QUIMICA MICROBIOLOGICA

Autor: GONZÁLEZ SANTAMARIA M. LUISA.
Año: 2003.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTADE CIENCIAS BIOLÓGICAS.

Resumen: En este trabajo se describe el desarrollo y estandarización de un modelo murino de colonización gastrointestinal por Candida y candidosis sistémica. El desarrollo de los experimentos se estructuró en tres fases. En la primera se evaluó la influencia sobre la colonización gastrointestinal por Candida de la glucosa y de la tetraciclina, administradas como complementos dietéticos. Los resultados demostraron que la administración oral de glucosa o de tetraciclina favorecía la colonización gastrointestinal por esta levadura. Cabe destacar que la colonización fue más elevada si se combinaban los dos complementos a la vez. En la segunda fase experimental se procedió a estandarizar el modelo discriminatorio de infección diseminada. La utilización de la ciclofosfamida con metilprednisolona como tratamiento inmunosupresor en ratones adultos con colonización gastrointestinal por C.albicans, originó una candidosis profunda diseminada en un 80% de los animales. La diseminación se produjo por invasión de los vasos sanguíneos de la submucosa digestiva o por continuidad en visceras cercanas a la unión gastro-esofágica. Por último, en la tercera fase experimental, se utilizó el modelo murino estandarizado para dos estudios aplicados. En el primero de ellos se comparó la capacidad invasora de cepas isogénicas de C.albicans cuya única diferencia era el perfil de sensibildiad al fluconazol. Solo en una de las parejas isogénicas se hallaron diferencias significativas. Este dato señala que las variaciones en la virulencia asociada al desarrollo de resistencia dependen de cada cepa y no deben considerarse como un fenómeno universal. En el segundo estudio aplicado se analizó la posibilidad de utilizar el modelo con otras especies de Candida. Se utilizaron tres cepas de Candida tropicalis y tres de Candida parapsilosis, con diferentes orígenes clínicos. El porcentaje de infecciones diseminadas fue significativamente menor para C.tropicalis que para C.albicans, lo que podría indicar una menor virulencia de esta especie. En el caso de C.parapsilosis no se produjeron infecciones diseminadas, lo que concuerda con el hecho de que esta especie produce infecciones profundas tras colonizar dispositivos vasculares y no tras diseminar desde el tracto gastrointestinal. El modelo puede emplearse en estudios diagnósticos, en ensayos sobre eficacia terapéutica o profiláctica de diferentes antifúngicos, en estudios de correlación in vitro-in vivo, en análisis de la respuesta inmunológica ante una infección por levaduras y en trabajos sobre las factores de virulencia implicados en las infecciones invasoras.

Autor: SOTO OSPINA CARLOS YESID.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: La virulencia de M.tuberculosis se ha relacionado con diversas características fenotípicas y entre las menos exploradas se encuentran las reacciones citoquímicas con diferentes colorantes básicos. Los estudios más prometedores en este campo ha sido los que describen la tinción de las cepas virulentas de M.tuberculosis con rojo neutro (RN). El principal objetivo de este trabajo ha sido evaluar el papel desempleado por los glicolópidos de pared, especialmente sulfolípidos (SL), en la tinción de las cepas virulentas de M. Tuberculosis con RN. Además se plantea conocer la región genómica d ela cepa virulenta H37Rv implicada en la fijación de RN (RN+). Se compararon los perfiles glicolip discos de la superficie de cepas RN+ y RN- de M.tuberculosis mediante cromatografía en columna de intercambio iónico (DEAE) y de capa fina (CCF). También se purificaron diferentes fracciones glicolópidicas de la superficie y se analiza su capacidad de fijar RN (NRA). No se encuentra una relación directa entre el contenido de SL, PL y PIM, y el carácter RN+ de M.tuberculosis. Simultáneamente se buscaron las condiciones óptimas para la tinción de micobacterias con RN en tubo de ensayo, y se desarrollarón un método para fijar colonias de micobacteria en placas de agar Middlebrook 7H10-OADC modificado. Una combinación de los dos anteriores permitieron desarrollar una técnica para la tinción con RN de colonias de micobacterias en placa de cultivo. Adicionalmente se desarrollo un método para la detección rápida de SL en cepas de M.tuberculosis por medio de cromatografía en capa fina de dos dimensiones (CCF-2D), y otro para diferenciar M.tuberculosis H37Ra, de H37Rv y aislados clónicos mediante tinción citoquímica. Por otra parte se construye una genoteca M.tuberculosis H37Rven el cosmido shuttle pYUB18, la que se transforma en la cepa RN-Mycobacterium smegmatis mc2 155 y se criba mediante tinción con RN en placas de cultivo. Se identificaron tres colonias RN+ de M.smegmatis mc2 155, a partir de las cuales se dedujo mediante nucleotidica, complementación de M.smegmatis mc 2 155 y analisis de restricción, que la región del genoma de M.tuberculosis H37Rv comprendida entre los marcos abiertos de lectura Rv0570 a Rv0577 estaran posiblemente implicados en el carácter RN+ de las cepas de M.smegmatis mc2 155 que fijaron RN.

Autor: ALEMANY AGULLO JAUME.
Año: 2001.
Universidad: GIRONA.
Centro de lectura: ESCUELA POLITECNICA SUPERIOR.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE GIRONA.

Resumen: Se estudio la capacidad de produccion de metabolitos con actividad antibiotica por cepas de la especie pseudomonas fluorescens de la colección EPS, y tambien se evaluó su potencialidad como agentes de biocontrol. En una primera etapa de prospeccion se demostro que el 37% del total de las cepas de la colección EPS producian HCN, todas ellas de la especie P.fluorescens, de las cuales el 90% habia sido aislada de las raices de plantas. Se confirmo la produccion de los metabolitos secundarios 2,4-diacetilfloroglucinol, acido fenazina-1-carboxilico, y pirrolnitrina por diversas cepas de la colección EPS seleccionadas mediante tecnicas moleculares. De la colección EPS las cepas EPS317 y EPS808 producen DAPG, la EPS263 acido fenazina-1-carboxilico y pirrolnitrina y las cepas EPS894,EPS895 y EPS945 producen acido fenazina-1-carboxilico. Se estudió en detalle la producción de HCN por la cepa EPS288, esta habia sido seleccioniada por su actividad antifungica y es candidata a agente de biocontrol contra Stemphylium vesicarium, causante de la estemfiliosis del peral, y contra Penicillium expansum, causante de la enfermedad del moho azul en la conservacion de la fruta en poscosecha. La temperatura de incubacion, la concentracion en la siembra y la composicion del medio de cultivo afectaban a la producción de HCN. La cepa EPS288 produjo mas HCN que la P. Fluorescens CHAO, cepa de referencia productora de HCN y descrita como activa en procesos de control biologico de hongos fitopatogenos. En el estudio de la produccion de DAPG, se comparararon diferentes medios de cultivo evaluando el efecto de la complejidad y la consistencia del medio del cultivo, y de la adicion de hierro o de glucosa. Se demostro que la produccion de DAPG depende principalmente de la cepa y de la composicion del medio de cultivo. La glucosa estimula la produccion, mientras que el hierro casi no tiene efecto. Sin embargo, estos efectos varian en algunas de las cepas ensayadas dando lugar a comportamientos singulares. Mutantes resistentes a rifampicina de diversas cepas de la colección EPS, y de la referencia se inocularon en semillas de manzano y de tomate las cuales se sembraron e incubaron en ambiente controlado. Todas las cepas colonizaron las raices de las plantas manteniendo una elevada poblacion durante, al menos 37 dias. Ninguna de las cepas estimulo el crecimiento ni mostro fitotoxicidady no afectaron significativamente a la poblacion bacteriana autoctona de las raices. La cepa EPS808, una de las seleccionadas para el presente trabajo, desmostro una produccion de DAPG, velocidad especifica de crecimiento y una supervivencia relativa en las raices, similares a otras cepas de referencia descritas como buenos agentes de biocontrol. Por lo tanto, se considera a esta cepa como una candidata a agente de biocontrol, que tendria de ser objeto de futuros estudios de eficacia en ensayos in vivo.

Autor: HIDALGO HUERTAS AURELIO.
Año: 2000.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: Se ha aislado e identificado mediante amplificación y secuenciacion del rRNA y 16S una cepa de Rhodococcus arythropolis de la ria de Gernika. Dicha cepa es capaz de utilizar fenol como unica fuente de carbono y energia, utilizando la via metabólica del B-cetoadipato. El fenol es un sustrato inhibitorio y las cinéticas de crecimiento y eliminacion pueden modelizarse adecuadamente con expresiones descritos en la bibliografia. Asimismo, esta cepa es capaz de eliminar totalmente el formaldehido presente en el medio de cultivo. Relacionado con este hecho, o no, encontramos una actividad formaldehido deshidrogenasa, constituiva, pero que aumentaba 5 veces en presencia de 3,4-dimetoxibenzoato. Dicha actividad no necesitó de un cofactor, al contrario de lo se habia descrito en la bibliografia. La eliminación de formaldehido a concentraciones tolerables sigue cinéticas de orden cero y es independiente de la concentración de biomasa y de formaldehido a estos niveles subtóxicos. Una vez caracterizado el proceso de eliminacion en aguas modelo se estudio el mismo en siete aguas residuales reales, estableciendose concentraciones optimas de biomasa bacteriana, dilucion optima de cada agua residual, y concentracion minima de nutrientes necesarios para el proceso. Se utilizaron diferentes parametros para evaluar el descenso de la contaminacion de las aguas residuales a lo largo del tratamiento, como las concentraciones de fenoll y formaldehido, DQO, toxicidad y analisis cromatográfico de los sobrenadantes del medio de cultivo.

Autor: PRIETO LAISECA M. BEGOÑA.
Año: 2000.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En el presente trabajo se ha aislado de aguas residuales de la comarca de Gernika, un microorganismo que biodegrada fenol y lo emplea como única fuente de carbono y energía. Este microorganismo se ha identificado como Rhodococcus erythropolis y a la cepa se ha denominado UPV-1. Estudios posteriores han permitido carcterizar su capacidad para biodegradar fenol. Los estudios se han llevado a cabo empleando biomasa bacteriana tanto en estado libre como inmovilizada sobre dos soportes sólidos (Biolite y tiera de diatomeas) en sistemas discontinuos, semicontinuos y continuos. Por último se estudió su posible utilidad en el proceso de biotransformación de fenol y formaldehído en aguas residuales de origen industrial.

Autor: ALMAGRO ESPEJO ANABEL.
Año: 2000.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: ETSIAM.

Resumen: Debaryomyces hansenii es una levadura halotolerante que se encuentra de forma habitual en salinas, agua de mar, y en alimentos como embutidos y quesos. La mayoria de los estudios realizados sobre la alta tolerancia a sal de esta levadura estan relacionados con el problema osmotico que suponen las altas concentraciones a sal en que crece, asi como con la produccion y acumulacion de solutos compatibles. Existe muy poca informacion disponible sobre los flujos de cationes en D.hansenii y con el papel que estos juegan en la tolerancia a sal, aunque se ha descrito la existencia de una relacion entre ambos. El objetivo de esta tesis es profundizar en el estudio de la halotolerancia de D.hansenii y la importancia de los flujos de cationes en este fenomeno. En este trabajo se ha estudiado el efecto del Na+ sobre el crecimiento de D.hansenii en distintas condiciones, empleando el K+ como cation de control no toxico. Se observo que, condiciones estandar, la presencia de concentraciones moderadas de Na+ estimularon el crecimiento de D.hansenii, y las altas concentraciones de este cation produjeron una inhibicion similar a la producida por las mismas concentraciones de K+. Esto parece indicar que dicha inhibicion es debida a un problema osmotico y no aun efecto propiamente toxico del Na+. Cuando las celulas se incubaron en condiciones de estrés-alta temperatura, pH basico, y pH acido-limitantes para el crecimiento de D.hansenii, se comprobo como la presencia de Na+ en el medio protegia a dicha levadura de estas situaciones de estrés. Esto parece indicar que el Na+ no es toxico para D.hansenii. Sin embargo, se ha propuesto que existen flujos de Na+ en este organismo y estos estan relacionados con la tolerancia a sal. Por ello se decidio estudiar en profundidad el transporte de Na+. Basandonos en los conocimientos sobre dicho proceso en Saccharomyces cerevisiae, donde se han descrito ATPasas de Na+ y antiportes Na+/H+ como responsables de la expulsion de Na+ al medio, se realizaron ensayos de salida de Na+ en D.hansenii a diferentes pHs. Los resultados obtenidos indican que este proceso es independiente del ph externo, por lo que no parece que este principalmente mediado por un antiporte Na+/H+. Por lo tanto, orientamos el trabajo hacia la busqueda de una ATPasa de Na+. La estrategia empleada se basa en la alta homologia que presenta esta familia de proteinas, lo cual permitio emplear oligonucleotidos degenerados obtenidos de regiones conservadas para amplificar ADN genomico de D.hansenii por PCR. Los fragmentos clonados revelaron la existencia de los ATPasas de Na+ distintas. Empleando reacciones de PCR y de PCR asociada a transcriptasa inversa (RT-PCR) se obtuvieron y secuenciaron ambos genes completos, a los que se denomino DhENA1 y DhENA2 debido a las altas homologias que presentaban con los respectivos genes de Swannyomyces occidentalis. Ambos genes fueron posteriormente clonados en vectores de expresion de levadura e introducidos en un mutante de S.cerevisiae carente de los sistemas de expulsion de Na+, y, por tanto sensible al mismo. Ambos transformantes complementaron tanto tolerancia como salida de Na+, aunque tan solo DhENA2 fue capaz de transportar Li+,un cation habitualmente empleado como analogo de transporte del Na+. Esta es la primera ATPasa de Na+ de hongos identificada que es capaz de discriminar entre Na+ y Li+, transportando tan solo el primero. Se han descrito en este trabajo como el sodio no resulta toxico para D.hansenii, y sin embargo, se han identificado, secuenciado y clonado dos ATPasas de Na+ en este organismo. ¿Cual puede ser el papel fisiologico de estos transportadores de Na+ en una levadura que no es intoxicada por Na+? Nuestra propuesta es que los habitas naturales en que crece D.hansenii tienen unas concentraciones tan altas de Na+, que, aunque este cation no sea toxico, resulta excesivo, de forma que este organismo se ve obligado a expulsarlo para poder mantener la homeostasis ionica de las celulas.

Autor: GOMEZ LUNA M. JOSE.
Año: 1999.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: E.T.S. INGENIERIOS AGRONOMOS.

Resumen: En saccharomyces cerevisiae se han identificado dos genes relacionados directamente con el transporte de K+: TRK1 y TRK2. Una cepa trk1 trk2 continúa creciendo a altas concentraciones de K+. Existe controversia respecto a si el K+ es transportado en estas células a través de una proteína específica de transporte aún no identificada, o bien si este proceso de transporte se debe a la suma de diferentes procesos específicos que también median la entrada de K+. El principal objetivo de este trabajo ha sido aclarar el proceso de transporte de K+ en cepar trk1 trk2. Algunos resultados demuestran que el amonio y cationes difvalentes como Ca, Mn y Mg, inhiben el transporte de RB ( análogo de K) en dichas cepas. También se ha observado que mutaciones en algunas proteínas de membrana de S. Cerevisiae (transportadores de aminoácidos, de azúcares, de colina) producen un incremento en la velocidad de transporte en células trk1 trk2, probablemente porque las proteínas mutadas permiten la entrada de K. Todo esto sugiere que en estas células estarían implicadas varias vías para la entrada de K. Por otro lado, resultados obtenidos con desacopladores como el CCCP y con higromicina B han demostrado que el doble mutante presenta una membrana plasmática hiperpolarizada. Esta idea se ve apoyada por los resultados obtenidos al analizar la fluorescencia celular en mutantes con diferentes mutaciones en los genes de transporte de K. Todos estos resultados, aunque no permiten descartar la existencia de un tercer transportador específico para K, apuntan hacia la misma idea y es que la hiperpolarización de la membrana en células trk1 y trk2, probablemente es la causante de ciertos cambios en transportadores no específicos para K, Estos cambios permitirían la entrada de dicho catión, provocando el proceso de transporte de K de baja afinidad en células trk1 trk2.

Autor: MESA DÍAZ M. MAR.
Año: 1998.
Universidad: CADIZ.
Centro de lectura: CIENCIAS .

Resumen: El biogás generado en la digestión anaerobia de sustancias biodegradables, consituye un subproducto con un alto valor energético por su contenido en metano, así pues, su utilización como combustible en las propias plantas de tratamientos de residuos puede disminuir los costes energéticos asociados a éstas. Sin embargo, su contenido en H2S genera serios inconvenientes para su aplicación energética. En la presente Tesis se propone un método químico-biológico para eliminar dicho componente, basado en su absorción sobre una disolución de sales férricas, y la posterior recuperación del reactivo mediante el empleo del microorganismo T. Ferrooxidans. Uno de los objetivos principales ha sido analizar la cinética del proceso de oxidación biológica del ion ferroso en disolución, por la especie Thiobacillus ferrooxidans. En este sentido la investigación se ha dirigido hacia un profundización de la cinética del proceso en continuo, en diversos reactores de película soportada, empleando elevadas concentraciones de hierro ferroso, establecer las ecuaciones de diseño correspondiente y estudiar su aplicabilidad a escala industrial.

Autor: CALONJE MACAYA MYRIAM.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA III.

Resumen: Verticillium fungicola es el agente causante de la enfermedad conocida como "mole seca" de los cultivos de Agaricus bisporus o champiñón. El micopatógeno infecta los carpóforos del basidiomiceto, pero no afecta a la fase de micelio vegetativo. En el proceso de micoparasitismo de V. fungicola sobre el micelio agregado de los carpóforos, parece estar implicado, en primer lugar, un mecanismo de reconocimiento y unión a la pared celular del huesped, seguido de un mecanismo fisicoquímico combinado, de ataque enzimatico y presión que hacen posible el acceso del parásito a la celula huesped, lo que conduce en último término a la desintegración y muerte celular. En los cultivos mixtos de los micelios vegetativos de A bisporus y V. fungicola las hifas de ambos microorganismos coexisten sin verse afectado su crecimiento, y únicamente en los puntos en que entran en contacto parece establecerse algun tipo de unión entre las respectivas hifas, aunque no se observa ninguna alteración en el micelio vegetativo de A bisporus.

Autor: VELASCO ALBAÑO JULIAN.
Año: 1996.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: EL GENERO BRUCELLA SE ENCUENTRA INCLUIDO DENTRO DE LA SUBDIVISION X-2 DE LA CLASE PROTEOBACTERIA, Y O, ANTHROPI, EN LA QUE SE HAN DESCRITO DOS GENOTIPOS, ES LA BACTERIA FILOGENETICAMENTE MAS PROXIMA. AL CONTRARIO QUE BRUCELLA QUE ES UN PATOGENO INTRACELULAR, O. ANTHROPI SE HA DESCRITO COMO UN PATOGENO OPORTUNISTA, E INCLUSO SE SOSPECHA QUE SU HABITAT NATURAL PUEDA SER LA TIERRA. DADAS LAS DIFERENCIAS QUE SE OBSERVAN EN LAS CARACTERISTICAS BIOLOGICAS ENTRE AMBOS GENEROS, NOS PLANTEAMOS LA HIPOTESIS DE QUE LA PROXIMIDAD FILOGENETICA ENTRE AMBOS DEBERIA DE MANIFESTARSE EN DIFERENCIAS Y SEMEJANZAS A NIVEL ANTIGENICO Y ESTRUCTURAL, QUE PUDIERAN TENER IMPLICACIONES EN EL DIAGNOSTICO DE LA BRUCELOSIS Y AYUDAR A COMPRENDER LOS MECANISMOS DE PATOGENICIDAD DE BRUCELLA. PARA EL ESTUDIO DE ESTA HIPOTESIS NOS HEMOS PROPUESTO DOS OBJETIVOS COMPLEMENTARIOS. POR UNA PARTE, ESTUDIAR LAS RELACIONES ANTIGENICAS ENTRE O. ANTHROPI Y BRUCELLA SPP, CON SIGNIFICACION TAXONOMICA COMO CON SIGNIFICACION DIAGNOSTICA. Y POR OTRA, COMPARAR ALGUNAS CARACTERISTICAS DE LA MEMBRANA EXTERNA (ME) DE O. ANTHROPI Y BRUCELLA COMO SON, LA ESTRUCTURA DEL LIPOPOLISACARIDO (LPS) Y LA PERMEABILIDAD A AGENTES HIDROFOBICOS Y LA RESISTENCIA A PEPTIDOS POLICATIONICOS. LOS RESULTADOS DEL ANALISIS ANTIGENICO CON SIGNIFICACION TAXONOMICA DEMUESTRAN QUE O. ANTHROPI Y Y BRUCELLA POSEEN UNA GRAN CANTIDAD DE DETERMINANTES ANTIGENICOS PROTEICOS COMUNES, Y QUE O. ANTHROPI 3301 (GENOTIPO 2) PRESENTA UNA MAYOR CANTIDAD DE EPITOPOS COMUNES CON BRUCELLA QUE O. ANTHROPI 3331 (GENOTIPO 1). 1). CUANDO SE ANALIZARON LOS EPITOPOS COMUNES CON SIGNIFICACION DIAGNOSTICA, SE DEMUESTRA QUE LOS ANTIGENOS PROTEICOS DE AMBOS GENEROS MOSTRARON UNA REACTIVIDAD SIMILAR EN LOS SUEROS DE PACIENTES Y ANIMALES INFECTADOS NATURALMENTE POR BRUCELLA, ADEMAS DE UNA INTENSA REACCION CRUZADA ENTRE LOS LPSS RUGOSOS. EL ANALISIS DE LA CADENA DEL LPS DE O. ANTHROPI 3331 DEMOSTRO QUE ESTABA FORMADA POR UN DISACARIDO LINEAL CON LA SIGUIENTE ESTRUCTURA: 3ALFA-D-GLCPNAC-(1-2)-ALFA-L-RHAP-(1-. EL NUCLEO DEL LPS D O. ANTHROPI 3301 ESTABA CONSTITUIDO FUNDAMENTALMENTE POR UN HEPTASACARIDO CON LA SIGUIENTE ESTRUCTURA: BETA-GLCNAC-(1-3)-ALFA-MAN-(1-5)-ALFA-KDO-((4-2)-ALFA-KDO- (1-5)-ALFA-GALA)-(2-6)-BETA-GLCN3N4P-(1-6)-ALFA-GLCN3N1P. LOS LIPIDOS A DE O. ANTHROPI Y B. ABORTUS PRESENTARON UNAS ESTRUCTURAS MUY SIMILARES Y PARECEN ESTAR FORMADOS POR UN DISACARIDO DE DIAMINOGLUCOSA, CON CUATRO BETA-HIDROXIACIDOS (EN ENLACE AMIDA) Y UN ACIDO GRASO INSATURADO Y UN BETA-HIDROXIACIDO DE CADENA LARGA EN ENLACE ACIL-OXIACIL; ADEMAS LAS CADENAS ACILO DEL LIPIDO A DE AMBOS LPSS PRESENTARON UN GRADO DE FLUIDEZ SIMILAR. AL CONTRARIO QUE EN BRUCELLA, LA ME DE O. ANTHROPI ES IMPERMEABLE A LAS SONDAS HIDROFOBICAS Y MUY SENSIBLE A LA ACCION DE PEPTIDOS POLICATIONICOS, AUNQUE COMO BRUCELLA ES INSENSIBLE A LA ACCION DEL EDTA. EL LPS DE BRUCELLA, POR SI SOLO, ES RESPONSABLE DE LA PERMEABILIDAD, YA QUE LA INSERCION DE ESTE EN LA ME DE O. ANTHROPI LAS PERMEABILIZO. ADEMAS, EL LPS DE B. ABORTUS UNIO MENOS PEPTIDO CATIONICO QUE EL DE O. ANTHROPI, Y MIENTRAS UN EXCESO DE PEPTIDO SATURO LAS CARGAS NEGATIVAS DE ESTE ULTIMO, EL DE B. ABORTUS NO SE SATURO, INDICANDO UNA INACCESIBILIDAD A LAS CARGAS DEL NUCLEO.

Autor: LIÑAN CARA EMILIO.
Año: 1995.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA ORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA ORGANICA Y FARMACEUTICA.

Resumen: LA PRESENTE MEMORIA CONSTA DE CUATRO PARTES BIEN DIFERENCIADAS. EN LA PRIMERA SE LLEVAN A CABO DIFERENTES BIOTRANSFORMACIONES CON NUMEROSAS CEPAS DE MICROORGANISMOS. SE ESTUDIA ASI LA ACCION DE CADA MICROORGANISMO SOBRE VARIOS SUSTRATOS TERPENOIDES QUE PROCEDEN DE PLANTAS DEL GENERO SIDERITIS. LA SEGUNDA PARTE SE DEDICA A LA REALIZACION DE TRANSFORMACIONES QUIMICAS TOMANDO COMO BASE TAMBIEN ESTOS PRODUCTOS DITERPENICOS CON EL FIN DE OBTENER PRODUCTOS SUCEPTIBLES DE NUEVAS BIOTRANSFORMACIONES O DE PRESENTAR DIFERENTES ACTIVIDADES BIOLOGICAS. EN LA TERCERA PARTE SE REALIZA UN IMPORTANTE ESTUDIO DE LAS PROPIEDADES BIOLOGICAS DE LOS COMPUESTOS OBTENIDOS LO QUE CONDUCE A RESULTADOS MUY PROMETEDORES COMO ANTIINFLAMATORIOS Y ANTILESHMANICOS. POR ULTIMO, SE LLEVA A CABO UN AMPLIO ESTUDIO DE MECANICA MOLECULAR, USANDO LAS SUSTANCIAS QUE APARECEN A LO LARGO DE TODO EL TRABAJO QUE DEMUESTRAN LA VALIDEZ DE LOS CALCULOS TEORICOS Y AYUDAN A LA ELUCIDACION ESTRUCTURAL DE LOS COMPUESTOS TERPENICOS ESTUDIADOS.

Autor: LOPEZ FERNANDEZ CARMEN LOURDES .
Año: 1995.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA.

Resumen: STREPTOMYCES CHATTANOOGENSIS UAH 23 PRODUCE DIFERENTES ACTIVIDADES ENZIMATICAS IMPLICADAS EN LA DEGRADACION DEL XILANO. ENTRE ELLOS HAY QUE DESTACAR LA ACTIVIDAD ENDO B (1,4) XILANASAS. ESTE MICROORGANISMO PRODUCE 4 ENZIMAS CON ESTA ACTIVIDAD, DE LAS CUALES SE HA PURIFICADO UNA DE ELLAS, DENOMINADA CM2 G, EMPLEANDO METODOS DE ULTRAFILTRACION, CROMATOGRAFIA EN CM-BIOGEL Y SUS CARACTERISTICAS DE UNION A ARABINOXILANO. ESTA XILANASA TIENE UN PESO MOLECULAR DE 48.000 D Y SU PUNTO ISOELECTRICO ES DE 9. PRESENTA UNA ACCION ESPECIFICA SOBRE EL XILANO DE TIPO ENDO. LA XILANASA CM2G PRESENTA UN ALTO GRADO DE GLICOSILACION Y LOS ESTUDIOS DE DESGLICOSILACION INDICAN LA POSIBILIDAD DE QUE EN EL PROCESAMIENTO DE LAS DIFERENTES XILANASAS DE STREPTOMYCES CHATTANOOGENSIS ESTAN IMPLICADOS PROCESOS DE GLICOSILACION/DESGLICOSILACION. EL COMPLEJO XILANOLITICO PRODUCIDO POR ESTE MICROORGANISMO REUNE LAS CARACTERISTICAS NECESARIAS PARA SER APLICADO EN PROCESOS DE BLANQUEO DE PASTA DE PAPEL. POR ELLO SE UTILIZO EN EL BLANQUEO DE PASTA DE PAPEL OBTENIDA MEDIANTE UN PROCESO KRAFT, A PARTIR DE MADERA DE EUCALIPTO. LOS DIFERENTES PARAMETROS VALORADOS PONEN DE MANIFIESTO LA EFICACIA DE ESTE COMPLEJO ENZIMATICO EN LA ELIMINACION DEL COLOR DE LA PASTA DE PAPEL.

Autor: MORALES CALVO M. PILAR.
Año: 1993.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: 275A MICROBIOLOGIA.

Resumen: LA DEGRADACION DEL XILANO HASTA LOS AZUCARES MONOMERICOS QUE LO CONSTITUYEN NECESITA DE LA ACTIVIDAD DE DIVERSOS ENZIMAS, ENTRE LOS QUE SE CUENTAN LAS XILANASAS Y LAS ARABINOFURANOSIDASAS. EL GENERO BACILLUS ES UN CONOCIDO PRODUCTOR DE ESTAS ACTIVIDADES. SE HAN PURIFICADO A HOMOGENEIDAD 4 XILANASAS DE B. POLYMYXA, DENOMINADAS X22, X34C, X34E Y X61 EN BASE A SU PM. X22 ES LA MAS ACTIVA. SOLO X61 NO ES AFECTADA POR LA ESTRUCTURA DEL SUSTRATO PARA SU ACTIVIDAD. X34C Y X34E PODRIAN SER DOS ISOENZIMAS. SE HA PURIFICADO UNA ARABINOFURANOSIDASA DENOMINADA AF166. TIENE ACTIVIDAD SOBRE ARABINOOLIGOSACARIDOS Y XILOOLIGOSACARIDOS CON RAMIFICACIONES DE ARABINOSA. TAMBIEN SE HAN PURIFICADO DOS POLIPEPTIDOS CON ACTIVIDAD ARABINOFURANOSIDASA SOBRE ARABINOXILANO A PARTIR DE UN CLON DE B SUBTILIS QUE CONTIENE EL GEN DE B. POLYMYXA QUE LOS CODIFICA. EL PROCESAMIENTO DE AF64 PARA RENIR AF53 DEBE PRODUCIRSE POR EL EXTREMO C-TERMINAL, PUESTO QUE SU EXTREMO N-TERMINAL ES IDENTICO. LOS ESTUDIOS DE COOPERACION MUESTRAN QUE LA ACTIVIDAD XILANASA NO FACILITA LA ARABINOFURANOSIDASA, PERO SI AL REVES. TAMBIEN SE HA OBSERVADO COOPERACION ENTRE DOS XILANASAS.

Autor: BALCELLS FLUVIA MERCE.
Año: 1992.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: CURSOS MONOGRAFICOS DE DOCTORAT.

Autor: MORENO BARON FRANCESC.
Año: 1991.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I FISIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO:.

Resumen: EL PRESENTE TRABAJO CONSTITUYE UN IMPORTANTE AVANCE EN EL CONOCIMIENTO DE LOS EFECTOS DE LOS FACTORES DE CRECIMIENTO DE GRAN IMPORTANCIA CIENTIFICA. LA METODOLOGIA UTILIZADA IMPLICA DELICADAS MANIPULACIONES LO CUAL AMPLIFICA EL VALOR Y LA RELEVANCIA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS. A ESTO HAY QUE AÑADIR UN PLANTEAMIENTO EXPERIMENTAL IMPECABLE Y UNA ADECUADA UTILIZACION DE LOS RECURSOS Y DE LA BIBLIOGRAFIA DISPONIBLE. EL PLANTEAMIENTO EXPERIMENTAL DE LOS EFECTOS DEL EGF EN EL METABOLISMO HEPATICO Y SU DESARROLLO HA SERVIDO PARA CONTESTAR DE UNA MANERA CLARA QUE ES LO QUE NO HACE EL EGF AL HIGADO QUE SUPONIAMOS QUE HACIA, ABRIENDO NUMEROSOS INTERROGANTES NUEVOS QUE HACEN ESTE TRABAJO MUY IMPORTANTE PARA POSTERIORES INVESTIGACIONES.

Autor: RIVAS SANCHEZ FRANCISCO .
Año: 1990.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA ORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA ORGANICA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO DE INVESTIGACION SE HAN REALIZADO UNA SERIE DE ESTUDIOS DE BIOTRANSFORMACION DE PRODUCTOS SESQUITERPENICOS AISLADOS DE LA SIDERITIS VAROI SUBESPECIE CUATRECASASII. LOS SUSTRATOS QUE HAN SIDO OBJETO DE ESTOS ESTUDIOS POSEEN ESQUELETOS GERMACRANICOS Y EUDESMANICOS. LOS MICROORGANISMOS QUE SE HAN UTILIZADO PARA REALIZAR ESTOS ESTUDIOS SON LOS HONGOS CURVULARIA LUNATA Y RHIZODUS NIGRICANS. DE ESTAS INCUBACIONES SE HAN OBTENIDO PRODUCTOS CON FUNCIONALIZACIONES EN LOS CARBONOS 11 Y 12, QUE SE HAN TRANSFORMADO QUIMICAMENTE EN LAS CORRESPONDIENTES 6B-SESQUITERPENOLIDAS.

Autor: SANCHEZ HERNANDEZ M. ESPERANZA.
Año: 1990.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS (CSIC) VELAZQUEZ, 144. 28006-MADRID.

Resumen: LA PARED CELULAR DE MICELIO VEGETATIVO DE ARMILLARIA MELLEA, PURIFICADA MEDIANTE RUPTURA CELULAR DE LA HIFAS EN EL OMNIMIXER SORVALL, SE SOMETIO A UNA SERIE DE EXTRACCIONES CONSECUTIVAS CON OBJETO DE SOLUBILIZAR LO MAS SELECTIVAMENTE POSIBLE LOS POLISACARIDOS QUE, JUNTO CON UNA MENOR PROPORCION DE PROTEINA, CONSTITUYEN ESTA ENVOLTURA CELULAR. LAS FRACCIONES OBTENIDAS FUERON ANALIZADAS QUIMICA Y ESTRUCTURALMENTE, LLEGANDOSE A CARACTERIZAR LA ESTRUCTURA FINA DE LOS POLISACARIDOS QUE LAS COMPONEN. LAS PROTEINAS DE PARED CELULAR SE ANALIZARON ELECTROFORETICAMENTE. PARALELAMENTE, LAS PAREDES CELULARES COMPLETAS ASI COMO LOS RESIDUOS RESULTANTES DE CADA UNO DE LOS TRATAMIENTOS DE EXTRACCION DE FRACCIONES, SE PREPARARON PARA SU OBSERVACION AL MICROSCOPIO ELECTRONICO DE TRANSMISION, UTILIZANDO TANTO TECNICAS DE SOMBREADO COMO DE INCLUSION Y CORTE ULTRAFINO. DE ESTA MANERA SE PUDIERON LOCALIZAR LOS COMPONENTES DE LAS FRACCIONES EXTRAIDAS DENTRO DE LA ESTRUCTURA DE LA PARED CELULAR. COMO CONCLUSION FINAL DE TODO EL TRABAJO, SE PROPONE UN MODELO PARA LA PARED CELULAR DE MICELIO VEGETATIVO DE ARMILLARIA MELLEA QUE PUEDE EXTRAPOLARSE AL ORDEN AGARICALES E INCLUSO A BASIDIOMICETOS EN GENERAL.

Autor: SOMAVILLA MOLINA M. CARMEN.
Año: 1990.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA AGRICOLA, GEOLOGIA Y GEOQUIMICA. PROGRAMA DE DOCTORADO: AGROALIMENTARIA.

Resumen: SE LLEVA A CABO, EN PRIMER LUGAR, UN ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD DE CIERTOS MICROORGANISMOS AISLADOS DE ACEITUNAS, EN RELACION A LA PRODUCCION-ACUMULACION DE HISTAMINA, COMO MOLECULA INDICADORA DE POSIBLES DESVIACIONES DE LA FERMENTACION. SE INTRODUCEN MODIFICACIONES EN EL PROCESO DE ELABORACION DE ACEITUNAS VERDES POR FERMENTACION LACTICA; PROFUNDIZANDO EN PRIMER LUGAR, SOBRE LA INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION SALINA EN EL CRECIMIENTO Y ACIDOGENESIS LACTICA DE LAS DOS BACTERIAS LACTICAS MAS REPRESENTATIVAS DEL PROCESO: "LACTOBACILLUS PLANTARUM" Y "LEUCONOSTOC MESENTEROIDES"., TANTO EN CULTIVO PURO COMO ASOCIADOS ENTRE SI. SE LLEVAN A CABO MODIFICACIONES EN LOS TRATAMIENTOS PREFERMENTATIVO Y FERMENTATIVO EN ORDEN A OPTIMIZAR LAS GANANCIAS EN CUALIDADES ORGANOLEPTICAS Y UNA MAYOR ESTABILIDAD MICROBIANA, PARA ALARGAR LA VIDA MEDIA COMERCIAL DEL PRODUCTO. POR ULTIMO SE REALIZAN INNOVACIONES EN LA ETAPA POSTFERMENTATIVA DE MADURACION-CONSERVACION EN RELACION A UN AJUSTE ACIDEZ-LEJIA RESIDUAL Y UNA MENOR SALINIDAD DEL FRUTO.

Autor: RUIZ PEREZ M. TERESA.
Año: 1989.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: INSTITUTO DE BIOQUIMICA VEGETAL Y FOTOSINTESIS. FACULTAD DE BIOLOGIA-CSIC, UNIVERSIDAD DE SEVILLA .

Resumen: EL QUELANTE EDTA INHIBE LOS CONSUMOS DE NITRATO, NITRITO Y AMONIO POR A. CHROOCOCCUM. DICHA INHIBICION PARECE TENER LUGAR A NIVEL DE TRANSPORTE DE LOS CITADOS IONES NITROGENADOS AL INTERIOR CELULAR Y DISMINUYE SIGNIFICATIVAMENTE EN PRESENCIA DE METALES DIVALENTES, SUGIRIENDO LA IMPLICACION DE ESTOS EN TAL PROCESO. EL MN(II) PRODUCE AL ACCTIVACION DE LOS CONSUMOS DE NITRATO Y NITRITO Y LA EXCRECION AL MEDIO DEL AMONIO PROCEDENTE DE LA REDUCCION DE AMBOS ANIONES. EN PRESENCIA DEL METAL, EL AMONIO AÑADIDO EXOGENAMENTE NO INHIBE LA FIJACION DE NITROGENO NI LA UTILIZACION DE NITRATO POR A. CHROOCOCCUM. EL MG(II) Y, EN MENOR MEDIDA, EL CA (II) CONTRARRESTAN LA ACCION DEL MN(II). EL BLANCO DE ACCION DE ESTE METAL RESULTA SER LA GLUTAMINA SINTETASA, CONCLUYENDOSE QUE LA RAZON DE LAS CONCENTRACIONES INTRACELULARES DE MG(II) Y MN(II) EJERCE UN CONTROL EXTERNO SOBRE LA ASIMILACION DE NITRATO Y LA FIJACION DE NITROGENO POR A. CHROOCOCCUM. SE HA AISLADO UN MUTANTE DE A. CHROOCOCCUM, DENOMINADO TR1, ESPECIFICAMENTE AFECTADO EN EL TRANSPORTE DE NITRATO AL INTERIOR CELULAR, NINDICANDO LA EXISTENCIA DE UNA PERMEASA DEL NITRATO EN ESTA BACTERIA. ESTE MUTANTE PRESENTA SIMULTANEAMENTE ACTIVIDADES NITRATO REDUCTASA Y NITROGENASA CUANDO SE CULTIVA A EXPENSAS DE DINITROGENO EN MEDIOS CONTENIDOS NITRATO. PUESTO QUE AMBAS ENZIMAS SE REPRIMEN POR AMONIO Y QUE LA NITROGENASA SE INHIBE POR NITRITO Y AMONIO, SE CONCLUYE QUE NO SE TRATA DE UN MUTANTE DESREGULADO. SE HA ENCONTRADO QUE EL CONSUMO DE NITRITO POR A. CHROOCOCCUM CONSTA DE DOS COMPONENTES, UNO PASIVO POR DIFUSION EN FORMA DE ACIDO NITROSO A TRAVES DE LA MEMBRANA PLASMATICA, Y OTRO ACTIVO, MEDIADO POR UNA PERMEASA QUE PARECE SER LA MISMA RESPONSABLE DEL TRANSPORTE DE NITRATO. EN EL MUTANTE TR1 EL MN(II) NO CAUSA ACTIVACION DEL CONSUMO DE NITRITO, AUNQUE SI DA LUGAR A LA EXCRECION EN FORMA DE AMONIO DEL NITRITO CONSUMIDO.

Autor: DUQUE GONZALEZ CARLOS OCTAVIO.
Año: 1988.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIDAD INGENIERIA QUIMICO; FACULTAD CIENCIAS UNIVERSIDAD AUTONOMA BARCELONA..