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PROTEINAS, 16



562 tesis en 29 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29
  • REGULACION DE LA METIONINA ADENOSILTRANSFERASA DE HIGADO DE RATA POR OXIDO-REDUCCION: IDENTIFICACION DE LOS GRUPOS IMPLICADOS Y POSIBLE CATALISIS POR TIOLTRANSFERASAS.
    Autor: MARTINEZ CHANTAR M. LUZ.
    Año: 1996.
    Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA DE LA FACULTAD DE MEDICINA (UAM).
    Resumen: SE HA PURIFICADO Y CARACTERIZADO UNA NUEVA FORMA DE LA MAT DE HIGADO DE RATA, OBTENIDA A PARTIR DE LOS CUERPOS DE INCLUSION, GENERADOS TRAS LA SOBREEXPRESION DE LA ENZIMA NATIVA EN E.COLI. MAT ES UN DIMERO DE 102 KDA. POSEE MAYOR AFINIDAD POR METIONINA Y ATP QUE MAT III, Y UNOS VALORES DE RO.5 Y KI QUE INDICAN UNA MAYOR SENSIBILIDAD A LA INHIBICION POR GSSG Y A LA MODULACION POR LA RELACION GSH/GSSG. LA PROBABILIDAD DE UNA CATALISIS MEDIADA POR TIOLTRANSFERASAS EN LAS DOS ISOFORMAS DE MAT FUE ANALIZADA IN VITRO. LA PROTEINA DISULFURO ISOMERASA (PDI) Y LA TIOREDOXINA MODIFICAN LAS CONSTANTES DE OXIDACION Y DE INHIBICION DE MAT HEPATICA, ALTERANDO SU ESTADO REDOX. EL INTERCAMBIO TIOL/DISULFURO EN MAT HEPATICA, REALIZADO POR LA PDI, PERMITIRIA UNA REGULACION DE LA PROTEINA, YA EN ESTADOS DE ESTRES OXIDATIVO MEDIO. EL MECANISMO POR EL CUAL SE PRODUJO EL INTERCAMBIO TIOL-DISULFURO ENTRE PDI Y MAT NO IMPLICA COMO PRODUCTO FINAL LA FORMACION DE DISULFUROS MIXTOS. FINALMENTE SE HA IDENTIFICADO LA PRESENCIA DE POSIBLES PUENTES DISULFURO EN LA MAT PURIFICADA DE HIGADO DE RATA, QUE SE ESTABLECERIAN ENTRE LAS CYS 69-CYS 57 O BIEN ENTRE LAS CYS 69- CYS 61.
  • AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION DE UN NUEVO TIPO DE PROTEINAS BASICAS NO TOXICAS INACTIVADORAS DE RIBOSOMAS (RIPS) EN EL GENERO SAMBUCUS.
    Autor: MARTINEZ DE BENITO FERNANDO.
    Año: 1996.
    Universidad: VALLADOLID.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA, BIOLOGIA MOLECULAR Y FISIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR Y FISIOLOGIA (BIENIO 93 / 95).
    Resumen: SE HAN AISLADO Y CARACTERIZADO NUEVAS RIPS EN DISTINTOS TEJIDOS DE VARIAS ESPECIES DEL GENERO SAMBUCUS. ESTAS PROTEINAS ENCABEZAN DOS NUEVOS TIPOS DE RIPS: . RIPS DE TIPO 2 FUERTEMENTE BASICAS, CON ACTIVIDAD AGLUTINANTE DE ERITROCITOS Y SIN AFINIDAD POR GALACTOSA, MANOSA O SUS DERIVADOS. EL EJEMPLO MAS DESTACADO SON LAS NIGRINAS 1 BASICAS. . RIPS DE TIPO 2 FUERTEMENTE BASICAS, SIN ACTIVIDAD HEMOAGLUTINANTE CUYO ELEMENTO CABECERA ES LA NIGRINA B BASICA. ASI, SE HA DEMOSTRADO POR PRIMERA VEZ LA COEXISTENCIA EN UNA MISMA ESPECIE VEGETAL E INCLUSO EN UN MISMO TEJIDO DE RIPS DE TIPO 1, TIPO 2 CLASICAS, TIPO 2 SIN AFINIDAD POR GALACTOSA Y TIPO 2 SIN ACTIVIDAD LECTINA. JUNTO A ESTAS PROPIEDADES, DESTACA LA ELEVADA CAPACIDAD DE INHIBIR LA SINTESIS PROTEICA EN EXTRACTOS ACELULARES (SIENDO LA NIGRINA B BASICA LA TOXINA MAS POTENTE DESCRITA HASTA LA FECHA) SIN QUE, SIN EMBARGO, PRESENTEN TOXICIDAD APRECIABLE SOBRE CELULAS O ANIMALES. ADEMAS ESTAS TOXINAS PRESENTAN ACTIVIDAD TOPOISOMERASA SOBRE EL DNA CIRCULAR SUPERENROLLADO Y MULTIDEPURINANTE DEL RNA GENOMICO VIRAL, LO QUE LAS CONVIERTE EN POTENCIALES AGENTES ANTIPATOGENO SOLAS O COMO CONJUGADOS E INMUNOTOXINAS.
  • CARACTERIZACION ESTRUCTURAL Y FUNCIONAL DE LA 5'-NUCLEOTIDASA DE MUSCULO DE RATON.
    Autor: MARTINEZ MARTINEZ ALEJANDRO.
    Año: 1996.
    Universidad: MURCIA.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR-A PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .
    Resumen: 1. EN LA PRESENTE MEMORIA DOCTORAL SE PURIFICO LA 5'-NT MEDIANTE LA EXTRACCION SECUENCIAL DEL MUSCULO ESQUELETICO DE RATON. SE OBTUVO UNA FRACCION SOLUBLE RICA EN ACTIVIDAD AMPASA. 2. LUEGO SE PURIFICO LA 5'-NT DEL EXTRACTO, OBTENIENDOSE TRES PREPARACIONES: NR=AMPASA NO RETENIDA EN LA MATRIZ CON AMP; NT-I= ENZIMA ELUIDA CON BETA GP; NT-II = AMPASA LIGADA A LA MATRIZ Y LIBERADA CON AMP. 3. LA ENZIMA SE HA PURIFICADO UNAS 200 VECES EN NT-I, Y 7800 EN NT-II. 4. NT-II REACCIONA CON ANTICUERPOS GENERADOS CONTRA LA ENT DE PLASMA SEMINAL BOVINO. LAS SUBUNIDADES DE 5'-NT DE MUSCULO PRESENTAN MASAS MOLECULARES DE 74, 65 Y 52 KDA. 5. LA ACTIVIDAD AMPASA ES 5'-NUCLEOTIDASA, COMO LO DEMUESTRA SU CARACTER GLICOPROTEICO, AFINIDAD POR AMP, INHIBICION POR ALFA, BETA-METILENADENOSINA- 5'-DIFOSFATO, E INTERACCION CON ANTICUERPOS. 6. LOS VALORES DE LOS COEFICIENTES DE SEDIMENTACION DE LAS FORMAS ENZIMATICAS Y SU VARIACION CON EL DETERGENTE AÑADIDO AL GRADIENTE INDICAN QUE LA FRACCION NR ES RICA EN DIMEROS HIDROFILICOS, MIENTRAS QUE LAS FRACCIONES NT-I Y NT-II CONTIENEN, PRINCIPALMENTE, FORMAS DIMERAS ANFIFILICAS. 7. LAS PROPIEDADES HIDROFILICAS DE LA 5'-NT EN NR, Y ANFIFILICAS EN NT-I Y NT-II, QUEDAN CONFIRMADAS POR LOS RESULTADOS DE LA PARTICION DE FASES CON TRITON X-114 Y CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD EN FENIL-AGAROSA. LA INCUBACION CON FOSFOLIPASA C ESPECIFICA PARA LOS FOSFOLIPIDOS DEL INOSITOL DEMUESTRA QUE LA ENZIMA CONTIENE RESTOS DE GLICOSIL-FOSFATIDIL INOSITOL. 8. LA ENZIMA CONTIENE CINC FUERTEMENTE UNIDO, CON UNA ESTEQUIOMETRIA DE 2,2 ATOMOS POR CADA MOLECULA DIMERA. PROBABLEMENTE EL METAL ESTA IMPLICADO EN LA CATALISIS, YA QUE LA ENZIMA SE INHIBE CON EDTA E IMIDAZOL. LA 5'-NT INHIBIDA CON IMIDAZOL RECUPERA LA ACTIVIDAD AL AÑADIR ZN2+, MN2+, O MG2+. 9. LA ENT DE MUSCULO DE RATON HIDROLIZA CON PREFERENCIA UMP, MUESTRA UNA KM PARA EL AMP DE 12 M Y SE INHIBE DE MODO COMPETITIVO POR ADP Y ATP. 10. LOS ANALISIS DE SEDIMENTACION DE LOS EXTRACTOS DE ENT SOLUBLE Y PARTICULADA DE PLASMA SEMINAL BOVINO MUESTRAN LA EXISTENCIA DE DIMEROS HIDROFILICOS, DE 6,9 S, Y ANFIFILICOS, DE 3,5 S. POR ENVEJECIMIENTO, LAS MOLECULAS DE 3,5 S SE TRANSFORMAN EN OTRAS DE 4,2 S. 11. LOS DIMEROS HIDROFILICOS Y ANFIFILICOS DE ENT DE PLASMA SEMINAL BOVINO SE TRANSFORMAN EN MONOMEROS POR REDUCCION CON DITIOTREITOL. SIN EMBARGO, LAS FUERZAS IMPLICADAS EN LA INTERACCION DE LAS SUBUNIDADES, EN LAS FORMAS DIMERAS, SON DE NATURALEZA NO COVALENTE, SIN QUE PARTICIPEN LOS ENLACES DISULFURO EN LA ASOCIACION, YA QUE LOS MONOMEROS SE SEPARAN POR ELECTROFORESIS, EN CONDICIONES NO REDUCTORAS, ASI COMO POR DESNATURALIZACION CON CLORHIDRATO DE GUANIDINA.
  • ESTUDIO DE LA INTERACCION DE LOS METALES PESADOS CON LAS PROTEINAS DE LA LECHE.
    Autor: MATA VALLESPIN LUIS M..
    Año: 1996.
    Universidad: ZARAGOZA.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: PRODUCCION ANIMAL Y CIENCIA DE LOS ALIMENTOS PROGRAMA DE DOCTORADO: CIENCIA DE LOS ALIMENTOS .
    Resumen: EL OBJETIVO DE ESTA TESIS HA SIDO EL ESTUDIO DE LA INTERACCION DE LAS PROTEINAS DE LA LECHE CON EL PLOMO, EL CADMIO Y EL MERCURIO. EL PLOMO SE ASOCIA MAYORITARIAMENTE CON LAS MICELAS DE CASEINA EN LA LECHE HUMANA Y EN LA DE VACA, LIBERANDOSE DE ELLAS CON EL DESCENSO DEL PH DE LA LECHE. EN EL CASO DEL CADMIO, ESTE SE ASOCIA MAYORITARIAMENTE CON UN COMPUESTO DE PESO MOLECULAR 70.000 EN LA LECHE DE VACA, MIENTRAS QUE EN LA HUMANA, SE ASOCIA CON LOS COMPUESTOS DE BAJO PESO MOLECULAR. LA BETA-LACTOGLOBULINA PUEDE UNIR CADMIO IN VITRO CON UNA CONSTANTE DE UNION DE 5 X 10 ELEVADO A 4 M-1. EL MERCURIO SE ASOCIA EN UNA ELEVADA PROPORCION A LAS MICELAS DE CASEINA, TANTO EN LA LECHE HUMANA COMO EN LA BOVINA, AUNQUE LA ALBUMINA Y LA BETA- LACTOGLOBULINA TAMBIEN FIJAN UNA CANTIDAD IMPORTANTE DE MERCURIO. SE HA OBSERVADO QUE LA CONGELACION Y PASTERIZACION DE LA LECHE DE VACA REDUCEN HASTA UN 37% LA PROPORCION DE CADMIO PRESENTE EN LA FRACCION DE LAS CASEINAS. EN LA LECHE HUMANA LA CONGELACION PRODUCE CAMBIOS MENORES EN LA DISTRIBUCION DE CADMIO Y PLOMO DENTRO DE LA FRACCION DE LAS SUBSTANCIAS DE BAJO PESO MOLECULAR. LA METALOTIONEINA, UNA PROTEINA CON GRAN AFINIDAD POR EL CADMIO, ESTA PRESENTE EN LA LECHE HUMANA Y EN LA DE VACA, ADEMAS EN ESTA ULTIMA SE ASOCIA PARCIALMENTE CON LAS CASEINAS. POR OTRA PARTE, LA INTERNALIZACION DE CADMIO POR LAS CELULAS INTESTINALES CACO-2 AUMENTA CON LA CONCENTRACION DE METAL EN EL MEDIO Y CON EL TIEMPO DE EXPOSICION. SE HA VISTO ADEMAS QUE EL CADMIO ESTIMULA LA SINTESIS DE METALOTIONEINA EN ESTAS CELULAS. LA LECHE DE VACA REDUCE LA INTERNALIZACION DE CADMIO EN LAS CELULAS, MIENTRAS QUE LA HUMANA NO MUESTRA EFECTO SOBRE DICHA INTERNALIZACION. POR OTRA PARTE, LA LACTOFERRINA INHIBE LA INTERNALIZACION DE CADMIO MEDIANTE UN MECANISMO QUE NO DEPENDE DE LA CONCENTRACION DE PROTEINA. LA BETA- LACTOGLOBULINA EN LAS MISMAS CONDICIONES NO TIENE EFECTO APARENTE SOBRE LA INTERNALIZACION DE CADMIO POR LAS CELULAS CACO-2.
  • CARACTERIZACION DE LA UNION A RNA AL CONECTOR DEL BACTERIOFAGO 029.
    Autor: MIER BUERGO CRISTINA.
    Año: 1996.
    Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.
    Resumen: EN ESTE TRABAJO DE TESIS SE HA CARACTERIZADO UN SISTEMA DE EMPAQUETAMIENTO DE DNA IN VITRO BASADO EN PRECABEZAS VIRALES HIBRIDAS LAMBDA/029. ESTE SISTEMA FUNCIONAL EMPAQUETA DISTINTOS DNAS SUSTRATOS Y ES ESTRICTAMENTE DEPENDIENTE DE LA PRESENCIA EN EL MEDIO DE RNA. POR ANALISIS COMPARATIVOS DE SECUENCIAS SE COMPROBO QUE LA PROTEINA P10, QUE FORMA EL CONECTOR DE LAS PRECABEZAS, PERTENECE A UNA FAMILIA DE PROTEINAS QUE UNEN RNA. EN BASE A ESTOS ESTUDIOS, DECIDIMOS CARACTERIZAR ESTE DOMINIO. REALIZAMOS MODELADO TRIDIMENSIONAL BASADO EN HOMOLOGIA DEL POSIBLE DOMINIO DE UNION A RNA DE LA PROTEINA P10; REALIZAMOS TAMBIEN UNA SIMULACION DE LA UNION DE ESTE DOMINIO A UNA MOLECULA DE RNA. UNA VEZ DEFINIDOS CUALES ERAN LOS AMINOACIDOS QUE PARECIAN CRITICOS PARA LA UNION DEL RNA Y QUE ADEMAS ESTAN CONSERVADOS EN OTROS DOMINIOS DE UNION A RNA DE OTRAS PROTEINAS, REALIZAMOS MUTAGENESIS DIRIGIDA PARA CARACTERIZAR A FONDO LA FUNCION DE ESTOS RESIDUOS. SE OBTUVIERON LOS MUTANTES Y SE ESTUDIO TANTO SU CAPACIDAD DE UNION A ACIDOS NUCLEICOS COMO SU COMPORTAMIENTO EN EL SISTEMA FUNCIONAL DE EMPAQUETAMIENTO. OBTUVIMOS IGUALMENTE MODELOS TRIDIMENSIONALES PARA CADA UNO DE LOS MUTANTES. DE ESTA FORMA, SE HA CARACTERIZADO LA EXISTENCIA DE UN DOMINIO DE UN UNION A RNA EN LA PROTEINA QUE FORMA EL CONECTOR DEL BACTERIOFAGO 029 EXISTEN UNA SERIE DE AMINOACIDOS QUE SON CRITICOS PARA LA UNION DEL RNA POR PARTE DE LOS CONECTORES AISLADOS; TAMBIEN HEMOS DEFINIDO QUE EL RNA TIENE QUE UNIRSE, NO YA CON UNA DETERMINADA AFINIDAD, SINO A TRAVES DE AMINOACIDOS ESPECIFICOS, A LAS PRECABEZAS VIRALES PARA QUE ESTAS SEAN FUNCIONALES EN EL EMPAQUETAMIENTO DE DNA. TAMBIEN HEMOS ESTUDIADO LOS PAPELES QUE JUEGAN EN EL SISTEMA DE EMPAQUETAMIENTO LOS DNAS Y RNAS SUSTRATOS.
  • ESTUDIO DE LA SIMBIOSIS RHIZOBIUM LEGUMINOSARUM-VICIA FABA L.: METABOLISMO CARBONADO EN NODULOS.
    Autor: OCAÑA CABRERA ANTONIO.
    Año: 1996.
    Universidad: GRANADA.
    Centro de lectura: CIENCIAS .
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA VEGETAL PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA DE LAS PLANTAS CULTIVADAS.
    Resumen: EL NITROGENO ES EL NUTRIENTE MAS LIMITANTE, CON LA EXCEPCION DEL AGUA, EN EL CRECIMIENTO DE LAS PLANTAS SUPERIORES. LAS LEGUMINOSAS PUEDEN FIJAR EL N ATMOSFERICO EN SIMBIOSIS CON BACTERIAS DE LOS GENEROS RHIZOBIUM Y BRADYRHIZOBIUM. EN ESTE TRABAJO SE ABORDAN ALGUNOS ASPECTOS DEL METABOLISMO CARBONADO DE LOS NODULOS RADICALES EN LA SIMBIOSIS VICIA FABA-RHIZOBIUM LEGUMINOSARUM, EN SU DESARROLLO A LO LARGO DE LA ONTOGENIA DEL CULTIVO, EN RELACION CON LAS DIFERENTES CEPAS DEL MICROSIMBIONTE Y EL GENOTIPO DE LA PLANTA HOSPEDADORA, EL EFECTO DE UNA DOSIS ALTA DE NITRATO EN EL MEDIO DE CULTIVO COMPARANDOLA CON PHASEOLUS VULGARIS, LEGUMINOSA DE ORIGEN TROPICAL MUCHO MAS SENSIBLE AL NITROGENO COMBINADO DEL MEDIO. COMO COMPLEMENTO DE ESTOS ESTUDIOS, SE ABORDA LA PURIFICACION PARCIAL Y CARACTERIZACION DE LA FOSFOENOLPIRUVATO CARBOXILASA DE LOS NODULOS DE VICIA FABA. SE DISCUTEN LOS RESULTADOS DE CRECIMIENTO, ACTIVIDAD NITROGENASA, ACTIVIDADES SACAROSA SINTASA, INVERTASA ALCALINA, VIA DE LAS PENTOSAS FOSFATO, PEPCARBOXILASA, MALATO E ISOCITRATO DESHIDROGENASAS EN RELACION CON LA EFICIENCIA SIMBIOTICA.
  • ANALISIS MUTACIONAL DE LA CATALISIS Y ESTABILIDAD DE LA (1,3)-(1,4)-B-D-GLUCANASA-4-GLUCANHIDROLASA DE BACILLUS LICHENIFORMIS.
    Autor: PONS LOPEZ JAUME.
    Año: 1996.
    Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA.
    Resumen: LA (1,3)-(1,4)-B-GLUCANASA DE BACILLUS LICHENIFORMIS ES UN ENZIMA GLUCOHIDROLITICO QUE HIDROLIZA ENLACES B-(1,4) ADYACENTES A ENLACES B-(1,3) POR EL EXTREMO NO REDUCTOR EN POLIMEROS DE GLUCOSA QUE CONTIENEN AMBOS ENLACES.EN ESTA TESIS DOCTORAL SE DESCRIBE: -MEJORA DE LA PRODUCCION Y PURIFICACION DEL ENZIMA RECOMBINANTE CLONADO EN E.COLI. -IDENTIFICACION DEL ACIDO GENERAL CATALITICO DEL ENZIMA. -ESTUDIO DE LA FUNCION SOBRE LA ESTABILIDAD Y CATALISIS DEL UNICO PUENTE DISULFURO DEL ENZIMA. -FUNCION DEL LAZO MAYOR QUE CUBRE PARCIALMENTE EL CENTRO DE UNION A SUBSTRATO SOBRE LA ACTIVIDAD CATALITICA Y LA ESTABILIDAD.SE HAN OBTENIDO DOS MUTANTES CON PROPIEDADES MEJORADAS PARA APLICACION BIOTECNOLOGICA MUTANTE M58A SIETE VECES MAS ACTIVO QUE EL ENZIMA SALVAJE EN TERMINOS DE KCAT MUTANTE N57A QUE ES MAS TERMORESISTENTE QUE EL ENZIMA SALVAJE (T50 DE 70 A 105 MINUTOS A 65 C).
  • METABOLISMO DEL AZUFRE INORGANICO EN LA MICROALGA EUCARIOTICA CHLAMYDOMONAS REINHARDTII.
    Autor: PRIETO RODRIGUEZ JOSE LUIS.
    Año: 1996.
    Universidad: SEVILLA.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA VEGETAL Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.
    Resumen: EL CONSUMO DE SULFATO POR CHLAMYDOMONAS REINHARDTII DEPENDE DE ENERGIA METABOLICA, ESTA MEDIADO POR PERMEASAS ESPECIFICAS, SE INDUCE POR CARENCIA DE AZUFRE Y SE INHIBE POR ANALOGOS ESTRUCTURALES DE SULFATO, COMO CROMATO O SELENIATO, Y POR ESPECIES MAS REDUCIDAS DE AZUFRE COMO EL SULFITO O EL TIOSULFATO, QUE PRESENTA UNA INHIBICION COMPETITIVA CON UNA KI DE 0,0 MM.A PARTIR DE EXTRACTOS CRUDOS DE C. REINHARDTII SE HA PURIFICADO UNA ENZIMA CON ACTIVIDAD TIOSULFATO-DITIOL SULFOTRANSFERASA (TSR) Y TIOSULFATO-CIANURO SULFOTRANSFERASA (RODANASA, RDN). AMBAS ACTIVIDADES SON CUANTITATIVAMENTE EQUIVALENTES, Y ESTUDIOS CINETICOS INDICAN QUE EL DTE Y EL CIANURO COMPITEN POR EL MISMO SITIO ACTIVO DE LA ENZIMA, TENIENDO UNA ACTIVIDAD 28 VECES MAYOR POR DTE. ESTUDIOS DE INHIBICION INDICAN QUE PRESENTE AL MENOS UN RESIDUO DE ARGININA. SE HAN SEPARADO POR PRIMERA VEZ EN ESTE ALGA TRES ISOENZIMAS CON ACTIVIDAD O-ACETIL-L-SERINA (TIOL)LIASA (OASS). EL PROCESO DE PURIFICACION CONSISTE FUNDAMENTALMENTE EN UNA CORMOTOGRAFIA EN DEAE-SEFACEL, DONDE SE SEPARA LA PRIMERA ISOENZIMA (OASS1), Y UNA CROMOTOGRAFIA EN FENIL-SEFAROSA QUE SEPARA LAS OTRAS DOS (OASS2 Y OASS3). LAS ACTIVIDADES ESPECIFICAS FUERON 10,7; 19,8 Y 2,0 U/MG PROT.; RESPECTIVAMENTE. OASS1 FUE LA QUE MOSTRO MAYOR AFINIDAD POR O-ACETIL-L-SERINA (OAS), SIENDO LA KM 2,5MM, MIENTRAS QUE PARA SULFURO, EL OTRO SUSTRATO DE LA REACCION, LA MASA AFIN FUE OASS3 CON UN VALOR DE KM DE 0,75MM. LA L-METIONINA SE MOSTRO INHIBIDOR COMPETITIVO RESPECTO A LAS OAS PARA LAS TRES ISOENZIMAS.
  • CARACTERIZACION DE CD,ZN,METALOTIONEINAS POR METODOS ELECTROQUIMICOS.
    Autor: RUIZ SANCHEZ CONSUELO.
    Año: 1996.
    Universidad: ALCALA.
    Centro de lectura: FARMACIA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.
    Resumen: SE HA LLEVADO A CABO LA CARACTERIZACION ELECTROQUIMICA DE CD, ZN METALOTIONEINAS DE ORIGEN ANIMAL, HIGADO DE CONEJO Y RIÑON DE CABALLO COMERCIALIZADAS, Y DE METALOTIONEINAS DE ORIGEN HUMANO, HIGADO DE FETO Y RIÑON DE ADULTO, POR POLAROGRAFIA DIFERENCIAL DE PULSOS. SE HA ESTUDIADO LA INFLUENCIA DEL PH Y DE LA ADICICON DE CATIONES METALICOS, CADMIO Y CINC, CATIONES QUE SE ENCUENTRAN UNIDOS A LAS METALOTIONEINAS INICIALMENTE. SE HAN EVALUADO LAS CONSTANTES DE FORMACION DE LOS COMPLEJOS DE CADMIO Y CINCO PARA LAS DIFERENTES METALOTIONEINAS ESTUDIADAS EN ESTE TRABAJO.
  • PROCESAMIENTO DE IMAGENES DE MICROSCOPIA ELECTRONICA APLICADO AL ESTUDIO DE LA ESTRUCTURA DE DOS ADN-HELICASAS HEXAMERICAS REPRESENTATIVAS.
    Autor: SAN MARTIN PASTRANA CARMEN.
    Año: 1996.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: FISICA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: ELECTRONICA E COMPUTACION PROGRAMA DE DOCTORADO: COMPUTACION AVANZADA E INTELIXENCIA ARTIFICIAL.
    Resumen: LAS DNA HELICASAS SON ENZIMAS UBICUAS CON UN PAPEL FUNDAMENTAL EN TODOS LOS ASPECTOS DEL METABOLISMO DE LOS ACIDOS NUCLEICOS: REPLICACION DEL DNA, REPARACION, RECOMBINACION Y CONJUGACION. SU ACTIVIDAD PERMITE LA RUPTURA DE LOS ENLACES DE HIDROGENO ENTRE LAS DOS HEBRAS DE DNA DOBLE, PROVOCADA POR LA ENERGIA OBTENIDA A TRAVES DE LA HIDROLISIS DE NUCLEOSIDOS 5' -TRIFOSFATOS (NTPS). PRESUMIBLEMENTE, TODAS LAS ESPECIES EN LA NATURALEZA CONTIENEN UNA COLECCION DE HELICASAS QUE PARTICIPA EN MUCHAS, SI NO TODAS, FACETAS DEL METABOLISMO DEL DNA. A PESAR DE SU PAPEL IMPORTANTE Y DE LA CANTIDAD DE CONOCIMIENTO BIOQUIMICO EN LA MATERIA, SE SABE POCO ACERCA DE SU ESTRUCTURA. DE HECHO, TODAVIA NO HAY DATOS DISPONIBLES CON RESOLUCION ATOMICA PARA NINGUNA DE LAS HELICASAS. EN ESTA MEMORIA, SE HAN UTILIZADO MICROSCOPIA ELECTRONICA Y TECNICAS DE PROCESAMIENTO DE IMAGENES PARA ESTUDIAR LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DE DOS HELICASAS REPRESENTATIVAS: LA DNAB DE ESCHERICHIA COLI Y EL ANTIGENO T DE SV40 QUE LLEVA A CABO SU FUNCION EN CELULAS DE MAMIFEROS. EN AMBOS CASOS, SE HAN ENCONTRADO CARACTERISTICAS RELEVANTES DE SU ACTIVIDAD: LAS DOS POSEEN UN CANAL CENTRAL QUE VA DE LADO A LADO DE LA PARTICULA Y ESTA ABIERTO EN AMBOS EXTREMOS, Y TAMBIEN PRESENTAN UNA POLARIDAD DEFINIDA. LA APARICION DE RASGOS ESTRUCTURALES COMUNES, Y RELEVANTES PARA SU ACTIVIDAD ENZIMATICA, EN DOS HELICASAS ALEJADAS EN LA ESCALA EVOLUTIVA SUGIERE LA EXISTENCIA DE UN MODELO GENERAL DE ESTRUCTURA-FUNCION PARA LAS HELICASA HEXAMERICAS, CONSERVADO A LO LARGO DE LA EVOLUCION.
  • EL INHIBIDOR DE LA PROTEINA C (PCI): SU PAPEL FISIOLOGICO EN LA REPRODUCCION HUMANA.
    Autor: SANCHEZ CUENCA BELLIDO JAIME.
    Año: 1996.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: 030B BIOQUIMICA CLINICA Y MEDICA .
    Resumen: EL INHIBIDOR DE LA PROTEINA C (PCI), UNA SERPINA QUE HABIA SIDO ESTUDIADA SOLO EN SANGRE, ESTA 40 VECES MAS CONCENTRADO EN EL SEMEN QUE EN EL PLASMA SANGUINEO, Y EN LA ACTUALIDAD NO SE CONOCE CON EXACTITUD SU PAPEL FISIOLOGICO EN LOS SISTEMAS DE LA COAGULACION-FIBRINOLISIS. EN ESTE TRABAJO, SE DEMUESTRA QUE EL PCI REGULA A PROTEASAS SEMINALES TALES COMO LA KALICREINA TISULAR Y LOS ACTIVADORES DEL PLASMINOGENO TIPO TISULAR Y TIPO UROQUINASA (TPA Y UPA). ADEMAS, O BIEN EL PCI REGULA AL ANTIGENO ESPECIFICO DE PROSTATA (PSA) DURANTE UN CORTO PERIODO DE TIEMPO, POR LO QUE PODRIA TEMPORIZAR LA LICUACION DEL SEMEN TRAS LA EYACULACION, O BIEN EL PSA PODRIA REGULAR LA ACCION DEL PCI SEMINAL. FINALMENTE, EL PCI PODRIA ESTAR IMPLICADO EN ALGUNO DE LOS PROCESOS QUE TIENEN LUGAR DURANTE LA FERTILIZACION HUMANA YA QUE INHIBE LA UNION DEL ESPERMATOZOIDE HUMANO AL OOCITO DENUNDADO DEHAMSTER DE UNA FORMA QUE ES DEPENDIENTE DE LA DOSIS DE PCI AÑADIDO.
  • INTERACCION FUNCIONAL ENTRE LA ADENOSINA DESAMINASA Y EL RECEPTOR A1 DE ADENOSINA EN LA SUPERFICIE CELULAR.
    Autor: SAURA ANTOLIN CARLOS A..
    Año: 1996.
    Universidad: BARCELONA.
    Centro de lectura: QUIMICA .
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA .
    Resumen: La adenosina deaminasa (ADA) es una enzima del metabolismo purínico que ha sido hallada tanto en el citosol como en la superficie celular. En este estudio se ha demostrado que la ADA interacciona con los receptores A1 de adenosina (A1Rs) en corteza cerebral de cerdo y en la linea celular DDT1MF-2. A través de esta interacción la ADA aumenta la afinidad del receptor A1 por los ligandos agonistas, permite la aparición del estado de alta afinidad del receptor (receptor-proteína G) y es necesaria para la correcta transducción de la señal del receptor A1. Los mecanismos moleculares involucrados en la desensibilización homóloga de los A1Rs se estudió en células DDT1MF-2. La exposición crónica de las células con el agonista R- PIA produce una rápida desensibilización funcional, la fosforilación y la agregación en la superficie celular de los receptores A1. La internalización de los A1Rs hacia compartimentos intracelulares es un proceso lento (horas) y conduce a la down-regulation de éstos. El antagonista, por el contrario, induce la aparición de nuevos centros de unión en la membrana. Todos los procesos implicados en la desensibilización homóloga del receptor A1 son acelerados y aumentados por la ADA. El agonista induce también la internalización conjunta de la ADA y los A1Rs. Estos resultados muestran una regulación mutua y una vía de endocitosis común de la ADA y el A1R de adenosina durante el proceso de desensibilización. Este es el primer estudio donde se demuestra que un miembro de la familia de receptores acoplados a proteína G requiere una ectoenzima, cuyo sustrato es el ligando del receptor, para una eficiente señalización y regulación funcional.
  • PROTEINAS INACTIVADORAS DE RIBOSOMAS (RIPS) PRESENTES EN LAS ESPECIES MUSGO ARMENIACUM (L) MILLER Y BETA VULGARIS L. SUBSP. VULGARIS.
    Autor: TORRE MINGUELA CARLOS DE.
    Año: 1996.
    Universidad: VALLADOLID.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA, BIOLOGIA MOLECULAR Y FISIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR Y FISIOLOGIA.
    Resumen: SE SABE QUE LAS PROTEINAS INACTIVADORAS DE RIBOSOMAS (RIPS, ACROSTICO DE RIBOSOMA INACTIVATING PROTEINS), ESTAN PRESENTES EN NUMEROSAS ESPECIES VEGETALES. EN EL PRESENTE TRABAJO, SE LLEVA A CABO EL AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION DE NUEVAS RIPS EN MUSCARI ARMENIACUM (L) MILLER Y BETA VULGARIS L. SUBSP. VULGARIS, ADEMAS DEL ESTUDIO DE SU DISTRIBUCION TISULAR Y DE SU POSIBLE FUNCION BIOLOGICA. DE ENTRE TODOS LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN EL PRESENTE TRABAJO DE INVESTIGACION SE PUEDE DESTACAR, LA DEMOSTRACION, POR PRIMERA VEZ DE LA INDUCIBILIDAD DE UN RIP DE TIPO I (BETINAS, AISLADAS DE BETA VULGARIS L. SUBSP. VULGARIS) EN TEJIDOS INFECTADOS, EN TEJIDOS SANOS ALEJADOS DEL PUNTO DE INFECCION Y DURANTE LA ESTIMULACION DE LA PLANTA CON MEDIADORES DE LA RESPUESTA ANTIPATOGENICA, COMO EL PEROXIDO DE HIDROGENO.
  • ESTUDIO FUNCIONAL DE LA GLICOPROTEINA-P (TRANSPORTADOR DE MULTIPLES FARMACOS) TRASPLANTADA A OVOCITOS DE XENOPUS LAEVIS.
    Autor: ALEU VILALTA JORDI.
    Año: 1995.
    Universidad: ALICANTE.
    Centro de lectura: MEDICINA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: INSTITUTO DE NEUROCIENCIAS PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIAS.
    Resumen: LA GLICOPROTEINA-P ESTA IMPLICADA EN EL TRANSPORTE DE FARMACOS ANTITUMORALES AL EXTERIOR CELULAR EN LAS CELULAS TUMORALES CON FENOTIPO RESISTENTE,Y POR TANTO, ES CAUSA DEL FRACASO DE LA QUIMIOTERAPIA A DICHOS TUMORES. ADICIONALMENTE, EN LA BUSQUEDA DE UN PAPEL FISIOLOGICO PARA LA MISMA, SE LE HA ASIGNADO UNA SEGUNDA ACTIVIDAD, LA DE CANAL DE CLORURO REGULADOR DEL VOLUMEN CELULAR. EL ESTUDIO DE LA ASIGNADA BIFUNCIONALIDAD SE REALIZA MEDIANTE EL EMPLEO DE UNA NUEVA METODOLOGIA BASADA EN LA INCORPORACION EN LA MEMBRANA DEL OVOCITO DE PROTEINAS PROCESADAS, METODOLOGIA QUE SE VALIDA MEDIANTE EL ESTUDIO DE LA INCORPORACION FUNCIONAL DEL RECEPTOR NICOTINICO DE ACETILCOLINA DE TORPEDO MARMORATA. INICIALMENTE SE OBTIENEN DOS MUESTRAS CON DISTINTO GRADO DE CONCENTRACION DE GLICOPROTEINA-P, MEDIANTE EL TRATAMIENTO SECUENCIAL DE LA FRACCION MICROSOMAL DE CELULAS LINFOBLASTICAS MURINAS CON DOS DETERGENTES (COLATO DE SODIO Y ZWITTERGENT 3-12). A CONTINUACION, SE INYECTAN EN LOS OVOCITOS, Y TRAS COMPROBAR LA INCORPORACION DE LA GLICOPROTEINA-P EN LA MEMBRANA DE LOS MISMOS, SE PROCEDE A SU ESTUDIO ELECTROFISIOLOGICO NO OBSERVANDOSE LA APARICION DE UNA CORRIENTE NUEVA NI ALTERACIONES EN LAS CARACTERISTICAS DE LA CORRIENTE NATIVA, AL APLICAR UN SHOCK HIPOTONICO A LOS OVOCITOS. SE CONCLUYE, POR TANTO, QUE LA GLICOPROTEINA-P NO ES UN CANAL DE CLORURO REGULADOR DEL VOLUMEN CELULAR.
  • ANALISIS BIOQUIMICO, GENETICO Y MOLECULAR DE UNA CARBOXIPEPTIDASA DE LA LEVADURA DE FISION SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE.
    Autor: ARGUELLES SANCHEZ M. ELADIA.
    Año: 1995.
    Universidad: OVIEDO.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA FUNCIONAL PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.
    Resumen: EN ESTE TRABAJO ABORDAMOS LA CARACTERIZACION GENETICA Y BIOQUIMICA DE UNA ACTIVIDAD CARBOXIPEPTIDASICA, DENOMINADA CARBOXIPEPTIDASA YSPS DE LA LEVADURA DE FISION SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE QUE LIBERA LEUCINA DE SUSTRATOS PEPTIDICOS TALES COMO EL SUSTRATO CBZ-GLY-LEU.HEMOS PURIFICADO EL ENZIMA EMPLEANDO DISTINTOS PASOS CROMATOGRAFICOS Y HEMOS DESCUBIERTO QUE EL ENZIMA ES UN OLIGOMERO. EL ENZIMA MUESTRA GRAN AFINIDAD POR LA LEUCINA EN EL EXTREMO CARBOXILO TERMINAL, SIEMPRE QUE EL PENULTIMO AMINOACIDO SEA PEQUEÑO Y SIN CARGA. EL VALOR DE LA KM PARA LOS SUSTRATOS CBZ-GLY-LEU, CBZ-GLY-GLY-LEU, CBZ-ALA-LEU SON DE 6,7 MM, 6 MM Y 20 MM, RESPECTIVAMENTE. LA CARBOXIPEPTIDASA YSPS PERTENECE AL GRUPO DE LAS METALOPROTEASAS, COMO SE DEDUCE DEL COMPORTAMIENTO QUE MUESTRA CON DISTINTOS INHIBIDORES TIPICOS DE PROTEASAS Y DE IONES METALICOS. EL ENZIMA ES UNA GLICOPROTEINA, CON TRES SITIOS POTENCIALES DE GLICOSILACION, COMO SE DEDUJO TRAS REALIZAR DISTINTAS DIGESTIONES CON ENDO H. HEMOS OBTENIDO ANTICUERPOS QUE RECONOCEN ESPECIFICAMENTE A LA CARBOXIPEPTIDASA YSPS EN UN EXTRACTO CRUDO DE LA LEVADURA DE FISION. MEDIANTE MUTAGENESIS CON EMS, SE AISLO UNA CEPA DEFICIENTE EN ACTIVIDAD CARBOXIPEPTIDASICA QUE PORTA CON UNA MUTACION CROMOSOMICA Y RECESIVA, Y AFECTA AL GEN ESTRUCTURAL DEL ENZIMA. TAMBIEN COMENZAMOS LA CARACTERIZACION MOLECULAR DE LA CARBOXIPEPTIDASA YSPS Y HEMOS AISLADO PLASMIDOS RECOMBINANTES DE UNA GENOTECA QUE SON CAPACES DE COMPLEMENTAR LA MUTACION PREVIAMENTE AISLADA.
  • EXPRESION EN ESCHERICHIA COLI Y BACULOVIRUS DE LA PROTEINA HC. LOCALIZACION DE UN NUEVO TIPO DE ENLACE EN EL COMPLEJO HC-IGA.
    Autor: CALERO LARA MIGUEL.
    Año: 1995.
    Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.
    Resumen: LA PROTEINA HC O A1-MIGROGLOBULINA ES UNA LIPOCALINA QUE SE ENCUENTRA AMPLIAMENTE DISTRIBUIDA EN TODOS LOS FLUIDOS FISIOLOGICOS, BIEN EN FORMA MONOMERICA ASOCIADA A UN CROMOFORO FLUORESCENTE, O FORMANDO COMPLEJOS CON IGA. EL MONOMERO ESTA COMPUESTO POR UNA UNICA CADENA POLIPEPTIDICA DE 183 AMINOACIDOS ESTANDO LA CISTEINA (34) ASOCIADA COVALENTEMENTE A UN CROMOFORO A TRAVES DE UN ENLACE RESISTENTE A LA REDUCCION. LA PROTEINA HC MUESTRA PROPIEDADES INMUNORREGULADORAS IN VITRO Y EL COMPLEJO HC-IGA ES LA CUARTA ESPECIE DE INMUNOGLOBULINA CIRCULANTE MAS ABUNDANTE EN PLASMA. EN ESTA TESIS, SE HA LOCALIZADO EL SITIO DE UNION ENTRE LA PROTEINA HC Y LA IGA, DEMOSTRANDOSE LA PARTICIPACION DEL CROMOFORO EN ESTE ENLACE COVALENTE DE CARACTERISTICAS NOVEDOSAS. ASIMISMO, SE HAN AISLADO Y PURIFICADO POR PRIMERA VEZ OTROS DOS COMPLEJOS PLASMATICOS: HC-ALBUMINA Y HC-IGA-ALBUMINA, QUE PRESENTAN PROPIEDADES ESTRUCTURALES ANALOGAS AL COMPLEJO HC-IGA. POR OTRO LADO, LA PROTEINA HC HA SIDO EXPRESADA EN ESCHERICHIA COLI Y CELULAS DE INSECTO. PUDIENDOSE UTILIZAR LA EXPRESION EN CELULAS DE INSECTO COMO UN METODO DE OBTENCION DE PROTEINA HC PARA ESTUDIOS DE ESTRUCTURA Y FUNCION. POR ULTIMO, SE HA ESTUDIADO EN PROFUNDIDAD LA HETEROGENEIDAD EN CARGA Y MASA DE LA PROTEINA HC, AISLANDOSE Y CARACTERIZANDOSE ESPECTROSCOPICAMENTE DISTINTAS SUBPOBLACIONES DE LA PROTEINA, ASI COMO NUEVAS UNIDADES CROMOFORICAS EN UN ESTUDIO COMPARATIVO CON LA ALBUMINA.
  • PURIFICACION Y CARACTERIZACION DE LA PROTEINA QUINASA DEPENDIENTE DE CAMP DE MYTILUS GALLOPROVINCIALIS.
    Autor: CAO TRIGO JESUS.
    Año: 1995.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA E BIOLOXIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA E BIOLOXIA MOLECULAR.
    Resumen: SE HA LLEVADO A CABO LA PURIFICACION Y CARACTERIZACION DE LA PROTEINA QUINASA DEPENDIENTE DE CAMP DE MYTILUS GALLOPROVINCIALIS. LA PROTEINA ESTA COMPUESTA POR DOS TIPOS DE SUBUNIDADES, CATALITICA Y REGULADORA. LA SUBUNIDAD CATALITICA PRESENTA UNAS PROPIEDADES FISICAS Y CINETICAS, Y UN MECANISMO DE REGULACION PRACTICAMENTE IDENTICAS A LA ENZIMA DE MAMIFEROS. EN MEJILLON SE IDENTIFICO UNA PROTEINA QUE PUEDE ACTUAR COMO SUBUNIDAD REGULADORA DE LA PROTEINA QUINASA A EN MEJILLON. LOS ESTUDIOS DE CARACTERIZACION REVELAN UN COMPORTAMIENTO SIMILAR A LA ISOFORMA RII TIPO BETA DE MAMIFEROS. SE HAN IDENTIFICADO OTRAS DOS PROTEINAS QUE UNEN CAMP, Y PROBABLEMENTE SE GENERAN POR PROTEOLISIS DE LA SUBUNIDAD REGULADORA. LOS RESULTADOS OBTENIDOS SUGIEREN QUE EN MEJILLON EXISTE UN SOLO TIPO DE PROTEINA QUINASA DEPENDIENTE DE CAMP. SE HAN IDENTIFICADO NUMEROSAS PROTEINAS QUE INTERACCIONAN CON LA SUBUNIDAD REGULADORA DE MAMIFEROS (TIPO RII ALFA), SIN EMBARGO SU UNION CON LA SUBUNIDAD REGULADORA DE MEJILLON NO ES POSIBLE.
  • SAP 420, A420 DDA SINAPSIS ASOCIADA A LA PROTEINA.
    Autor: CASES LANGHOFF CLAUDIA.
    Año: 1995.
    Universidad: BARCELONA .
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: GENETICA.
    Resumen: SE HA CARACTERIZADO UNA PROTEINA DE 420 KDA ASOCIADA A LA SINAPSIS, DENOMINADA SAP 420, LA SAP 420 SE ENCUENTRA LOCALIZADA EXCLUSIVAMENTE EN LA ZONA ACTIVA DE TERMINALES PRESIPNAPTICA. EN TODAS LAS REGIONES ANALIZADAS DEL SISTEMA NERVIOSO. NO TODAS LAS SINAPSIS SON INMUNORREACTIVAS. LAS SINAPSIS INMUNORREACTIVAS SE CARACTERIZAN POR TENER DIFERENTES PROPIEDADES FISIOLOGICAS Y UTILIZAN DIFERENTES TIPOS DE NEUROTRANSMISORES. SAP420 NO ESTA CODIFICADO POR MRNA ESPECIFICO DEL SISTEMA NERVIOSO DE 14 Y 16 KB QUE SON EXPRESADOS DIFERENCIALMENTE A LO LARGO DEL DESARROLLO. LA SECUENCIA PRIMARIA DEDUCIDA A PARTIR DE LOS 8KB DE CDNA CLONADAS NO PRESENTA NINGUNA SIMILITUD CON LA SECUENCIA EN BASE DE DATOS.
  • EFECTO DEL CONTENIDO DE COLESTEROL CELULAR Y LA DISPONIBILIDAD DE MEVALONATO SOBRE PROTEINAS QUE UNEN GTP Y ADENILIL CICLASA. ESTUDIO DE SU PAPEL SOBRE LA PROLIFERACION CELULAR.
    Autor: CHILOECHES GALVEZ ANTONIO.
    Año: 1995.
    Universidad: ALCALA.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.
    Resumen: LA TESIS PRESENTADA MUESTRA COMO CAMBIOS EN LA SINTESIS DE COLESTEROL CELULAR SON CAPACES DE MODIFICAR LA PRESENCIA DE LAS SUBUNIDADES ALFA DE LAS PROTEINAS G TRIMERICAS EN LA MEMBRANA PLASMATICA, Y LA PRESENCIA DE RAS; ALTERANDO TAMBIEN LA ACTIVIDAD DE SUS EFECTORES (ADENILIL CICLASA Y MAPK, RESPECTIVAMENTE). DEMOSTRAMOS QUE LA DISPONIBILIDAD DE MEVALONATO Y NO EL CONTENIDO DE COLESTEROL SON IMPRESCINDIBLES PARA ESTOS SISTEMAS DE TRANSDUCCION DE SEÑALES. ADEMAS; DEMOSTRAMOS QUE LA FALTA DE COLESTEROL, COMO ESTA AMPLIAMENTE DESCRITO ES FUNDAMENTAL PARA LA PROLIFERACION CELULAR. LA FALTA DE COLESTEROL IMPIDE EL CRECIMIENTO Y AUMENTA LOS NIVELES DE RAS EN LA MEMBRANA PLASMATICA; MIENTRAS QUE EN PRESENCIA DE COLESTEROL, LOS NIVELES DE RAS ESTAN DISMINUIDOS Y EXISTE UNA PROLIFERACION CELULAR NORMAL. LA UNICA RELACION QUE SE ESTABLECE ENTRE LA PROTEINA RAS Y LA SISTESIS DE COLESTEROL, SE CORRESPONDE CON LOS NIVELES DE MEVALONATO. ESTO INDICA QUE EL EFECTO DEL COLESTEROL SOBRE LA PROLIFERACION CELULAR ES INDEPENDIENTE DE LA VIA DE TRANSDUCCION DE SEÑALES EN LA QUE SE ENCUENTRA LA PROTEINA RAS, Y QUE DEBE EJERCER SUS EFECTOS EN ALGUN PUNTO POR DEBAJO DE LA CASCADA DE PROTEINAS MAPKS.
  • INTERACCION FUNCIONAL ENTRE PROTEINAS IMPLICADAS EN EL RECONOCIMIENTO MOLECULAR DE LA ADENOSINA.
    Autor: CIRUELA ALFEREZ FRANCISCO.
    Año: 1995.
    Universidad: BARCELONA.
    Centro de lectura: BIOLOGIA .
    Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENT DE BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR. PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.
    Resumen: LA ADENOSINA, ADEMAS DE INTERVENIR EN EL METABOLISMO ENERGETICO CELULAR, POSEE UNA FUNCION EXTRACELULAR COMO AUTOCOIDE AL INTERACCIONAR CON RECEPTORES ESPECIFICOS DE MEMBRANA. LA ADENOSINA GENERADA EN EL MEDIO EXTRACELULAR PUEDE EJERCER SUS EFECTOS VIA DOS SISTEMAS DIFERENTES: UNO ES LA ACCION DIRECTA SOBRE SUS RECEPTORES ESPECIFICOS, MIENTRAS QUE EL OTRO ES SU TRANSPORTE HACIA EL INTERIOR CELULAR, CONTRIBUYENDO ASI A LA RECUPERACION DE NUCLEOSIDOS PURINICOS. EL TRANSPORTADOR EQUILIBRATIVO DE NUCLEOSIDOS SENSIBLE A NBTI (FORMA ES) ES UNA PROTEINA DE 65 KDA DE PESO MOLECULAR CON CAPACIDAD DE PRESENTAR DISTINTAS ASOCIACIONES OLIGOMERICAS. EL TRANSPORTADOR PRESENTE EN CELULAS LLC-PK1 SE REGULA POR UN MECANISMO DE FOSFORILACION, PROBABLEMENTE MEDIANTE LA PROTEINA QUINASA A. LA CARACTERIZACION DE LOS RECEPTORES QUE ESTAN INTERACCIONANDO CON LA ADENOSINA, SE HA REALIZADO EMPLEANDO ANTICUERPOS POLICLONALES ANTIPEPTIDICOS QUE RECONOCEN ESPECIFICAMENTE AL RECEPTOR A1 DE ADENOSINA DE DIVERSAS PROCEDENCIAS, DEMOSTRANDOSE TRES HECHOS IMPORTANTES: LA EXISTENCIA DE UNA FORMA DIMERICA DEL RECEPTOR, LA CAPACIDAD DE INTERACCION DE LA ECTOADENOSINA DESAMINASA (ENZIMA QUE METABOLIZA ADENOSINA EN EL MEDIO EXTRACELULAR) CON EL RECEPTOR A1 (INTERACCION PROTEINA-PROTEINA), FACILITANDO TANTO LA UNION DE LIGANDOS COMO LA TRANSDUCCION DE LA SEÑAL; FINALMENTE, SE HA PUESTO DE MANIFIESTO QUE LOS RECEPTORES A1 DE ADENOSINA, EN EL PROCESO DE DESENSIBILIZACION POR SATURACION CON EL AGONISTA, SUFREN UN PROCESO DE AGREGACION EN LA SUPERFICIE CELULAR RESULTADO DE UNA FOSFORILACION EN SER/THR DEL RECEPTOR.
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