PROTEINAS, 19

Autor: LOPEZ AVALOS M. DOLORES.
Año: 1994.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA EVOLUTIVA.

Resumen: EL ORGANO SUBCOMISURAL ES UNA GLANDULA CEREBRAL UBICADA EN LA PARED DORSAL DEL TERCER VENTRICULO CEREBRAL. SU SECRECION ESTA CONSTITUIDA POR GLUCOPROTEINAS QUE, TRAS SER LIBERADAS APICALMENTE AL VENTRICULO, POLIMERIZAN Y FORMAN LA FIBRA DE REISSNER. ESTA DISCURRE EN SENTIDO ROSTRO-CAUDAL POR EL CANAL CENTRAL MEDULAR, DESPOLIMERIZANDOSE EN SU EXTREMO DISTAL. SE HA SUGERIDO LA EXISTENCIA DE UNA SECRECION BASAL DE LAS CELULAS DEL OSC HACIA VASOS SANGUINEOS Y LEPTOMENINGE. LA FUNCION DEL OSC Y SU SECRECION SE DESCONOCE HASTA EL MOMENTO, A PESAR DE SER UNA GLANDULA CEREBRAL DE TEMPRANA APARICION EN LA ONTOGENIA Y EN LA FILOGENIA. LOS ESTUDIOS ENCAMINADOS A ANALIZAR LA NATURALEZA DE LA SECRECION DEL OSC HAN LLEVADO A PROPONER QUE ESTA CONSTITUIDA POR GLUCOPROTEINAS DE TIPO N-LIGADAS. ESTAS SE SINTETIZAN EN EL RETICULO ENDOPLASMATICO, Y A CONTINUACION SON PROCESADAS Y TRANSPORTADAS A GRANOS DE SECRECION. LOS COMPUESTOS DE SECRECION MADUROS SON SIALOGLUCOPROTEINAS CON UN OLIGOSACARIDO DE TIPO COMPLEJO. PARA EL ANALISIS DE LA SECRECION EN UN VERTEBRADO INFERIOR SE HA ESCOGIDO EL ELASMOBRANQUIO SCYLIORHINUS CANICULA. ESTE ANALISIS SE BASA EN EL EMPLEO DE ANTISUEROS Y LECTINAS PARA MARCAR LOS COMPUESTOS SECRETORIOS EN SECCIONES DE OSC Y EN EXTRACTOS DE TEJIDO. PARA ELLO SE PRODUJERON ANTICUERPOS CONTRA LAS BANDAS ELECTROFORETICAS CORRESPONDIENTES A TALES COMPUESTOS, CUYOS PESOS MOLECULARES ESTIMADOS FUERON 600, 475, 400 Y 145 KDA. EL COMPUESTO DE 600 KDA SE PROPONE COMO POSIBLE PRECURSOR POR: I) SER EL DE MAYOR PESO MOLECULAR DE LOS CUATRO, II) LOCALIZARSE EN LAS CISTERNAS DEL RETICULO ENDOPLASMATICO Y EN LOS GRANOS SECRETORIOS, III) REACCIONAR EL ANTISUERO CONTRA EL CON EL RESTO DE LOS COMPUESTOS DE MENOR PESO MOLECULAR. LOS COMPUESTOS DE 475, 400 Y 145 KDA CORRESPONDEN A FORMAS PROCESADAS A PARTIR DEL ANTERIOR, YA QUE: I) SON RECONOCIDOS POR EL ANTISUERO CONTRA EL COMPUESTO DE 600 KDA, II) SE LOCALIZAN EN GRANOS DE SECRECION, Y NO EN EL RETICULO ENDOPLASMATICO. LA DESGLUCOSILACION DE LOS COMPUESTOS SECRETORIOS MEDIANTE UNA GLUCOPEPTIDASA QUE ROMPE ESPECIFICAMENTE ENLACES TIPO N NOS PERMITE CONFIRMAR QUE: I) LAS GLUCOPROTEINAS DEL OSC DE LA PINTARROJA SON N-LIGADAS, II) LA BAJA CONTRIBUCION DE LOS OLIGOSACARIDOS AL PESO MOLECULAR DE LAS MISMAS, III) EL GRAN TAMAÑO DE SU COMPONENTE PROTEICO. EN VARIOS ELASMOBRANQUIOS EL ANTISUERO CONTRA LOS COMPUESTOS MADUROS REVELO LA PRESENCIA DE LOS MISMOS EN PROLONGACIONES BASALES, LO QUE SUPONE UNA PRUEBA A FAVOR DE LA EXISTENCIA DE UNA RUTA BASAL DE SECRECION. DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO DE LA PINTARROJA APARECE UNA ESTRUCTURA TRANSITORIA, EL ORGANO FLEXURAL, DE CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS E INMUNOLOGICAS SIMILARES A LAS DEL OSC. PARECE EXISTIR UNA IDENTIDAD ENTRE LOS COMPUESTOS SECRETORIOS DE AMBAS ESTRUCTURAS.

Autor: MACIAN JUAN FERNANDO.
Año: 1994.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR 030A.

Resumen: HEMOS ANALIZADO LA ORGANIZACION TRANSCRIPCIONAL DEL AGRUPAMIENTO GENICO RPMH-RNPA-ORF60K-ORF50K SITUADO EN EL MINUTO 83 DEL CROMOSOMA DE E. COLI, UTILIZANDO UN NUEVO SISTEMA DE PLASMIDOS DISEÑADOS PARA CONSTRUIR FUSIONES TRANSCRIPCIONALES CON LACZ. LOS DOS PRIMEROS GENES SE TRANSCRIBEN DESDE LOS PROMOTORES SITUADOS POR DELANTE DE RPMH. HEMOS DESCRITO 2 NUEVOS PROMOTORES QUE DIRIGEN LA TRANSCRIPCION DE ORF60K Y ORF50K. EN EL INTERIOR DE RNPA SE SITUA UN TERMINADOR DE LA TRANSCRIPCION POSIBLEMENTE DEPENDIENTE DE RHO. ENTRE RNPA Y ORF60K SE LOCALIZA OTRO TERMINADOR DEPENDIENTE DE FACTORES Y POR DELANTE DE ORF50K EXISTE UN TERMINADOR SIMPLE DE LA TRANSCRIPCION. HEMOS DETECTADO MENSAJEROS POLICISTRONICOS QUE COMPRENDEN LOS CUATRO GENES Y, POR TANTO, EN SENTIDO ESTRICTO CONSTITUYEN UNA UNIDAD TRANSCRIPCIONAL. LA EXPRESION DE RPMH NO SE REGULA POR VELOCIDAD DE CRECIMIENTO, A DIFERENCIA DE LA DE RNPA QUE ES DIRECTAMENTE PROPORCIONAL A LA VELOCIDAD DE CRECIMIENTO. C5, PROTEINA CODIFICADA POR RNPA, ESTA IMPLICADA EN LA AUTORREGULACION DE LA EXPRESION DE ESTE GEN. 60K, PROTEINA CODIFICADA POR ORF60K, ES UNA PROTEINA INTEGRAL DE MEMBRANA. 50K, CODIFICADA POR ORF 50K, ES UNA GTPASA ASOCIADA A MEMBRANA, AUNQUE PRESENTA TAMBIEN UNA LOCALIZACION CITOPLASMATICA. ESTA PROTEINA ESTA POSIBLEMENTE IMPLICADA EN EL CONTROL DE LA DIVISION CELULAR.

Autor: MARTINEZ HERRERIAS JOSE CRISTOBAL.
Año: 1994.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA FISICA PROGRAMA DE DOCTORADO: AGROQUIMICA AVANZADA .

Resumen: EN CUANTO A LA DESNATURALIZACION DE LAS PROTEINAS ESTUDIADAS, PODEMOS DECIR QUE EN GENERAL SE EXPLICA CON MODELOS DE EQUILIBRIO SENCILLOS. ALGUNAS DE ELLAS COMO EL DOMINIO SH3 DE ESPECTRINA, BARNASA E, INCLUSO, BARSTAR PUEDEN DESCRIBIRSE CON UN MODELO DE DOS ESTADOS, AUNQUE EN LA BARSTAR EL MODELO PARECE SER ALGO MAS COMPLEJO, EXISTIENDO ALGUN PROCESO IRREVERSIBLE. LA CHEY, EN CAMBIO, PRESENTA UN MECANISMO MUY COMPLEJO PARA SU DESNATURALIZACION Y ADEMAS APARECE UN ESTADO INTERMEDIO CON LAS PROPIEDADES CARACTERISTICAS DE UN "MOLTEN GLOBULE". HEMOS CONFIRMADO QUE ESTE ESTADO TIENE UNA TENDENCIA CLARA A LA ASOCIACION SEGUN SE DESPRENDE TANTO EN ESTE CASO COMO EN EL DE BARSTAR A PH ACIDO. LA INTERACCION BARNASA -3' GMP NOS HA SERVIDO COMO BASE PARA COMPROBAR LOS MODELOS QUE DESPUES HAN SERVIDO PARA DESCRIBIR LA INTERACCION BARNASA - BARSTAR. EN GENERAL, LA INTERACCION BARNASA -3' GMP ES UN CASO TIPICO DE INTERACCION PROTEINA - NUCLEOTIDO Y EL CASO BARNASA - BARSTAR EN UNA INTERACCION BASTANTE FUERTE CON UN CARACTER CLARAMENTE ENTALPICO, DEBIDO FUNDAMENTALMENTE AL CARACTER POLAR DE LAS SUPERFICIES DE UNION.

Autor: MORATO LOPEZ ESPERANZA.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: EL TRABAJO DE ESTA TESIS DOCTORAL SE HA CENTRADO EN EL ESTUDIO DEL METABOLISMO ESPECIFICO DEL BAPP EN UN MODELO EXPERIMENTAL DE CELULAS GLIALES EN CULTIVO, UTILIZANDO DIVERSOS ANTICUERPOS POLICLONALES ESPECIFICOS CONTRA DISTINTOS DOMINIOS DEL BAPP Y DE B-A4 GENERADOS EN NUESTRO LABORATORIO. HEMOS CARACTERIZADO LA EXISTENCIA DE UNA ALTA EXPRESION Y UN ACTIVO PROCESAMIENTO DE DISTINTAS ISOFORMAS DEL BAPP EN CELULAS GLIALES, PROCESAMIENTO QUE ES DIFERENTE AL OBSERVADO EN OTROS TIPOS CELULARES. ADEMAS LAS CELULAS DE GLIA PRODUCEN Y LIBERAN AL MEDIO EXTRACELULAR EL PEPTIDO B-A4 DURANTE SU NORMAL METABOLISMO. NUESTROS DATOS SUGIEREN UN IMPORTNATE PAPEL DE LAS CELULAS GLIALES EN EL METABOLISMO DE BAPP EN EL TEJIDO NERVIOSO.

Autor: MUÑOZ MORUNO PURIFICACION.
Año: 1994.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I FISIOLOGIA. UNITAT BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECU PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: HEMOS PUESTO A PUNTO UN PROTOCOLO DE FRACCIONAMIENTO SUBCELULAR DE MUSCULO ESQUELETICO QUE PERMITE DETECTAR LA EXISTENCIA DE DOS DOMINIOS EN SARCOLEMA QUE SE CARACTERIZAN POR PRESENTAR UNA DISTRIBUCION MUTUAMENTE EXCLUYENTE DE DISTROFINA Y CLATRINA. EN CONDICIONES BASALES GLUT1 Y LOS RECEPTORES DE INSULINA SE DISTRIBUYEN MAYORITARIAMENTE EN MEMBRANA DE SUPERFICIE. LA MAYOR PARTE DE GLUT4 ES INTRACELULAR. GLUT1 ES EXCLUSIVO DE SARCOLEMA Y LOS RECEPTORES DE INSULINA SE LOCALIZAN EN TUBULO-T Y DOMINIOS SELECTIVOS DE SARCOLEMA. LA INSULINA PROMUEVE LA TRANSLOCACION DE GLUT4 DESDE UNA POBLACION DE VESICULAS INTRACELULARES A TUBULO-T Y A DOMINIOS SELECTIVOS DE SARCOLEMA. EN RESPUESTA A LA INSULINA SE PRODUCE LA INTERNALIZACION DE RECEPTORES DE INSULINA A MEMBRANAS INTRACELULARES. SE HAN IDENTIFICADO 3 POBLACIONES DE VESICULAS INTRACELULARES QUE CONTIENEN GLUT4 EN MUSCULO ESQUELETICO: UNA POBLACION SENSIBLE A LA INSULINA (PARTICIPA EN LA TRANSLOCACION DE GLUT4), UNA INSENSIBLE A LA INSULINA Y UNA POBLACION QUE SE ENRIQUECE EN RECEPTORES DE INSULINA EN RESPUESTA A LA HORMONA. NI LAS PROTEINAS SCAMPS NI CAVEOLINA PARECEN ESTAR IMPLICADAS EN LA VIA DE TRAFICO INTRACELULAR DE GLUT4. EN CARDIOMIOCITOS DE RATA LA INSULINA PROMUEVE LA TRANSLOCACION DE GLUT1 Y GLUT4. EN ESTE TIPO CELULAR EXISTE UN MAYOR GRADO DE COLOCALIZACION INTRACELULAR ENTRE GLUT4 Y PROTEINAS SCAMPS. SE SUGIERE UN PAPEL REGULADOR PARA LAS PROTEINAS SCAMPS EN EL TRAFICO INTRACELULAR DE GLUT4.

Autor: MUÑOZ VAN DEN EYNDE VICTOR.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTA TESIS SE HA CONSTRUIDO POR PRIMERA VEZ UN MODELO CUANTITATIVO DE LA TRANSICION HELICE/OVILLO PARA HETEROPEPTIDOS. ESTE MODELO ES CAPAZ DE DESCRIBIR TODA LA INFORMACION EXPERIMENTAL CONOCIDA HAS TA LA FECHA. EL MODELO SE HA UTILIZADO COMO HERRAMIENTA CONCEPTUAL PARA ESTUDIAR EL PAPEL DE LA CAJA DE ENCAPUCHAMIENTO EN LA HELICE ALFA ASI COMO PARA DESCRIBIR UN NUEVO MOTIVO ESTRUCTURAL (LA GRAPA HIDROFOBICA) QUE ESTABILIZA LA HELICE ALFA, Y VALIDAR UN METODO PARA EL CALCULO DE LAS PROPENSIONES INSTRINSICAS. SEGUIDAMENTE SE HA ESTUDIADO CUALES SON LOS REQUERIMIENTOS MINIMOS DE PROPENSION DE HELICE ALFA PARA LA FORMACION DE UNA PROTEINA ALFA/BETA PARALELA MEDIANTE EL ANALISIS CONFORMACIONAL POR DICROISMO CIRCULAR Y RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR DE TODOS LOS PEPTIDOS CORRESPONDIENTES A LAS HELICES ALFA DE CINCO PROTEINAS PERTENECIENTES A ESA FAMILIA. POR ULTIMO, SE ESTUDIA EL PAPEL DE LAS PROPENSIONES DE HELICE ALFA EN LA ESTABILIDAD DE LAS PROTEINAS MEDIANTE LA MODIFICACION, CON NUESTRO MODELO, DE LAS PROPENSIONES DE HELICE ALFA DE CADA UNA DE LAS HELICES ALFA DE LA PROTEINA CHE Y, ESTUDIANDO EL EFECTO DE ESAS MUTACIONES EN LA ESTABILIDAD DE LA PROTEINA.

Autor: OLMO SEVILLA ASUNCION.
Año: 1994.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: EXPERIMENTACION Y METODOLOGIA EN S. BIOLOGICOS MOLECULARES.

Resumen: EL TRABAJO HA CONSISTIDO EN CARACTERIZAR LOS MECANISMOS MOLECULARES DE RESISTENCIA AL FARMACO METOTREXATO (MTX) EN DOS LINEAS DE L. TROPICA. POR UN LADO SE HA ANALIZADO EL COMPORTAMIENTO QUE SIGUE UNA POBLACION HETEROGENEA EN RESPUESTA A SELECCION CON MTX, QUE REVELO LA EXISTENCIA DE UN ELEVADO GRADO DE POLIMORFISMO EN EL PATRON CROMOSOMICO ENTRE LOS INDIVIDUOS DE LA POBLACION SALVAJE Y LOS QUE SE SELECCIONABAN EN PRESENCIA DE FARMACO. ESTE POLIMORFISMO AFECTABA INCLUSO AL PATRON DE PROTEINAS Y MAS CONCRETAMENTE AL DE LA PROTEINA DIHIDROFOLATO REDUCTASA-TIMIDILATO SINTASA (DHFR-TS), BLANCO DE ACCION DEL FARMACO. ESTA PROTEINA DIFERIA ENTRE AMBAS POBLACIONES TANTO EN LA LOCALIZACION CROMOSOMICA COMO EN SU SECUENCIA NUCLEOTIDICA Y DE AMINOACIDOS A UNOS NIVELES COMPARABLES A LOS QUE MOSTRABAN DOS PROTEINAS PROCEDENTES DE DOS ESPECIES DIFERENTES DE LEISHMANIA. UNA CARACTERIZACION CINETICA DE LA DHFR-TS RECOMBINANTE DE AMBAS POBLACIONES REVELO QUE NO SE ENCONTRABAN MODIFICADOS LOS PARAMETROS CINETICOS ENTRE ELLAS NI TAMPOCO AFECTABAN LAS MODIFICACIONES AMINOACIDICAS A LA INTERACCION CON EL INHIBIDOR MTX. POR OTRO LADO, CUANDO LA INDUCCION DE LA RESISTENCIA SE HIZO PARTIENDO DE UNA LINEA CLONADA, EL CARIOTIPO MOLECULAR SE MANTUVO HOMOGENEO EN LAS LINEAS RESISTENTES COMPARADO CON EL DE LA LINEA SALVAJE. EL FENOMENO QUE CARACTERIZABA A LA LINEA RESISTENTE ERA LA PRESENCIA DE AMPLIFICACION GENICA, TANTO EN FORMA DE ELEMENTOS EXTRACROMOSOMICOS LINEALES COMO CIRCULARES, DERIVADOS DEL LOCUS H. TODOS LOS AMPLICONES CONTENIAN EL GEN DE LA PTERIDINA REDUCTASA QUE ESTA DIRECTAMENTE IMPLICADO EN CONFERIR RESISTENCIA A MTX. LA CARACTERIZACION ESTRUCTURAL DE LOS DIFERENTES AMPLICONES REVELO QUE TODOS CONTENIAN UNA DUPLICACION INVERTIDA DEL LOCUS H ORIGINAL, HABIENDO INTERVENIDO EN LA GENERACION DE TODOS ELLOS LOS MISMOS SITIOS DE RECOMBINACION.

Autor: RECHE GALLARDO PEDRO ANTONIO.
Año: 1994.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: EXPERIMENTACION Y METODOLOGIA EN SISTEMAS BIOLOGICOS Y MOLECULARES.

Resumen: TRYPANOSOMA CRUZI ES UN PROTOZOO FLAGELADO CAUSANTE DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS, UNA ENFERMEDAD ENDEMICA DE CENTRO Y SUR AMERICA QUE AFECTA ALREDEDOR DE 18 MILLONES DE PERSONAS Y A LA QUE UNOS 90 MILLONES ESTAN EXPUESTAS. HOY EN DIA NO EXISTE TRATAMIENTO NI VACUNA EFICAZ CONTRA EL PARASITO, POR LO QUE UNA APROXIMACION RACIONAL PARA ELLO CONSISTIRIA EN LA CARACTERIZACION DE ENZIMAS BLANCO DE ACCION DE FARMACOS. DOS DE ESTAS ENZIMAS SON LA DIHIDROFOLATO REDUCTASA (DHFR) Y LA TIMIDILATO SINTASA (TS), QUE JUNTO LA SERINA HIDROXIMETIL TRANSFERASA (SHT) CATALIZAN EL CICLO DE SINTESIS DE NOVO DEL DTMP. LA INHIBICION TANTO DE LA TS COMO LA DHFR PROVOCA LA MUERTE DEL PARASITO POR DISMINUCION DE LOS NIVELES DE DTMP. MIENTRAS QUE EN LA MAYOR PARTE DE LOS ORIGENES ESTAS DOS ENZIMAS SON INDEPENDIENTES, EN TODOS LOS PROTOZOOS DESCRITOS HASTA LA FECHA FORMAN PARTE DE UNA MISMA ENZIMA BIFUNCIONAL, LO QUE INDICA QUE "A PRIORI" EXISTEN CLARAS DIFERENCIAS ENTRE LA ENZIMA DEL PARASITO Y LAS CORRESPONDIENTES DEL HUMANO, QUE PODRIAN EXPLOTARSE EN EL DESARROLLO DE UN FARMACO EFECTIVO FRENTE EL PARASITO. CON ESTAS PREMISAS HEMOS AISLADO EL GEN DE LA ENZIMA DHFR-TS DE T. CRUZI, LO HEMOS SECUENCIADO Y HEMOS DESARROLLADO UN SISTEMA HETEROLOGO DE EXPRESION EN ESCHERICHIA COLI A PARTIR DEL CUAL ES POSIBLE PURIFICAR CANTIDADES RELATIVAMENTE ELEVADAS DE LA PROTEINA RECOMBINANTE DE T. CRUZI DE UN MODO SENCILLO Y CON UN COSTE REDUCIDO. CON LA ENZIMA PURIFICADA SE HAN REALIZADO DIFERENTES ESTUDIOS PARA SU CARACTERIZACION, TALES COMO LA DETERMINACION DE LOS PARAMETROS CINETICOS Y SU INTERACCION CON INHIBIDORES TALES COMO LA PIRIMETAMINA (PYR), EL TRIMETOPRIM (TMP) Y EL METOTREXATO (MTX). ADEMAS, SE HA EXPRESADO INDIVIDUALMENTE EN E. COLI EL DOMINIO DHFR DE LA ENZIMA BIFUNCIONAL DE T. CRUZI, SE HA PURIFICADO Y SE HA CARACTERIZADO SU COMPORTAMIENTO CINETICO ASI COMO SU INTERACCION CON LOS INHIBIDORES ENSAYADOS CON LA ENZIMA BIFUNCIONAL. LA PROFUNDIZACION EN EL CONOCIMIENTO DE LA DHFR-TS INICIADO DURANTE ESTE TRABAJO PODRIA FINALMENTE REFLEJARSE EN LA OBTENCION DE UN FARMACO EFECTIVO CONTRA LA ENFERMEDAD DE CHAGAS.

Autor: RIBALLO FERNANDEZ M. ENRIQUETA.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA II PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: LOS TRANSPORTADORES DE AZUCARES EN S. CEREVISIAE SE INACTIVAN IRREVERSIBLEMENTE CUANDO SE INHIBE LA SINTESIS DE PROTEINAS. ESTA INACTIVACION ES CONOCIDA COMO INACTIVACION CATABOLICA. SE HA ESTUDIADO SI ESTA INACTIVACION ES UNA PECULIARIDAD DE LOS TRANSPORTADORES DE AZUCARES O SI TAMBIEN AFECTA A OTRAS PROTEINAS DE MEMBRANA PLASMATICA. LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON EL SISTEMA DE TRANSPORTE DE K+ INDICAN QUE ESTA INACTIVACION PODRIA SER UNA CARACTERISTICA COMUN A OTRAS PROTEINAS DE MEMBRANA. POR OTRA PARTE SE HA DEMOSTRADO QUE ESTA INACTIVACION NO REQUIERE LA ACTIVIDAD DE LA PROTEINA KINASA DEPENDIENTE DE CAMPO. MEDIANTE EL USO DE MUTANTES CON LA VELOCIDAD DE ENDOCITOSIS ALTERADA SE HA DEMOSTRADO QUE LA PROTEOLISIS RESPONSABLE DE LA INACTIVACION TIENE LUGAR EN EL INTERIOR CELULAR TRAS LA INTERNALIZACION DE LOS TRANSPORTADORES. ADEMAS MEDIANTE EL USO DE MUTANTES QUE TIENEN ALTERADAS LAS FUNCIONES PROTELITICAS DEL PROTEASOMA Y DE LA VACUOLA, SE HA ESTABLECIDO QUE LA INACTIVACION OCURRE EN LA VACUOLA INDEPENDIENTEMENTE DE LA FUNCION DEL PROTEASOMA.

Autor: RIBO PANOSA MARC.
Año: 1994.
Universidad: GIRONA.
Centro de lectura: CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA Y BIOQUIMICA APLICADAS .

Resumen: EL PRESENTE TRABAJO TENIA COMO OBJETIVOS, POR UNA PARTE, EL ESTUDIO DE LA RIBONUCLEASA DE PANCREAS HUMANO Y LA CARACTERIZACION A NIVEL GLUCIDICO DE LA MISMA Y POR OTRA, LA EXPRESION DE DICHO ENZIMA PANCREATICO EN DIFERENTES SISTEMAS DE EXPRESION HETEROLOGA. EL ESTABLECIMIENTO DE UN SISTEMA DE PURIFICACION SENSIBLE Y RESOLUTIVO Y QUE CONSERVARA LA HETEROGENEIDAD GLUCIDICA HA PERMITIDO LLEVAR A CABO UN ESTUDIO DE LA GLICOSILACION DE LA RIBONUCLEASA PANCREATICA HUMANA. LOS RESULTADOS OBTENIDOS HAN DEMOSTRADO QUE LA RIBONUCLEASA DE PANCREAS HUMANO ES UNA PROTEINA QUE SE ENCUENTRA GLICOSILADA DE MANERA HETEROGENEA EN EL ORGANO DE ORIGEN. DICHA ENZIMA POSEE TRES DIANAS DE GLICOSILACION A TRAVES DE ASPARAGINAS, LAS CUALES SE ENCUENTRAN GLICOSILADAS EN PROPORCIONES DIFERENTES. EL ESTUDIO DE LA COMPOSICION EN MONOSACARIDOS DE LOS DIFERENTES GLICOPEPTIDOS REVELA QUE LA GLICOSILACION EN LA ASN-34 SERIA DEL TIPO HIBRIDO, MIENTRAS QUE LA GLICOSILACION EN LA ASN-76 SERIA DEL TIPO COMPLEJO. TAMBIEN SE HA DEMOSTRADO QUE EN LA RIBONUCLEASA DE PANCREAS HUMANO EXISTE UN NIVEL DE GLICOSILACION MAS ELEVADO QUE EL DESCRITO PARA OTRAS RIBONUCLEASAS HUMANAS. ESTOS RESULTADOS HAN DE PERMITIR ESTABLECER A CORTO PLAZO LAS POSIBILIDADES DE QUE LA RIBONUCLEASA DE PANCREAS HUMANO PUEDA SER UTILIZADA COMO MARCADOR TUMORAL DE DISFUNCIONES PANCREATICAS. EN LOS ESTUDIOS DE EXPRESION HETEROLOGA DE LA RIBONUCLEASA DE PANCREAS HUMANO, SE HA UTILIZADO EN PRIMER LUGAR EL SISTEMA DE EXPRESION EN LEVADURA BASADO EN EL PROMOTOR HIBRIDO ADH2/GAPDH EN EL QUE EL GEN SINTETICO CONSTRUIDO DURANTE EL PRESENTE TRABAJO SE HALLABA FUSIONADO EL PEPTIDO LIDER DEL FACTOR-ALFA. EN DOS CONSTRUCCIONES DIFERENTES BASADAS EN ESTE SISTEMA DE EXPRESION, SE HA OBSERVADO QUE LOS NIVELES DE EXPRESION ERAN RELATIVAMENTE BAJOS (0,1 MG/L) Y QUE EL PRODUCTO HETEROLOGO EXPRESADO PARECIA TENER UN GRADO DE HETEROGENEIDAD DE MASAS MOLECULARES DEBIDO A DIFERENTES GRADOS DE GLICOSILACION. POSTERIORMENTE, Y DEBIDO A LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN LA EXPRESION EN LEVADURA, SE HA CLONADO EL GEN EN DOS VECTORES DE EXPRESION EN ESCHERICHIA COLI BASADOS EN EL PROMOTOR DE LA RNA POLIMERASA DE T7 QUE SE DIFERENCIAN, EN QUE EN EL PRIMERO LA PROTEINA RECOMBINANTE ES EXPORTADA AL ESPACIO PERIPLASMICO, MIENTRAS QUE EN EL SEGUNDO, LA PROTEINA PERMANECE EN EL CITOPLASMA EN LOS DENOMINADOS CUERPOS DE INCLUSION. LOS NIVELES DE PRODUCCION EN AMBOS SISTEMAS OSCILAN ALREDEDOR DE 1 MG/L DE CULTIVO, Y EL PRODUCTO EXPRESADO ES HOMOGENEO ELECTROFORETICAMENTE Y CROMATOGRAFICAMENTE DESPUES DEL SISTEMA DE PURIFICACION DESARROLLADO. LA SECUENCIACION DEL EXTREMO N-TERMINAL INDICA QUE LA PROTEINA RECOMBINANTE ES PROCESADA CORRECTAMENTE DEL PEPTIDO SEÑAL PELB. LA RIBONUCLEASA PANCREATICA HUMANA RECOMBINANTE NO PRESENTA DIFERENCIAS SIGNIFICATIVAS EN LOS PARAMETROS CINETICOS ESTUDIADOS, NI CON RESPECTO AL ENZIMA AISLADO DE PANCREAS HUMANO, NI TAMPOCO CON LA RIBONUCLEASA DE PANCREAS BOVINO COMERCIAL UTILIZADA COMO CONTROL. LA UTILIZACION DE TECNICAS DE ADN RECOMBINANTE PARA LA EXPRESION DE LA RIBONUCLEASA PANCREATICA HUMANA DEBE POSIBILITAR LLEVAR A CABO EN UN FUTURO ESTUDIOS SOBRE EL MECANISMO CATALITICO- MEDIANTE EL USO DE TECNICAS DE MUTAGENESIS DIRIGIDA PUESTAS A PUNTO DURANTE LA REALIZACION DEL PRESENTE TRABAJO- ASI COMO GARANTIZAR CANTIDADES SUFICIENTES DE ENZIMA PARA REALIZAR ESTUDIOS ESTRUCTURALES Y SOBRE EL PLEGAMIENTO PROTEICO, Y PARA LA OBTENCION DE ANTICUERPOS MONOCLONALES QUE HAN DE PERMITIR LA IDENTIFICACION DE LA RIBONUCLEASA DE ORIGEN PANCREATICO DE ENTRE LAS DIFERENTES FORMAS QUE CONVIVEN EN EL SUERO.

Autor: RODRIGUEZ CRESPO JOSE IGNACIO.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN LA PRESENTE MEMORIA DE INVESTIGACION SE HA LLEVADO A CABO LA CARACTERIZACION TANTO ESTRUCTURAL COMO ANTIGENICA DE LA PROTEINA S DEL ANTIGENO DE SUPERFICIE DEL VIRUS B DE LA HEPATITIS CLONADA Y EXPRESADA EN CELULAS CHO ASI COMO DE CUATRO MUTANTES SENCILLOS DE CISTEINA POR SERINA Y DOS MUTANTES DOBLES. ASIMISMO, SE HA LLEVADO A CABO LA CARACTERIZACION DE LAS PROPIEDADES DE INTERACCION CON LIPIDOS DE UN PEPTIDO SINTETICO CORRESPONDIENTE AL EXTREMO N-TERMINAL DE LA PROTEINA S DEL HBSAG QUE PRESENTA HOMOLOGIAS DE SECUENCIA CON PEPTIDOS DE FUSION DE LA FAMILIA DE LOS RETROVIRUS Y DE LOS PARAMYXOVIRUS. DICHO PEPTIDO HA DEMOSTRADO SER CAPAZ DE INTERACCIONAR CON LIPIDOS PROMOVIENDO PROCESOS DE HEMOLISIS AGREGACION, MEZCLA DE LIPIDOS Y RUPTURA VESICULAR.

Autor: SALINERO ESCALADA OLGA.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR. PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR..

Resumen: HEMOS DETERMINADO LA EXISTENCIA DE UNA POBLACION DE APP (PROTEINA PRECURSORA DEL AMILOIDE) EN CEREBRO HUMANO, QUE SE GLICOSILA COMO UN PROTEOGLICANO (PG), EN PARTE COMO CONDRITIN-SULFATO (CS) Y EN PARTE COMO HEPARAN-SULFATO (HS). ESTE TIPO DE APP, SUPONE AL MENOS 2/3 DEL AMILOIDE TOTAL DE CEREBRO Y AUMENTA CON LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER UN 50%, SOBRE TODO LA SUBPOBLACION DE APP HS. EL APP PG SE PROCESA EN SU DOMINIO EXTRACELULAR GENERANDO UN GRUPO DE DERIVADOS DE PESOS MOLECULARES DECRECIENTES, QUE CONTIENEN LA SECUENCIA AMILOIDOGENICA COMPLETA. FUNCIONALMENTE EL APP-PG SE COMPORTA COMO UN MAL SUSTRATO ADHESIVO, PARA LAS NEURONAS HIPOCAMPALES DE RATA. A CONCENTRACIONES BAJA INDUCE LA NEURITACION Y LA RAMIFICACION DE LAS PROLONGACIONES. PARA ESTOS DOS FENOMENOS, EL APP PROCEDENTE DE LOS CEREBROS DE ALZHEIMER PROPORCIONA VALORES SUPERIORES. A ALTAS CONCENTRACIONES EL APP-PG DE CEREBROS CONTROLES MUESTRA UN CIERTO EFECTO "TOXICO". EL ANALISIS DEL PAPEL DE LAS CADENAS DE AZUCARES MUESTRA QUE LOS GLICOSAMINOGLICANOS DISMINUYEN LA TOXICIDAD DE LA PROTEINA. LAS CADENAS DE HS CONTRIBUYEN A LA ELONGACION DE LAS NEURITAS Y LAS DE CS AUMENTAN EL NUMERO DE CELULAS RAMIFICADAS, ASI COMO LA LONGITUD DE LAS MISMAS. LA SUMA DE LOS DOS TIPOS DE AZUCARES INCREMENTA LA CAPACIDAD ADHESIVA DEL APP. ESTOS RESULTADOS PUEDEN SUMINISTRAR UNA INFORMACION FUNDAMENTAL PARA EL CONOCIMIENTO DEL COMIENZO DE LA ACUMULACION Y DEPOSICION DEL PEPTIDO AMILOIDE EN LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER.

Autor: SOTO ALVAREZ MANUEL .
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR. PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR..

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE DESCRIBE LA CARACTERIZACION DE CUATRO ANTIGENOS DE LEISHMANIA INFANTUM. LA HISTONA H2A Y LAS PROTEINAS ACIDAS RIBOSOMICAS LIP2A LIP2B Y LIPO. SE HAN CARACTERIZADO LA ORGANIZACION GENICA DE LOS MISMOS ELABORANDOSE ESTUDIOS DE EXPRESION GENICA Y SU REGULACION. EN UNA SEGUNDA PARTE SE HA ESTUDIADO LA ANTIGENICIDAD DE LAS PROTEINAS DETERMINANDOSE LA LOCALIZACION DE LOS DETERMINANTES ANTIGENICOS DE LAS MISMAS. POR ULTIMO SE DETERMINO EL USO DE ESTAS PROTEINAS PARA ELABORAR UN DIAGNOSTICO SEROLOGICO DE LA LEISHMANIOSIS CANICA.

Autor: URIA CAMPO JOSE ANTONIO.
Año: 1994.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA FUNCIONAL, AREA DE BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE ABORDA EL ESTUDIO ESTRUCTURAL Y FUNCIONAL DE LA ZN-ALFA2- GLICOPROTEINA (ZN-ALFA2-GP), UNA PROTEINA PLASMATICA DESCUBIERTA EN 1961 Y CUYA FUNCION PERMANECE DESCONOCIDA. EL HALLAZGO EN NUESTRO LABORATORIO DE QUE LA ZN-ALFA2-GP SE ACUMULABA EN GRANDES CANTIDADES EN FLUIDO QUISTICO DE MUJERES CON ENFERMEDAD QUISTICA MAMARIA Y LA OBSERVACION DEL ALTO GRADO DE SIMILITUD ENTRE LA SECUENCIA DE AMINOACIDOS DE LA ZN-ALFA2-GP Y LOS ANTIGENOS DE HISTOCOMPATIBILIDAD HUMANOS, NOS LLEVO A PLANTEAR UN ESTUDIO MAS PROFUNDO DE ESTA PROTEINA. DE ESTA MANERA, SE LLEVO A CABO EL AISLAMIENTO DEL GEN QUE CODIFICA LA ZN-ALFA2-GP, LO CUAL NOS PERMITIO COMPROBAR EL PARALELISMO EXISTENTE ENTRE LA ESTRUCTURA DE LOS GENES DE LOS ANTIGENOS DE HISTOCOMPATIBILIDAD Y EL DE LA ZN-ALFA2-GP. ADEMAS DISPUSIMOS DE LA ZONA REGULADORA DEL GEN QUE NOS PERMITIO ABORDAR ESTUDIOS DE REGULACION CON EL FIN DE ESCLARECER QUE MECANISMOS ACTUAN EN LA EXPRESION DE ESTE GEN, TANTO EN CONDICIONES NORMALES COMO PATOLOGICAS. TAMBIEN SE LLEVARON A CABO ENSAYOS FUNCIONALES CON LA PROTEINA PURIFICADA, BASADOS EN LA SIMILITUD CON LOS HLA, Y QUE CONSISTIERON EN ESTUDIAR SU CAPACIDAD DE UNIR PEPTIDOS Y DE PARTICIPAR EN PROCESOS DE ADHESION CELULAR, PROCESOS CARACTERISTICOS DE LOS ANTIGENOS DE HISTOCOMPATIBILIDAD. FINALMENTE, ABORDAMOS EL AISLAMIENTO DEL GEN DE LA ZN-ALFA2-GP CON OBJETO DE LLEVAR A CABO ESTUDIOS DE REGULACION IN VIVO. EN ESTE SENTIDO, CABE DESTACAR QUE AISLAMOS EL CDNA QUE CODIFICA LA ZN-ALFA2-GP EN RATA QUE, ADEMAS, NOS PERMITIO COMPROBAR LA EXISTENCIA DE DOS ISOFORMAS DEL GEN DE LA ZN-ALFA2-GP QUE SE EXPRESAN EN HIGADO Y, QUE A BUEN SEGURO, CONFERIRIA A LA MOLECULA UNA CIERTA VARIABILIDAD PARA LLEVAR A CABO PROCESOS CARACTERISTICOS DE LOS ANTIGENOS DE HISTOCOMPATIBILIDAD.

Autor: VICENTE RUBIO JOSE IGNACIO DE.
Año: 1994.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: ASPECTOS BASICOS EN LA INVESTIGACION EN BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HA PURIFICADO UNA PROTEASA EXTRACELULAR DE PHYCOMYCES CUYA CARACTERIZACION INCLUYO LA DETERMINACION DE LA MASA MOLECULAR, PUNTO ISOELECTRICO, COMPOSICION DE AMINOACIDOS, COMPOSICION DE AZUCARES NEUTROS DE LA FRACCION GLUCIDICA DE LA PROTEINA, PH OPTIMO, ENERGIA DE ACTIVACION Y PARAMETROS TERMODINAMICOS DEL PROCESO DE INACTIVACION POR CALOR. SE ESTUDIO ASI MISMO EL MECANISMO CATALITICO, DETERMINANDOSE LAS CONSTANTES CINETICAS. SE HA AISLADO EL GEN CHS1 DE PHYCOMYCES, CODIFICADOR DE UNA QUITIN SINTETASA. LA REGION ESTRUCTURAL DE DICHO GEN COMPRENDE 2995 NUCLEOTIDOS Y CONSTA DE SIETE EXONES SEPARADOS POR SEIS INTRONES. DICHO GEN CODIFICA UN POLIPEPTIDO DEDUCIDO DE 826 AMINOACIDOS. LA COMPARACION DE LA SECUENCIA DEL GEN CHS1 CON SECUENCIAS DE QUITIN SINTETASAS DE OTROS HONGOS REVELO QUE EL GEN CHS1 CODIFICA UNA QUITIN SINTETASA DEL TIPO 2.

Autor: VILLEGAS HERNANDEZ VIRTUDES.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HA ESTUDIADO EN DETALLE EL PROCESO DE ACTIVACION DE LA PROCARBOXIPEPTIDASA B PANCREATICA PORCINA (PCPB), DESCRIBIENDOSE LOS EVENTOS MOLECULARES IMPLICADOS EN LA GENERACION DE LA CARBOXIPEPTIDASA B (CPB) ACTIVA. LA CPB PARTICIPA EN LA DEGRADACION DE SU PROPIO SEGMENTO DE ACTIVACION, ESCINDIENDO RESIDUOS C-TERMINALES DE FRAGMENTOS ORIGINADOS POR PROTEOLISIS TRIPTICA DE LA PCPB. SIN EMBARGO, LA ACCION DE LA CPB NO ES CRUCIAL PARA LA PRODUCCION DE UN ENZIMA TOTALMENTE FUNCIONAL, TAL Y COMO SE HABIA COMPROBADO EN LA PROCARBOXIPEPTIDASA A (PCPA). EN EL MODELO ESTUDIADO, EL PROCESO DE ACTIVACION ES UNICAMENTE DEPENDIENTE DEL PRIMER CORTE TRIPTICO, Y EL SEGMENTO DE ACTIVACION PIERDE TODA SU CAPACIDAD INHIBIDORA UNA VEZ SE HA SEPARADO DEL PROENZIMA. CONSIDERACIONES, QUE TIENEN EN CUENTA LAS ESTRUCTURAS TRIDIMENSIONALES DE LA PCPA Y LA PCPB, NOS LLEVAN A PROPONER QUE LAS DIFERENCIAS DE UNION MENCIONADAS SE DEBERIAN UNICAMENTE A VARIACIONES CONFORMACIONALES EN LA REGION QUE CONECTA EL DOMINIO DE ACTIVACION GLOBULAR CON EL ENZIMA. LA UTILIZACION DE INHIBIDORES DE LA ACTIVIDAD CPB DURANTE EL ESTUDIO HA SIDO DETERMINANTE EN LA CAPTURA DE INTERMEDIARIOS DE VIDA CORTA. IGUALMENTE, HA MOSTRADO QUE LA PRIMERA ACCION TRIPTICA TAMBIEN SE PUEDE DAR EN UN SEGUNDO ENLACE ESPECIFICO QUE SE CONVERTIRA EN ACCESIBLE EN FUNCION DE LOS LIGANDOS UNIDOS AL CENTRO ACTIVO EN EL ESTADO DE PROENZIMA. PARALELAMENTE, SE HA CLONADO EL CDNA CODIFICANTE PARA LA PCPB PORCINA, SE HA DISEÑADO UN SISTEMA DE EXPRESION Y SE HAN CONSTRUIDO UNA SERIE DE MUTANTES EN EL SEGMENTO DE ACTIVACION QUE POSIBILITAN EL ESTUDIO DE LA RELACION ESTRUCTURA-FUNCION.

Autor: VILLUENDAS DE CELIS RAQUEL.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR. PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR..

Resumen: EL GEN SUPRESOR DE TUMORES P53 CODIFICA UNA PROTEINA DE UNION A ADN, QUE ACTUA REGULANDO NEGATIVAMENTE EL CRECIMIENTO CELULAR Y ES CAPAZ DE INDUCIR APOPTOSIS: LA AUSENCIA O ALTERACION DE ESTA PROTEINA POR MUTACIONES EN EL GEN CONTRIBUYE AL CRECIMIENTO INCONTROLADO DE LA CELULA LA CONFORMACION MUTADA IMPLICA UNA ESTABILIZACION DE LA PROTEINA LO QUE PERMITE DETECTARLA POR TECNICAS INMUNOHISTOQUIMICAS. LA DETECCION DE LA PROTEINA P53 DE FORMA DIFUSA ES UN HALLAZGO FRECUENTE EN LINFOMAS DE ALTO GRADO HABIENDOSE ENCONTRADO EN EL 30% DE LOS 83 CASOS ESTUDIADOS. LA EXPRESION FOCAL DE P53 SE HA OBSERVADO EN LINFOMAS DE ALTO Y BAJO GRADO, INCLUYENDO LINFADENITIS REACTIVAS. EN UN 37% DE NUESTROS CASOS ESTA ESTABILIZACION DE LA PROTEINA ES SECUNDARIA A MUTACION, PERO EN UN 63%, EN CONTRA DE LO OBSERVADO EN OTROS TUMORES; LA ESTABILIZACION DE LA PROTEINA PARECE SECUNDARIO A ADHESION A OTRAS PROTEINAS LA DETECCION DIFUSA DE LA PROTEINA EN UN TERCIO DE LOS LINFOMAS DE ALTO GRADO SE RELACIONA CON UNA CORTA SUPERVIVENCIA DE VIDA, PUDIENDOSE CONSIDERAR COMO FACTOR PRONOSTICO. ESTA RELACION ERA MAS FUERTE EN CASOS CON SIMULTANEA EXPRESION DE LA ONCOPROTEINA BCL2.

Autor: ALBALAT RODRIGUEZ RICARD.
Año: 1993.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: GENETICA.

Resumen: EL SISTEMA ALCOHOLDESHIDROGENASA (ADH) DE DROSOPHILA HA SIDO AMPLIAMENTE ANALIZADO, CONSTITUYENDO UN BUEN MODELO PARA ESTUDIOS DE ESTRUCTURA Y REGULACION GENICA, ANALISIS FILOGENETICOS Y TRABAJOS BIOQUIMICOS Y ENZIMATICOS. EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA CARACTERIZADO LA REGION GENOMICA DEL GEN ADH DE DROSOPHILA LEBANONENSIS I DE DROSOPHILA IMMIGRANS, COMPARANDOLA CON OTRAS ESPECIES DEL GENERO DROSOPHILA. LA HOMOLOGIA ENTRE LAS SEQUENCIAS ES DEL 78% APROXIMADAMENTE. DENTRO DE ESTA REGION GENOMICA SE INCLUYE TAMBIEN OTRO GEN, QUE POR LA HOMOLOGIA QUE PRESENTA CON EL GEN ADH SE HA DENOMINADO ADH-DUP. A NIVEL DE PROTEINA, SE HA REALIZADO MUTAGENESIS DIRIGIDA DEL GEN ADH PARA ESTUDIAR DETERMINADOS AMINOACIDOS IMPLICADOS EN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA. LOS RESULTADOS INDICAN QUE LA TYR152 PARTICIPA EN LA TRANSFERENCIA ELECTRONICA DE LA OXIDACION DEL ALCOHOL. LA ALA13 Y LA ASN56, ESTAN IMPLICADOS EN LA UNION DEL COFACTOR. FINALMENTE, EL EXTREMO C-TERMINAL DE LA PROTEINA PARTICIPA EN LA UNION ENZIMA-SUBSTRATO, PROPORCIONANDO EN AMBIENTE HIDROFOBICO NECESARIO PARA LA REACCION.

Autor: BANDRES PONCE JUAN CARLOS.
Año: 1993.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: 1. EN CELULAS T HUMANAS, VIH NEF NO AFECTA LA INDUCCION DE LOS FACTORES DE TRANSCRIPCION NF-KB Y AP-1, Y LA SUBSECUENTE TRANSCRIPCION DE LOS GENES DE VIH O IL-2, EN RESPUESTA A LA ESTIMULACION A TRAVES DE MECANISMOS INDEPENDIENTES DE LA PROTEINA KINASA C. 2. EN CELULAS T HUMANAS, VIH NEF REGULA LA INDUCCION DE LOS FACTORES DE TRANSCRIPCION NF-KB Y AP-1, Y LA SUBSECUENTE TRANSCRIPCION DE LOS GENES DE VIH O IL-2, EN RESPUESTA A LA ESTIMULACION A TRAVES DEL RECEPTOR DE CELULAS T Y SU FUNCION ES INDEPENDIENTE DE LA PROTEINA KINASA C. 3. EL FENOTIPO DE VIH NEF QUE INCLUYE UNA TREONINA EN LA POSICION 15 RESULTA EN LA FOSFORILACION DE LA PROTEINA Y LA PERDIDA DE SU FUNCION COMO REGULADORA DE LA TRANSCRIPCION. 4. MUTACIONES EN VIH NEF DESTINADAS A VARIAR EL ESTADO DE FOSFORILACION DE LA PROTEINA DEMUESTRAN QUE LA EXISTENCIA DE UNA ALANINA EN LA POSICION 15 ES CRITICA PARA SU FUNCION COMO REGULADORA DE LA TRANSCRIPCION.

Autor: BOQUE LLORDES LLUIS.
Año: 1993.
Universidad: POLITECNICA DE CATALUÑA.
Centro de lectura: INGENIEROS INDUSTRIALES.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: INGENIERIA QUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR ESTRUCTURAL .

Resumen: SE HAN CRISTALIZADO Y RESUELTO LAS ESTRUCTURAS CRISTALINAS DE CUATRO DERIVADOS COVALENTES DE RIBONUCLEASA A DE PANCREAS BOVINO, TRES DE ELLAS CORRESPONDIENDO A LA MODIFICACION CON FOSFATO DE PIRIDOXAL UNIDO COVALENTEMENTE A LOS RESIDUOS LISINA-1 (DERIVADO A), LISINA-7 (DERIVADO B) Y LISINA-41 (DERIVADO C). EL CUARTO DERIVADO CORRESPONDE A LA MODIFICACION COVALENTE CON 5'-MONOFOSFATO DE 6-CLOROPURINA RIBOSIDO EN EL EXTREMO N-TERMINAL DE LA PROTEINA. LAS ESTRUCTURAS, RESUELTAS MEDIANTE TECNICAS DE REEMPLAZO MOLECULAR Y AFINADAS A ALTA RESOLUCION, PERMITEN LA OBSERVACION DE DETALLES QUE SE RELACIONAN CON PROPIEDADES BIOQUIMICAS DE DICHOS DERIVADOS, ASI COMO OTRAS CARACTERISTICAS RELACIONADAS CON EL MECANISMO CATALITICO DEL ENZIMA.