE ALICIA.
Año: 1998.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .

Resumen: En esta tesis Doctoral se ha estudiado fundamentalmente la interacción de distintas moléculas de gran interés biológico con membranas modelo. En la primera parte del trabajo se utilizó la fosfolipasa A2, como herramienta para comprobar el efecto estabilizador y desestabilizador de la incorporación de diferentes isómeros del tocoferol, en membranas fosfolipídicas. Los resultados mostraron una inhibición de tipo no competitivo únicamente en vesículas en estado lamelar fluido de la actividad PLA2, por diferentes isómeros del tocoferol siguen un orden alfa>beta>gamma>delta-tocoferol, correlacionándose este orden decreciente en cuanto al grado de inhibición de los isómeros bajo estudio con su actividad biológica como estabilizadores de membrana, sugiriendo otras posibles actividades biológicas de los compuestos con actividad vitamina E, aparte de su clásica función como antioxidantes. El estudio, en la segunda parte del trabajo, de la interacción de los lipopéptidos surfactina e iturina A con membranas fosfolipídicas modelo, nos muestra para el caso de la surfactina, una interacción óptima en el caso de fosfolípidos que poseen cadenas acílicas de ácido mirístico, indicando el establecimiento de interacciones moleculares entre las cadenas acílicas de los fosfolípidos y la molécula de surfactina, perturbando el comportamiento cooperativo de los lípidos. La molécula de surfactina se situaría en la parte superior de la empalizada lipídica, estableciendo interacciones con el agua y las cabezas polares de los lípidos. Esto podría producir un aumento de las fuerzas repulsivas entre las bicapas adyacentes y en consecuencia un aumento del grosor de la bicapa. Los estudios de mezclas de surfactina con DEPE en fase hexagonal-HII mediante DSC, mostraron una destabilización de la fase hexagonal-HII, y en consecuencia una estabilización de la fase lamelar. Para el caso de iturina A, se produjo un efecto similar a bajas concentraciones, pero a concentraciones elevadas del mismo, se observó la formación de fibrillas entrelazadas. Dicha desestabilización podría afectar a las propiedades de barrera de la membrana, dando lugar a los consiguientes efectos biológicos. Por otro lado, se comprobó la capacidad que posee la iturina A de encapsular moléculas solubles en agua, cuando se encuentra a altas concentraciones. Este resultado sugiere un fuerte comportamiento agregacional de la iturina A, organizándose en forma de bicapas interdigitadas. Finalmente se observa que el efecto que produce iturina A incluso a concentraciones elevadas, en dos tipos de vesículas lipídicas formadas por fosfolípidos que difieren en su carga neta como son DMPC, con carga neutra, y DMPG, con carga negativa, es mayor en vesículas de DMPG que en las de DMPC, pudiendo ser una razón la interferencia del lipopéptido con la red de enlaces de hidrógenos que forman las moléculas del fosfatidilglicerol. Por otro lado se muestra también la capacidad de la iturina A para agregarse dentro de la membrana con tendencia a formar dominios dentro de la misma, incluso a bajas concentraciones, pudiendo ser estos los responsables de la desestabilización de la bicapa y alteración de las propiedades de barrera de la membrana, dando lugar a los potentes efectos biológicos como es su capacidad antifúngica y antibiótica.

Autor: BENGOECHEA ALONSO M. TERESA .
Año: 1998.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: La estimulación de monocitos humanos con el péptido sintético NVLGAPKKLNESGAV, conlleva un aumento de la producción de citoquinas IL-1, IL-6 y TNF-a, así como el incremento de la elevación en los niveles intracelulares de segundos mensajeros. En estudios previos se ha observado a su vez, que el tratamiento de monocitos humanos con beta-endorfina provoca un aumento de los niveles intracelulares de AMPc y de la expresión de la iNOS. En este trabajo se pone de manifiesto que tanto el péptido fisiológico como el sintético aumentan la actividad NF-kB y CREB medida en extractos celulares de monocitos humanos. El análisis de los componentes de NF-kB, mediante la utilización de anticuerpos específicos revela la existencia de dímeros p50/p50 y p50/p65. La utilización de inhibidores específicos demuestra que la activación de ambos factores requiere la integridad de la vía de señalización que desencadena el péptido, en lo que se refiere a las etapas implicadas en la elevación secuencial de Ca2+, NO y AMPc. Tanto la beta-endorfina como el péptido sintético, activan al factor CREB, por fosforilación por PKA y a NF-kB por degradación de IkB-a inducida por fosforilación por PKA y por la quinasa dependiente de PP2B.

Autor: OSES PRIETO JUAN ANTONIO.
Año: 1998.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: Hemos demostrado que un péptido sintético (Pa), que contiene un motivo estructural común (motivo "2-6-11") que se encuentra en diversas proteínas de la matriz extracelular y que es capaz de activar monocitos humanos en cultivo, induce apoptosis en los cultivos de monocitos, ya que tras la estimulación de los monocitos con Pa se produce un aumento del grado de condensación de la cromatina y de la fragmentación nuclear, así como de la exposición de fosfatidilserina en la cara externa de la membrana plasmática y de la fragmentación internucleosomal del DNA. Además, se observa proteolisis de dos biosubstratos de caspasas, PARP y D4-GDI y una disminución de los niveles de Bcl-2. Los extractos nucleares de monocitos incubados en presencia del péptido Pa, manifiestan una elevada actividad DNAasa con relación a los extractos de monocitos no tratados. El aumento de actividad nucleasa que se detecta a pH 7 en presencia pero no en ausencia de Ca2+ en los núcleos de monocitos incubados con Pa, disminuye por el pretratamiento de las células con el inhibidor de caspasas Z-DEVD-fmk. Estas nucleasas podrían estar reguladas también por poliADPribosilación. La apoptosis inducida por el péptido Pa está mediada por las tirosina quinasas solubles Src y Syk, esfingomielinasa ácida y caspasas, así como por p38. Esta última es activada por ceramida pero no por caspasas. La activación secuencial de ceramida y caspasas lleva a la activación de SAPK. Este proceso está regulado positivamente por AMPc, tal vez vía inhibición de PI3K. El NO tendría un papel antiapoptótico. Hemos demostrado asimismo que la beta-endorfina induce también apoptosis vía Ca2+ y cAMP.

Autor: VARO CENARRUZABEITIA NEREA.
Año: 1998.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: FARMACIA .

Autor: PEDRAZA LOPEZ ANDRES.
Año: 1998.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: Se ha clonado y caracterizado un cDNA de fresa que codifica un Péptido metionina Sulfóxido Reductasa (PMSR) de fresa. Este gen se expresa única y exclusivamente en los frutos maduros de fresa. La construcción de una proteína de fusión GST/PMSR nos ha permitido demostrar que dicha proteína es capaz de proteger frente al estrés oxidativo provocado por el radical peróxido de hidrógeno cuando se induce la actividad PMSR. La PMSR de fresa es capaz de utilizar como sustrato la L-metionina sulfóxido libre. Todos estos resultados sugieren que la PMSR de fresa puede estar implicada en funciones como la protección de determinadas proteínas que han sido oxidadas y como consecuencia pierden su actividad biológica, también puede estar implicada en la síntesis de algunos compuestos aromáticos de la fresa que se forman especificamente en los frutos maduros. Por último, se postula sobre su posible papel en la regulación de algunas proteínas como la calmodulina y también modulando la actividad de transportadores de potasio.

Autor: MARTINEZ MORA M. CARMEN.
Año: 1998.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: Los sistemas neuroendocrino e inmunológico están interconectados anatómica y funcionalmente y comparten un gran número de moléculas reguladoras como hormonas peptídicas, citocinas y neuropéptidas que ejercen sus efectos a través de mecanismos endocrinos, paracrinos y autocrinos. Las células del SI están expuestas a neuropéptidos resultantes de la secreción de terminaciones nerviosas o de las propias células inmunes, entre ellos el VIP y PACAP. Varios estudios han sugerido que el VIP puede ser sintetizado por diferentes células inmunes e inflamatorias, sin embargo, una cuestión que todavía no ha sido abordada es la caracterización de las células que contienen VIP dentro de los órganos linfoides y qué factores inducen su expresión y secreción, por lo que éste es el primer punto que se estudia en el presente trabajo. Las actividades inmunomodularas del VIP son mediadas a través de la unión directa a una heterogeneidad de receptores específicos presentes en las células linfoides, por ello nos pareció interesante estudiar la expresión génica y la caracterización de los receptores comunes para VIP y PACAP en las mismas subpoblaciones de células linfoides. Los efectos inmunomoduladores de ambos neuropéptidos podrían estar mediados, en parte, a través de la producción de citocinas, sin embargo, son escasos los datos existentes acerca del efecto de VIP y PACAP sobre la producción de citocinas, en SI, implicadas en la inflamación, por ello, el propósito de este trabajo ha sido estudiar el efecto de ambos neuropéptidos sobre la producción de citocinas como son IL-6 y TNFalfa, así como IL-10.

Autor: MOYA MARIN FRANCISCO JOSE.
Año: 1998.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Resumen: El objetivo de este trabajo estudiar la función fisiológica de los péptidos natriuréticos en la regulación de la presión intraocular (PIO). Para esto, hemos estudiadio 1) la interacción del péptido atrial natriurético (ANP), péptido cerebral natriurético (BNP) y péptido natriurético tipo C (CNP), con sus receptores (NPRA, NPRB y NPRC), así como la proporción y localización de estos receptores en los procesos ciliares de rata; 2) el efecto de los péptidos natriuréticos sobre la PIO en conejos. Nuestros datos indican la presencia de los tres receptores, siendo el receptor NPRC el receptor mayoritario en este tejido. Estos receptores están localizados tanto en el estroma como en el epitelio ciliar pigmentado y no pigmentado. Por otro lado, hemos demostrado que los péptidos natriuréticos disminuyen la PIO y estimulan la actividad guanilato ciclasa en los procesos ciliares de conejo, siendo el CNP el más potente de lostres péptidos. sintético del ANP, específico del receptor NPRC, incrementa casi tres veces los niveles basales de los péptidos natriuréticos inmunorreactivos en el humor acuoso de conejo. Estos hallazgos demuestran la presencia de los receptores funcionales NPRA y NPRB en el ojo de conejo y que el receptor NPRC modula la concentración de los péptidos natriuréticos en el humor acuoso, actuando como un receptor de aclaramiento.

Autor: LAMAS LOPEZ JOSE RAMON.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: HLA-B27 es una molécula de clase I implicada en la presentación de péptidos antigénicos a los linfocitos T citotóxicos. En este trabajo se han determinado las bases moleculares que determinan el solapamiento de repertorios peptídicos entre subtipos de HLA-B27 asociados y no asociados a enfermedad, como un posible mecanismo de la asociación patogénica de este subtipo con su función presentadora de péptidos..

Autor: GARCIA MARTINEZ JUAN ANTONIO.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: En este trabajo se ha investigado, in vivo, el efecto insulinotrópico de varios ésteres de metabolitos carboxílicos, tales como los de los ácidos succínico, glutámico y pirúvico, debido a que son capaces de soslayar los defectos detectados en el transporte, forforilación y en otros tramos del metabolismo de la D-glucosa en la célula beta pancreática, considerados responsables de la disminución de la liberación de insulina estimulada por glucosa, en algunos modelos animales de diabetes tipo 2. Los resultados de este estudio indican que los ésteres de metabolitos carboxílicos actúan como nutrientes secretagogs, in vivo, estimulando la secreción de insulina, tanto en la rata normal como en la diabética, sin ejercer acción glucagonotrópica. También se demuestra que algunos ésteres del ácido succínico son capaces, tras su administración intraduodenal, de pasar al torrente circulatorio y, por lo tanto, de manifestar su potencial insulinotrópico. Además, se documenta que es posible diseñar nuevos ésteres del ácido succínico, como el 1,2,3-tri(etilsuccinil)glicerol éster, que gracias a su alto potencial insulinotrópico evita la necesidad de suministrar dosis altas. Igualmente, la generación de metanol, resultante de la hidrólisis intracelular de los metil ésteres, se puede evitar con el uso de ésteres del ácido succínico alternativos, que no sólo siguen siendo potentes secretagogos de insulina, sino que, además, algunos de ellos muestran una clara acción hipoglucémica. Por otro lado, todos los ésteres de metabolitos carboxílicos estudiados in vivo, potencian la respuesta secretora de la célula beta a las sulfonilureas hiplucémicas y a los derivados de la meglitinida, y en algunos casos, también intensifican su acción hipoglucémica. Todos lo documentado en este trabajo proporciona una serie de nuevos secretagogos de insulina, a considerar en la terapia de la diabetes tipo 2..

Autor: VAN DELFT JOZEF.
Año: 1998.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: El "glucagon-like peptide-1" (GLP-1) es uno de los productos del procesamiento postraduccional del proglucagón. El péptido existe en diferentes formas moleculares, pero sólo las formas GLP-1(7-37) Y GLP-1(7-36)NH2 tienen actividad biológica, representando esta última un 80% de la totalidad del GLP-1 biológicamente activo. Esta tesis tuvo por objetivo el desarrollo de un radioinmunoensayo (RIA) muy sensible para las formas amidadas de GLP-1, el uso de este RIA, en combinación con HPLC, para valorar la producción de GLP-1(7-36)NH2 en el hipotálamo, el páncreas y el íleon en comparación con la inmunorreactividad "glucagon-like" (GLI) y el glucagón inmunorreactivo (IRG) en estos tejidos y el bloqueo del péptido endógeno con anticuerpos monoclonales. La inmunización de conejos con un conjugado de GLP-1(7-36)NH2 con albúmina bovina, obtenido mediante reacción con glutarldehido, permitió obtener un antisuero (CR14C) de título elevado, alta afinidad y específico para el extremo C-terminal amidado del péptido. El RIA desarrollado con CR14C era muy sensible y pudo ser utilizado para determinaciones de GLP-1 amidado en extractos de tejido y muestras pequeñas de plasma de rata. La producción de GLP-1(7-36)NH2 resultó muy eficaz en el hipotálamo, lo cual indica el posible papel de esta forma molecular como neuropéptido. En el páncreas, el GLP-1(7-36)NH2 estuvo presente en cantidades muy pequeñas, lo cual argumenta en contra de un papel para el GLP-1(7-36)NH2 producido en el páncreas en la secrección de insulina. En el ileon, la producción de GLP-1(7-36)NH2 resultó muy variable, y fue menos eficaz que lo que se desprende de trabajos anteriores. En uno de los animales, se detectó también GLP-1(1-36)NH2 en cantidades apreciables. El bloqueo de GLP-1(7-36)NH2 en ratas Wistar conscientes y en ayunas, por la administración intraperitoneal de antícuerpos monoclonales contra dos epitopos diferentes del péptido, provocó un retraso y una reducción notable de la liberación de insulina en plasma en respuesta a la administración intragástrica de glucosa, lo cual subraya la importancia del GLP-1(7-36)NH2 en la estimulación de una respuesta de insulina apropiada a la ingesta de alimentos. Sin embargo, la administración de los anticuerpos monoclonales redujo también el aumento de las concentraciones de glucosa en plasma, indicando un posible papel del GLP-1(7-36)NH2 en el transporte intestinal de glucosa..

Autor: BAJO CHUECA ANA M..
Año: 1998.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: El AMP cíclico ejerce un papel crucial en el útero humano, participando en la relajación de la musculatura lisa en endometrio y miometrio. Además, presenta un efecto inhibidor en la proliferación celular. Su contenido en el interior de la celula dependerá en gran medida de los tres elementos implicados en la ruta de transducción de señales: receptores, proteinas G y la enzima adenilil ciclasa. En el presente trabajo, se ha descrito por vez primera la distribución de los receptores para el péptido intestinal vasoactivo(VIP) en el tracto genital femenino, así como su acoplamiento positivo a la enzima adenilil ciclasa. Por otro lado, se ha purificado parcialmente la enzima adenilil ciclasa de miometrio humano asociada a una proteina semejante a actina. Hasta el momento, no se habia descrito tal asociación pudiendo tener un papel relevante en la regulación de la contracción muscular uterina. La ultima parte del estudio se centra en una situación neoplásica muy frecuente en la mujer como es el leiomioma uterino. Este precisa en la mayoria de los casos cirugia ginecológica. En los resultados obtenidos se muestra alterado el sistema adenilato ciclasa, a nivel de las proteínas G y de la enzima productora de este segundo mensajero, pudiendo tener importancia en la regulación del crecimiento del tumor.

Autor: GARCIA LOPEZ MONICA.
Año: 1998.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FARMACIA.

Resumen: El objetivo inicial de esta tesis doctoral era la contribucion al futuro diseño de una vacuna de origen quimico contra el virus de la Hepatitis A. En este sentido se ha llevado a cabo la sintesis en fase solida de la secuencia HAV-VP3(102-121) y su palmitoil-derivado. Esta secuencia se ha conjugado a tres polimeros sinteticos ramificados mediante enlace disulfuro o amida obteniendose seis inmunogenos de distinta polaridad y orientación de epitopos. Se han formulado ademas las secuencias peptidicas en liposomas mediante encapsulación en su interior, incorporación entre las bicapas fosfolipidicas o unión covalente a la superficie de la vesicula. Todas las formulaciones obtenidas se han caracterizado desde el punto de vista estructural, realizando un estdio mediante dicroismo circular, y desde el punto de vista fisicoquimico, estudiando su interacción con modelos de biomembrana como las monocapas y bicapas fosfolipidicas. Se ha estudiado ademas la antigenicidad de estas estructuras mediante la tecnica de Resonancia en Plasmon superficial. La evaluación inmunologica de la secuencia permite concluir que ésta es una firme candidata aformar parte de una vacuna de origen quimico contra el virus de la Hepatitis A.

Autor: ALBA BASTARRECHEA EVA DE.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUIMICA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA ORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA ORGANICA .

Resumen: La Tesis se centra en el análisis conformacional en disolución de péptidos diseñados. La Técnica fundamentalmente utilizada ha sido la Resonancia Magnetica Nuclear. El estudio ha permitido identificar factores de gran influencia en la formación y estabilidad de la estructura secundaria beta de proteínas. En concreto, en esta investigación se ha hecho hincapié en el análisis y diseño de horquillas y láminas beta. Con respecto de las primeras, se ha estudiado la importancia relativa de la conformación del giro, de las interacciones interhebra y de las propensiones intrinsecas de los aminoácidos. La información obtenida se ha utilizado para diseñar péptidos que fueran capaces de adoptar láminas beta. A su vez, éstos pueden ser utilizados como modelos para extraer información sobre los factores involucrados en la estabilidad de las láminas beta. La investigación realizada puede ser de gran ayuda en el diseño de proteínas y aporta datos de relevancia para el entendimiento de la formación de las horquillas beta, y por lo tanto, puede influir en el conocimiento del mecanismo de plegamiento de proteínas que contengan estos elementos de estructura secundaria.

Autor: MARTINEZ CRESPO ALEJANDRO.
Año: 1997.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: Se han sintetizado péptidos de 14 aminoácidos cuyas secuencias están contenidas en las de antígenos de rechazo tumoral y que además cumplen el patrón estructural "2-6-11" o tienen pequeñas variaciones de éste. El motivo estructural "2-6-11" se caracteriza por estar constituido por péptidos de 14 aminoácidos con los siguientes requisitos: prolina en posición 6, un aminoácido hidrofóbico o lisina en posición 2 y un aminoácido ácido en posición 11. Cuando se incuban estos péptidos en presencia de células linfomononucleares de donantes sanos, inducen la estimulación de los monocitos que se manifiesta con la liberación de IL-1alfa, IL-6 y TNFalfa. Algunos de los péptidos estudiados (T1,T9 y T10) también promueven la proliferación de clones de linfocitos Th1, lo que se manifiesta con un incremento en la liberación de IL-2. Además hemos detectado que éstos péptidos inducen un aumento en la actividad ADNasa presente en algunas subpoblaciones celulares. Los resultados de éste trabajo sugieren que los péptidos estudiados podrían ser utilizados en la inmunoterapia antitumoral.

Autor: MARTINEZ LAUSIN SILVIA.
Año: 1997.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: Un péptido sintético del cual ya se han descrito sus propiedades inmunomoduladoras, NVLGAP KKLNESQAV (Pa), se ha encontrado que estimula la producción de citoquinas IL-1, IL-6, TNF, así como la expresión del marcador de superficie HLA-II-DR en monocitos humanos. En este trabajo se han investigado los caminos de señalización implicados en dicha estimulación. Nuestros resultados demuestran que el péptido activo provoca hidrólisis de fosfoinosítidos, elevación de calcio intracelular y acumulación de c-AMP. Los datos indican que los efectos podrían estar asociados a la activación de proteína-tirosina quinasa. También se encontró que una población de monocitos que unian preferencialmente FITC-Pa y que expresaban CD-16, pudiendo este actuar como receptor para Pa.

Autor: RAMOS GONZALEZ SERNA ELADIO.
Año: 1997.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PROGRAMA DE DOCTORADO: AVANCES EN MEDICINA.

Resumen: Pancreastatina (PST) es un péptido regulador del que se sabe que inhibe la secreción y la acción de la insulina, con efecto glicogenolítico en el hígado. Está presente y es segregado por muchas células endocrinas y cromafines. Alteraciones del metabolismo de la glucosa, insulina y las lipoproteínas son frecuentes en pacientes hipertensos así como en sus familiares de primer grado. Recientemente hemos estudiado a un grupo de pacientes hipertensos no obesos en los que los niveles de PST estaban aumentados comparados con un grupo control, correlacionándose con los niveles de norepinefrina: Hipotetizábamos que la PST junto al sistema simpatoadrenal podía formar parte de la resistencia a la insulina de estos pacientes y que este síndrome metabólico podía jugar un papel en la patogénesis y las complicaciones de la hipertensión. En este trabajo estudiamos la existencia de alteraciones metabólicas, así como niveles plasmáticos de PST, glucagon y catecolaminas en descendientes normotensos de estos pacientes. Para determinar con precisión el estado de insulín-resistencia de los pacientes hipertensos se los sometió a una infusión de somatostatina, insulina y glucosa (350 mg/h, 25 mU/m2min y 6 mg/kg/min respectivamente) determinándose los niveles de glucosa e insulina cada 30 min hasta los 120 min y en ese momento cada 10 min hasta los 180 min obteniéndose así los valores de glucemia e insulinemia en estado estable. Esta técnica permitió separar a los pacientes en dos grupos: insulín-resistentes y no insulín-resistentes. Se seleccionaron entonces sujetos jóvenes normotensos hijos de estos pacientes (Grupo I: hijos de insulín-resistentes. Grupo II: hijos de no insulín-resistentes) a los que se los sometió a una sobrecarga intravenosa de glucosa (SIVG: 330 mg/kg) tras una noche de ayuno. Se tomaron muestras de sangre antes y a los 5, 10, 15, 30 y 60 min tras la sobrecarga. Igual prueba se realizó a un grupo de hijos sanos de sujetos normotensos como control. No se encontraron diferencias significativas en los lípidos entre el grupo I y el II comparados con los controles, sin embargo, el grupo I presentó niveles de colesterol HDL ligeramente inferiores a los controles. Los niveles basales de glucagón, PST, catecolaminas e insulina fueron similares en los tres grupos. El grupo I mostró una mayor respuesta insulínica a la SIVG, aunque sólo hubo diferencias significativas a los 10 y 15 min. La respuesta insulínica en el grupo II fue similar a la de los controles. No hubo diferencias significativas en los niveles de glucemia en ninguno de los momentos de la SIVG entre los tres grupos. Los niveles plasmáticos de glucagón y ácidos grasos libres (AGL) descendieron tras la SIVG en los tres grupos, pero no hubo diferencias significativas en ningún momento. Los niveles plasmáticos de catecolaminas y PST antes y después de la carga de glucosa fueron similares en los tres grupos. Estos resultados sugieren que las catecolaminas y la PST pueden no jugar un papel importante en el desencadenamiento de la resistencia a la insulina y la hiperinsulinemia. Sin embargo, pueden tener parte en la fisiopatología del síndrome una vez establecido. A su vez, la insulina puede jugar un papel estimulando el sistema nervioso simpático (SNS) y por tanto mediando un aumento de los niveles de catecolaminas y PST. La hipertensión borderline es un estado hiperadrenérgico caracterizado por un aumento de la norepinefrina. Las catecolaminas y la PST son potentes antagonistas de la acción de la insulina y por lo tanto pueden empeorar la resistencia insulínica en este síndrome. La resistencia a la insulina y el aumento de la actividad del SNS tenderían a reforzarse mutuamente en un círculo vicioso ocasionando así otros efectos que conducen a factores de riesgo cardiovascular.

Autor: RODRIGUEZ LOPEZ MARTA.
Año: 1997.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA INTERNA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: Se describe un nuevo método para serotipar el Virus de la Hepatitis C (VHC) mediante péptidos sintéticos de las proteínas E1, NS4a, NS4b, NS5a y NS5b, que permite determinar los tipos 1, 2 y 3 y los subtipos 1a y 1b. A partir de 728 péptidos sintetizados (de entre 7 y 16 aminoácidos) y paneles de sueros de indivíduos sanos e infectados con VHC, se seleccionaron 29 péptidos. Estos péptidos, en conjucción con algunos de sus homopolímeros permitieron serotipar el 64% de los VHC de tipo 1, 2 y 3 y diferenciar entre sí el 45% de los subtipos 1a y 1b. La especificidad del ensayo fue del 96%. Se hicieron árboles filogenéticos y se observó que los sueros se distribuían en dos grupos, que se denominaron serotipos alfa y beta. Se comprobó que 21 de los 728 péptidos eran responsables de la asignación de los sueros a los serotipos alfa y beta. El 74,4% de los sueros del serotipo alfa pertenecieron a pacientes respondedores a la terapia con interferón-alfa (IFN-alfa) mientras que el 74,1% de los sueros del serotipo beta pertenecieron a pacientes no respondedores. Se estudió la relación entre los serotipos alfa y beta y algunas variables de los pacientes tales como: edad, sexo, vía de transmisión de la enfermedad, genotipo viral y respuesta al tratamiento con interferón-alfa. Los serotipos alfa/beta parecen estar más relacionados con la edad y la respuesta al tratamiento con interferón-alfa que con el genotipo y son capaces de predecir la respuesta al tratamiento en el 71,2% de los casos.

Autor: ALSINA FERNANDEZ JORDI.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: QUIMICA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA ORGANICA. FACULTAD DE QUIMICA. UNIV. BARCELONA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA FUNDAMENTAL-QUIMICA ORGANICA. BIENIO 1993-1995.

Resumen: En esta tesis se han desarrollado nuevos métodos para la síntesis en fase sólida de péptidos modificados en su extremo C-terminal: péptidos cíclicos, péptidos alcohol, péptidos carbamato, péptidos N,N-dialquil-amida, péptidos éster y péptidos aldehido entre otros. La tesis consta de tres capítulos. En el primero de ellos, se ha descrito la utilización de resinas funcionalizadas en forma de carbonato activo de succinimidilo. En el segundo se ha realizado el diseño, la preparación y las aplicaciones experimentales de un nuevo espaciador bifuncional denominado Backbone Amide Linker (BAL), que implica que la unión del péptido al espaciador se realiza a través de un nitrógeno del esqueleto peptídico y no, como en la estrategia convencional, a través de la función carboxilo del residuo C-terminal. En el tercer capítulo se describe un método que permite evitar la formación de dicetopiperacinas en SPPS según la estrategia Fmoc/tBu.

Autor: DIAZ ACHIRICA PILAR.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: SE HA ESTUDIADO EL MECANISMO DE ACCION DE PEPTIDOS SINTETICOS HIBRIDOS DE CECROPINA A Y MELITINA CON ACCION ANTIBIOTICA SOBRE EL PROTOZOO PARASITO LEISHMANIA. ESTOS HIBRIDOS PRESENTAN UNA ACCION ANTIBIOTICA SUPERIOR A CECROPINA A Y NO SON HEMOLITICOS, COMO OCURRE CON LA MELITINA. EL MAS EFECTIVO DE LOS ANALOGOS TESTADOS, CON UNA LD50 DE 1 UM ES CA(1-8) M(1-18), FORMADO POR LOS 8 PRIMEROS RESIDUOS DE CECROPINA A Y LOS 18 PRIMEROS DE MELITINA. EL PEPTIDO ACTUA MUY RAPIDAMENTE SOBRE PROMASTIGOTES DE L.DONOVANI, DE FORMA DEPENDIENTE DE LA TEMPERATURA Y DEL POTENCIAL DE MEMBRANA, PERO NO DEL PH. PROVOCA PERMEABILIZACION DE LA MEMBRANA DEL PARASITO, CON EQUILIBRIO DEL PH INTRACELULAR CON EL EXTERNO, COLAPSO DEL POTENCIAL DE MEMBRANA Y DISMINUCION DE LOS NIVELES INTRACELULARES DE ATP. LA PRIMERA ETAPA DE INTERACCION DEL PEPTIDO ES ELECTROSTATICA, YA QUE ES INHIBIDA POR ALTA FUERZA IONICA Y PRESENCIA DE POLIANIONES. LIPIDOFOSFOGLICANO, UN OLIGOSACARIDO ANIONICO PRESENTE EN LA MEMBRANA, PROTEGE PARCIALMENTE AL PARASITO. LA FORMA INTRACELULAR DEL PARASITO, EL AMASTIGOTE ES ALTAMENTE RESISTENTE A LA ACCION DEL PEPTIDO, PERO NO CUANDO SE ENCUENTRA EN EL INTERIOR DEL MACROFAGO, INDICANDO UN EFECTO DEL PEPTIDO SOBRE ESTA CELULA, POR INDUCCION DE NO. EL PEPTIDO APLICADO EN FORMA TOPICA SOBRE RATONES INFECTADOS CON L. MAJOR PROVOCA LA REMISION DE LA ULCERA, Y ES ACTIVO EN CEPAS DE MULTIRRESISTENCIA A FARMACOS.