QUIMICA CLINICA

Autor: MALET ENGRA GEMA.
Año: 2004.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIBLIOTECA DEL CAMPS DE BURJASSOT.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: La apoptosis, o muerte celular programada, ocurre de folma natural comq parte de una amplia Variedad dE procesos biológicos, tales como el recambio. celular normal, procesos del sistema immunológ¡co y el desarrollo embnonano. La apoptosis madecuada está implicada en muchas patologías, incluyendo enfermedades neurodegenerativas como las de Alzheimer y Huntington, isquemia, desórdenes autommunes y varias folmas de cáncer. Los estímulos apoptósicos inducen , la traslocación de miembros pro-apoptósicos de la familia de Bcl-2 a la membrana mitocondrial externa donde fonnan canales iónicos que pueden contribuir a disipar el potencial transmembrana de la mitocondria y favorecer la liberación de cito cromo c. En el citosol, esta proteina se une al factor activador de apoptosis (Apaf-l) para folmar un complejo denominado apoptosoma, el cual activa una familia de proteasa§ denominada caspasas. Finalmente las caspasas hidrolizan una serie de proteínas clave para la supervivencia celular y la célula muere de folma organizada y nonecrótica. Actualmente la implicación de la apoptosis en cáncer y enfermedades neurodegenerativas está bien establecida. Resultados La identiñcación de agentes que puedan modular el proceso de apoptosis es de gran interés farrnacológico. En primer lugar, se ha puesto a punto un ensayo bioquimico de reconstitución de apoptosomas purificados y seguimiento de la activación de caspasas a partir de sus componentes básicos expresados in vitro. Pare ello se ha puesto a punto la expresión de la proteina (Apaf-1 )en el sistema de expresión con bacu1ovirus y se ha caracterizado y optimizado la cinética de la expresión para la obtención de proteína funcional. Para identiñcar moléculas que modulen la folmación del apoptosoma hemos utilizado como estrategia la q1ri1Iúca combinatoria. A partir de una de las quimiotecas ensayadas, una quimioteca de pseudopéptidos (mas concretamente trímeros de alquilglicinas sustituid¡¡s) se han identificado unos compuestos inhibidores de la activación de caspasas mediada por el apotosoma. Con un segundo ensayo, basado en la activación de caspasas en extractos celulares de mamífero se ha realizado la caracterización del mecanismo de inhibición de los compuestos activos. Se ha demostrado que la diana molecular de los inhibidores es la proteína Apaf-1 y se ha demostrado la unión fisica de un derivado fluorescente de uno de los inhibidores con Apat: Finalmente, se ha realizado un estudio in vivo con células de leucernia humanas y análisis mediante citometria de flujo, en el que se ha demostrado que dos de los compuestos identificados tienen actividad in vivo como protectores de la apotosis frente a la inducción química de la apoptosis inducida por el agente quimico doxorrubicina.

Autor: POYATOS ANDUJAR ANTONIO MIGUEL.
Año: 2003.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA UNIVERSIDAD DE GRANADA.

Resumen: En el contexto de la cardiopatía isquémica, se están empleando marcadores moléculares que detectan daño celular con fines diagnósticos. Principalmente, se están usando las Troponinas (I y T) que son proteínas reguladoras del aparato contráctil. Dentro del conjunto de las proteínas contráctiles intracelulares del miocardiocito de los enfermos con IAM o Angor entendemos que las que se encuentran en mayor cantidad serán las que tendrán mayores posibilidades de ser liberadas circulatorio cuando exista lesión celular como consecuencia del mecanismo de lesión isquémica. Una mayor concentración intracelular de proteína en los compartimentos citosólico y/o citoesquelético permitirá incrementar en mayor medida y con mayor rapidez los niveles circulantes de esa proteína en el torrente sanguíneo. Esa mayor rapidez permitirá aumentar la sensibilidad temprana de la prueba. Si a la precodidad le añadimos la especificidad intrínseca de una molécular de origen exclusivamente cardíaco, tendremos un test de mayor potencia diagnóstica que los actuales en una sola determinación. Por otra parte, si ganamos en sensibilidad para detectar lesiones de menor extensión, no se necesitará afectar a un gran número de células miocárdicas para incrementar la concentración sérica circulante de la proteína. Esto permitirá alcanzar más fácilmente el rango analítico del método de determinación. Por lo tanto, poder diagnosticar con mayor sensibilida el Mínimo Daño Miocárdico. Al disminuir el nivel de detección de lesión miocárdica estaremos aproximándonos a encontrar un test diagnóstico que puede identificar a los pacientes con angina inestable hasta ahora limitado su diagnóstico a criterios clínicos y electrocardiográficos. Aún no se ha encontrado un marcador biológico que represente una solución definitiva al diagnóstico precoz y específico de la cardiopatía isquémica. Se precisa de un test rápido y fiable que permita anticipar la terapéutica adecuada. En el caso de la angina inestable, todavía no se dispone de un test que permita diagnosticar a este grupo de pacientes con mayor riesgo de presentar complicaciones. Pensamos que la Alfa Actina reúne potencialmente unas características que la pueden convertir en un nuevo y más eficaz marcador bioquímico de cardiopatía isquémica. Se trata de una proteína muy abundante en el citoplasma del miocardiocito, en mucha mayor concentración que los marcadores empleados actualmente y que tiene una isoforma específica del miocardio. Estimamos que la Alfa Actina es un candidato ideal para responder a las carencia diagnósticas que poseen otros marcadores y consideramos que evaluar sus resultados comparativamente en las mismas muestras con otros marcadores actualmente en uso podría reportarnos información muy interesante y todavía inédita acerca de su utilidad en la Cardiopatía Isquémica. Las conclusiones de la Tesis han sido: 1,- La Alfa Actina se encuentra elevada significativamente en el suero de los pacientes con cardiopatía isquémica siendo un marcador molecular útil para su estudio y diagnóstico. 2,- La Alfa Actina no presenta interferencias cruzadas con los pacientes que presenten daño muscular esquelético agudo. 3,- La Alfa Actina se encuentra elevada en los pacientes renales crónicos en tratamiento con diálisis y sin cardiopatía isquémica. La Actina disminuye después de haber realizado la diálisis hasta concentraciones normales. 4,- La Alfa Actina se eleva precozmente respecto a los otros marcadores específicos comparados en el estudio . 5,- La Alfa Actina es el único marcador que se eleva con significación estadística respecto al grupo control en la Angina Inestable. Por lo tanto, destaca como marcador molecular específico cardíaco que evidencia el daño muscular de la fibra cardíaca en enfermos con angina inestable. Este estudio revela la necesidad de desarrollar un método automatizado para la determinación rápida y sensible de Alfa Actina en los enfermos de Cardiopatía Isquémica y de Angina Inestable en particular.

Autor: DIEGO GÓMEZ JOSÉ EUGENIO DE.
Año: 2003.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: El trabajo de tesis doctoral describe un nuevo tipo de compuestos que actúan como potentes inhibidores de CDKS, utilizando como base el esqueleto de 2-aminoimidazo[1,2-A]piridina. La memoria engloba un amplio estudio químico médico de relaciones estructura-actividad (SAR) en torno a este tipo de moléculas. Estudios estructurales de rayos X de la proteína con el inhibidor ha permitido enfocar el diseño para encontrar inhibidores potentes y selectivos. Nuevas rutas sintéticas se han desarrollado para acceder a estos núcleos y permitir el desarrollo del SAR.

Autor: GONZÁLEZ DE LA PRESA BERNARDINO.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: La incertidumbre es un parámetro asociado al resultado de una medición que caracteriza la dispersión de los valores que razonablemente pueden atribuirse a una magnitud particular. De hecho una medición no está completa si el resultado de la misma no está acompañado de una indicación de su incertidumbre asociada. Esta dispersión de valores es debido a la existencia de errores aleatorios producidos en las distintas fases en las que se divide el proceso de medida y que están originados por diversos factores de variabilidad. Todo proceso de evaluación de la incertidumbre consta de cuatr pasos: especificación de la magnitud, identificación de los componentes de incertidumbre, cuantificación de estos componentes de incertidumbre y el cálculo de la incertidumbre combinada. El objetivo de esta tesis ha sido el cálculo de la incertidumbre producida durante la fase premetrológica (PM), la fase metrológica (M), en la valoración de los calibradores (Cal) y por las magnitudes influyentes (Inf). Este estudio se ha realizado en un conjunto de magnitudes que se encuentran entre las más solicitadas en el laboratorio de bioquímica clínica. El modelo de función usado en todos los casos ha sido y=CM+ Cte PM + Cte Cal + Cte Inf y teniendo en cuenta este modelo de función, la función de la incertidumbre combinada para estos procedimientos ha sido uc= VSM2 + SPM2 + SCal2 + Sint 2. En el caso de la incertidumbre premetrológica se ha estudiado el efecto de la extracción a cargo de distintos flebotomistas, en distintos brazos y el tratamiento premetrológico de la muestra diferido en el tiempo. En el caso de incertidumbre metrológica se ha calculado la incertidumbre interdiaria en 7 muestras de mezcla de sueros que abarcan el intervalo más amplio posible del procedimiento de medida. Los puntos obtenidos en la grafica concentración versus variancia correspondiente a la imprecisión se han ajustado con el programa desarrollado por Sadler y colaboradores Variance Function Program Versión 2. Se ha estudiado además la intercambiabilidad de la imprecisión intermediaria entre materiales de control y mezclas de suero. En el estudio de la incertidumbre de las magnitudes influyentes se ha estudiado el efecto de la concentración de bilirrubina, la concentración de hemoglobina y la concentración de triglicérido. RESULTADOS Y CONCLUSIÓN La incertidumbre premetrológica generalmente no es despreciable. No existe siempre intercambiabilidad en la imprecisión entre materiales de control y muestras de suero. La variancia de la imprecisión interdiaria es heterocedástica en todos los procedimientos estudiados mientras que el tipo de relación entre el coeficiente de variación y la concentración del constituyente varía dependiendo del procedimiento. Las interferencias potenciales conocidas son un componente notable de la incertidumbre.

Autor: SEGOVIA SILVESTRE ANTONIO.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Autor: ORDOÑO DOMINGUEZ EUGENIO.
Año: 2001.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: HOSPITAL DR. PESET (VALENCIA).

Resumen: EL CANCER DE PROSTATA ES EL CANCER UROLOGICO MAS FRECUENTE, SIENDO LA SEGUNDA CAUSA DE MUERTE POR CANCER EN HOMBRES EN EL MUNDO OCCIENTAL. EL DESCUBRIMIENTO Y EXTENSIÓN DEL USO DE BIOMARCADORES DE PROSTATA, HA HECHO QUE SEAN DIAGNOSTICADOS UN MAYOR NUMERO DE CANCERES DE PROSTATA Y EN FASES MAS PRECOCES. PARA LA REALIZACION DE ESTE TRABAJO, SE HAN USADO DOS GRUPOS DE PACIENTES: UNO DEL 3894 QUE NO PADECEN CANCER DE PROSTATA Y OTRO DE 23 QUE PADECEN LA ENFERMEDAD. EN PRIMER LUGAR, SE PROCEDIÓ AL ESTUDIO DE LA VARIABILIDAD DEL PSA (ANTIGUENO PROSTATICO ESPECIFICO) TOTAL Y DEL PROCENTAJE DE PSA LIBRE CON LA EDAD. SE OBTUVO QUE EL PSA TOTAL AUMENTA CON LA EDAD POR LO QUE SE DEBERIA DE CONSIDERAR ESTE AUMENTO A LA HORA DE LA EVALUACION CLINICA. EN SEGUNDO LUGAR, SE REALIZÓ UNA VALORACIÓN DE LA INFLUENCIA DE LA FUNCIÓN RENAL SOBRE LOS NIELES DE PSA TOTAL Y EL PORCENTAJE DE PSA LIBRE, NO ENCONTRANDOSE LOS NIVELES DE PSA TOTAL NI LOS DEL PORCENTAJE DE PSA LIBRE AFECTADOS POR LA EXISTENCIA DE FALLO RENAL EN LOS PACIENTES. POR ÚLTIMO, SE ESTUDIO LA POTENCIA DIAGNOSTICA DEL PSA TOTAL Y DEL PORCENTAJE DE PSA LIBRE, OBTENIÉNDOSE QUE EL PSA TOTAL SI QUE PUEDE SER USADO COMO MAGNITUD DE SCREENING POBLACIONAL EN VARONES CON EDADDE RIEGO PARA EL CANCER DE PROSTATA, MIENTRAS QUE EN EL CASO DEL PORCENTAJE DE PSA EL CANCER DE PROSTATA, MIENTRAS QUE EN EL CASO DEL PORCENTAJE DE PSA LIBRE NO SIRVE PARA LA REALIZACIÓN DE ESTE TIPO DE ESTUDIO.

Autor: BRUGUERA VILALTA MARC.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: El síndrome de Sjögren es una enfermedad autoinmune con una prevalencia elevada en la población general (entre el 0,5% y el 3%). Como en las demás enfermedades de esta naturaleza, la presencia de anticuerpos antinucleares (ANA) está ampliamente aceptada como prueba importante en su diagnóstico. En el caso del síndrome de Sjögren, el principal marcador serológico es la presencia de anticuerpos dirigidos contra el antígeno SS-B (La), aunque en algunos casos también se ha descrito la presencia única de anticuerpos dirigidos contra el antígeno SS-A (Ro), compuesto por dos proteínas (Ro60 y Ro52) asociadas a distintos RNA citoplasmáticos. En el presente trabajo se describe el procedimiento de obtención de las proteínas antigénicas SS-B (La) y SS-A (Ro), para ser utilizadas posteriormente en el desarrollo de dos enzimoinmunoanálisis (ELISA anti-SS-B (La) y ELISA anti-SS-A (Ro)) útiles para la detección de anticuerpos dirigidos contra éllas. La estrategia seguida fue la siguiente: se prepararon tres vectores de expresión en Escherichia coli de las tres proteínas (SS-B, Ro60 y R052) mediante la tecnología del DNA recombinante, se expresaron las tres proteínas recombinantes en los microorganismos procariotas en forma de proteínas de fusión, se purificaron las proteínas por comatografía de afinidad, se inmovilizaron por adsorción pasiva en microplacas de poliestireno, y se opitimizaron las distintas variables del ensayo tipo ELISA. Los dos ensayos desarrollados se evaluaron mediante el estudio de las constantes diagnósticas y analíticas y el estudio de las características analíticas. Para la ELISa anti-SS-B (La), se obtuvieron los siguientes resultados: sensibilidad diagnóstica del 96%, especificidad diagnóstica del 97%, coeficiente de repetibilidad del 2,1%, coeficiente de reproductibilidad del 10,0%, y ausencia de reacciones cruzadas e interferencias. Para la ELISA anti-SS-A (Ro) los resultados fueron los siguientes: sensibilidad diagnóstica del 88%, especificidad diagnóstica del 91%, coeficiente de repetibilidad del 1,9%, coeficiente de reproductibilidad del 10,6% y ausencia de reacciones cruzadas e interferencias.

Autor: BIOSCA ADZENT M. CARMEN.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: El motivo de esta tesis ha sido encontrar indicadores analíticos capaces de señalar cambios significativos en el estado de salud del paciente con transplante renal, antes de cualquier manifestación clínica. En el seguimiento de pacientes se solicitan repetidamente pruebas analíticas a lo largo del tiempo, siendo muy importante determinar la diferencia mínima entre resultados consecutivos, de una misma magnitud biológica, que expresan un cambio significativo. Este es el denominado "valor de referencia de magnitud biológica, que expresan un cambio significativo. Este es el denominado "valor de referencia de un cambio". La aplicación clínica que de este valor se derive es clave para tomar decisiones correctas, por lo que se ha de tener en cuenta la opinión del médico al establecer el valor de referencia de un cambio para cada situación clínica concreta. Está demostrado que el valor de referencia de un cambio depende de la variación biológica intraindividual, cuyo valor está ya publicado para un gran número de magnitudes biológicas en personas sanas. Los pacientes trasplantados renales se encuentran en "un cierto estadio de salud", en el cual es importante optimizar el seguimiento, puesto que la detección precoz de posibles alteraciones funcionales es decisiva para decidir el tratamiento más apropiado. En esta tesis se han utilizado los datos obtenidos al aplicar el protocolo asistencial de seguimiento de los pacientes trasplantados renales, para establecer el equilibrio homeostático (período de máxima estabilidad) en estos pacientes. Empieza entre las 2 y 8 semanas después del trasplante, dependiendo del paciente, comprende un intervalo de 8 determinacines y se mantienen durante una media de 3 meses. Durante este período, se han estimado los componentes de variación biológica intra e interindividual, habiéndose comprobado que la obtención de muestras en intervalos de tiempo irregulares no influye en los valores de variación biológica intraindividual obtenidos. Así se ha constatado que el protocolo asistencial es apropiado para estimar la variabilidad biológica, por lo que este modelo de estudio podría ser extrapolado a otras patologías. Los valores de variabilidad biológica intra e interindividual en el postrasplante renal son distintos de los obtenidos en personas sanas. Las magnitudes con mayor individualidad, idóneas para detectar cambios significativos, son creatinina y uratos en sangre. Se ha calculado el valor de referencia de un cambio (VRC) para estas dos magnitudes. Para aumentar el valor predictivo de un cambio en el estado de salud, se han utilizado valores VRC combinando las dos magnitudes, una vez demostrada la independencia en entre ellas durante el período de máxima estabilidad. La validez diagnóstica de los VRC combinados para creatinina y uratos se ha estimado en un grupo de 75 pacientes trasplantados renales (57 clínicamente estables y 18 con rechazo agudo después de un corto período de estabilidad clínica), calculando los VRC a diferentes niveles de probabilidad. Con la finalidad de optimizar la utilidad clínica de los VRC calculados, se ha tenido en cuenta el criterio médico. Para ello, se ha desarrollado una encuesta dirigida a los nefrólogos responsables del seguimiento del pacientes trasplantado renal. De los resultados obtenidos se deduce que los VRC de creatinina de 18.1% y de uratos de 19.8% (intervalo de probabilidad del 85%) presentan la mejor combinación en cuánto a sensibilidad, especificidad y valor predictivo par detectar rechazo o complicaciones renales. Se ha verificado la utilidad clínica del modelo definido (VRC combinado de creatinina y uratos) en otro grupo de pacientes, constatando la detección de potenciales crisis subclínicas en dicho nuevo grupo. Como consecuencia práctica de esta tesis se ha previsto incorporar, en el sistema informático del laboratorio, un algoritmo de cálculo de los VRC a los resultados de creatinina y uratos de todos los pacientes postrasplantados renales. Cualquier resultado que supere los VRC definidos será específicamente señalado como indicativo de cambio significativo.

Autor: RAMIS BARCELO MARGARITA.
Año: 2000.
Universidad: ISLAS BALEARES.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: El contenido de esta TD se puede dividir en 3 grandes apartados: En el primero se hace un estudio de la inhibición de la cristalización de la brushita y la hidroxiapatita en orina artificial enpresencia y ausencia de inhibidores utilizando un método de seguimiento cinético y llegando a las siguientes conclusiones: 1- Los efectos de las sustancias ensayadas sobre la cristalización de la DCPD y la HAP dependen tanto de la naturaleza del fosfato cálcio insolubre formado, como de la etapa de critalización inhibida. 2- La especialidad de los procesos de inhibición cristalina depende de las interaciones del inhibidor con el núcleo del sólido formado y de las velocidades de absorción/dessorción del inhibidor sobre la superficie de la DCPD y de la HAP. 3- La nucleaciónd e los cristales de HAP se inhibe más facilmente que la nucleación de la DCPD. 4- Son interesanes los resultados obtenidos en la serie de los polifosfatos, ya que aquellos productos qu manifiestan una mejor actividad inhibidoa de la cristlización de la HAP, son los que pero inhiben la DCPD. 5- Es muy importante evaluar la mínima concentración de inhibidor que jpreviene la precipitación del fosfato cálcico durante largos periodos de tiempo para examinar la capacidad de evitar el desarrollo de depósitos de fosfato cálcico sobre el epitelio renal. En el segundo apartado se recogen los resultados del estudio de la velocidad de cristalización del ácido úrico y el efecto de los inhibidores. Este estudio es una interesante alternativa para aquellos casos en que la terapeútic habiutal consiste en: - Alcalinización sistématica de la orina en valores de pH-5,5 - Aumento de la ingesta de líquidos y dieta pobre en proteinas - Administrando alopurinol No pueda ser utilizada o no de los resultados stisfactoriso que se esperan. Finalmente en el tercer apartado se estudian los efectos de tres infusiones vegetales sobre la litiasis renal, Zea mays, Agropyron repens y Herniaria hirsuta para evaluar su supuesto poder antililiáico. Para valorar la significación de los resultados se emplearon técnicas estadísticas que tratan de calcular la probabilidad de que las diferencias encontradas entre las medias sean debidas al tratamiento con plantas medicinales o al hecho de trabajar conmuestras reducidas de una población con una variablidad natural. Determinamos las diferencias significativas, comparando los resultados de las ratas tratadas con las distintas infusiones respecto a los obtenidos cuando bebieron agua (control), mediante la comparación de medias por el test de la t. De Student. En cuanto a los resultados obtenidos con las infusiones vegetales decir que en todos los parámetros evaluados se pudo observar que no había efectos drásticos si tomaban la infusión en lugar de agua y que estos efectos dependían del tipo de dieta. -

Autor: SIMONET SUAN BARTOLOMÉ MIGUEL.
Año: 2000.
Universidad: ISLAS BALEARES.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD ISLAS BALEARES.

Resumen: El ácido fítico es un producto natural ampliamente distribuido en el reino vegetal y animal. Se encuentran presente en elevadas cantidades en legumbres, cereales, frutos secos y semillas, por lo que constituye un alimento habitual de la dieta humana. En la presente tesis doctoral se han tratado dos aspectos fundamentales del ácido fítico, por una parte se han estudiado y desarrollado neuvos métodos analíticos de determinación de ácido fítico en muestras biológicas y por otra parte se han desarrollado y estudiado diversos aspectos biológicos del ácido fítico tanto en animales de experimentación (ratas Wistar) como en humanos. De los diferentes métodos analíticos desarrollados, caben destacar dos: el primero se trata de un método extracto-fotométrico basado en la purificación del ácido fítico y determinación fotométrica de los fosfatos provenientes de su hidrólisis, dicha metodología permite determinar el ácido fítico de muestras urinarias, el segundo se fundamenta en la purificación del ácido fítico, hidrólisis enximática para rendir myo-inositol, derivatización y cuantificación de éste pro CG/MS. Ésta última metodología permite determinar el ácido fítico preente en tejidos y fluidos biológicos. Los estudio biológicos han demostrado entre otros los siguientes aspectos: * La excreción urinaria de ácido fítico se encuentra directamente relacionada con su ingesta oral. De hecho al eliminar la ingesta oral de ácido fítico tanto los niveles en tejidos como fluidos biológicos disminuyen drásticamente. * Con un consumo moderado, consumo que en ningún caso produce problemas de biodisponibilidad, se alcanzan unos niveles óptimos para el organismo. * La administración de cantidades moderadas de ácidofítico evita la formación de calificaciones en el tejido renal de ratas Wistar hembra. * Los niveles de ácido fítico enlos pacientes litiásicos oxalocálcicos son claramente inferiores a los niveles urinarios de sanos. * El estudio de la farmacocinética del ácido fítico en humanos, ha demostrado que el ácido fítico se absorbe rápidamente aunque en pequeña extensión presentando un máximo de absorción a las cuatro horas.

Autor: LLANSOLA GIL MARTA.
Año: 2000.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: El glutamato es el neurotransmisor excitador más importante en mamiferos, pero una activacion excesiva de sus receptores tipo NMDA conduce a la muerte neuronal. Estudios previos mostraron que la carnitina previene la neurotoxicidad del glutamato en cultivos primarios de neuronas de cerebelo. En este estudio se ha demostrado que compuestos que, como la carnitina, contienen un grupo trimetilamina (TMAO, Betaina, Colina, Acetilcolina, Acetilcarnitina, Carbacol) previenen la neurotoxicidad del glutamato en neuronas de cerebelo en cultivo. El efecto protector frente a la neurotoxicidad del glutamato de la mayoria de estos compuestos se previene por un antagonista (AP-3) de receptores metabotropicos de glutamato de la mayoria de estos compuestos se previene por un antagonista (AP-3) de receptores metabotropicos de glutamato (mGluRs). El t-ACPD, un agonista de mGluRs, previene la neurotoxicidad del glutamato en cultivos primarios de neuronas de cerebelo. Se ha estudiado que subtipo de receptor metabotrópico de glutamato media el efecto protector del t-ACPD mediante la utilizacion de agonistas y antagonistas selectivos de diferentes subtipos de mGluRs. Se ha determinado que la activacion del mGluR5 media el efecto protector del t-ACPD frente a la neurotoxicidad del glutamato. El receptor mGluR5 esta asociado a la activacion de proteinas G que activan de proteinas G que activan la fosfolipasa C(PLC). Esta enzima hidroliza fosfolipidos de inositol. Hemos estudiado el efecto de la carnitina sobre la hidrólisis de fosfolipidos inducida por el t-ACPD e inhibe en un 50% aproximadamente la hidrólisis inducida por carbacol. Este efecto de la carnitina implica la modulacion de algunos tipos de proteinas G, ya que inhibe parcialmente la hidrólisis de fosfolipidos inducida por activacion de algunos tipos de proteinas G, ya que inhibe parcialmente la hidrólisis de fosfolipidos inducida por activacion directa de proteinas G con AIF 4. Hemos demostrado que la activacion de receptores muscarinicos de actilcolina por el carbacol induce una liberacion de glutamato que activa mGluRs asociados a la activacion de PLC. Por tanto la hidrólisis de fofolipidos inducida por carbacol tiene dos componentes, la activacion directa de una PLC asociada al receptor muscarinico y la hidrólisis inducida por el glutamato liberado que activa mGluRs asociados a la activacion de PLC. Este componente se inhibe por carnitina o AP-3, un antagonista de mGluRs. Hemos estudiado la implicacion de la activacion de la PLC por t-ACPD en el efecto protector de t-ACPD frente a la neurotoxicidad del glutamato en cultivos de neurones de cerebelo. La activacion de PLC no esta implicada en el efecto protector del t-ACPD, sino que esta implicada en el mecanismo de neurotoxicidad del glutamato, ya que inhibidores de PLC previenen la neurotoxicidad del glutamato. Hemos demostrado que la activacion del receptor NMDA induce la activacion de una PLC mediante la formacion de oxido nitrico que por algun mecanismo aun no conocido activa una fosfolipasa C. La activacion del receptor NMDA induce un rapido aumento de fosforilacion de la proteina asociada a microtubulos MAP-2. Hemos estudiado la(s) via(s) de transduccion de señales asociada(s) al receptor NMDA que median el aumento de fosforilacion de MAP-2. Hemos comprobado que el aumento de fosforilacion de MAP-quinasa que fosforila MAP-2. Tambien hemos comprobado que la carnitina previene el aumento de fosforilacion de MAP-2 inducido por el NMDA.

Autor: SÁNCHEZ MANRIQUE MARIBEL.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: En la actualidad no se ha descrito ningún procedimiento de medida de referencia para la medición de la concentración de masa de la isoenzima 2 de la creatina-cinasa, por lo que para la asignación de un valor de concentración de masa al material de referencia BCR 608 se siguió la siguiente estrategia: en la campaña de certificación se midió la concentración de masa del material mediante inmunoanálisis de distintas características, utilizando como calibrador una solución purificada de creatina-cinasa 2 ala que previamente se le había asignado un valor de concentración de proteína mediante el procedimiento de Doetsch, utilizando como calibrador el materia de referencia SRM 927b con un valor de concentración de proteína certificado. La creatina-cinasa 2 se purificó a partir de músculo cardiaco humano. A la solución purificada se le asignó un valor de concentración de proteína por el procedimiento de Doetsch de 124,3 mg/L, diluyéndose hasta una concentración de 80,362 ug/L para poder ser utilizada ocmo calibrador en los distitnos inmunoanálisis. El valor certificado de concentración de masa de la creatina-cinasa 2 del material de referencia BCR 608 fue de 93,30 ug/L con una incertidumbre asociada de 9,65 ug/L.

Autor: GARCIA SALINAS M. JOSE.
Año: 1999.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: La tesis supone un estudio de los sistemas coloidales desde el punto de vista de investigación básica. Se centra en el estudio de los fenómenos electrocinéticos, considerando para sistemas de látex de pliestireno la movilidad electroforética, la conversión de este dato experimental a potencial zeta y por último el efecto electroviscoso primario. Para este último fenómeno se encuentra muy buen ajcuerdo entre resultados experimentales y predicciones teóricas (terorías de Booth y de Watterson-White). Además se encuentra un máximo en la representación del coeficiente electroviscoso primario frente al radio electrocinético (o concentración de electrolito), obtenido experimentalmente y justificado teóricamente conlas teorías mencionadas, incluyendo la contribución al efecto de una tercera especie iónica presente en la doble capa (especie determinante del pH) de mucha mayor movilidad. También se ha realizado la caracterización electrocinética para un sistema coloidal constituido por partículas tipo núcleo-corteza, denominado microgel. El comportamiento de la movilidad electroforética en función de la temperatura y la concentraciónd e electrolito en el medio ha sido justificado cualitativa y cuantitativamente mediante la teoría de la electroforesis de Ohhima teniendo en cuenta los cambios e s tructurales que sugre la partícula y como la variaciónde tamaño influye en la densidad de carga de la partícula y en el arrastre ejercido por la corteza de polielectrolito.

Autor: SCHMITT ARTUR.
Año: 1999.
Universidad: GRANADA .
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS .

Resumen: La Tesis plantea como objetivo principal la determinación de los mecanismos de agregación entre partículas colidales recubiertas con proteína(BSA). En primer lugar, se destacan los avances acerca de la descripción teórica de los procesos de agregación de sistemas de partículas recubiertas por moléculas proteicas. Se describe la técnica empleada en el estudio experimental, (SPOS) y las adaptaciones del dispositivo realizadas para medidas de larga duración. Se exponen resultados obtenidos mediante el estudio de los procesos de agregación controlados por fuerzas de tipo DLVO. En la última parte de la memoria se estudian los procesos de agregación de coloides poliméricos recubiertos de BSA, en función de diferentes parámetros como el grado de recubrimiento, la concentración iónica y el pH de la fase acuosa,y la carga superficial de las partículas soporte. A partir de las distribuciones de tamaño obtenidas experimentalmente se calculan, las funciones de escalado y se muestra como el escalado temporal se pone de manifiesto para todas las cinéticas estudiadas. Se desarrolla un modelo que permite suponer los diferentes mecanismos(agregación, floculación debil, puenteo) presentes en este tipo de agregación.

Autor: JUNQUERA BAÑARES SONIA.
Año: 1999.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ZARAGOZA.

Resumen: 1,- Estudio de las alteraciones hemostáticas en los pacientes con cáncer colorecta en el momento del diagnóstico a los 15 días después de la cirugía curativa. Se determina la utilidad de los diferentes tests de laboratorio (tiempos de coagulación, zimógenos, activadores e inhibidores de la coagulación y fibrinólisis, junto con productos resultantes de su activación) para su detección, así como la relación con los accidentes trombóticos y con la extensión tumoral. Se determina el valor pronóstico de productos resultantes de la activación de la coagulación y fibrinólisis. 2,- Se determina el valor pronóstico de los componentes del sistema de activación del plasminógeno en plasma de los pacientes con cáncer colorectal mediante el seguimiento prospectivo durante 60 meses después de la exéresis tumoral. En este estudio original se observa un gran valor pronóstico para inhibidores y activadores del sistema de activación del plasminógeno, superior al que se detecta para otras variables pronósticos de algunas de las variables clínico-patológicas relacionadas con el pronóstico, así como el número de plaquetas, trasfusiones perioperatorias, reactantes de fase aguda, etc. 3,- Se determina el valor pronóstico de los niveles de CEA sérico en el momento del diagnóstico de los pacientes con cáncer colorectal y después de 4-6 semanas de la exéresis. Se determina en el estudio la utilidad del CEA para detectar recidivas en nuestros pacientes mediante el seguimiento y determinación secuencial de CEA sérico durante los 5 años de seguimiento. Se determina la relación entre el grado de diferenciación tumoral por estudios histológicos con los niveles de CEA sérico en estos pacientes y con la cantidad en tejido tumoral.

Autor: GARCIA VILLORA ANA.
Año: 1998.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Dada la relevancia clínica y epidemiológica de la Diabetes Mellitus, un problema importante en Medicina Legal y Forense es el diagnóstico postmortem de esta enfermedad. El indicador postmortem de mayor fiabilidad es la determinación de la concentración de glucosa a nivel del humor vítreo, que se correlaciona de forma directa con los niveles antemortem de glucosa en el suero. A pesar de esto, la determinación de este parámetro no debe ser utilizada aisladamente, sino junto al análisis de otros marcadores más específicos de la diabetes que ayuden a corroborar el diagnóstico postmortem de dicha enfermedad. La hipótesis de trabajo de esta memoria es que las concentraciones de los parámetros analizados en el humor vítreo pueden reflejar de forma directa las alteraciones metabólicas secundarias a la enfermedad diabética. La muestra estudiada está integrada por un grupo de 181 cadáveres, entre los cuales 84 individuos tenían diagnóstico previo de Diabetes Mellitus y 97 carecían de dicho diagnóstico. Por otro lado, 75 sujetos fallecieron por muerte violenta, mientras que los 106 restantes murieron por causas naturales. La extracción de las muestras de humor vítreo fue realizada en el momento de la autopsia para su posterior análisis bioquímico. Por un lado, se realizó la determinación de los parámetros que componen en la práctica clínica el perfil bioquímico general mediante métodos automatizados. Posteriormente, se realizaron una serie de determinaciones bioquímicas más específicas del diagnóstico de la Diabetes Mellitus, como los niveles de fructosamina, de ácido láctico y de ácido beta-hidroxibutírico, mediante métodos manuales. Se aplicó el paquete estadístico SPSS para el tratamiento de los datos obtenidos, utilizándose los siguientes programas: análisis de la distribución simple de frecuencias, matriz de correlación y análisis de comparación de medias (test de Mann-Whitney-Wilcoxon y test de Kruskal-Wallis). Este estudio corrobora la utilidad de la determinación de la concentración de glucosa en el humor vítreo de cadáveres para el diagnóstico postmortem de la Diabetes Mellitus. Por otro lado, los resultados obtenidos permiten confirmar la necesidad del uso simultáneo de otros marcadores más específicos, como la fructosamina, que permite conocer niveles séricos antemortem de glucosa a más largo plazo, o como el ácido láctico, cuya utilización combinada con la glucosa evitaría los posibles errores en la interpretación derivados de los fenómenos glucolíticos postmortem. Resulta de gran interés la buena correlación obtenida entre los niveles de ácido betahidroxibutírico y los niveles de glucosa, siendo la determinación de este cuerpo cetónico a nivel del humor vítreo una posible nueva vía en el diagnóstico de la enfermedad diabética, y en especial en los casos en que se sospeche de la instauración de un coma cetoacidótico. Finalmente, hay que destacar, la utilidad de determinados parámetros bioquímicos habitualmente utilizados en las analíticas generales de la práctica clínica, como los marcadores de daño renal, a la hora de hacer el diagnóstico postmortem de distintas complicaciones secundarias a la Diabetes Mellitus.

Autor: APARICIO TORMO JOSE RAMON.
Año: 1998.
Universidad: MIGUEL HERNANDEZ.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La distinción temprana entre pancreatitis aguda alcohólica (PAA) y biliar (PAB) es transcendente, ya que condiciona diferencias importantes en el tratamiento. Se ha propuesto que la transferrina deficiente en carbohidratos (CDT) y la actividad de la tripsina (AT) son útiles en el diagnóstico de PAA. Objetivos: Determinar los niveles de CDT y de AT en pacientes con PA y valorar su utilidad en el diagnóstico de PAA. Material y métodos: Se estudiaron de forma retrospectiva 70 pacientes con diagnóstico de PA (36 PAB, 16 PAA, 11 PA idiopática (PAI) y 7 de otras etiologías (PAO), 32 alcohólicos asintomáticos (AA) y 16 controles sanos (CS). Posteriormente se validaron los resultados de forma prospectiva en 70 pacientes con PA: 42 PAB, 14 PAA y 14 PAI. Resultados: Los niveles de CDT fueron sifnificativamente más altos (p

Autor: JIMENEZ DE LUCAS ISABEL EUGENIA.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: Se han analizado 50 tumores cerebrales, de los cuales 36 son astrocitomas. Se ha comprobado la presencia de amplificación en el del receptor del factor de crecimiento epidermico, la existencia de mutaciones en p53 o bien de perdida de heterocigosidad. Se han analizado inmunohistoquimicamente los tumores para comprobar la expresión de p53. Se han estudiado 9 marcadores de microsatélites con el fin de valorar la existencia de inestabilidad en microsatélites, dos de ellos adyacentes a los genes oncosupresores ing 1 y dmnbt1. Se ha estudiado la existencia de mutaciones asociadas a inestabilidad en los tractos de pares de bases repetidas presentes en los genes tgfbRII, bax, hmsh3 y hmsh6. Se ha encontrado inestabilidad y/o mutaciones asociadas a la misma en el gen tgfbrII en la totalidad de tumores astrociticos de grado bajo estudiados, lo que sugiere que la deficiencia en reparación es un suceso temprano en la progresión de estos tumores. En astrocitomas de grado alto, hay una relación significativa entre la presencia de mutaciones en tgfbRII y la amplificación del gen del receptor del factor de crecimiento epidérmico. No se han encontrado mutaciones en los genes bax, homsh6 y hmsh3 (con una sola excepción). Se llega a la conclusión de que dos de los marcadores utilizados son especialmente relevantes para el estudio de la inestabilidad en microsatetes..

Autor: LOPEZ URRUTIA LORENTE LUIS.
Año: 1998.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: FARMACIA .

Resumen: Los lipopolisacáridos lisos (S-LPS) de Brucella abortus 544 y Brucella melitensis 16 M son capaces de inducir la producción de óxido nítrico (NO) por los macrófagos peritoneales de rata de forma dependiente del tiempo y de la dosis. La producción de NO ocurre a través de la vía de la L-arginina, a juzgar por su dependencia de la presencia de L-arginina y el bloqueo por N elevado G-metil-L-arginina, un inhibidor de las sintasas de NO. La participación de la isoforma inducible de la NO sintasa (iNOS) en la producción de NO iniciada por ambos S-LPS, se demuestra por la inducción de la expresión de ARN mensajero y de la proteína iNOS. Los lípidos A(LipA) de Brucella también inducen la producción de NO de forma dependiente de la dosis y la expresión de ARNm de iNOS, comportándose como la parte activa de S-LPS en dicha inducción. No existen diferencias significativas en cuanto a las cantidades de NO que puedan llegar a producirse por cada S-LPS, ni tampoco en lo que se refiere a las cantidades producidas por sus LipA, sin embargo a bajas concentraciones, 0.01-0.1 ug/ml, se comportan como inductores menos potentes que el LPS y lipA de Escherichia coli. Además, los lipopolisacáridos de Escherichia hermannii, Yersinia enterocolítica O:9, Pseudomonas maltophilia 555 y Ocrobactrum anthopi LMG3331, que presentan reacciones serológicas cruzadas con los S-LPS de Brucella, son capaces de inducir la producción de NO y la expresión de ARNm de iNOS en macrófagos peritoneales de rata..

Autor: QUINTANA PEREZ JUAN JOSE.
Año: 1998.
Universidad: CADIZ.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS DE PUERTO REAL.

Resumen: En este trabajo se aplica por primera vez la técnica de absorción atómica en el estudio de las reacciones de reextracción por intercambio de ligandos, e igualmente por primera vez, se estudian ligandos orgánicos neutros. Proponiendo nuevos métodos de determinación de oxalato y etilendiamina basados en reacciones reextracción. Se han elegido las disoluciones de: oxinato de cobre en alcohol isoamílilco y cloroformo, 5-cloro-8-hidroxiquinoleinato de cobre en alcohol isoamílico y cloroformo y 5,7-dicloro-8-hidroxiquinoleinato de cobre en metilisobutilcetona y cloroformo para poner a punto varias determinaciones. Se han determinado las condicones óptimas de reextracción de los distintos complejos. Con el fin de determinar el oxalato y la etilendiamina, se han obtenido varias rectas de calibrado, utilizando la espectrofotometría molecular y la espectromtría de abosrción atómica, correspondientes a la reextracción de los complejos en los distintos disolventes por oxalato y por etilendiamina. Se han realizado un estudio estadístico para la reextracción de los distintos complejos y disolventes por oxalato y etilendiamina. SE ha realizado un estudio de la relación molar de la reextracción de oxinato de cobre y demás complejos y disolventes en alcohol isoamílico por oxalato y por etilendiamina. La reacción de intercambio que se propone para la reextracción del oxinato de cobre por etilendiamina y oxalato es la complejación de ambas especies con el cobre del oxinato, aplicable a resto de los complejos. Se han realizado numerosos análisis de oxalato ó etilendiamina en mezclas vinarias con especies orgánicas e inorgánicas. A partir del estudio de la determinación de oxalato en orina sintética a través de la botención de la correspondiente recta de calibrado, y aplicando el método de adiciones patrón, se ha determinado la concentración de oxalato en muestras reales de orian. Se han obtenido varias recetas de calibarado de etilendiamina en orina sintética. Finalmente se ha realizado la determinación conjunta de oxalato y etilendiamina.