PROCESOS METABOLICOS, 2

Autor: ALVAREZ VASQUEZ FERNANDO.
Año: 1999.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: BIOLOGIA.

Resumen: En un intento de lograr una base racional para la optimización de la producción de ácido cítrico por Aspergillus niger, se ha desarrollado un modelo matemático del metabolismo de estehongo filamentoso en condiciones de acumulación de ácido cítrico. La información relevante sobre la estructura de la ruta, que va desde el sustrato presente en el medio a la salida del ácido cítrico al exterior celular, así como la información disponible sobre las concentraciones, flujos, actividades enzimáticas y cinéticas enzimáticas en el estado estacionario han sido integradas en un modelo matemático. Entre las distintas alternativas para representar el comportamiento del sistema se ha decidido utilizar la representación S-system dentro del formalismo power-law. Este tipo de representación nos permite evaluar no sólo la exactitud del modelo para representar un estado estacionario del sistema(su consistencia) sino también la robustez de la representación, es decir, la capacidad a resistir pequeños cambios en los valores de los parámetros sin una variación significativa en sus respuestas y comportamientos. La caracterización del modelo, su consistencia y la robustez del mismo constituyen un estudio preliminar necesario en orden de determinar si es razonable y merecedor de un análisis mas refinado. En esta tesis se muestra que el modelo del metabolismo en Aspergillus niger es consistente, capaz de describir el estado estacionario de referencia y, coherente con la evidencia experimental disponible. También se demuestra que el modelo es robusto y se evalúa la calidad del modelo. Dicho modelo constituye la base para la optimización del sistema en orden de maximizar la velocidad de producción de ácido cítrico en condiciones donde la viabilidad celular esté garantizada. La distribución y magnitudes de las ganancias logarítmicas que caracterizan la propagación de las señales bioquímicas a través del sistema, indican que cambios en las variables independientes son razonablemente amplificadas en la mayoría de los casos. Los resultados de los análisis dinámicos realizados indican un tiempo de respuesta también razonable, lo que provee indicación adicional de la robustez del modelo. En la optimización del modelo se pretende encontrar un perfil de actividades enzimáticas que produzcan la máxima velocidad de producción de ácido cítrico, pero manteniendo al mismo tiempo las actividades enzimáticas dentro de rangos fisiológicamente aceptables. La optimización esta basada en el hecho de que las representaciones S-sistem se pueden linealizar en el estado estacionario, lo que permite la aplicación de técnicas de programación lineal(Torres et al., 1996b;1997;Rodríguez-Acosta eta al., 1999). Los resultados muestan que:i)aunque el perfil de actividades enzimáticas que muestran las cepas disponibles de Aspergillus niger en la fase de producción de ácido cítrico produce grandes cantidades de éste ácido; éste es, no obstante susceptible de mejora pudiéndose llegar a obtener hasta 5 veces mas de ácido cítrico con el mismo gasto metabólico de síntesis proteica; ii) cuando la concentración total de enzima se duplica con respecto a su valor basal, la producción de ácido cítrico se incrementa más de 12 veces. Valores mayores de producción de ácido cítrico(hasta 50 veces el valor basal), se obtienen cuando la concentración basal total de enzima se amplifica por un factor de 10; iii)la búsqueda sistemática de la mejor combinación de subgrupos enzimáticos muestra que, bajo las condiciones experimentales a las que se sometió el modelo, se necesita modificar un mínimo de 13 enzimas para obtener incrementos significativos en la producción de ácido cítrico. Esto implica que es improbable un aumento en la producción de cítrico con la modulación de una o dos enzimas, lo que está en concordancia con los resultados publicados en este campo y en otros afines(Torres et al.,1997; Thomas and Feel, 1998;Stephanoupoulos et al.,1998).

Autor: SANTAMARIA RAMIRO MONICA.
Año: 1999.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE LA LAGUNA.

Resumen: Se ha estudiado la presencia de ATPasa en la membrana peribacteroidea de simbiosomas de nódulos radicales de soja infectada con Bradyrhizobium japonicum USDA110. Para obviar el problema de la contaminación cruzada con otras fracciones nodulares de desarrolló un protocolo de purificación más exhaustivo que los empleados habitualmente por otros grupos de investigación. La actividad ATPasa de determinó i) mediante valoración enzimática del ADP producido, ii) mediante valoración colorimétrica del fosfato, iii)por HPLC de los hicleótidos de adenina. Los diferentes tipos de ATPasas se distinguieron por su dependencia del pH y por el empleo de inhibidores específicos. No se encontró actividad ATPasa P ni V enlos sibiosomas. El empleo de técnicas inmunológicas tampoco permitió la detección de ATOasas en simbiosomas, si no se encontró energización de la membrana perribacteroidea dependiente de ATP o de pirofosfato. Estos datos contradicen el modelo comúnmente aceptado en el que la presencia de una ATOasa en la membrana peribacteroidea es indispensable para el transporte de solutos entre los simbiontes. Se concluye que la presencia de ATPasa comunicada por otros autores puede deberse a contaminación con otras fracciones subnodulares, lo que implica la necesidad de cambiar el modelo establecido para la simbiosis rizobio-leguminosa. Además, se ha encontrado una actividad adenilato kinasa asociada a los simbiosomas, que se activa tras su solubilización con urea o detergentes no iónicos. Esta actividad es cinéticamente distinguible de otras adenilato kinasas nodulares, y puede desempeñar un papel importante en el proceso simbiótico.

Autor: GORBACHO GODES ADELINA.
Año: 1999.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: 1- La síntesis de L-cisteína a apartir de la L-metionina en hepatocitos requiere GSH. 2- El bloqueo de la transulfuración por inhibición de la y-cistationasa con propargilglicina PPG aumenta la concentración de L-cisteína se mantiene constante por un incremento de la degradación proteica y por una disminución de la concentración de GSH que puede contirubir a ahorrar L-cisteína. La adminsitración de N-acetilcisteína revierte parte de estas alteraciones. 3- La inhibición de la y-cistationasa se rfleja en sangre porque el cociente L-metionina/L-cistina y la concentración de L-cistationina están aumentadas en ratas tratadas con PPG si se compara con ratas control. 4- La concentración de L-cistationina y L-mentionina fue significativamente más elevada en los pacientes con pancreatitis, colecistitis y apendicitis si se compara con controles. La concentración de L-cistína no cambió en ningún grupo. 5- El cociente L-mentioninal/L-cistina fue significativamente mayor el cociente L-glutamina/L-cistina fue significativamente menor en todos los pacientes con procesos inflamatorios abdominales agudos si se compara con el grupo control. Este trabajo apoya que ambos cocientes son buenos marcadores para evaluar el metabolismo de los aminoácidos azufrados y abre la puerta para futuros estudios donde se evalue el uso de N-acetilcisteína como aminoácidos esencial en los procesos inflamantarios abdominales agudos.

Autor: CHAZARRA PARRES SOLEDAD.
Año: 1999.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: Polifenol oxidasa (PPO) es una cuproproteína ampliamente distribuida en la naturaleza que cataliza dos reacciones acoplados rindiendo o-quinonas. Las quinonas son muy reactivas y sufren transformaciones no enzimáticas dando lugar a la formación de melaninas y otros compuestos coloreados, pardos o negros, responsables del pardeamiento vegetal. La enzima se encuentra fundamentalmente en la membrana cloroplastídica y se puede encontrar en estado inactivo o latente. Esta enzima es muy importante en la industria alimentaria ya que la formación de melaninas y pigmentos pardos modifica las cualidades organolépticas del vegetal. Además PPO causa pérdidas en el valor nutricional, bien por oxidación de compuestos fenólicos con capacidad antioxidante, o debido a la reacción de las quinonas con aminoácidos, péptidos y proteínas. En el caso particular de luchuga, existe un fenómeno de pardeamiento en el que está implicada PPO, conocido como moteado rojizo y caracterizado por la aparición de manchas marrones a lo largo de la vena central de la hoja, que posteriormente pueden extenderse a toda la hoja. A pesar del interés económico que la conservación de lechuga fresca puede tener, no se ha caracterizado la enzimade de lechuga de origen cloroplastídico. Así, el objetivo de esta Tesis Doctoral fue la obtención y caracterización de PPO de lechuga ligada a membranas del cloroplasto. En la primera parte de esta Memoria se obtuvo por primera vez la enzima parcialmente purificada en forma latente y con capacidad hidroxilante, se caracterizaron espectofotométricamente tanto su actividad difenolasa como su actividad monofelasa, no detectada hasta ahora para la enzima de lechuga, se estudió el fenómeno de latencia de la enzima y también el fenómeno de inactivación suicida, que ha sido descrito para la enzima activa de otras fuentes pero nunca para la enzima latente. La observación de un complejo comportamiento cinético durante los estudios realizados en esta primera parte nos llevó a la caracterización estructural de la enzima. A pesar de la dificultad que supone la purificación de enzimas en extractos vegetales y de las pocas fuentes en que se ha conseguido purificar PPO, en esta Memoria se ha purificado la enzima mediante cromatografía de exclusión molecular en Sephacryl HR-S200 y cromatografía de intercambio iónico en DEAE y en QMA, consiguiendo la purificación hasta homogeneidad aparente, obteniéndose una sola banda en electroforesis desnaturalizante con teñido de plata. Se han determinado su peso molecular y su coeficiente de sedimentación (10,2 y 4,1 S) encontrándose que PPO de lechuga es un tetrámero formado por subunidades de 60 kDa. Al estudiar el comportamiento cinético de la enzima purificada se ha encontrado que presenta cooperatividad cinética positiva, con un valor de índice de Hill muy alto (4), comportamiento no descrito hasta ahora para ninguna PPO. Esta cooperatividad es dependiente del pH y de la activación por SDS, posible equivalente biológico de los lípidos, desapareciendo una vez que la enzima se encuentra totalmente activada por choque ácido o por SDS por lo que podría representar un complejo mecanismo de regulación de la actividad in vivo no descrito hasta el momento, que haría pensar en la importancia de esta enzima para el desarrollo del vegetal.

Autor: MENEU MONTOLIU VICENTE.
Año: 1999.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DPTO. DE BIOQUIMICA/FACULTAD DE MEDICINA/UNIV.VALENCIA.

Resumen: El deterioro progresivo vascular que se produce en la diabetes es consecuencia de diversos factores, entre ellos una disfunción endotelial secundaria a un incremento del estrés oxidativo y una alteración de la acción del óxido nítrico. La arginina y alguno de sus metabolitos realcionados pueden actuar conantioxidantes y, al menos, dos vías relacionadas con ellas, la síntesis de poliaminas y la síntesis de óxido nítrico (NO) se encuentran deterioradas en la diabetes, pudiendo estar relacionadas con la angiopatía diabética. Puesto que la arginina es el sustrato precursos tanto para la síntesis de pliaminas como para la de NO, la disponibilidad de ellas en condiciones fisiológicas, patológicas o clínicamente manipuladas podría condicionar la funcionalidad de ambas vías. Para comprobarlo se ha realizado un estudio comparativo del estrés oxidativo y del metabolismo de la arginina entre sujetos diabéticos y sujetos no diabéticos. Y posteriormente, se ha realizado un ensayo clínico sobre los sujetos diabéticos para averiguar los efectos de la suplementación moderada de arginina sobre los parámetros anteriores. Los resultados muestran un aumento significativo de MDA en plasma y orina y un aumento de carbonilos en los sujetos diabéticos, que indican un deterioro oxidativo superior en los diabéticos. Igualmente hay unos niveles mas elevados de poliaminas en sangre y de nitratos en orina en los diabéticos. Con el suministro de arginina se tiende a normalizar los niveles de poliaminas y los niveles de MDA urinario, lo que indicaría una mejoría del daño oxidativo, y posiblemente, una mejoría de la disfunción endotelial.

Autor: ROJO MARTINEZ GEMMA.
Año: 1999.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: MEDICINA .

Resumen: El objetivo general ha sido el estudio de las interrelaciones entre los ácidos grasos (AG) de la dieta y diferentes componentes corporales, habiéndose abordado por medio de un estudio clínico y experimental. Para el estudio experimental se han utilizado seis grupos de ratas alimentadas con dietas de diferente composición grasa, cuyo objetivo ha sido determinar la contribución de la dieta y del tejido de origen (timocitos, adiposo, músculo y páncreas) a la varianza de la composición en AG corporal. El estudio clínico se ha realizado en pacientes con diabetes mellitus (DM) tipo 1 y controles sanos, siendo su objetivo estudiar las relaciones entre la composición en AG de los fosfolípidos y las lipoproteínas séricas con la ingesta de alimentos, así como con los fenómenos clínicos de la DM. Las principales conclusiones han sido: - La variabilidad debida al tejido es mucho mayor que la atribuible a la dieta para la mayor parte de los AG, con la salvedad del ácido palmítico y algunos n-3 de cadena larga. - El comportamiento del tejido y su sensibilidad frente a la manipulación dietética, fué característica para cada tejido. - En humanos los AG de los fosfolípidos y de las lipoproteínas séricas reflejan el tipo de grasa de la dieta, pero los niveles de cada AG no dependen sólo de su presencia en la ingesta sino de la proporción n-6/n-9 y n-6/n-3 de la dieta. - Los pacientes con DM presentan un patrón de AG diferente al de personas no diabéticas. Esta diferencia no puede ser explicada solo por un diferente comportamiento alimentario, sino que, probablemente, sea secundario a la menor actividad desaturasa de las personas con DM.#

Autor: ROIG MARLES ROSER.
Año: 1999.
Universidad: ROVIRA I VIRGILI.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD QUÍMICA (URV).

Resumen: Des del momento que se ha observado la relación entre los radicales libres y el estrés oxidativo en el desarrollo de enfermedades como el cáncer y la arteriosclerosis, ha surgido la hipótesis de que el consumo de vino podría ser un factor a tener encuenta en la prevención de estas enfermedades ya que los compuestos fenólicos del vino se han identificado como sustancias antioxidantes. En el presente estudio se ha diseñado un modelo animal de consumo voluntario de vino o alcohol en dosis moderadas o excesivas utilizando ratas macho Wistar. Estos animales no presentan problemas nutricionales y además el modelo permite diferenciar los efectos del alcohol de los efectos de los componentes no alcohólicos del vino. Se ha determinado como afecta el consumo moderado de vino o alcohol al metabolismo oxidativo de estos animales, estudiando los niveles de malondialdehido, vitamina E y C, niveles de glutatión y actividades de enzimas antioxidantes. Los resultados obtendios muestran como el con sumo moderado de vino presenta un efecto protector a corto y largo plazo. También se ha estudiado in vivo como afecta un consumo excesivo de vino o alcohol a los niveles de peroxidación lipídica y glutatión a largo plazo. La cantidad de compuestos fenólicos contenidos en dicho vino no puede contrarrestar la oxidación hepática causada principalmente por el alcohol. Para determinar el potencial antioxidante de algunos flavonoides presentes en el vino se ha diseñado un estudio in vitro con hepatocitos de rata de línea celular Fao.La acción antioxidante de cada compuesto depende, además de su estructura química de las condiciones experimentales, pero se ha observado que en una situación de estrés oxidativo todos los flavonoides protegen la integridad de la membrana plasmática a corto y largo plazo e incrementan la respuesta antioxidante enzimática principalmente a largo plazo.

Autor: OZALLA ROMERO DEL CASTILLO M DOLORES.
Año: 1999.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DERMATOLOGIA.

Resumen: Antecedentes: El conocimento sobre la relacion entre hexaclorobenceno (HCB) y porfiria cutanea tarda en humanos se reduce al episodio ocurrido en Turquia (1955-1959). Hasta el momento, no se conocen los valores umbrales de exposicion a HCB capaces de inducir porfiria cutanea tarda. Objetivos: Analizar las concentraciones de HCB serico y la excrecion de porfirinas urinarias en los habitantes de la poblacion de Flix (Tarragona), situada en las proximidades de una empresa productora de compuestos organoclorados, con concentraciones elevadas de HCB atmosferico y conocer si el HCB ocasiona alteraciones en el patron de excreccion de porfirinas urinarias. Diseño: Estudio transversal. Marco: Unidad de Porfirinas. Departamento de Dermatologia. Barcelona. España. Sujetos de estudio: Participaron en el estudio un total de 604 habitantes de Flix. Mayores de 14 años de edad, que proporcioaron muestras de sangre y orina(185 de los participantes eran trabajadores de la empresa electroquimica). Mediciones: Se determinó el HCB sérico con cromatografia de gases acoplada a deteccion por captura de electrones. La concentracion de porfirinas totales se realizo por espectrofluorimetria. El patron de excrecion de las fracciones de porfirinas se determino por cromatografia liquida de alta presion. Resultados: Se detectó HCB en todas las muestras de sangre (media, 39,8 ng/ml, rango, 1,1-1.616 ng/ml), siendo superior en el grupo de trabajadores de la empresa electroquimica. La concentracion (media +- DE) de porfirinas totales en la poblacion fue de 98+-69 nmodl/l (rango, 9-1.009 nmol/l). La unica muestra de orina con aumento en la concentracion de porfirinas totales presento un incremento de uroporfirina y heptacarboxiporfirina similar al patron observado en la porfiria cutanea tarda. En las 603 muestras de orina restantes, la coproporfirina fue la fraccion predominante. Conclusiones: La exposicion ambiental y la acumulacion corporal de HCB en flix no parecen suficientes para desencadenar alteraciones en la biosintesis del hem. (Arch Dermatol 1999,135:400-404)

Autor: BERENGUER PINA JOSE JAVIER.
Año: 1999.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: El manejo perioperatorio de los pacientes tratados con trasplante ortotópico de hígado exige el control de la función renal, ya que la insuficiencia renal es un factor importante de mal pronóstico. De ahí la necesidad de profundizar en el desarrollo de técnicas que midan la función renal y que cuantifiquen con precisión el índice de filtración glomerular, dado que la determinación de creatinina sérica aislada ofrece una valoración muy limitada del estado de la función renal. OBJETIVOS: 1.- Determinar el comportamiento de la función renal durante las distintas fases intraoperatorias del trasplante ortotópico de hígado, y comprobar si existen diferencias respecto del valor basal. 2.- Hacer un seguimiento de la función renal, de los pacientes que no precisen diálisis crónica durante los quince días posteriores a la intervención quirúrgica y comprobar si existen diferencias respecto del valor basal. 3.- Calcular el índice de filtración glomerular por medio de la determinación de la cistatina C en plasma, y compararlo con el valor encontrado por el cálculo del aclaramiento de creatinina, en los pacientes trasplantados de hígado que no precisaron diálisis mantenida tras el trasplante. PACIENTES Y MTODOS: se han estudiado 54 pacientes adultos sometidos a trasplante ortotópico de hígado mediante técnica de PIGGY-BACK, PARMETROS PLASMTICOS: creatinina, BUN, sodio, osmolaridad y cistatina C. PARMETROS URINARIOS: creatinina, volumen de diuresis, tiempo de diuresis y osmolaridad. PARMETROS CALCULADOS: Aclaramiento de creatinina, aclaramiento de agua libre, excreción fraccional de sodio y el índice de filtración glomerular calculado a partir de la concentración de cistatina C plasmática. Momentos de la toma de muestras. A1 - Tras la inducción anestésica, cinco minutos antes de comenzar la disección. Se considera el momento basal. A2 - Cinco minutos antes de proceder al pinzado de la vena porta. B - Cinco minutos antes de finalizar la fase anhepática. C - Cinco minutos antes de finalizar la intervención. D - 24 horas tras la intervención. E - 72 horas tras la intervención. F - 15 días tras la intervención. Previamente se excluyeron del estudio: los pacientes retrasplantados, aquellos en los que se objetivó alguna alteración en la recogida de muestras, los que fallecieron antes de los quince días postrasplante, los que precisaron diálisis mantenida, los que desarrollaron disfunción primaria del injerto y los que presentaron un rechazo del injerto que no revirtió. RESULTADOS: La media del valor basal de la creatinina (A1) es de 0.83 mg/dL, situándose dentro del intervalo de referencia (0.6-1.3 mg/dl). Permanece estable a lo largo de la intervención: al final de la fase de disección (momentos A2 y B) y aumenta significativamente (p

Autor: PUJOL PERPIÑA GEMMA.
Año: 1999.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FARMACIA.

Resumen: Arabidopsis thaliana contiene dos secuencias de cDNA que codifican dos isoformas diferentes de la subunidad catalitica de proteina fosfatasas de tipo X. Hemos aislado y caracterizado los genes correspondientes, los cuales presentan un alto grado de conservacion tanto a nivel de su secuencia como de su estructura. El analisis de expresión temporal y espacial de ambos genes demuestra que tienen el mismo patron de expresión. Experimentos de inmunolocalización por tecnicas de inmunofluorescencia y microscopia electrónica muestran que las proteinas PPX se encuentran principalmente localizadas en el interior de un determinado tipo de plastidos a nivel de las celulas epidermicas de la raiz de Arabidopsis thaliana. Esta expresión constitutiva y generalizada de los genes PPX1 y PPX1, y la presencia de las proteinas PPX-1 y PPX-2, en todos los orgaos analizado sugiere que ambas isoformas estan implicadas en una funcion esencial de Arabidopsis thaliana. Aunque las PPX tienen una extensa distribucion en los organismos eucariotes, no hemos podido detectarlas en un organismo eucariota inferior. Esto sugiere que a pesar del alto grado de conservación de la secuencia de todas las PPX clonadas hasta el momento, estas podrian estar desarrollando funciones diferentes en los mencionados organismos.

Autor: MARTIN CANO JOSE ANTONIO.
Año: 1998.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .

Resumen: La gamma-cistationasa es uno de los enzimas fundamentales del metabolismo de los aminoácidos azufrados. Se ha observado que su actividad varía en diversas condiciones fisiológicas y patológicas. Con la transición fetal-neonatal se detecta un aumento de la gamma-cistationasa. Este aumento se correlaciona con mayores niveles de proteína y de mRNA de gamma-cistationasa en adultos que en neonatos y en éstos que en fetos. En rata, hemos observado que en animales viejos más del 50% de los cristalinos carece de actividad gamma-cistationasa, y que en estos cristalinos sin actividad tampoco se detecta proteína gamma-cistationasa. El tratamiento con antioxidantes evita parcialmente la pérdida de proteína gamma-cistationasa en cristalino de rata vieja. En el caso de la infección por el virus de la inmunodeficiencia humana hemos encontrado menores niveles de GSH en pacientes con SIDA que en controles sanos, pero no hemos encontrado en sangre que el cociente GSH/GSSG indique un estrés oxidativo. Por otro lado, los pacientes con SIDA poseen una actividad gamma-cistationasa hepática casi ausente comparándola con controles sanos, lo que podría explicar, al menos parcialmente, los bajos niveles de cisteína observados en estos pacientes.

Autor: HERRMANN MATOS STELA MARIS .
Año: 1998.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: En el presente trabajo se utilizaron seis grupos de ratas de raza Wistar (n=8), con el objeto de analizar en ratas con obstrucción biliar las alteraciones en el sistema de biotransformación mediado por el citocromo P-450 e investigar los efectos de los flavonoides rutina y quercitina sobre dicho sistema y confirmar o descartar la presencia de efectos mutagénicos de los referidos flavonoides. La administración de los flavonoides rutina y quercitina contrarrestó parcialmente las alteraciones en las enzimas séricas (ALT, AST y FA), la esplenomegalia y las anomalías histológicas en ratas con obstrucción del conducto biliar. El fenómeno podría relacionarse con su efecto antioxidante, puesto de manifiesto por la reducción de los niveles de TBARS en el hígado y el aumento en la concentración hepática de glutatión. Previno parcialmente la disminución hepática de citocromo P-450 y la reducción en la fluidez de la membrana microsómica inducidas por la obstrucción del conducto biliar, este efecto se acompañó de modificaciones selectivas en diversas monooxigenasas dependientes del citrocromo P-450, produciéndose tanto inhibiciones como estimulaciones en la actividad de las mismas. El estudio de la mutagenicidad de ambos flavonoides mediant el test de micronúcleos permite descartar la existencia de efectos mutagénicos de la rutina. Estos podrían estar presentes en el caso de la quercitina, aunque a dosis muy superiores a las administradas en ratas con obstrucción del conducto biliar.

Autor: MARTINEZ PEREZ IRENE.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: Esta Tesis Doctoral recoge los primeros resultados obtenidos en el marco de un proyecto multicéntrico en el que participan la Universitat Autónoma de Barcelona, el Centre Diagnóstic Pedralbes de Barcelona y diversops hospitales. El objetivo general ha sido evaluar el interés diagnóstico de la espectroscopía de resonancia magnética (ERM) de humanos a 1,5 Tesla utilizada en combinación con la exploración clínica rutinaria por imagen de resonancia magnética (IRM) en pacientes con tumores cerebrales. Para ello, se pretende definir las características espectroscópicas diferenciales de diversos tipos tumorales así como realizar aproximaciones a la automatización del análisis de los datos espectrales mediante la aplicación de técnicas computacionales de reconocimiento de patrones, con el fin de facilitar su utilización en el ámbito clínico. Paralelamente, se realizan estudios bioquímicos complementarios sobre extractos de biopsias postiquirúrgicas de los pacientes examinados, obteniéndose espectros de RMN de alta resolución "in vitro" en un espectrómetro de 9,4 t, con el fin de complementar la determinación de las características blioquímicas de los diferentes tipos tumorales así como de poner a punto los parámetros para la aplicación de las técnicas de reconocimiento de patrones sobre los espectros "in vivo". Los resultados obtenidos mediante estas técnicas permiten la correcta clasificación de un alto procentaje (89%) de los grupos de tumores bien representados en la base de datos, habiéndose iniciado los análisis sobre los espectros "in vivo". Los estudios paralelos sobre biopsias, además de contribuir a la caracterización de los patrones espectrales, han posibilitado la correlación entre la detección de señales lipídicas "in vivo" con la presencia de gotículas lipídicas producidas por la necrosis tisular. Con los espectros "in vivo" caracterizados, se ha elaborado un conjunto de patrones espectrales de los diferentes tipos tumorales que pueden resultar muy útiles a la hora de realizar un diagnótico clínico, sobre todo tomados junto con los datos proporcionados por IRM. Finalmente, se estudiaron también casos de abscesos cerebrales, que presentaron un patrón espectral (resonancias de aminoácidos, lactato, acetato) característico y muy diferente del de todos los tumores analizados.

Autor: LLORENS POCA NURIA.
Año: 1998.
Universidad: ROVIRA I VIRGILI.
Centro de lectura: QUIMICA.

Autor: BENITO CALVO ENRIQUE.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: En los procesos patológicos de shock endotóxico se produce un fracaso pulmonar asociado a la pérdida de surfactante pulmonar. Ni la endotoxina ni sus mediadores inflamatorios TNF, IL-1 y PAF, producidos por células fagocíticas activadas por el lipopolisacárido, fueron capaces de disminuir el metabolismo del surfactante alveolar en los pneumocitos tipo II, células alveolares encargadas de la producción de este material tensoactivo, sino que lo aumentaron. Fueron los radicales libres de oxígeno, producidos de forma importante por los macrófagos alveolares, los mediadores de la endotoxina que se encuentran implicados en esa patología, al inactivar o alterar los sistemas enzimáticos encargados de la biosíntesis y secreción de surfactante en los pneumocitos tipo II.

Autor: CALCERRADA REDONDO M. CARMEN.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: El PAF es un autacoide fosfolipídico que se ha implicado en numerosos procesos fisiológicos y patológicos. Se han caracterizado receptores de PAF en cerebro asignándole un papel neuromodulador en el SNC. En este trabajo se ha intentado determinar de forma detallada los mecanismos de transducción del PAF en cerebro. Los resultados han puesto de manifiesto que el PAF es capaz de activar la PLC, generando IP3 y DAG, hecho que produce la activación de la PKC. También es capaz de activar la fosforilación en tirosina de las proteínas pl25FAK y p130cas en hipocampo y en corteza cerebral; mediante un mecanismo dependiente de calcio e independiente de PKC. Por otro lado se ha encontrado una relación entre el PAF y el NO en el hipocampo que desemboca en un aumento de cGMP. Por último, los resultados han puesto de manifiesto la existencia de receptores de PAF en la envuelta nuclear, los cuales son capaces de acoplarse a los sistemas de transducción del núcleo.

Autor: DIAZ GONZALEZ KEYBELL MARIELLA.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: Nuestros resultados muestran las primeras evidencias experimentales de la unión de la uteroglobina (UG) a microsomas y membranas plasmáticas, mediante su interacción con un componente de membrana de naturaleza proteíca. Esta unión ocurre mediante interacciones hidrofóbicas y depende del estado de óxido-reducción de la UG. Por otra parte, la UG ejerce una acción mitogénica en cultivos de células NB2, la cual no parece estar mediada por el receptor de prolactina ni por el receptor de interleuquina 2. Finalmente, la UG de conejo y la UG humana recombinante estimulan la división celular del embrión y la diferenciación al estado de blastocistos. La activación de quinasas de proteínas parece estar involucrada en dicha acción, ya que el tratamiento con el inhibidor de tirosina quinasas, genisteína inhibió completamente el incremento del desarrollo y de la proliferación del embrión. Además la UG produce un rápido incremento en la fosforilación en tirosina de algunas proteínas embrionarias. Asimismo, la UG favorece la implantación del embrión, tanto in vitro como in vivo. Estos resultados sugieren que la UG puede ser un factor fisiológico importante para el desarrollo e implantación del embrión.

Autor: ESCUREDO GARCIA DE GALDEANO PEDRO.
Año: 1997.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOMEDICAS .

Resumen: Se han estudiado los efectos del nitrato y la oscuridad continua, por separado, en nódulos de judía y guisante. El tratamiento de ambas plantas con nitrato 10 mM inhibe la actividad nitrogenasa en un 85% y retienen virtualmente intacta su capacidad defensiva antioxidante tras 2 días de exposición al nitrato, sin embargo, en los nódulos tratados durante 4 días con nitrato se produce una importante disminución de antioxidantes y se acumulan proteínas modificadas oxidativamente. La exposición de plantas de guisante y judía a 1 día de oscuridad causa una inhibición del 96% en la actividad fijadora de nitrogeno. En judia esta inhibición es debida a una limitación drástica del aporte de sacarosa a las células infectadas y, consecuentemente de sustratos respiratorios a los bacteroides. La exposición a 2 días de oscuridad provoca una caída moderada de los antioxidantes de los nódulos que se intensifica a los cuatro días. La ascorbato peroxidasa se localiza principalmente en el parenquima modular y en la zona infectada. La inmunolocalización de este enzima por microscopía electrónica indica que el enzima se encuentra principalmente en el citosol de las células infectadas de los nódulos. Los trioles de glutation y homoglutation pueden separarse de manera sensible y cuantificarse. Se ha demostrado que la estimación del daño oxidativo a las proteínas nodulares es un indicador de estrés oxidativo más sensible y adecuado que la peroxidación de lipidos.

Autor: GIL VILLARINO ALMUDENA .
Año: 1997.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: Se han estudiado los cambios inducidos en los niveles de colesterol plasmático y hepático como respuesta a la suplementación a la dieta con aceite de coco (rico en SFA, 12:0 y 14:0) y aceite de pescado (rico en PUFA n-3). Con objeto de incidir en un mejor conocimiento de los mecanismos responsables de dichos cambios, se analizó con detalle la composición lipidica de las membranas microsomales y se correlacionó con la actividad enzimática HMG]CoA reductasa (enzima clave en la síntesis del colesterol. De los resultados obtenidos cabe destacar la rapida respuesta obtenida en la incorporación de los ácidos de las dietas a las membranas microsomales y como estas perturbaciones implican una rapida disminución de la actividad reductasa para ambas dietas.

Autor: LOPEZ TELLEZ ANTONIO.
Año: 1997.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA. BIOLOGIA MOLECULAR Y QUIMICA ORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: PLAN ANTIGUO.

Resumen: Con el objetivo de conocer las repercusiones renales del ejercicio físico intenso en nadadores adolescentes tras la realización de un test de campo en un medio de entrenamiento habitual, se determinaron las tasas de excrección de albumina urinaria y proteina fijadora de retinol (TEA y PFR) como marcadores tempranos de daño renal y las caracteristicas antropométricas de los individuos sometidos a estudio. Del analisis de los resultados obtenidos se deriva que nuestros nadadores presentan caracteristicas antropométricas similares a los nadadores de competición de otros ámbitos. Tras realizar un esfuerzo de intensidad moderada-alta, se produce una lateración de la membrana de filtración glomerular que es reversible y no se objetivaron alteraciones tubulares, así como un aumento del catabolismo proteíco. Creemos conveniente hacer controles periódicos a los deportistas para valorar la incidencia y recurrencia de la microalbuminuria post-esfuerzo. También serán necesarios estudios de seguimiento a largo plazo para valorar la incidencia de patología renal en deportistas.