PROTEINAS, 14

Autor: GONZALEZ BARROSO M. MAR.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA ANIMAL II (FISIOLOGIA ANIMAL) PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA ANIMAL COMPARADA: SISTEMAS FUNCIONALES Y METODOLOGIA.

Resumen: La elevada actividad termogénica del tejido adiposo pardo se debe a la actividad de la proteína desacoplante (UCP) que se localiza en la membrana interna mitocondrial. La UCP desacopla la respiración de la síntesis de ATP, ya que permite la re-entrada de los protones a la matriz mitocondrial. La actividad de la UCP se encuentra regulada por nucleótidos de purina (inhibidores) y ácidos grasos (activadores). Existe un conocimiento muy limitado acerca de la organización estructural de la UCP y de los dominios implicados en el transporte, así como en su regulación por los ácidos grasos y los nucleótidos. Por esta razón, el objetivo primordial de esta Tesis ha sido el estudio de dominios que participan en el control del transporte en la proteína. Los resultados recogidos en esta memoria de Tesis muestran la identificación de dos dominios en la UCP importantes para la regulación del transporte en la proteína. Por un lado, se ha demostrado que el extremo C-terminal participa en la modulación de la acción de los ácidos grasos y a partir del estudio de un mutante que es el doble de sensible a los ácidos grasos que la UCP salvaje, se han obtenido detalles sobre la función de la proteína en ausencia de ácidos grasos. Por otro lado, la región comprendida entre la 5 y 6 alfa hélice transmembranal ha resultado ser clave para el control de la actividad de la proteína, no sólo desde el punto de vista de sus ligandos reguladores, sino incluso para determinar las especies que va a transportar. Finalmente, se demuestra que también los dominios que conectan las hélices transmembranales 1 y 2 y 3 y 4, participarían junto a la región entre las hélices 5 y 6, en el control del transporte en la UCP.

Autor: LALLENA JIMENO M. JOSE.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: La clonación de cDNAS de 4.1 ha permitido identificar, por primera vez, la presencia de 4.1 en el retículo endoplasmático y la disbución de varias isoformas en un mismo compartimento celular. La mayor parte deL trabajo se ha centrado en la caracterización del posible papel que la proteína 4.1 puede estar desarrollando en el núcleo. Los resultados obtenidos demuestran que la proteína 4.1 es un componente del nucleoesqueleto celular que se asocia a proteínas implicadas en el procesamiento del pre-mRNA. Además se ha mostrado que una de las isoformas de la proteína 4.1 nucleares se distribuye en el citoplasma en situaciones de estrés celular.

Autor: LOZANO CASTRO JOSE.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: Mediante el sistema de dos hibridos en levadura se ha identificado a la proteina hnRNP A1 como un nuevo substrato especifico y directo de la zetaPKC. Esta quinasa fosforila a la hnRNP A1 in vitro y media su fosforilacion in vivo con importantes consecuencias sobre su afinidad por los acidos nucleicos y su capacidad de sufrir transporte nucleocitoplasmatico. Esta ultima propiedad ha resultado ser muy sensible a los estimulos de estres genotoxico, los cuales provocan su acumulacion citosolica y variaciones en su estado de fosforilacion. Hemos identificado la ruta de p38 como una de las mediadoras del proceso aunque deben existir otras aun por identificar que participan en el proceso. La simple activacion de p38 por su activador MKK3/6 es suficiente para provocar su acumulaciocitosolica y su fosforilacion. Tambien se ha estudiado la regulacion enzimatica de zetaPKC por las moleculas lipidicas ceramida y esfingosina utilizando comosubstrato en los ensayos in vitro la nueva proteina clonada.

Autor: MARCOS GARCIA M. JOSE.
Año: 1997.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: ENZIMOLOGIA Y REGULACION METABOLICA.

Resumen: Las aplicaciones de las lectinas son multiples pero, sin embargo, es dificil encontrar investigaciones actuales en las que el objetivo del estudio sea esta proteina. Por otra parte, estudios anteriores referidos a la estabilidad de la proteina son escasos y contradictorios. En esta tesis se ha pretendido realizar un estudio sobre la estabilidad de la lectina de Lens culinaris y conocer su comportamiento termodinamico en condiciones experimentales diversas, asi, se indujeron variaciones en el pH tanto acidas como basicas; se simultanearon los efectos termico, y acido que determinaron cambios estructurales que logicamente, implican una disposicion distinta de los aminoacidos. Para llevar a cabo este estudio y hacer un seguimiento de los procesos de plegamiento en entornos distintos, se utilizaron metodos termicos como la microcalorimetria diferencial de barrido que permite detectar algunas de las propiedades fisicas de la muestra de forma continua y a medida que se desnaturaliza con la temperatura. La espectroscopia de fluorescencia que permite detectar cambios en la posicion de los residuos de triptofano y, que se pueden relacionar con cambios en la estructura de la proteina sometida a condiciones experimentales diversas. El analisis en el de poliacrilamida que permite asignar los polipeptidos a las transiciones calorimetricas obtenidas mediante DSC.

Autor: MARTIN BENITO ROMERO JAIME.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUIMICA.

Resumen: En este trabajo se ha realizado un estudio pormenorizado, mediante la microscopía electrónica de transmisión, de la interacción existente entre la proteína Sticolisina II y membranas modelo. Dicha proteína es uno de los componentes activos del veneno de la anémona Stichodactyla helianthus y se ha mostrado como uno de los agentes hemolíticos más potentes aislados de un ser vivo. En una primera etapa se realizaron ensayos con la finalidad de determinar si existía interacción de la proteína con vesículas preparadas a partir de lípidos naturales. Una vez demostrada la existencia de dicha interacción se procedió a realizar un estudio más detallado que permitiera deducir más datos a cerca de la interacción. Así, en una segunda etapa se llevó a cabo la preparación de cristales bidimensionales de Sticolisina II sobre monocapas de lipídicas de diferentes composiciones. Las micrografías obtenidas de dichos cristales fueron examinadas empleando tratamientos de imágenes basados en métodos de Fourier y se demostró que era posible la determinación de la estructura tridimensional de la Sticolisina II, así como de la ultraestructura que forma al interaccionar con lípidos. El análisis detallado de los cristales obtenidos mostró que pertenecían la grupo cristalográfico p22,2 (98x196x51 A). La reconstrucción tridimensional final presenta una proteína con 3 lóbulos, con una longitud máxima de 51 A y una anchura máxima de 39 A. La ultraestructura formada por la Sticolisina II al interaccionar con las monocapas es un poro tetramérico responsable del mecanismo de acción de la toxina. Además, en el proceso de síntesis de cristales se encontró una relación inversa entre la afinidad de la proteína por el lípido que compone la monocapa y la calidad del cristal; esta observación podría ser extrapolable para la cristalización de proteínas con este método.

Autor: MARTINEZ ARCA SONIA .
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: La señal de transporte basada en dilevcina del transportador de glucosa GLUT4 depende para su eficaz funcionamiento de la contiguidad de dos argininas en las posiciones -4 y -5, pero la distancia de éstas al dipéptido Dileucina, a diferencia de lo que ocurre en la proteína lisosomal LIMPII, no es crítica. Existen por tanto diferentes señales de transporte basadas en el par dileucina, que pueden ser reconocidas por maquinarias distintas dentro de la misma vía o en diferentes vías de transporte. El pentapéptido ácido PDEND del extremo final de GLUT4 juega un papel importante en la regulación de la retención de la proteína en el compartimento perinuclear de almacenamiento. El mutante GLUT4 D5 es transportado a los endosomas tardíos por un mecanismo dependiente de la fosforilación del residuo Tyr502 la señal basada en dileucina de GLUT4 es necesaria para acceder al compartimento de almacenamiento intracelular, mientras que la señal basada en Fenilcalanina actúa a nivel de la membrana plasmática, introduciendo a los mutantes desviados hasta aquí en una vía degradativa.

Autor: MONSALVE PEREZ MARIA.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: Partiendo de la observación de que la proteína p4 podía regular actividad del promotor A2c tanto in vivo como in vitro, se inició caracterización del mecanismo de represión empezando por la determinación del punto del proceso de inicio de la transcripción sobre el que actuaba la proteína p4 en el promotor A2c, que resultó ser el proceso de salida o escape de la RNAP del promotor. Se observó seguidamente que el mecanismo de represión operaba a través de la interacción directa entre el extremo C-terminal de la proteína p4. y el dominio CTd de la subunidad alfa de la RNAP. La construcción de variantes en el promotor A2c y en el promotor A3, este último activable por p4, llevó a la conclusión de que el efecto regulador de p4 sobre un promotor puede ser tanto activador o represor, dependiendo únicamente de la fuerza de las interacciones de la RNAP con las secuencias promotoras. Finalmente, se caracterizó el sitio de unión de p4 en el promotor A2c responsable de su capacidad reguladora.

Autor: MONTANER SALAS SILVIA.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA (UAM) PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: Las proteínas Rho son GTPasas de bajo peso molecular que pertenecen a la superfamilia Ras y que están implicadas en proliferación celular, apoptosis y respuesta stress. En el Trabajo describimos que las proteínas Rho A, Rac 1 y Cdc42Hs son capaces de activar el factor de transcripción NFkB en diversos sistemas celulares. La activación tiene lugar mediante un mecanismo que involucra la fosforilación en los residuos Ser32 y Ser36 de la proteína IkB alfa, lo cual permite la degradación proteolítica de la misma. Rho A y Cdc42Hs están involucradas en la cascada de señalización inducida por el factor de necrosis tumoral alfa. Sin embargo estas GTPasas no median en la respuesta inducida por la luz ultravioleta. La regulación de la actividad NFkB es independiente de Ras y Raf quinasa. Sin embargo, sí hemos observado una interconexión entre la activación del factor NFkB y la ruta JNK/SAPK, ya que Rac 1 y Cdc42Hs son capaces de inducir la actividad transcripcional de NFkB a través de la activación de MEKK1 quinasa. Por último, la activación del SRF por Rho A es dependiente de NFkB.

Autor: MUGUETA URIAQUE M. CARMEN.
Año: 1997.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: FARMACIA Y TECNOLOGIA FARMACEUTICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOFARMACIA, FARMACOLOGIA Y CALIDAD DE MEDICAMENTOS.

Resumen: Las granzimas A y B, así como la dipeptidilpeptidasa-1 necesaria para su activación, están contenidas en gránulos secretores de células citotoxicas y participan en la muerte por apoptosis de la célula diana. Las catepsinas B,H,S y D del sistema endosoma-lisosoma, presente en células presentadoras, intervienen en el procesamiento y presentación de proteinas exógenas. En este trabajo se han puesto a punto las técnicas para determinar la actividad de estas proteasas en poblaciones de células linfomononucleares humanas (CLMN). Además se ha cultivado la población célular en ausencia o en presencia de un péptido inmunopotenciador Pa, con motivo estructural "2-6-11" o de IL-2, observándose los cambios producidos en la actividad de estas proteasas. Simultáneamente se han determinado marcadores de membrana, que han permitido asociar, en presencia del Pa, una elevación de proteasas de gránulos en subpoblaciones citotóxicas de monocitos, linfocitos CD4+ y CD8+, y células NK, así como un aumento de proteasas del sistema endosoma-lisosoma en subpoblaciones presentadoras de monocitos y linfocitos B. Se ha observado que las caracteristicas de las CLMN recién extraídas de pacientes con enfermedad autoinmune son similares a las de sujetos sanos cultivadas en presencia del Pa.

Autor: MUNICIO ESCURIN M. MAR.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: Se han identificado dos nuevos reguladores específicos para las proteínas quinasa C atípicas: LIP y PAR-4. Ambas proteínas interaccionan con el dominio denominado dedo de zinc pero mientras que LIP es específico del isotipo LAMBDA/IOTA, PAR-4 interacciona tanto con el isotipo zeta como con el LAMBDA/IOTA. También hemos demostrado que mientras que LIP es un activador de LAMBDA/IOTA, PAR-4 es un inhibidor de su actividadquinasa. LIP y PAR-4 regulan la actividad transcripcional dependiente de las proteínas quinasa C atípicas y además la sobreexpresión de PAR-4 induce apoptosis y muerte celular por inhibición de las PKC-implicadas en la generación de señales de supervivencia. Con la identificación de estos dos reguladores se desvela una manera completamente nueva de entender la regulación de las PKC atípicas ya que los mediadores lipídicos actuarían como cofactores que favorezcan/impidan las interacciones y la especificidad de la activación o inhibición sería llevada a cabo por proteínas reguladoras como LIP o PAR-4.

Autor: MUÑOZ MONTAÑO JUAN RAMON.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: La proteína tau es fosforilada por la glucógeno sintasa quinasa 3 in vitro en cultivos celulares e in vivo en cerebros de ratas. Como consecuencia de dicha fosforilación se puede regular la estabilidad de los microtúbulos. En las neuronas en crecimiento es necesario que los microtúbulos se encuentren en un estado de dinamismo que permita el crecimiento axonal, para ello es indispensable que la proteína tau se encuentre parcialmente fosforilada. La fosforilación de la proteína tau mediada por la glucógeno sintasa quinasa 3 puede regular este proceso, de modo que esta quinasa es imprescindible para el crecimiento axonal, y todos los sistemas de regulación que a ella le afecten.

Autor: OVIEDO VALENCIA JOSE M..
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: 1. Establecimiento de modelos experimentales de protección con cepas atenuadas del VPPA que permitan obtener animales resistentes a virus homólogos y heterólogos. Análisis de la respuesta humoral desencadenada en animales supervivientes frente a las proteínas víricas mayoritarias: p72, p30 y p54. 2. Analisis de las propiedades inmunogénicas de las proteínas p72, p30 y p54 en cerdo. Análisis de la inducción de anticuerpos neutralizantes y protección conferida por dichas proteínas. 3. Desarrollo de nuevos métodos de diagnóstico de la Peste porcina africana basados en la utilización de las proteínas recombinantes p72, p30 y p54. Análisis del grado de conservación genética de estas proteínas.

Autor: PANZERA CRESPO YANINA.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: Se ha caracterizado un nuevo anticuerpo monoclonal, 224, que en Drosophila reconoce la cadena pesada de la miosina citoplásmica (miosina II) codificada por el gen zipper. Sugerimos que en el resto de los organismos estudiados el anticuerpo monoclonal 224 reconoce también la cadena pesada de la miosina citoplásmica, o bien, otra proteína similar de tipo miosina. El anticuerpo 224 nos permite detectar la miosina citoplásmica (miosina II) en los centrosomas y el huso de Drosophila tanto en mitosis como en meiosis. Hasta el momento no se había descrito la presencia de miosina en estas estructuras. Se ha caracterizado un nuevo anticuerpo monoclonal, 337, que en Drosophila reconoce una proteína no descrita hasta la fecha que hemos denominado p337. Esta proteína, además de estar presente en los centrosomas, se concentra en el huso medio y midbody durante la meiosis masculina. En la secuencia de la proteína p337 aparecen 12 motivos dedos de zinc altamente conservados y que muestran una elevada homología con los presentes en factores de transcripción susceptibles de mediar interacciones con el DNA. Entre el resto de motivos presentes en la secuencia de la proteína p337 cabe destacar un posible motivo de localización nuclear y una homología considerable con una región anteriormente descrita como responsable de la localización centrosómica.

Autor: QUIJADA ARTEAGA LUIS.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: En este trabajo se ha caracterizado la proteina HSP70 de leishmania infantum, analizandose la organización génica, regulación de la expresión y antigenicidad. Los genes codificantes para la HSP70 se encuentran organizados en tandem, con un número aproximado de seis copias génicas. El análisis de su expresión ha demostrado que el último gen del agrupamiento origina un transcrito mayoritario no regulado por choque térmico. Los otros cinco genes originan transcritos minoritarios que se acumulan en situaciones de choque térmico. La proteina HSP70 de leishmania es un antígeno inmunodominante reconocido por sueros de pacientes de leishmaniosis humana y por sueros de perros infectados por este parásito.

Autor: REVERTER CENDROS DAVID.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA DE LA UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BARCELONA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA.

Resumen: El tema principal de esta tesis es el estudio de diferentes mecanismos de regulación de la actividad carboxipeptidasa. El primer objetivo fue la expresión de la PCPA2 humana en Pichia pastoris hasta niveles de 250 mg/l. El estudio de su proceso de activación nos muestra que el primer corte tríptico es suficiente para liberar el segmento de activación, y que durante el proceso se producen tres fragmentos de 96, 94 y 92 residuos. También se han calculado sus constantes catalíticas para diferentes sustratos. La resolución de su estructura tridimensional por difracción de rayos X aislado y con el inhibidor benzilsuccinico, ha permitido explicar diferentes características del proenzima a nivel estructural; como son su actividad intrínseca frente sustratos pequeños y su proceso de cativación. También se ha realizado el aislamiento y determinación de la estructura primaria de un nuevo inhibidor de carboxipeptidasa en la sanguijuela Hirudo medicinalis. Este presenta un mecanismo de inhibicion similar la inhibidor encontrado en patata, donde la cola C-terminal penetra hasta el centro activo.

Autor: RIAÑO RUIZ MARTA.
Año: 1997.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: Se ha propuesto que el NO puede complejar residuos aminoacídicos en autoantígenos llevando a una respuesta autoinmune. Se ha demostrado la expresión de iNOS en monocitos activados y diferenciados obtenidos de pacientes con enfermedad de Graves (EG), esclerosis múltiple (EM) o diabetes mellitus insulino dependiente (DMID). Tanto células presentadoras de antígeno (APC) profesionales, tales como monocitos, como APC no profesionales (por una expresión aberrante de HLA), tales como tirocitos, células de la glía o células beta pancreáticas, pueden producir NO. Si este NO modifica las proteínas celulares, pueden mostrarse nuevos modelos proteolíticos, como se sugiere por los resultados, y con ello la posible formación de nuevos epitopos relacionados con autoantígenos. Hemos llevado a cabo la nitrosilación de la tiroglobulina (Tg), proteína básica de mielina (PBM) y proinsulina, autoantígenos relacionados con EG, EM y DMID respectivamente, y analizado el patrón de esas proteínas cuando se exponen a diferentes proteasas. La Tg-NO, PBM-NO y proinsulina-NO se sintetizaron por tratamiento con exceso de NaNO2 en medio ácido y la nitrosilación se confirmó por el incremento en la densidad óptica a 340 nm aproximadamente. Las proteínas nitrosiladas muestran un patrón de fragmentación proteolítico diferente al de las proteínas nativas sugiriendo que el NO puede estar jugando un papel importante en la producción de nuevos determinantes antigénicos. Los experimentos han dado lugar a cambios cuantitativos y cualitativos en relación con el grado de nitrosilación de las proteínas ensayadas.

Autor: RIVAS CACHO SUSANA.
Año: 1997.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: La conjugación bacteriana es un proceso de transferencia de DNA que tiene lugar mediante un mecanismo multienzimático. En el caso del plásmido conjugativo R388, trwD es un gen esencial para la conjugación, para la expresión del pilus conjugativo y para la sensibilidad al fago PRD1. La secuencia deducida de aminoácidos de TrwD muestra gran homología con la superfamilia PulE/VirB11 de potenciales ATPasas implicadas en diversos procesos de transporte de macromoléculas a través de membranas. Se ha purificado la proteína TrwD y se ha demostrado la actividad ATPasa de dicha proteína, así como la esencialidad de tal actividad para el fenómeno de la conjugación. Por otra parte, la localización de TrwD, tanto en la fracción soluble como en la de membrana externa, puede indicar una asociación periférica de TrwD con la membrana. Así, se ha estudiado el efecto producido tras la adición de TrwD, y diferentes mutantes en TrwD, a membranas modelo como una aproximación experimental para comprender la naturaleza de la interacción de TrwD con la membrana bacteriana. Se ha demostrado que TrwD es capaz de inducir la agregación, la mezcla de los lípidos y la liberación de los contenidos acuosos de los liposomas, lo cual sugiere la capacidad de TrwD de interaccionar con la membrana de Escherichia coli.

Autor: SANCHEZ MARTIN CARLOS.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: En este trabajo se describe que una secuencia presente en la región rica en prolinas de la proteína asociada a los microtubulos MAP2 se fosforila por MAPKS y GSK3 y se desfosforila por las fosfatasas PP1 y PP2A tanto in vitro como in vivo. El hecho de que su estado de fosforilación se modifique durante el desarrollo del encéfalo de la rata podría sugerir su implicación en la morfogénesis de las neuronas. Además; la MAP2 fosforilada en esta secuencia está presente en las zonas de crecimiento neurítico, con un gran dinamismo, donde se detecta una ausencia practicamente total de tubulina y una gran abundancia de actina. Se ha observado por otra parte que esta secuencia de la MAP2 se desfosforila tras la activación de los receptores de glutamato lo que podría alterar la estabilidad del citoesqueleto durante la transmisión sinaptica. Finalmente podría haber una relación entre la desfosforilación de la MAP2 en la secuencia estudiada y la esquizofrenia.

Autor: VENTURA ZAMORA SALVADOR.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: La procarboxipeptidasa b pancreática se ha expresado en la levadura P.pastoris. El proenzima recombinante se ha purificado y caracterizado resultando sus mecanismos de activación y inhibición idénticos a los de la proteina purificada de páncreas. Mediante el uso de mutagenesis dirigida se ha desvelado el papel de las diferentes dianas de activación tríptica presentes en el segmento de activación de la PCPB. Asimismo se ha demostrado el papel crucial que juega la región de conexión de dicho segmento en la proteólisis de la procarboxipeptidasa b. Por último, se ha observado que la falta de actividad residual en este zimogeno se debe, en parte, al hecho de que presenta bloqueado el centro de fijación de sustratos. La presencia de una estructura en forma de hélice que dificulta el acceso al centro activo ha de ser el otro elemento que contribuye a la inhibición.

Autor: YELAMOS LOPEZ M. BELEN.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: Los Lentivirus son un grupo de virus, subfamilia de los Retrovirus. Incluyen virus de gran importancia tanto veterinaria, como el virus de la anemia infecciosa equina (EIAV) o el virus de la inmunodeficiencia felina (FIV), como clínica como el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV). Nuestro sistema de estudio es la proteína mayoritaria de la cápsida de lentivirus. Las proteínas de las cápsidas lentivirales tienen una gran homología de secuencia. Este alto grado de similitud, junto con la existencia de reacciones cruzadas y la función conservada, sugieren que las estructuras tridimensionales de estas proteínas están muy relacionadas. En esta Memoria se describen los estudios estructurales de dos de estas proteínas: la proteína p26 de EIAV y la proteína p24 de FIV. Con la primera de ellas se lleva a cabo una caracterización estructural de la proteína y un estudio del papel que desempeñan los puentes disulfuro en el mantenimiento de la estructura. En el caso de la proteína p24 se estudia el mecanismo de plegamiento de la proteína mediante la obtención de formas mutantes en las que se cambian los residuos de triptófano por fenilalanina. El proceso de desnaturalización con urea de la proteína salvaje y los mutantes se puede seguir mediante técnicas espectroscópicas como dicroismo circular y fluorescencia. Esto nos permite profundizar en el proceso mediante el cual la proteína alcanza su estructura tridimensional.