PROTEINAS, 26

Autor: MEIRELES DA SILVA GONCALVES RIBEIRO JOAO NUNO.
Año: 1987.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA, FACULTAD DE MEDICINA UNIVERSIDAD DE EXTREMADURA, BADAJOZ Y DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA,.

Resumen: A PARTIR DE EXTRACTOS DE HIGADO DE RATA SE HA PURIFICADO UNA ACTIVIDAD, A LA QUE SE HA DENOMINADO NUCLEOSIDO 3'(2'), 5'-BISFOSFATO 3'(2')-FOSFOHIDROLASA. LA CONSTANTE DE MICHAELIS PARA EL ADENOSINA 2',5'-BISFOSFATO Y PARA EL ADENOSINA 3', 5'-BISFOSFATO FUE DE 10 UM. EL ENZIMA HIDROLIZABA, DE MANERA ESPECIFICA, EL FOSFATO SITUADO EN 2' O EN 3', PERO NO EL SITUADO EN 5' DE LA RIBOSA. EL PH OPTIMO FUE ALREDEDOR DE 8,0 Y SU PESO MOLECULAR DE 38.000. ESTA ACTIVIDAD PODRIA CORRESPONDER A LA RECOGIDA PREVIAMENTE POR LA COMISION DE ENZIMAS CON EL NUMERO EC 3.1.3.7. ASIMISMO, SE HAN ELABORADO TRES METODOS PARA CALCULAR EL PUNTO ISOELECTRICO (PI) DE PROTEINAS: COMPLETO, ABREVIADO Y SIMPLIFICADO. EN LOS DOS PRIMEROS, EL PI SE CALCULA TRAS LA RESOLUCION DE POLINOMIOS DE DISTINTO GRADO, DEPENDIENDO DEL NUMERO DE GRUPOS ACIDO-BASE QUE SE CONSIDEREN PRESENTES EN LA PROTEINA. CON EL METODO SIMPLIFICADO PUEDE CALCULARSE EL PI DE LA MAYOR PARTE DE LAS PROTEINAS CON AYUDA DE TAN SOLO DOS TABLAS QUE SE INCLUYEN EN ESTA TESIS.

Autor: MORENO PUERTAS COSME.
Año: 1987.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: CLINICA PUERTA DE HIERRO MADRID. SERVICIO DE BIOQUIMICA EXPERIMENTAL. DEPARTAMENTO DE MEDICINA INTERNA..

Resumen: DADA LA INCOGNITA ACTUAL ACERCA DE LOS SUBSTRATOS DEL ENZIMA D-AMINOACIDO OXIDASA Y SU PAPEL BIOLOGICO SE PROPONEN COMO SUBSTRATOS DEL MISMO ATOMOS DE CARBONO ALFA EN COMFORMACION BETA O SIMILAR CORRESPONDIENTES A PROTEINAS. ESTA PROPOSICION ESTA BASADA EN EL PARECIDO QUIMICO-ESTRUCTURAL ENTRE LAS ESTRUCTURASMENCIONADAS Y EL CARBONO X DE LOS D-AMINOACIDOS OBJETO DE LA CATALISIS. SE PROPONEN NUEVOS MECANISMOS DE ACCION PARA EL ENZIMA CUYO RESULTADO ES LA SINTESIS DE DERIVADOS OXIGENADOS (HIDROPEROXIDOS E HIDROXILOS) A NIVEL DEL CARBONO X DE LA PROTEINA. ESTUDIOS PRELIMINARES CON PEROXIDASA DE RABANO HAN MOSTRADO UNA PROFUNDA INFLUENCIA DE SUBSTRATOS DE ORIGEN PROTEICO Y EL PROCESO DE OXIDACION AEROBICA DE LOS PIRIDIN-NUCLEOTIDOS POR EL ENZIMA PEROXIDASA LO CUAL SUGIERE QUE SUS SUSTRATOS PODRIAN SER DE NATURALEZA PROTEICA.

Autor: PATERNAIN SUBERVIOLA JOSE LUIS.
Año: 1987.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA REUS (TARRAGONA). UNIVERSIDAD DE BARCELONA..

Resumen: LA LITOGENESIS RENAL COMIENZA CON LA DEPOSICION DE LA FASE SOLIDA A PARTIR DE LOS COMPONENTES CRISTALINOS EN DISOLUCION EN ORINA. SUS NIVELES DE SATURACION EN LA ORINA DETERMINARAN SU CAPACIDAD DE NUCLEACION. EN LA ZONA METAESTABLE DE SOBRESATURACION LA NUCLEACION NO ES ESPONTANEA SINO INDUCIDA POR AGENTES EXTRAÑOS AL MATERIAL PRECIPITADO Y SE PRODUCE LA LLAMADA NUCLEACION HETEROGENEA. SE IDENTIFICO EN LAS PROTEINAS DE LA ORINA DE LITIASICOS UNA ACTIVIDAD NUCLEANTE HETEROGENEA EN LA PRECIPITACION DE OXALATO. LA ACTIVIDAD SE MEDIA AÑADIENDO EN EL VOLUMEN FINAL DE 1 ML: TAMPON FOSFATO SODICO 0 5 MM PH 7 5 CACL SUB 2 0 75 MM A. OXALICO 0 5 MM 5X10 ELEVADO A 4 CPM DE A. ELEVADO A 14 C-OXALICO Y CANTIDADES CRECIENTES DE PROTEINAS DESDE 0 HASTA 100/UG. TRAS 4 HORAS DE INCUBACION A 4 GRADOS CENTIGRADOS SE DETERMINO LA RADIACTIVIDAD DE LOS PRECIPITADOS. LA ACTIVIDAD ESPECIFICA SE VALORO COMO LA PENDIENTE MAXIMA DE LA RELACION LINEAL DEL OXALATO PRECIPITADO CON RESPECTO A LAS PROTEINAS AÑADIDAS. SE PURIFICO A PARTIR DE LA ORINA DE LITIASICOS OXALO-FOSFO-CALCICOS UNA PROTEINARESPONSABLE DE LA ACTIVIDAD NUCLEANTE PROMOTORA DE LA PRECIPITACION DE OXALATO. ESTA PROTEINA RESULTO HOMOGENEA EN ELECTROFORESIS EN POLIACRILAMIDA-SDS EQUILIBRIO DE SEDIMENTACION EN ULTRACENTRIFUGA Y RESIDUO N-TERMINAL. EN EL ANALISIS DE COMPOSICION OBSERVO LA PRESENCIA MAYORITARIA DE RESIDUOS ACIDOS GLU ASP JUNTO A ALA Y GLY. SE VALORO UN BAJO CONTENIDO EN RESIDUOS AROMATICOS Y SULFURADOS. SE CARACTERIZO LA PRESENCIA DE RESIDUOS MODIFICADOS DE PSER Y GLA.COMO CONSTITUYENTES HIDROCARBONADOS SE APRECIARON HEXOSAS (10 6%) HEXOSAMINAS(1 2%) Y ACIDOS HEXURONICOS (2 6%). TAMBIEN SE DETECTO FOSFORO ORGANICO (3 9%). SU PESO MOLECULAR FUE DE 56200D MEDIANTE FILTRACION EN GELES Y 56600D POR EQUILIBRIO DE SEDIMENTACION. SE COMPORTO DE MODO ANORMAL EN LA ELECTROFORESIS ENPOLIACRILAMIDA-SDS VARIANDO SUS PESOS MOLECULARES ENTRE 44500 Y 48200 D. LA FORFOGLICOPROTEINA EXHIBIO UNA CAPACIDAD DE INTERACCIONAR CON EL CALCIO Y EL FOSFATO TRAS SER DESCARBOXILADA ESPECIFICAMENTE EN EL GAMMA-COOH DEL GLA PERDIO SIGNIFICATIVAMENTE SU CAPACIDAD DE INTERACCIONAR CON EL CALCIO Y PRECIPITAR OXALATO. EL COMPORTAMIENTO Y LAS CARACTERISTICAS DE LA FOSFOGLICOPROTEINA HACE PENSAR EN UNA ACTIVIDAD COMO FACTOR PROMOTOR DE LA PRECIPITACION DE OXALATO CON CAPACIDAD DE NUCLEADOR HETEROGENEO EN LOS PRIMEROS ESTADIOS DE FORMACION DE LOS NUCLEOS CRISTALINOS.

Autor: ROWE FERNANDEZ GAO GUILLERMO .
Año: 1987.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE QUIMICA FISICA. FACULTAD DE CIENCIAS. UNIVERSIDAD DE EXTREMADURA..

Resumen: EL TRABAJO CONSISTE EN UN ANALISIS CONFORMACIONAL TEORICO DE POLIPEPADOS HIDRATADOS. HEMOS CONSTRUIDO UNA FUNCION POTENCIAL QUE TIENE EN CUENTA ADEMAS DE LAS CONTRIBUCIONES ENERGETICAS CORRESPONDIENTES A LAS INTERACCIONES ELECTROSTATICAS, DE ATOMOS NO ENLAZADOS, DE ENLACES DE HIDROGENO INTRAMOLECULARES Y DE TORSION; UNA ENERGIA DE HIDRATACION ESPECIFICA Y OTRA NO ESPECIFICA SEGUN EL MODELO QUE PARA PEPTIDOS HIDRATADOS HAN PROPUESTO SCHERAGA Y COLABORADORES. POSTERIORMENTE SE CALCULAN LAS ENERGIAS CONFORMACIONES DE LAS N-ACETIL N-METIL-AMIDAS DE LOS VEINTE AMINOACIDOS NATURALES HIDRATADOS; VARIANDO LOS ANGULOS ROTACIONALES 0 Y ETRE 0 Y 360 CON INCREMENTOS DE 18., PARA CADA ANGULO LATERAL QUE VARIAMOS ENTRE 0 Y 360 CON INCREMENTOS DE 60. LOS RESULTADOS SE REPRESENTAN EN FORMA DE MAPAS DE NERGIA. CON EL CONJUNTO DE ENERGIAS OBTENIDO Y HACIENDO USO DEL MODELO DE ISOMEROS ROTACIONALES Y DE LAS TECNICAS DE CALCULO MATRICIAL DE FLORY Y COLABORADORES, SE CALCULAN LAS PROPIEDADES CONFORMACIONALES: DIMENSIONES, MOMENTODIPOLAR (HACIENDO USO DEL METODO DE ORBITALES MOLECULARES MINDO/3), DIFUSION DE LUZ Y CONSTANTE KERR. EN LAS PROPIEDADES OPTICAS UTILIZAMOS EL MODELO DE VALENCIA OPTICA PARA CALCULAR LA PARTE ANSOTROPA DEL TENSOR DE POLARIZABILIDAD. ESTE CALCULO DE PROPIEDADES LO EXTENDEMOS A LOS HOMOPOLIPEPTIDOS DE LOS VEINTE AMINOACIDOS NATURALES Y PARA DIVERSAS ENZIMAS Y PROTEINAS. GENERALIZAMOS EL MODELO A OTROS DISOLVENTES COMO EL METANOL. LOS RESULTADOS SE COMPARAN CON LOS VALORES TEORICOS Y EXPERIMENTALES ENCONTRADOS EN LA BIBLIOGRAFIA, SIENDO EN CONJUNTO BASTANTE SATISFACTORIOS.

Autor: SANZ CERVERA SUSANA ALEJANDRA.
Año: 1987.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS - DIVISION BIOLOGIA UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: LA CAPACIDAD DE UNION DE MIOSINA A ACTINA ASI COMO SU CAPACIDAD DE HIDROLISIS DE ATP SE ENCUENTRAN LOCALIZADAS EN UNA PARTE DE SU MOLECULA, SEPARABLE DEL RESTO POR PROTEOLISIS, DENOMINADA SUBFRAGMENTO 1 O SF1. CON OBJETO DE APORTAR NUEVOS DATOS PARA LA IDENTIFICACION DE LOS CENTROS DE UNION DE NUCLEOTIDOS EN SF1 Y SU FUNCIONALIDAD, SE HA ESTUDIADO EL EFECTO DE ANIONES, NUCLEOTIDOS Y TRATAMIENTO CON TRIPSINA SOBRE LA ACTIVIDAD DE SF1 ASI COMO SOBRE SUS PROPIEDADES DE ASOCIACION/DISOCIACION CON ACTINA. LOS RESULTADOS OBTENIDOS MUESTRAN COMO LOS ANIONES NO NUCLEOTIDEOS ENSAYADOS ASI COMO EL ATP INDUCEN LA DISOCIACION DE LOS COMPLEJOS ACTO-SF1, MIENTRAS QUE EL ADP NO ES CAPAZ DE PRODUCIR DICHO EFECTO. LA HIDROLISIS CON TRIPSINA DE SF1 NO MODIFICA EL COMPORTAMIENTO DE ESTOS ANIONES SOBRE EL PROCESO DE ASOCIACION/DISOCIACION DE ACTO-SF1. SIN EMBARGO, EL FRAGMENTO SF1 MODIFICADO POR TRIPSINA PRESENTA UN DIAGRAMA DE EADIE-HOFSTEE PARA SU ACTIVIDAD CA2+-ATPASA MONOFASICO EN LUGAR DE BIFASICO COMO OCURRE EN SF1 NATIVA. IGUALMENTE, LA HIDROLISIS POR TRIPSINA MODIFICA EL EFECTO QUE DISTINTOS ANIONES EJERCEN SOBRE LA ACTIVIDAD CA2+-ATPASA DE SF1. EL EMPLEO DEL MARCADOR QUIMICO PIRIDOXAL-5'-FOSFATO HA PERMITIDO IDENTIFICAR UN RESIDUO LISINA RELACIONADO CON EL CENTRO ACTIVO EN EL FRAGMENTO DE 25KDA DE SF1. POR SU PARTE, EL FLUORESCEIN ISOTIOCIANATO SE INCORPORA ESPECIFICAMENTE A DOS RESIDUOS DE LOS FRAGMENTOS DE 20 Y 50KDA RESPECTIVAMENTE, UNO DE LOS CUALES DEBE FORMAR PARTE DEL CENTRO ACTIVO. SE SUGIERE QUE EL CENTRO CATALITICO DE SF1 NO SOLO ESTA CONSTITUIDO POR UNA REGION DEL FRAGMENTO DE 25KDA SINO QUE NECESARIAMENTE DEBE DE IMPLICAR UNA REGION DE LOS FRAGMENTOS DE 20 O 50KDA QUE APORTARIA LA ZONA DE INTERACCION CON EL FOSFATO TERMINAL DEL ATP. DE ESTOS DOS ULTIMOS FRAGMENTOS, EL NO IMPLICADO EN EL CENTRO CATALITICO FORMARIA PARTE DE UN CENTRO DE UNION DE NUCLEOTIDOS RELACIONADO CON LA DISOCIACION DE LOS COMPLEJOS DE ACTO-SF1.

Autor: URZAINQUI MAYAYO ANA CARMEN.
Año: 1987.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO DE BIOLOGIA MOLECULAR..

Resumen: SE HAN ANALIZADO Y CARACTERIZADO, MEDIANTE ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL, LAS PROTEINAS VIRALES SINTETIZADAS EN LAS CELULAS HELA INFECTADAS CON EL VIRUS DE LA POLIO. LA IDENTIFICACION DE LAS PROTEINAS SE HA LLEVADO A CABO MEDIANTE EXPERIMENTOS DE PULSO Y CAZA, INMUNOPRECIPITACIONES CON ANTICUERPOS MONOCLONALES, Y ANALISIS BIDIMENSIONAL DE LAS PARTICULAS VIRALES PURIFICADAS. TAMBIEN SE HAN ESTUDIADO LAS MODIFICACIONES POSTRADUCCIONALES QUE SUFREN LAS PROTEINAS VIRALES, ASI COMO SU LOCALIZACION SUBCELULAR. POR OTRO LADO, SE HA ESTUDIADO LA ESTABILIDAD DE LAS PROTEINAS CELULARES A LO LARGO DE LA INFECCION CON EL VIRUS DE LA POLIO, Y SE HAN CARACTERIZADO MUTANTES RESISTENTES A 3-METIL-QUERCETINA, UN INHIBIDOR DE LA REPLICACION DEL VIRUS DE LA POLIO, MEDIANTE EL ANALISIS BIDIMENSIONAL DE SUS PROTEINAS. TAMBIEN SE HA LLEVADO A CABO EL ESTUDIO MEDIANTE ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL DE LAS PROTEINAS DEL VIRUS DE LA PESTE PORCINA AFRICANA EN LAS CELULAS MS INFECTADAS, LAS MODIFICACIONES POSTRADUCCIONALES QUE SUFREN, ASI COMO EL ANALISIS BIDIMENSIONAL DE LAS PROTEINAS QUE CONSTITUYEN LA PARTICULA VIRAL PURIFICADA TANTO DEL VIRUS INTRACELULAR COMO EXTRACELULAR.

Autor: VALENCIA HERRERA ALFONSO.
Año: 1987.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO BIOQUIMICA-INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOMEDICAS..

Resumen: LAS PROPIEDADES MAS RELEVANTES DE DISCOIDINA I SE HAN ESTUDIADO EN RELACION CON SU ESTRUCTURA Y CON LAS ACTIVIDADES FUNCIONALES PROPUESTAS PARA ESTA LECTINA EN EL PROCESO DE AGREGACION DE DICTYOSTELIUM DISCOIDEUM. RESPECTO A LA ESTRUCTURA DE LA MOLECULA, SE HA CARACTERIZADO: A) ESTRUCTURA SECUNDARIA, CON LA IDENTIFICACION DE UN RESIDUO DE TRIPTOFANO LOCALIZADO EN UN ENTORNO APOLAR COMO RESPONSABLE DE LAS CARACTERISTICAS ESPECTROSCOPICAS DE DISCOIDINA I. POR LA PRESENCIA DE ESTE RESIDUO AROMATICO Y LA ORGANIZACION GENERAL DE LA ESTRUCTURA, DISCOIDINA I MUESTRA FUERTES HOMOLOGIAS CON FIBRONECTINA. B) ESTRUCTURACION EN DOMINIOS DE LAS MOLECULAS DE DISCOIDINA I, EXISTIENDO CAMBIOS NOTABLES EN LA ORGANIZACION GLOBAL EN DOMINIOS DURANTE EL DESARROLLO. ESTOS CAMBIOS PUEDEN RELACIONARSE CON LA PRESENCIA/AUSENCIA DE UNA DE LAS TRES ISOFORMAS, ASI COMO CON LA EXISTENCIA DE MODIFICACIONES POSTRADUCCIONALES. C) SE HA IDENTIFICADO LA EXISTENCIA DE PUENTES DISULFURO INTRACATENARIOS E INTRADOMINIOS, QUE PARECEN INTERVENIR EN EL MANTENIMIENTO DE LA ESTRUCTURA CUATERNARIA DE LOS TETRAMEROS. RESPECTO A LAS PROPIEDADES DE DISCOIDINA I, EN PRIMER LUGAR SE LA HA CARACTERIZADO COMO UNA PROTEINA QUE UNE CALCIO, CON UNA CONSTANTE DE DISOCIACION DE 15 MICROM., EXISTIENDO DOS SITIOS DE UNION DE CALCIO POR MONOMERO. ESTUDIOS DE COMPARACION DE SECUENCIA, SITUAN A DISCOIDINA I DENTRO DE LA FAMILIA DE LECTINAS DE LEGUMINOSAS, SIMILARES A CONCANAVALINA A. AL IGUAL QUE EN ESTAS, DISCOIDINA I PARECE POSEER LOS SITIOS DE COORDINACION PARA EL CALCIO LOCALIZADOS EN DOS ZONAS DISCONTINUAS DE LA MOLECULA, POSIBLEMENTE ALREDEDOR DE LA POSICION 114 Y DEL ENTORNO DEL TRITOFANO APOLAR. LA PRESENCIA DE CALCIO INDUCE CAMBIOS NOTABLES EN LA ESTRUCTURA DE DISCOIDINA I, DETECTADOS A NIVEL DE OGANIZACION ESTRUCTURAL EN DOMINIOS Y DE ESTRUCTURA CUATERNARIA. EN GENERAL, SE APOYA UN MODELO EN QUE LA PRESENCIA DE CALCIO INDUCE UNA MAYOR COMPACTACION DE LOS TETRAMEROS Y LA PROTECCION ESPECIFICA DE DOMINIOS ESTRUCTURALES CONCRETOS. RESPECTO A LA UNION DE AZUCARES, SE HA CARACTERIZADO, QUE EN CONDICIONES NATIVAS, EL SITIO DE UNION DE AZUCARES ESTA COMPARTIDO ENTRE DOS DOMINIOS ESTRUCTURALES. LOS ESTUDIOS DE COMPARACION DE SECUENCIA MUESTRAN LA EXISTENCIA DE HOMOLOGIA CON LECTINAS DE VERTEBRADOS Y VEGETALES. SE HA DETECTADO LA EXISTENCIA DE FOSFORILACION IN VIVO DE DISCOIDINA I EN EST EN ESTADIOS TEMPRANOS DE LA DIFERENCIACION Y SE HA CARACTERIZADO LA FOSFORILACION IN VITRO DE LA MISMA, LLEVADA A CABO POR PROTEINA QUINASA C Y DEPENDIENTE DE CAMP. DISCOIDINA I PURIFICADA DE CELULAS VEGETATIVAS, DONDE SOLO SE EXPRESAN DOS DE LAS TRES ISOFORMAS, MUESTRA DIFERENCIAS SIGNIFICATIVAS RESPECTO A LA DE CELULAS EN DIFERENCIACION EN LAS PROPIEDADES DE UNION DE CALCIO, FOSFORILACION Y ORGANIZACION EN DOMINIOS ESTRUCTURALES. ESTAS DIFERENCIAS DEBEN ESTAR RELACIONADOS CON LA ORGANIZACION ESTRUCTURAL GLOBAL DE LA PROTEINA EN CELULAS VEGETATIVAS, ASI COMO CON LA APARENTE AUSENCIA DE ACTIVIDAD BIOLOGICA ASOCIADA A DISCOIDINA I DE ESTA POBLACION CELULAR.

Autor: VARGAS GOMEZ JOSE LUIS.
Año: 1987.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: INSTITUTO DE INVESTIGACIONES CITOLOGICAS.

Resumen: A. LAS DIFERENCIAS EN LAS VELOCIDADES DE RECAMBIO DE ALGUNAS PROTEINAS MITOCONDRIALES DERIVAN AL MENOS PARCIALMENTE DE LA HETEROGENEIDAD INTERCELULARHEPATICA. MEDIANTE GRADIENTES DE PERCOLL SE HAN SEPARADO TRES POBLACIONES DE HEPATOCITOS MORFOLOGICA Y FUNCIONALMENTE DISTINTOS. EN ESTAS POBLACIONES SE DETERMINO EL CONTENIDO EN TRES ENZIMAS MITOCONDRIALES: GLUTAMATO DESHIDROGENASA (VIDA MEDIA 1 DIA) CARBAMIL FOSFATO SINTETASA (VIDA MEDIA 8 DIAS) Y ORNITINA TRANSCARBAMILASA (VIDA MEDIA 8 DIAS). LOS HEPATOCITOS MAS LIGEROS PRESENTAN UN MAYOR CONTENIDO EN EL ENZIMA DE VIDA MEDIA MAS CORTA Y LO CONTRARIO OCURRE CON LOS HEPATOCITOS MAS PESADOS. ASIMISMO EL SISTEMA LISOSOMAL ESTA MAS DESARROLLADO EN LOS HEPATOCITOS MAS LIGEROS Y ELLO EXPLICARIA PORQUE LA GLUTAMATO DESHIDROGENASA QUE ES MAS ABUNDANTE EN ESTOS MISMOS HEPATOCITOS TIENEN UNA VIDA MEDIA MAS CORTA. OTRA PRUEBA EN FAVOR DE ESTA HIPOTESIS RADICA EN LAS VACUOLAS AUTOFAGICAS AISLADAS DE HIGADO DE RATA CONTIENEN TRES VECES MAS GLUTAMATO DESHIDROGENASA QUE LOS OTROS DOS ENZIMAS CONSIDERADOS. B. PARTICIPACION DE COMPONENTES DE LA MITOCONDRIA EN LA DEGRADACION DE LAS PROTEINAS DE ESTE ORGANULO. ESTE ESTUDIO SE HA ABORDADO UTILIZANDO LA CARBAMIL FOSFATO SINTETASA QUE REPRESENTA UN 20% DE LA PROTEINA MITOCONDRIAL FRACCIONES SUBMITOCONDRIALES Y LISOSMAS ROTOS. NINGUNA DE LAS FRACCIONES SUBMITOCONDRIALES DEGRADA POR SI MISMADE FORMA APRECIABLE LA CPS. SIN EMBARGO LA ACTUACION DE LAS PROTEASAS LISOSOMALES SOBRE LA MEMBRANA INTERNA MITOCONDRIAL PRODUCIA LA LIBERACION DE UNOS COMPONENTES DE ESTA MEMBRANA QUE ERAN CAPACES DE DEGRADAR LA CPS Y OTROS ENZIMAS CITOSOLICOS Y MITOCONDRIALES. ESTOS COMPONENTES LIBERADOS SON DIFERENTESDE LAS PROTEASAS LISOSOMALES EN BASE A LOS ESTUDIOS REALIZADOS CON INHIBIDRES DE PROTEASAS. C. ESTUDIOS ACERCA DE LA NATURALEZA Y MECANISMOS DE DEGRADACION DE LAS PROTEINASDE VIDA MEDIA CORTA EN CELULAS CULTIVADAS. LAS PROTEINAS DE VIDA MEDIA CORTA SONSIMILARES A LAS DE VIDA MEDIA LARGA Y EN SU DEGRADACION ESTAN IMPLICADOS EL GOLGI Y LOS LISOSOMAS.

Autor: ALONSO FARRE JULIO .
Año: 1986.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPT. BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTA TESIS SE PRESENTA UN ESTUDIO SOBRE LA MODIFICACION COVALENTE DE LA RIBONUCLEASA A CON EL 6-CLOROPURINA RIBOSIDO PARA OBTENER INFORMACION SOBRE EL PAPEL DE LA MITAD NUCLEOSIDICA EN LA INTERACCION ENZIMA-SUBSTRATO. SE MODIFICARON LOS GRUPOS AMINO DE LAS LYS-1 -37 -41 Y 91. LA ESPECIFICIDAD DE LA REACCION ES INDEPENDIENTE DE LA RELACION MOLAR LIGANDO/ENZIMA UTILIZADA. TODOS ESTOS RESULTADOS JUNTO CON LA INHIBICION OBSERVADA CUANDO EN EL MEDIO DE REACCION SE AÑADEN NUCLEOSIDOS Y LOS ESTUDIOS CINETICOS SUGIEREN LA EXISTENCIA EN LA ENZIMA DE ZONAS DE INTERACCION ESPECIFICAS PARA LA PARTE NUCLEOSIDICA DEL RNA. LOS ESTUDIOS POR RMN SOBRE LA INTERACCION ENTRE LA RNASA A Y DIDESOXINUCLEOSIDOS MONOFOSFATO HAN PERMITIDO CONCLUIR: QUE EL TPDA ES EL LIGANDO QUE INTERACCIONA MEJOR EN B1R1P1B2R2 PORQUE SE PRODUCE EL MEJOR RECONOCIMIENTO MUTUO; QUE EL GRUPO FOSFATO FIJA EL LIGANDO EN EL CENTRO ACTIVO PERO QUE SON LAS PARTES NUCLEOSIDICAS LAS QUE DETERMINAN LA INTERACCION FINAL EN BASE A LA ESPECIFICIDAD; QUE HAY UNA INTERACCION DIRECTA ENTRE LA HIS-119 Y EL GRUPO FOSFATO QUE INTERACCIONA EN P1; FINALMENTE ESTAN DE ACUERDO CON LA EXISTENCIA DEL CENTRO DE INTERACCION B3R3P2 CERCA DE LA REGION N-TERMINAL DE LA RNASA A COMO SE HABIA POSTULADO POR TRABAJOS PREVIOS. POR ULTIMO SE HA PUESTO A PUNTO UN METODO DE SEPARACION DE DERIVADOS DEL RNA POR HPLC EN CONDICIONES ISOCRATICAS QUE SE HA APLICADO A LA SEPARACION DE NUCLEOSIDOS 3 - Y 5 - NUCLEOTIDOS ASI COMO A LAS DE NUCLEOTIDOS CICLICOS Y HALOGENADOS.

Autor: BERNUES MARTINEZ JORGE.
Año: 1986.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: INSTITUTO DE BIOLOGIA FUNDAMENTAL V. VILLAR-PALASI UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BARCELONA..

Resumen: EL ESTUDIO DE LAS INTERACCIONES EN SOLUCION DE LAS NO-HISTONAS HMG1 Y HMG2 CON LOS OLIGOMEROS DE HISTONAS MEDIANTE TECNICAS DE ENTRECRUZAMIENTO QUIMICO Y ANALISIS POR ELECTROFORESIS EN UNA Y DOS DIMENSIONES INDICA QUE AMBAS PROTEINASINTERACCIONAN CON LAS HISTONAS H1 H2A H2B Y H3; NO SE HA OBSERVADO SU INTERACCION CON LA H4. SE HA DETERMINADO QUE CON LAS HISTONAS H2A Y H2B INTERACCIONAN A TRAVES DE SU DOMINIO C-TERMINAL Y CON LA H3 A TRAVES DEL N-TERMINAL. AL OBJETO DE PROSEGUIR EL ESTUDIO EN CROMATINA SE HA ESTUDIADO LA RECONSTITUCION DE LAS HMG1 Y HMG2 EN CROMATINA DE HIGADO DE RATA POR DIALISIS DESCENDENTE Y ANALISIS EN GRADIENTES DE ULTRACENTRIFUGACION. LOS RESULTADOS INDICAN QUE LAS HMG1 Y HMG2 RECONSTITUYEN MUY PREFERENTEMENTE CON LOS OLIGONUCLEOSOMAS MAS PEQUEÑOS TANTO EN CROMATINA CON O SIN H1. EN CROMATINA SIN H1 TAMBIEN SE OBSERVA UNA CIERTA RECONSTITUCION CON LOS OLIGONUCLEOSOMAS MAS LARGOS AUNQUE MINORITARIA. CUANDO LA CROMATINA RECONSTITUIDA SE ENTRECRUZA QUIMICAMENTE Y SE ANALIZA SE OBSERVA QUE LAS HMG1 Y HMG2 INTERNACCIONAN CON LASMISMAS HISTONAS QUE EN SOLUCION A EXCEPCION DE LA H3 QUE NO SE HA OBSERVADO. ESTAS INTERACCIONES SE REALIZAN CON TODA LA PARTICULA NUCLEOSOMAL SIN QUE EXISTASUBSTITUCION DE NINGUNA HISTONA. COMO RESULTADO PREVIO SE HA OBSERVADO QUE LA HMG1 PERO NO LA HMG2 PUEDE FIJAR CANTIDADES MODERADAS DE CA2+ DE FORMA REVERSIBLE Y DEPENDIENTE DEL PH A TRAVES DE SU DOMINIO C TERMINAL. EL ESTUDIO CON DNA SE HA REALIZADO CON DOS PLASMILDOS MIXTOS DERIVADOS DEL PBR322 Y EL VIRUS DEL PAPILOMA BOVINO-1 (PBPV) Y EL DE SIMIO 40 (PSV40). SE HA OBSERVADO QUELAS HMG1 Y HMG2 PROTEGEN DE LA DIGESTION UNA DIANA ACC I SITUADA EN EL FRAGMENTO DERIVADO DE PBR322 EN PBPV PERO NO EN PSV40. SE TRATA DE UNA ESTRUCTURA ALTERADA DE DNA DEPENDIENTE DE LA SUPERHELICIDAD INDUCIDA POR UNA SECUENCIA VECINA DE BPV-1 POSIBLEMENTE UN ENHANCER Y RECONOCIDA POR LAS HMG1 Y HMG2. LAS ESTRUCTURAS ALTERADAS HIPERSENSIBLES A S1 EN ESTOS PLASMIDOS TAMBIEN SON PROTEGIDAS POR ELLAS AUNQUE ESTAS NO SON DEPENDIENTES DE SUPERHELICIDAD. LAS ESTRUCTURAS ALTERADAS SENSIBLES A OTRAS NUCLEASAS NO RESULTAN PROTEGIDAS DE IGUAL MANERA. TODAS ESTAS ESTRUCTURAS SE LOCALIZAN EN UNAMISMA REGION QUE RESULTA SE LA ZONA PRINCIPAL DE REGULACION DEL BPV-1.

Autor: CASAS BECERRA M. TERESA.
Año: 1986.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: UNIDAD DE QUIMICA MACROMOLECULAR C.S.I.S. ESCUELA TECNICA SUPERIOR DE INGENIEROS INDUSTRIALES (DIAGONAL 647) BARCELONA (08028).

Resumen: SE HA ESTUDIADO POR MICROSCOPIA ELECTRONICA Y ANALISIS ELECTROFORETICO EL EFECTO DE MEDIOS REDUCTORES Y DEL DETERGENTE CATIONICO CTAB O BROMURO DE CETILTRIMETIL AMONIO SOBRE LA ESTRUCTURA DEL NUCLEO Y SOBRE EL CONTENIDO PROTEINICO EN LOS ESPERMATOZOIDES DE SCYLLIORHINUS CANICULOS Y ELEDONE CIRRHOSA. EN SCYLLIORHINUS CANICULUS CON LA ACCION COMBINADA DE AGENTE REDUCTOR Y DETERGENTE SE OBTUVO EL MAYOR EFECTO TANTO SOBRE LA ULTRAESTRUCTURA NUCLEAR COMO SOBRE LA ESTABILIDAD PROTEINICA. EN ELEDONE CIRRHOSA CON DICHO TRATAMIENTO TAMBIEN SE DETECTARON MODIFICACIONES IMPORTANTES A NIVEL DE LA ULTRAESTRUCTURA NUCLEAR. POR OTRA PARTE LA PROTEINA 0O DE CARACTER BASICO ENCONTRADA EN EL ESPERMATOZOIDE DE HOLOTHORIA TUBULOSA SE LOCALIZO MEDIANTE INMUNOMICROSCOPIA ELECTRONICA EN LA VESICULA ACROSOMAL Y ASI MISMO SE SUGIERE QUE ESTA PROTEINA HAGA SU APARICION EN LAS PRIMERAS ETAPAS ESPERMATOGENICAS.

Autor: COSTELL ROSSELLO M. MERCEDES.
Año: 1986.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: INSTITUTO DE INVESTIGACIONES CITOLOGICAS DE LA CAJA DE AHORROS DE VALENCIA .

Resumen: SE DESCRIBE LA PURIFICACION DE UNA ENZIMA QUE CATALIZA LA REACCION DE DESCARBAMILACION DE PROTEINAS CARBAMILADAS. EL ENZIMA DESCARBAMILANTE TAMBIEN ESACTIVO EN LA HIDROLISIS DE AMINOACIDOS CARBAMILADOS PARTICULARMENTE LA CITRULINA. LA REACCION DESCRITA NO SE DEBE A UNA PROTEASA DESACETILASA O DESMETILASA. ADEMAS DE LA ACTIVIDAD DESCARBAMILANTE DE CITRULINA LA DESCARBAMILASA PRESENTA UNA SERIE DE CARACTERISTICAS EN COMUN CON EL ENZIMA ORNITINA TRANSCARBAMILASA (OTC) COMO SENSIBILIDAD A SU INHIBIDOR ESPECIFICO (PALO) Y REQUERIMIENTO DE FOSFATO. A SU VEZ LA OTC ES ACTIVA EN LA REACCION DE DESCARBAMILACION DE PROTEINAS CARBAMILADAS. CIERTAS CARACTERISTICAS COMO PESO MOLECULAR Y LOCALIZACION SON DIFERENTES EN LOS DOS ENZIMAS. SE ESTABLECE LA HIPOTESIS DE QUE LA DESCARBAMILASA TENGA PROPIEDADES Y FUNCION METABOLICA DISTINTAS PUDIENDO ESTAR INTEGRADA EN UNA VIA ALTERNATIVA DE ELIMINACION DEL CARBAMIL FOSFATO (CP). A NIVEL DE LA ETAPA CATALIZADA POR EL ENZIMA OTC EXISTE ALGUN FACTOR LIMITANTE INCLUSO EN SITUACIONES DE LIGERA HIPERAMONEMIA QUE DETERMINA QUE UNA PARTE DEL CP SINTETIZADO EN LA MITOCONDRIA NO REACCIONE CON LAORNITINA Y SALGA DE ESTA INCORPORANDOSE AL MENOS EN PARTE A LA VIA DE SINTESISDE PIRIMIDINAS. SE ESTUDIA LA CAPACIDAD DE SINTESIS DE UREA MEDIANTE DISTINTOS MODELOS EXPERIMENTALES DE HIPERAMONEMIA EN RATONES. EN LOS ANIMALES TRATADOS CON SOBRECARGAS PROTEICAS ESTA MUCHO MAS ESTIMULADA LA SINTESIS DE UREAQUE EN LOS TRATADOS CON DOSIS LETALES DE AMONIO. SE DISCUTE EL POSIBLE EFECTO PROTECTOR DE LOS AMINOACIDOS QUE CONSTITUYEN LA PROTEINA INYECTADA FRENTE A LA HIPERAMONEMIA QUE SE GENERA. LA L-CARNITINA COMPUESTO QUE ACTIVA LA B-OXIDACIONDE ACIDOS GRASOS ESTIMULA LA SINTESIS DE UREA FRENTE A DOSIS LETALES DE ACETATOAMONICO. SE ESTUDIAN ALGUNOS POSIBLES MECANISMOS DE ACCION DE LA L-CARNITINA.

Autor: COZAR MAROTO MANUEL DE.
Año: 1986.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: UNIDAD DE NEUROFARMACOLOGIA BIOQUIMICA DEL INSTITUTO DE NEUROBIOLOGIA SANTIAGO RAMON Y CAJAL DEL CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS (C.S.I.C.)..

Resumen: SE HA EXTRAIDO PURIFICADO Y DELIPIDADO EL PROTEOLIPIDO DE MIELINA DE SUSTANCIA DE CEREBRO BOVINO (PLP) CON EL FIN DE CARACTERIZARLO MORFOLOGICA ESTRUCTURAL YFUNCIONALMENTE EN RELACION A SU PARTICIPACION EN EL TRANSPORTE IONICO. EL PROTEOLIPIDO DELIPIDADO (APL) SE HA INCORPORADO EN LIPOSOMAS DE DIMIRISTOILFOSFATIDILCOLINA (DML) MARCADO EN DISTINTAS POSICIONES DE LA CADENA HIDROCARBONADA CON EL FIN DE APLICAR A SU ESTUDIO LAS SIGUIENTES TECNICAS FISICO-QUIMICAS ESPECTROSCOPICAS: RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR (RMN) RESONANCIADE SPIN ELECTRONICO (RSE) ESPECTROSCOPIA DE INFRARROJO Y ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCENCIA DE POLARIZACION. ESTAS TECNICAS NOS DAN UNA IDEA DEL GRADO DE FLUIDEZ O MICROVISCOSIDAD DE LA BICAPA LIPIDICA COMO CONSECUENCIA DEL EFECTO PRODUCIDO POR LA INCORPORACION DE LA PROTEINA EN EL ORDENAMIENTO MOLECULAR DE LAS CADENAS LIPIDICAS A NIVEL INTRA E INTERMOLECULAR ASI COMO OTRAS INFORMACIONES COMPLEMENTARIAS REFERIDAS A LA ESTEQUIOMETRIA LIPIDO-PROTEINA Y LAFORMACION DE UNA POBLACION DE LIPIDO UNIDO A LA PROTEINA CON UNAS CARACTERISTICAS FISICAS DIFERENTES AL RESTO DE LOS LIPIDOS. ADEMAS TAMBIEN SE HA OBTENIDO LA EVIDENCIA MORFOLOGICA DE LA INCORPORACION DEL APL EN LOS LIPOSOMAS SIGUIENDO UN PATRON SIMILAR AL OBSERVANDO EN MEMBRANA MIELINICA NATIVAY OLIGODENDROCITOS LO QUE CONTRIBUYE A APOYAR LOS ENSAYOS DE FUNCIONALIDAD EFECTUADOS. POR ULTIMO CON LOS ANTEDICHOS ENSAYOS SE HA PUESTO DE MANIFIESTO QUE EL PROTEOLIPIDO SE COMPORTA COMO UNA TIPICA PROTEINA INTRINSECA DE MEMBRANA QUE PODRIA ACTUAR COMO CANAL IONICO EN LA MIELINA.

Autor: LABORDA FERNANDEZ JORGE.
Año: 1986.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: INSTITUT DE RECHERCHES SCIENTIFIQUES SUR LE CANCER. CHIMIE DES PROTEINES. 94.802VILLEJUIF FRANCIA.

Autor: MARTINEZ DEL POZO ALVARO.
Año: 1986.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO BIOQUIMICA. FACULTAD CIENCIAS UNIVERSIDAD COMPLUTENSE - MADRID..

Resumen: MEDIANTE UNA EXTRACCION ACIDA A PARTIR DE TENDONES DE COLA DE RATA DE HASTA DOS MESES DE EDAD SE HA OBTENIDO UNA PREPARACION HOMOGENEA DE COLAGENO DE TIPO I MONOMERICO. LAS MOLECULAS DEL COLAGENO ASI AISLADO POSEEN UN DOMINIO HIDROFOBICO LOCALIZADO EN LA ZONA RESISTENTE A LA PERSINA DEL TELOPEPTIDO COOH-TERMINAL. SE HA PUESTO DE MANIFIESTO UNA INTERACCION ENTRE ESTE COLAGENO Y VESICULAS DE FOSFOLIPIDOS. COMO CONSECUENCIA DE ESTA ASOCIACION NO SE ALTERA EL ESPECTRO DE DICROISMO CIRCULAR DE LA PROTEINA PERO DISMINUYE SU ESTABILIDAD TERMICA. ASIMISMO SE REDUCE LA ENERGIA DE ACTIVACION DE LA TRANSICION DE FASE DE LAS VESICULAS DE FOSFOLIPIDOS SIN APENAS MODIFICARSE LA TEMPERATURA A LA CUAL TIENE LUGAR ESTE PROCESO. ESTOS HECHOS UNIDOS A LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON PREPARACIONES DE COLAGENO DIGERIDO PROTEOLITICAMENTE PERMITEN POSTULAR QUE LA INTERACCION SE ESTABLECE ENTRE LA ZONA EN TRIPLE HELICE Y LA SUPERFICIE DE LAS VESICULAS.

Autor: MENAYA FERNANDEZ JUAN.
Año: 1986.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTIFICAS .

Resumen: SE HA ESTUDIADO EL EFECTO DE AGENTES MOVILIZADORES DE CALCIO: AGONISTAS X-ADRENERGICOS VASOPRESINA Y ANGIOTENSINA II CON EL FIN DE CONOCER SI VARIACIONES EN LA CONCENTRACION DE CALCIO LIBRE CITOSOLICO DESEMPEÑAN UN PAPEL REGULADOS DE LA SINTESIS DE PROTEINAS EN HEPATOCITOS. LA FENILEFRINA PER SE NO TIENE EFECTOS DETECTABLES SOBRE SINTESIS DE PROTEINAS BASALES; NO OBSTANTE ES CAPAZ DE IMPEDIR LA ESTIMULACION INDUCIDA POR AMINOACIDOS COMO ALANINA. ESTE EFECTO SOLO ES OBSERVABLE EN AUSENCIA DE CALCIO EXTRACELULAR EN CUYO CASO SE INCREMENTA EL CONTENIDO DE AMP CICLICO. ESTE HALLAZGO SUGIERE LA EXISTENCIA DE UNA ACCION CONCERTADA CALCIO-AMP CICLICO EN LAINHIBICION DE SINTESIS DE PROTEINAS MEDIADA POR AGONISTAS X-ADRENERGICOS. LA VASOPRESINA INHIBE SINTESIS DE PROTEINAS EN CONDICIONES MUY DIFERENTES A LAS DE LA FENILEFRINA. SU EFECTO ES EJERCIDO INDEPENDIENTEMENTE DEL ESTADO DE NUTRICION DEL ANIMAL DEL QUE SE OBTUVIERON LAS CELULAS DE LA PRESENCIA DE ESTIMULADORES DE SINTESIS COMO LA ALANINA Y DEL CONTENIDO CELULAR DE CALCIO. SU ACCION ES EJERCIDA SOBRE LA ETAPA DE INICIACION DE CADENAS PEPTIDICAS. ACTIVADORES DE PROTEINAS-KINASA C COMO LOS ESTERES DE FORBOL Y ANALOGOS DE DIACILGLICEROL PRODUCEN UNA INHIBICION DE SINTESIS DE PROTEINAS CUANTITATIVAMENTE SIMILAR A LA DE LA VASOPRESINA Y QUE NO ES ADITIVA. ESTO SUGIERE QUE LA ACTIVACION DE PROTEINA KINASA C PUDIERA MEDIAR LA ACCION DE LA VASOPRESINA. HEMOS OBSERVADO UNA DISMINUCION EN LA ACTIVIDAD DEL FACTOR DE INICIACION EIF-2. ESTE HALLAZGO SUGIERE QUE LA FOSFORILACION DE ESTE FACTOR PUDIERA SER EL MECANISMO MEDIANTE EL CUAL LA VASOPRESINA EJERZA SU ACCION. LA ANGIOTENSINA II NO INHIBE SINTESIS DE PROTEINAS COMO LA VASOPRESINA Y FENILEFRINA NO OBSTANTE EJERCE UN POTENTE EFECTO PROTEOLITICO. LA DIFERENTE ACCION DE LOS TRES AGENTES SOBRE EL PROCESO DE SINTESIS DE PROTEINAS INDICA QUE LA ELEVACION DE LA CONCENTRACION DE CALCIO LIBRE CITOSOLICOPER SE NO DESEMPEÑA UN PAPEL IMPORTANTE EN LA REGULACION DE ESTE PROCESO.

Autor: MONTOYA BAIDES ANGEL.
Año: 1986.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: CENTRO DE INVESTIGACION. HOSPITAL LA FE. VALENCIA.

Resumen: EN LOS ANIMALES SUPERIORES LA BIOSINTESIS Y EXCRECION DE PROTEINAS PLASMATICAS ES UNA DE LAS FUNCIONES MAS ESPECIALIZADAS DEL HIGADO Y SE REALIZA EN LAS CELULAS PARENQUIMALES DE ESTE ORGANO: LOS HEPATOCITOS. EN LA PRESENTE TESIS SE HA ABORDADO EL ESTUDIO IN VITRO DE ESTA FUNCION UTILIZANDO EL MODELO EXPERIMENTAL DE CULTIVO PRIMARIO DE HEPATOCITOS DE RATA ADULTA EN UN MEDIO QUIMICAMENTE DEFINIDO. LOS OBJETIVOS PROPUESTOS HAN SIDO: 1) LA CARACTERIZACION DEL PROPIO MODELO DESDE EL PUNTO DE VISTA DE LA SINTESIS Y EXCRECION DE PROTEINAS PLASMATICAS. 2) EL ESTUDIO DEL PAPEL REGULADOR DE LA DEXAMETASONA SOBRE ESTA FUNCION. 3) EL ESTUDIO DEL POSIBLE PAPEL REGULADOR DE LOS AMINOACIDOS RAMIFICADOS (AAR). PARA ELLO HA SIDO NECESARIO PURIFICAR Y PONER A PUNTO METODOS DE MEDIDA DE ALTA SENSIBILIDAD (ELISA E INMUNOPRECIPITACION DE PROTEINAS MARCADAS RADIOACTIVAMENTE) PARA LA DETERMINACION DE 5 PROTEINAS PLASMATICAS DE RATA: ALBUMINA TRANSFERRINA FIBRINOGENO BETA1-GLICOPROTEINA Y ALPHA2-GLOBULINA. LOS RESULTADOS OBTNIDOS INDICAN QUE: 1) EN CONDICIONES BASALES LOS HEPATOCITOS SINTETIZAN PROTEINAS PLASMATICAS Y LAS EXCRETAN AL MEDIO EXTRACELULAR. EN EL SEGUNDO DIA DECULTIVO LA PRODUCCION DE ALBUMINA Y TRANSFERRINA ES MENOR QUE LA DESCRITA IN VIVO MIENTRAS QUE LA PRODUCCION DE FIBRINOGENO ES SIMILAR A IN VIVO . 2) LA DEXAMETASONA A CONCENTRACIONES FISIOLOGICAS ESTIMULA LA SINTESIS DE PROTEINAS PLASMATICAS TOTALES ALBUMINA Y TRANSFERRINA A CORTO Y A LARGO PLAZO.3) LOS AAR ESTIMULAN LA SINTESIS DE ALBUMINA TRANSFERRINA BETA1-GLICOPROTEINA ALPHA2-GLOBULINA. LAS CONCENTRACIONES DE MAXIMO EFECTO COINCIDEN CON LAS QUE SE ALCANZAN EN SANGRE PORTAL DE RATA TRAS UNA INGESTA RICA EN PROTEINAS. EL EFECTO DE LOS AAR ES ESPECIFICO SOBRE LAS PROTEINAS PLASMATICAS MIENTRAS QUE LA SINTESIS DE PROTEINAS ESTRUCTURALES NO SE VE AFECTADA.

Autor: PEREZ SALA GOZALO M. DOLORES.
Año: 1986.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIDAD ESTRUCTURAL DE FISIOLOGIA ENDOCRINA CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS.C.S.I.C. MADRID..

Resumen: EL CONTENIDO EN AMINOACIDOS DEL PLASMA Y DEL HIGADO SUFRE CAMBIOS CUANTITATIVOS Y CUALITATIVOS RELACIONADOS CON EL ESTADO NUTRITIVO DEL ANIMAL. DURANTE EL AYUNO SE OBSERVA UNA DISMINUCION DE LA TASA DE SINTESIS DE PROTEINAS HEPATICAS IN VIVO DEBIDA A UNA DISMINUCION DE LA ACTIVIDAD DE LAS ETAPAS DE INICIACION Y DE CRECIMIENTO DE CADENAS PEPTIDICAS. EL EFECTO SOBRE LA ETAPA DE INICIACION ES MAS INTENSO Y SE ACOMPAÑA DE UNA DISMINUCION DE LA ACTIVIDAD DEL FACTOR EIF. 2. LA ADMINISTRACION DE DETERMINADOS AMINOACIDOS INDIVIDUALES IN VIVO (ALANINA PROLINA ORNITINA) RESTAURA LA ACTIVIDAD DE LA ETAPA DE INICIACION. DE LOS AMINOACIDOS ESTUDIADOS LA ALANINA PARECE DESEMPEÑAR UN IMPORTANTE PAPEL REGULADOR DEBIDO A QUE: A) ES EL AMINOACIDO CUYA CONCENTRACION HEPATICA SUFRE UNA DISMINUCION MAS ACUSADA CON EL AYUNO; B) ES UNA DE LAS SUSTANCIAS MAS EFECTIVAS ESTIMULANDO SINTESIS DE PROTEINAS; C) OTROS SUSTRATOS (COMO GLUCOSA O PIRUVATO) O AMINOACIDOS CAPACES DE ESTIMULAR LA SINTESIS DE PROTEINAS PUDIERAN ACTUAR A TRAVES DE UN INCREMENTO EN LOS NIVELES DE ALANINA. EL EFECTO DE ALANINA AFECTA A AMBAS ETAPAS: INICIACION Y CRECIMIENTO DE CADENAS PEPTIDICAS Y ES INDEPENDIENTE DE SU CONVERSION METABOLICA. DETERMINADOS AMINOACIDOS INDIVIDUALES DAN LUGAR A UN AUMENTO DE LA TASA DE SINTESIS DE PROTEINAS EN HEPATOCITOS AISLADOS DE ANIMALES EN AYUNO. LA ADICION DE AMINOOXIACETATO (INHIBIDOR DE AMINOTRANSFERASAS) INHIBE LA SINTESIS DE PROTEINAS A TRAVES DE UNA DISMINUCION DE LOS NIVELES CELULARES DE ASPARTATO. ESTE EFECTO ES IMPEDIDO POR AMINOACIDOS CUYO METABOLISMO ELEVA EL NIVEL CELULAR DE ASPARTATO.

Autor: VENDRELL ROCA JOSEP.
Año: 1986.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA FACULTAD DE CIENCIAS UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BARCELONA. BELLATERRA BARCELONA (ACTUALMENTE: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR UNIDAD DE CIENCIAS).

Resumen: LA PROCARBOXIPEPTIDASA A ES UNO DE LOS ZIMOGENOS QUE COMPONEN LA SECRECION PANCREATICA QUE DESCARGA EN EL DUODENO. EN EL INTESTINO SE PRODUCE SU ACTIVACIONPOR PROTEOLISIS LIMITADA QUE DA LUGAR A LA APARICION DE CARBOXIPEPTIDASA A EN FORMA ACTIVA Y DE UN SEGMENTO DE ACTIVACION DE 94 RESIDUOS AMINOCIDOS. ESTE SEGMENTO DE ACTIVACION RESULTA INTERESANTE DE ESTUDIAR POR DIVERSAS RAZONES SIENDO LA MAS EVIDENTE LA DE SU LONGITUD MUY SUPERIOR A LA DE OTROS PEPTIDOS DEACTIVACION DE ZIMOGENOS PANCREATICOS. EN ESTA TESIS SE HA ESTUDIADO LA PROCARBOXIPEPTIDASA A DE PANCREAS DE CERDO ESPECIE EN LA QUE COEXISTEN DOS FORMAS NATURALES DEL ZIMOGENO UN MONOMERO Y UN COMPLEJO BINARIO EN EL QUE APARECE UNIDA NO COVALENTEMENTE CON LA PROPROTEINASA E. LA COMPARACION ESTRUCTURAL DE LOS DOS PROTOMEROS PRECURSORES DE LA CARBOXIPEPTIDASA A DEMUESTRALA IDENTIDAD DE AMBAS PROTEINAS. ESTA COMPARACION SE HA LLEVADO A CABO MEDIANTE MAPAS PEPTIDICOS TRIPTICOS SEGUIDOS POR CAPA FINA Y POR HPLC COMPLEMENTADOS CONDETECCION ESPECIFICA DE RESIDUOS. LA IDENTIDAD OBSERVADA SE COMPLEMENTA CON OBSERVACIONES FUNCIONALES REFERENTES A LA CAPACIDAD DE LOS PROTOMEROS DE ASOCIARSE CON LA PPE. SE HA DETERMINADO LA ESTRUCTURA PRIMARIA DEL SEGMENTO DE ACTIVACION DEDUCIDA A PARTIR DE LA SECUENCIA OBTENIDA POR DEGRADACION AUTOMATICA DE EDMAN DE PEPTIDOS PROCEDENTES DE DIGESTIONES DE LA PROTEINA CON TRIPSINA PEPSINA Y PROTEASA V-8 DE S.A. LA ESTRUCTURA PRIMARIA AQUI OBTENIDA ESALTAMENTE HOMOLOGA CON LA YA CONOCIDA PARA LA MISMA PROTEINA EN PANCREAS DE RATA (81% DE HOMOLOGIAS ESTRICTAS). PREDICCIONES CONFORMACIONALES REALIZADAS A PARTIR DE LA SECUENCIA PERMITEN HIPOTETIZAR POSIBLES PUNTOS DE ATAQUE PROTEOLITICO DURANTE EL PROCESO DE ACTIVACION DEL PROENZIMA. ESTE PROCESO DE ACTIVACION SEGUIDO MEDIANTE ESTUDIOS DE ACTIVIDAD ELECTROFORESIS HPLC Y SECUENCIACION N-TERMINAL DE LOS FRAGMENTOS PRODUCIDOS DEPENDE EN CUANTO A EXPRESION DE LA ACTIVIDAD CPA MUY POCO DE LA PRESENCIA EN EL MEDIO DE UNA FORMAU OTRA DEL ENZIMA ACTIVO (ALFA O BETA) Y ES EN CAMBIO MUY DEPENDIENTE DE LA DESAPARICION DEL MEDIO DE ACTIVACION DEL SEGMENTO DE ACTIVACION PRIMARIO.

Autor: VILANOVA BRUGUES MARIA.
Año: 1986.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR FACULTAD DE CIENCIAS UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BARCELONA.

Resumen: EL TRABAJO PRESENTADO EN ESTA TESIS HA CONSISTIDO EN EL ESTUDIO DE UN SEGMENTO DE ACTIVACION DE UN PROENZIMA DIGESTIVO LA PROCARBOXIPEPTIDASA A OBTENIDA DE PANCREAS PORCINO. SE HAN LLEVADO A CABO UNA SERIE DE ESTUDIOS ESTRUCTURALES DEL CITADO SEGMENTO DE ACTIVACION MEDIANTE TECNICAS DIVERSAS TALES COMO: ELECTROFORESIS RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR Y CALORIMETRIA DE BARRIDO DIFERENCIAL. ESTOS ESTUDIOS HAN PERMITIDO PONER DE MANIFIESTO QUE LA CONFORMACION DE ESTA PROTEINA NO ES LA MISMA CUANDO FORMA PARTE DEL ZIMOGENOQUE UNA VEZ SE HA SEPARADO DEL MISMO POR PROTEOLISIS LIMITADA. SE HA EVIDENCIADO TAMBIEN QUE EL CAMBIO DE CONFORMACION QUE SUFRE AL LIBERARSE DEL PROENZIMA LE CONFIERE UNAS CARACTERISTICAS Y PROPIEDADES QUE PERMITEN RELACIONARLO ESTRUCTURAL Y EVOLUTIVAMENTE CON UNA FAMILIA DE PROTEINAS FIJADORAS DE CA2+ LA QUE SE CONOCE CON EL NOMBRE DE FAMILIA EF-HAND.