QUIMIOTERAPIA

Autor: REAL LUNA PEDRO JOSE.
Año: 2004.
Universidad: CANTABRIA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La tesis doctoral titulada: Mecanismos de control de la apoptosis mediada por quimioterapia en células de cáncer de mama: Desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas se adentra en los mecanismos moleculares de resistencia a quimioterapia en células de cáncer de mama receptor de estrógeno negativas. En ella se describen en profundidad los elementos moleculares y la implicación de dos rutas de supervivencia controladas por los receptores de la familia del EGFR: HER1oEGFR y HER2. Ambas proteínas de membrana controlan diferentes funciones celulares como migración, diferenciación proliferación e inhibición de la apoptosis. Será esta última el punto de encuentro de las dos vías de transducción de señal aquí descritas y la regulación de la transcripción de distintos miembros de la familia Bcl-2 los verdaderos protagonistas. Por un lado EGFR y HER2 mantienen la ruta de supervivencia activada a través del factor transcripcional STAT3 y que controla la expresión de la proteína antiapoptótica Bcl-2. Además, la expresión de esta proteína protege a las células de cáncer de mama de la apoptosis inducida por quimioterapia. La inhibición de esta ruta de señalización empleando inhibidores químicos selectivos de la actividad tirosina quinasa de EGFR sensibiliza a las células tumuorales al tratamiento quimioterápico convencional. Del otro lado de la balanza, estos dos receptores de membrana activan la ruta PI-3K/Akt que mantiene reprimida la expresión de Bnip3L, una proteína facilitadora de la apoptosis (pro-apoptótica) de la familia Bcl-2. Además, el bloqueo con anticuerpos monoclonales específicos frente a EGFR y HER2, utilizados actualmente en el tratamiento de distintos tipos de cánceres, consigue la inducción de Bnip3L que sensibiliza a las células de cáncer de mama frente a la quimioterapia. Esta misma ruta de señalización también ha sido analizada en muestras tumorales de cáncer de mama y se comprueba que se mantiene activa. Finalmente, describimos un compuesto selectivo frente a la proteína Bcl-2 que interrumpe la interacción de esta proteína antiapoptótica con los miembros proapoptóticos que quedarán libre para inducir la muerte celular. Demuestra con diversos ensayos la especificidad y funcionalidad de dicho compuesto denominado YC137 y la efectividad que tiene sobre las células tumorales que expresan Bcl-2. Además, analiza la toxicidad que posee frente a diversos tipos celulares no transformados encontrando que no induce apoptosis y asegurándose la especificidad de acción del inhibidor. A continuación, desarrolla células tumorales resistentes al inhibidor de Bcl-2 mediante el cultivo progresivo de dichas células en presencia del compuesto. El análisis de las células resistentes determina que el fenotipo se adquiere por pérdida de la expresión de la proteína Bcl-molécula diana de YC137, y que las hace sensible al tratamiento quimioterápico convencional. La reducción de esta proteían antiapopotótica está mediada por la inactivación de Stat3 y una reducción de la expresión del receptor de membrana HER2.

Autor: GARCÍA TEIJIDO PAULA.
Año: 2001.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DPTO. DE CIRUGÍA Y ESPECIALIDADES MÉDICO-QUIRÚRGICAS UNIVERSIDAD DE OVIEDO.

Resumen: La ifosfamida (IFOS) es un agente alquilante que se emplea preferentemente en el tratamiento de los sarcomas de partes blandas (SPB). Su administración puede producir toxicidades renal, hematológica y neurológica. Actualmente se utilizan esquemas con dosis altas (>10 g/m2) de IFOS, lo que conlleva un aumento en el riesgo de aparición de efectos secundarios. El análisis de un población de pacientes adultos tratados con este esquema nos ha permitido estudiar estas tres toxicidades. En una primera parte se ha estudiado la toxicidad renal, que produce fundamentalmente una afectación subclínica sobre el túbulo renal proximal, observando que es reversible en la mayor parte de los casos. Además la IFOS induce mielosupresión, principalmente neutropina marcada. El uso de factores estimulantes de colonias granulomonocíticas sólo permitió salir antes de la aplasia, pero no contribuyó a aumentar la actividad citostática de la droga. La toxicidad neurológica fue tolerable, sin que ningún paciente llegase a un estado de coma. Se exploró el efecto terapéutico de la administración de tiamina sobre la encefalopatía por IFOS, y aunque no se ha podido establecer una relación clara entre los niveles de tiamina y el desarrollo del cuadro, los datos recogidos sugieren una recuperación más rápida en el grupo que recibió tiamina.

Autor: FERNÁNDEZ GÓMEZ-CHACÓN GERÓNIMO.
Año: 2001.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: El ciclo celular es el proceso por el que se regula el crecimiento y diferenciación celular, que controla a su vez, diversos procesos en los que intervienen factores de trascripción, y diferentes tipos de enzimas y orgánulos celulares. Cuando este proceso pierde la regulación se produce un crecimiento permanente de la célula, llegando a perder su diferenciación, originando así un tumor. Los fármacos que se administran para combatirlos tienen como dianas el ADN en replicación, proteínas y enzimas activas en proliferación. Debido los efectos secundarios que estas terapias provocan al atacar otras células del organismo en proliferación que no son cancerígenas, hay un alto interés en la búsqueda de nuevos fármacos que sean más específicos y con alta capacidad terapeútica. En el diseño y síntesis de nuevos fármacos es importante contar con un método de caracterización de su interacción con las dianas previstas, con un consumo bajo de muestra, ensayos completos en un periodo de tiempo corto, y con bajo coste. El presente trabajo es el fruto de la colaboración de un grupo multidisciplinar en el que se han diseñado y sintetizado compuestos con potencial antitumoral y con capacidad de unión al ADN por intercalación. La parte del proyecto descrita en la memoria de la tesis doctoral presentada corresponde a la búsqueda y puesta a punto de una nueva técnica para determinar la interacción con ADN de los nuevos compuestos sintetizados. Dicha técnica precisa poco cantidad de compuesto y ADN para hacer un ensayo completo en poco tiempo, y está basada en el retraso de la molécula de ADN con el ligando unido respecto a la misma molécula de ADN libre en electroforesis en geles de agarosa. La unión por intercalación se determina de modo inequívoco al ver los cambios conformacionales provocados por esta interacción en moléculas de AND plasmídico. También se han realizado ensayos complementarios y controles para asegurar y corroborar los datos obtenidos. Además se ha establecido un ensayo para determinar la Kd del complejo formado ADN-compuesto intercalante. Basados en la electroforesis de ADN en geles de agarosa, se han sentado las bases de dos tipos de ensayos para determinar la secuencia específica de unión a ADN de los compuestos ensayados, así como otro ensayo para comprobar la capacidad inhibitoria de la actividad de la enzima topoisomerasa I (diana de fármacos antitumorales), por dichos compuestos.

Autor: ALONSO ROMERO JOSE LUIS.
Año: 2000.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Uno de los campos más interesantes dentro de la biología celular es de los genes relacionados con el ciclo celular y la apoptosis. En varios estudios, el estado de estos genes ha mostrado valor pronóstico e implicaciones terapéuticas en pacientes diagnosticados de cáncer. En este trabajo estudiamos mediante inmunihistoquímica la modificación de algunos genes relacionados con el control del ciclo celular y con el control de la apoptosis(p53,p21,p16,bax y bcl-2)en pacientes diagnosticados de urotelioma vesical localmente avanzado tras la administración de quimioterapia. También estudiamos la relación de estos genes con el valor pronóstico, en cuanto a supervivencia y supervivencia libre de enfermedad, y con las sensibilidad al tratamiento aplicado. Tras la administración de quimioterapia, hay reducción de forma significativa de la expresión de p53 (p=0,03), p16(p=0,04) y bcl-2(p=0,01). No existe diferencia significativa de la expresión de bax y p21, aunque existe tendencia a la disminución de la expresion de p21(p=0,06) y al aumento de bax(p=0,06). Las variables relacionados con la supervivencia global de estos pacientes han sido: la expresión de bcl-2 antes de la quimioterapia y la modificación del grado de tinción de p16y p21. Las variables relacionadas con la supervivencia libre de enfermedad en estos pacientes han sido: la expresión de bc1-2 antes de la quimioterapa, la modificación de la expresión de p53 y bax y la respuesta clínico-patológica conseguida con el tratamiento. Tras la quimioterapia, la célula tumoral urotelial tiene reducido su potencial para progresar a lo largo del ciclo celular y aumentada su capacidad para la entrada en la apoptosis.

Autor: GAJATE FRAILE M. CONSUELO.
Año: 2000.
Universidad: VALLADOLID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Esta tesis ha analizado los mecanismos de indución de apoptosis por el lipido antitumoral ET-18-OCH3 y por el análogo de coldicina MTC. La actividad apoptótica de la molécula de ET-18-OCH3 es dependiente de su estructura molecular y en particular de las sustituciones en el C2 y C3 en su esqueleto de glicerol. El ET-18-OCH3 induce apoptosis por un mecanismo independiente de la interacción del ET-18-OCH3 con el receptor del PAF. La incorporación del ET-18-OCH3 en la célula es necesaria para su actividad apoptótica. La acción apoptosis en células tumorales es independiente de la interacción de Fas con su ligando natural FasL. Se requiere c-jun para la inducción de la apoptosis por el ET-18OCH3. El ET-18-OCH induce una activación persistente de la JNK el ET-18-OCH induce la pérdida de Aym y la activación de la caspasa-3, en células lencémicas y linfoides. La inducción de apoptosis por el ET-18-OCH no requiere la síntesis de macromoléculas. El MTC induce apoptosis en células leucémicas humanas induce una rápida y potente rotura de los amicrotibulos, una parada del ciclo celular en la fase G2/M y una inhibición de la proliferación celular antes del disparo de la apoptosis.Induce un incremento en los nivlees de c-jun y una activación persistente de la JNK. La extracción del MTC del medio de cultivo antes del disparo de la apoptosis dio lugar a una repolimerización de los microtúbulos.

Autor: MONTANER RAMONEDA BEATRIZ.
Año: 2000.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: UNVIERSIDAD DE BARCELONA.

Resumen: En este trabajo se estudió el efecto del sobrenadante (CS-2170), obtenido del cultivo de Serratia marcescens 2170, en la viabilidad de diferentes líneas celulares cancerosas de origen hematopoyético (Jurkat, NSO, HL-60, Molt-4 y Ramos), gastrointestinal (DLD-1, SW-620 y HGT-1), mama (MCF-7) y epitelial (A431), así como en líneas celulares no cancerosas (NIH-3T3, SWISS-3T3, NRK y MDCK). A través del ensayo del MTT se observó un descenso rápido (4h) en el número de células viables. Este efecto citotóxico se producía a través de la apoptosis, según pudimos determinar por la fragmentación del DNA en escalera, la tinción nuclear con Hoechst 33342 y por análisis por FACS de la externalización de los residuos fosfatidilserina de la membrana celular. Nosotros hemos purificado la molécula responsable de este efecto apoptótico y determinado su estructura química. Para ello utilizamos distintos mutantes de S.marcescens (OF, WF y 933), que lo eran en la vía de síntesis de la prodigiosina (PG), y de esta forma vinos que la PG estaba implicada en la inducción de apoptosis. Esta evidencia fue corroborada por el análisis espectroscópico de la PG aislada de S.marcescens. Estos resultados indican que PG, un inmunosupresor, induce apoptosis en células cancerosas, pero no tiene un efecto tóxico en células no cancerosas, existiendo la posibilidad de su utilidad terapéutica como agente antineoplásico. El mecanismo de PG también fue estudiado. PG induce apoptosis de forma independiente a p53 y Bcl-2. Este efecto fue bloqueado utilizando el inhibidor de caspasas Z-VAD.fmk, indicando que están implciadas las caspasas. También vimos por Western blot que se producía la fragmentación de la PARP, lo cual sirvió también para determinar la actividad de las caspasas. Por último, mostramos que la activación de la PKC es necesaria para la protección de las células frente a la apoptosis inducida por PG y que el efecto anti-apoptótico del TPA (PMA) está mediado en parte por la activación de las ERK, Además, PG induce la expresión de c-Jum y c-Fos. Recientemente hemos visto que la inducción de la apoptosis con PG depende de la vía de la quinasa p38.

Autor: ARENCIBIA JIMENEZ JOSE MANUEL.
Año: 2000.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE TULANE (NEW ORLEANS, LA USA).

Resumen: El presente trabajo estudia la especificidad y la toxicidad de diferentes análogos peptídicos citotóxicos en el tratamiento de cánceres experimentales. Para ello se ha investigado la presencia de receptores específicos para los péptidos portadores del compuesto citotóxicos (LHRH y SST) en diferentes líneas cancerígenas por medio de RT-PCR y esayos de unión. La especificidad de los compuestos se analizó mediante un ensayo de toxicidad dirigida utilizando co-cultivos celulares y estudiando la amplificación específica de microsatélites pertenecientes a cada lìnea celular por medio de PCR. A partir de estudios in vivo con animales de experimentación se estudió el efecto y la toxicidad de los compuestos citotóxicos, los resultados demuestran que los análogos peptídicos citotóxicos de LHRH y SST actuan a través de receptores específicos y son más eficaces y menos tóxicos que el radical que los compone en el tratamiento de cánceres experimentales de ovario y de próstata. Por otro lado se estudió la presencia de receptores de LHRH en muestras de cáncer de próstata humana y se correlacionó con el grado histológico del tumor. Los resultados demuestran una elevada expresión de estos receptores de alta afinidad relacionados positivamente con el grado histológico del tumor.

Autor: ARTEAGA MARTÍN M. CARMEN.
Año: 1999.
Universidad: PUBLICA DE NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: ESCUELA UNIVERSITARIA DE ESTUDIOS SANITARIOS.

Resumen: La diarilsulfonilureas son grupo de compuestos para el que durante los últimos años se ha demostrado un amplio espectro de actividad frente a tumores sólidos, tanto in vitro como in vivo, siendo el sulofenur el más representativo de este grupo de compuestos. En este trabajo se analiza la actividad antitumoral frente a las líneas celulares CCRF-CEM, K-562, HTB-24, HL-29 y MEL-AC de 34 compuestos de nueva síntesis estructuralmente relacionados con las sulfonilureas, sus precursores o sus posibles metabolitos. De los 34 compuestos ensayados, 29 han mostrado actividad citotóxica in vitro frente a 1 ó varias de las líneas celulares empleadas. Los más activos de los compuestos analizados han mostrado una actividad citotóxica frente a la línea CCRF-CEM de leucemia linfoide superior o igual a la descrita para el Sulofenur, con valores de GI50 entre 0,06 y 0,2 HM, similares a los mosrados in vitro por otros agentes oncolíticos utilizados hoy en día como la doxorubicina. Como se había descrito previamente para el solofenur, la concentración de suero en el medio de cultivo afecta a esta actividad. Este efecto se relaciona con la diferente lipofilidad de las moléculas expresadas como coeficiente de reparto octanol-agua (LogP), ya que la actividad de las moléculas más liposolubles disminuye notablemente al aumentar la concentración de suero en el medio de cultivo. Estos compuestos también han mostrado toxicidad en ensayos de inhibición del crecimiento de colonias hematopoyéticas. La comparación de los resultados con los diferentes compuestos muestra que aquellos con menor valor de LogP son los de menor toxicidad. Teniendo en cuenta estos resultados, junto con las diferencias estructurales entre los distintos compuestos analizados y sus valores de LogP, se puede aproximar un valor de LogP idóneo de entre 0 y 1 unidades para la actividad antineoplásica de este tipo de compuestos.

Autor: MARTINEZ BARRASA VALENTÍN.
Año: 1999.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE ALCALÁ.

Resumen: el trabajo que se presenta en esta memoria se engloba dentro de un amplio proyecto dedicado a la síntesis de nuevos intercalantes de ADN con actividad antiproliferativa. 1,- Se han sintetizado nuevas series de sales derivadas de pirrollo e indolodiazinopiridazinio y quinoxalino y dipirrolopirimidinopiridazinio mediante la reacción de Westphal en su versión intermolecular. La mayoría de los sistemas obtenidos se comportan como intercalantes de ADN como ha puesto de manifiesto técnicas de electroforesis en gel y espectrofotometría UV/Vis. 2,- Se ha llevado a cabo por primera vez con éxito la condensación de Westphal en su versión intramolecular y se ha estudiado la utilidad de la misma y sus limitaciones. Esta metodología ha permitido preparar una nueva serie de sales de benzoquinolino y piridoftalazinio, de difícil acceso por otras vías. 3,- Se detallan todos los intentos llevados a cabo para poner a punto una nueva metodología de síntesis de sistemas cationicos con nitrógeno cuaternario en posición cabeza de puente mediante un proceso tandem de ciclocondensación cicloadición. Aunque los intentos para preparar el sustrato de Diels-Alder no han dado resultados satisfactorios, se recogen en la memoria las aproximaciones ensayadas para acceder a este tipo de compuestos. 4,- Se ha llevado a cabo la evaluación de la interacción con el ADN de los nuevos productos sintetizados utilizando técnicas de elctroforesis en gel y espectrofotometría UV/Vis. Se ha establecido cuales de los productos obtenidos interaccionan con el ADN de forma intercalativa y se han determiando los valores de K, constante de asociación, y n, pares de bases por moléculas de ligando unido. 5,- Se ha realizado un estudio de la actividad antiproliferativa in vitro de los compuestos sintetizados, frente a la línea tumoral L1210. Aunque el estudio de actividad no se ha completado, los resultados obtendios frente a esta línea celular son prometedores ya que algunos valores se encuentran en el rango de antitumorales de uso clínico.

Autor: ENJO BABIO JUAN.
Año: 1998.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: QUIMICA.

Resumen: Se ha realizado la síntesis del N-((5-(benzo(b)furan-2-ilcarboxamido)-1H-2- indolil)carbonil)-2-metil-8-oxo-4a,5,6,8-tetrahidro -4H-ciclopropa(c)furo(3,2-e)indol-3- carboxilato de etilo, un nuevo análogo del agente antitumoral CC-1065, así como de su correspondiente pro-droga, el N-((5-(benzo(b) furan-2-ilcarboxamido)-1H-2- indolil)carbonil)-8-clorometil-4-hidroxi-2-metil -7,8-dihidro-6H-furo(3,2-e)indol-1- carboxilato de etilo. La síntesis desarrollada cuenta con un total de 13 etapas, con un rendimiento global del 12%. El paso clave de la síntesis consistió en la formación del esqueleto de furo(3,2-e)indol mediante una ciclación en condiciones de irradiación fotoquímica de un compuesto con estructura de estilbenoide. El nuevo agente antitumoral sintetizado muestra una elevada actividad citotóxica in vitro, del orden de ng/mL, frente a distintos tipos de líneas de células tumorales humanas (A-549,HT-29,MEL-28).

Autor: IRIGOYEN MEDINA ANTONIO.
Año: 1998.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: INTRODUCCION: En cáncer avanzado de cabeza y cuello la supervivencia es del 30% a 3 años con cirugía y radioterapia. Se investiga la quimioterapia neoadyuvante como tratamiento de inducción previo a radioterapia o cirugía. OBJETIVOS: Evaluar la toxicidad y efectividad terapéutica de quimioterapia neoadyuvante ambulatoria con cisplatino, 5-fluorouracilo y leucovorín (PFL). MATERIAL Y METODOS: 86 pacientes con cáncer epidermoide de cabeza y cuello, estadios III y IV (Mo), evaluados en el Comité de tumores de cabeza y cuello del Complejo Hospitalario Universitario de Santiago (Servicios de ORL, Patología, Oncología y Radioterapia). Período de inclusión: 1993-1996. Seguimiento mínimo: 2 años. Tratamiento: 3 ciclos, dias 1, 8 y 15, cada 28 días, de quimioterapia con cisplatino 33 mg/m2, 5- fluorouracilo 800 mg/m2, y leucovorín 200 mg/m2. En caso de respuesta al menos parcial a quimioterapia fueron tratados con Radioterapia. Si no rspuesta, con cirugía. Se practicó disección cervical de adenopatías persistentes. RESULTADOS: En 50% de pacientes se administró 100% de dosis. La toxicidad predominante fue neutropenia, con 48 episodios grado III-IV. Tras quimioterapia se alcanzó 82% de respuestas objetivas en tumor primario y 60% en adenopatías cervicales. Tras quimioterapia y radioterapia secuencial: 81% de respuestas completas en tumor primario y 66% en adenopatías. Media de supervivencia 34 meses (Intervalo Confianza 95% de 25 a 39 meses). Se objetivo diferencia estadísticamente significativa en la supervivencia en favor de los pacientes con estadios III frente a IV (p=0,03), o con respuesta objetiva en adenopatías cervicales a quimioterapia frente a no respuesta (p=0,0001), o con respuesta objetiva global (en T y en N) frente a los pacientes sin respuesta objetiva global a quimioterapia (p=0,0001). DISCUSION: La quimioterapia PFL empleada se ha testado en muestra altamente representativa, con amplio rango de edad, estado general, localización, e irresecabilidad. Ha mostrado buen perfil de toxicidad, comparada con otros esquemas que también utilizan leucovorin, los cuales han conseguido mayores tasas de supervivencia que otras quimioterapias clásicas pero con gran toxicidad. Ha permitido la conservacíon de órgano en los pacientes con respuesta parcial, sin perjuicio en la supervivencia. CONCLUSIONES: El régimen PFL obtuvo buen índice terapéutico según la media de supervivencia (34 meses) y tasa de metástasis a distancia (12%) y de segundos tumores (2%). La tasa de recurrencia locorregional (32%) indica la conveniencia de quimiorradioterapia concomitante tras 3 ciclos de PFL. Se consiguió conservar el órgano afecto en 75% de pacientes.

Autor: LOPEZ BARCONS LLUIS ARISTIDES .
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: Las células del fibrosarcoma humano HT-1080 presentan una elevada adhesión a la molécula de laminina-1 inmobilizada al soporte de plástico cuando se incuban a 37 grados C durante 30 min. Para averiguar cuales de las secuencias peptídicas de la laminina-1 estan implicadas en este efecto, se sintetizaron los péptidos YIGSR y su péptido control PEAGD (LAM2M). El péptido YIGSR inmobilizado al mismo soporte causa la adhesión celular de manera dependiente de la concentración de péptido inmobilizada y de forma significativa respecto de la obtenida con el péptido control. En forma soluble, en contacto con las células en suspensión inhibe la adhesión celular a la laminina-1 inmobilizada, de la misma manera, respecto de la obtenida con el péptido control. Se prepararon liposomas de composición EPC/EPG/COL/DSPE-PEG (28/16/50/6). El péptido YIGSR se unió covalentamente al derivado DSPE-polietilénglicol (PEG). Esta unión, no causa una disminución de los efectos descritos anteriormente, lo que implica que las células HT-1080 también reconocen al péptido YIGSR unido a liposoma. Se sintetizaron otros péptidos como el GYSRARKEAASIKVAVSARKF (E(8)2-4-G), el RGD, el NPWHSIYITRFG (AG-10) y su control, NIDTTDPEAGDKDKDTGRGLK (P5). Los péptidos E(8)2-4-G y AG-10 inmobilizados al mismo soporte, y a varias concentraciones, causaron la adhesión celular de forma significativa respecto de la obtenida con el péptido control P5. En forma soluble y en contacto con las células en suspensión, únicamente el primero inhibió la adhesión celular a la laminina-1 inmobilizada de forma significativa respecto del péptido control. Seguidamente, se encapsuló doxorubicina (dox), en los liposomas descritos. El "leakage" del fármaco encapsulado, ante varios medios, a 37 grado C, fue del 10%, pudiendose considerar a estos liposomas estéricamente estabilizados (e.e.). El tratamiento de células HT-1080 durante 2 h a diferentes concentraciones de dox encapsulada en el liposoma lip-PEG-YIGSR presenta un valor de IC50 significativamente inferior que el tratamiento con la dox encapsulada en el liposoma que incorpora el péptido control, lip-Peg-LAM2M. La presencia del péptido YIGSR en una cantidad en exceso y en forma soluble respecto de su homólogo unido a liposoma, causa un aumento del valor de la IC50 aproximando su valor al obtenido ocn el tratamiento control, lo que indica la especificidad del péptido YIGSR para desplazar a su homólogo unido a liposoma del receptor celular que lo reconoce. Unos resultados similares se obtuvieron con la dox encapsulada en el liposoma que incorpora el péptido E(8)2-4-G en el extremo distal del PEG liposomico respecto del tratamiento con la dox encapsulada en el liposoma lip-PEG-P5. Estos valores de IC50 son causados por la mayor acumulación de dox intracelular que se obtiene cuando se tratan células HT-1080 durante 2 h a una concentración de 2,5 g/ml con dox encapsulada en liposomas lip-PEG-YISGR respecto del tratamiento control, teniendo lugar tanto a una temperatura de incubación de las células de 37 grado C como de 4 grado C. Estudios utilizando la microscopía de fluorescencia confocal demuestran que la entrada de la dox encapsulada en los liposomas es por un proceso de endocitosis del liposoma. Los estudios de la cinética de distribución tisular en ratones de la cepa Balb/c-nude portadores del tumor HT-1080 implantado de forma subcutánea (0,8 cm3) indican que la dox encapsulada en liposomas a una dosis de 5 mg/Kg presenta un tiempo de circulación en plasma largo, como es caracteristico de este tipo de liposomas e.e. Su acumulación cardiaca es significativamente menor a la que se obtiene con la dox en forma libre. El tratamiento con la dox encapsulada en el liposoma lip-PEG-!2>ñ[ causa una menor acumulación hepática y esplénica durante todos los intervalos de tiempo estudiados, contrariamente, su acumulación tumoral es significativamente superior respecto de la obtenida con la administración de la dox encapsulada en el liposoma control. Por tanto, es posible direccionar hacia células HT-1080 in vitro e in vivo, dox si se encapsula ésta en liposoma lip-PEG-YIGSR.

Autor: SANCHEZ PEREZ M. ISABEL.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: El uso de la quimioterapia ha permitido la mejora de la terapia para pacientes con diferentes tipos de tumores sólidos. Los obstáculos más importantes en el uso de quimioterapicos son la toxicidad frente a los tejidos normales del cuerpo y la presencia de mutaciones que confieren resistencia a estos agentes. El conocimiento de los mecanismos moleculares a través de los cuales los agentes antitumorales inducen la muerte celular programada es esencial para mejorar la terapia contra el cancer. En esta tesis, hemos analizado las respuestas celulares inducidas por los compuestos de platino (isomeros cis y trans) que son agentes que dañan el DNA, y su relación con la apoptosis, en células de mamíferos. Hemos encontrado que estos agentes activan la ruta de señalización de JNK/SAPK, aunque con diferentes cinéticas. Mientras que el isomero trans, que no es citotóxico, activa rápida y transitoriamente la JNK, el isomero cis citotóxico, es capaz de inducir la activación de JNK de forma retrasada y persistente. Hemos podido alterar la toxicidad relatia de estas drogas simplemente modulando el perfil de activación de JNK, usando inhibidores de tirosina fosfatasas, de acuerdo con esto, hamos observado la inducción de la expresión de MKP1, en células tratadas con los compuestos de platino, hemos demostrado que la inhibición de la activación de JNK por la expresión de CL100 y h-VH5 pero no de Pyst 1 (miembros de la familia MKPs) resulta en protección frente al cisplatino. Por otra parte, el bloqueo de la vía de señalización de JNK protege parcialmente de la muerte por cisplatino. Además, demostramos que la transcripción mediada por c-Jun es necesaria en la apoptosis causada pro cisplatino. Hemos estudiado la relación entre las caspasas y la actividad JNK. Hemos demostrado que la inducción de JNK por MEKK1 en respuesta a cisplatino no depende de la activación de las caspasas. En conjunto, nuestros resultados sugieren que la vía de señalización JNK es necesaria en la apoptosis inducida por cisplatino. sta activación incrementa los niveles de la proteína c-Jun, que regula muerte celular por expresión de genes de muerte los cuales activan el programa de muerte celular..

Autor: MADRID PEREZ OLGA.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: En este trabajo se describe la síntesis in vitro de dinucleósido polifosfatos (NpnNs) y sus 2',3'-dideoxiderivados (ddNpnddN) catalizada por la luciferasa de luciérnaga (EC 1.13.12.7) y por la T4 DNA ligasa (EC 6.5.1.1). Se analizan también los intentos de introducir dinucleótidos en el interior de las células. La síntesis relativa de diadenosina tetrafosfoto (Ap4A) catalizada por luciferasa de luciérnaga a partir de ATP es unas 100 veces más rápida que la de di-2',3'-dideoxiadenosina tetrafosfato (ddAp4ddA) a partir de ddATP. En presencia de ATPyS y ddATP la producción de Ap4ddA es similar a la de Ap4A en presencia de ATP. Esto indica que el grupo 3'-OH de la ribosa es esencial para la formación del complejo luciferasa-luciferil-AMP y explica el bajo rendimiento en la síntesis de ddAp4ddA en presencia de luciferasa, luciferina y ddATP. La importancia del residuo 3'-OH de la ribosa se investigó adicionalmente explorando las reacciones catalizadas por la fosfodiesterasa de verano de serpiente, dinucleósido tetradosfatasa, adenilato quinasa, adenosina deaminasa, apirasa, 6-fosfofructoquinasa y hexoquinasa. En general se encuentran valores de Vmax inferiores y de Km superiores cuando se usan los 2'-deoxi o 2',3'-dideoxi derivados de los substratos naturales. El Ap4ddA se hidreoliza por la fosfodiesterasa y dinucleósido tetrafosfatasa preferentemente a AMP + ddATP. Este hallazgo abría la posibilidad de usar Ap4ddN como una fuente directa de ddNTP, el agente activo de los 2',3'-dideoxinucleósidos (ddN) en la terapia de algunos tumores e infecciones virales. Basado en lo anterior, se exploró la posibilidad de introducir (di)nucleótidos en el interior de células de hepatoma de rata o en Saccharomyces cerevisiae, usando liposomas o electroporación. Finalmente, la T4 DNA ligasa (EC 6.5.1.1), uno de los enzimas más ampliamente utilizados en ingeniería génetica, transfiere AMP del complejo E-AMP al tripolifosfato (P3), NDP, NTP, dTTP o ddTTP produciendo a p4A, Ap3Ns, Ap4Ns, Ap4dT o Ap4ddT, respectivamente. El DNA con mella compite muy eficazmente con GTP en la síntesis de Ap4G, y por el contrario el tripolifosfato (o el GTP) inhiben el ligamiento del DNA por la ligasa..

Autor: GARCIA BERMEJO M. LAURA.
Año: 1997.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: La apoptosis parece ser el proceso por el que el etopósido (agente antitopoisomerasa) y otros agentes antitumorales con acción genotóxica provocan la muerte de células leucémicas mieloides. Por ello es de gran interés investigar la regulación de este proceso, así como el modo en que otros agentes como el AMPc pueden modularlo. Con este objetivo, el trabajo permitió concluir que: Los agentes que elevan el AMPc atenúan la citotoxicidad del etopósido en células mieloides al interferir específicamente con el proceso de apoptosis. La inducción de apoptosis no está asociada a cambios en calcio, pero sí a una bajada del pH intracelular. Tampoco está primariamente regulada por estrés oxidativo ni por cambios en la expresión del bc1-2 y bax, y problablemente tampoco por activación de AP-1, pero sí podría estar regulada por activación de NF-kB, por activacion de fosfatasas tipo I y consiguiente activación de proteasas ICE/CED-3. La atenuación por AMPc podría explicarse por la abolición de la expresión de c-myc, la inhibición de fosfatasas tipo I y proteasas ICE/CED-3, e incluso la superactivación de AP-1. El butirato de sodio induce la diferenciación y la apoptosis en células mieloides, así como la expresión del gen de estrés hsp-70, pero esta expresión no es un requerimiento estricto para la inducción de ninguno de dichos procesos.

Autor: HERNANDEZ ALCOCEBA RUBEN.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: Las células tumorales presentan alteraciones en los mecanismos que regulan su proliferaci]on, de modo que ésta se produce de modo incontrolado. La identificaci]on de estos procesos proporciona nuevas dianas para el desarrollo de agentes antitumorales con elevada especificidad. El papel de los segundos mensajeros derivados de fosfolípidos de membrana en las rutas mitogénicas está siendo ampliamente estudiado. Entre ellos, la fosforilcolina (PCho) puede tener una gran importancia, ya que se han detectado niveles anormalmente elevados de este metabolito en varios tipos de tumores humanos. El aumento de PCho se relaciona de modo directo con la transformaci]on maligna de las células, independientemente de su tasa de proliferaci]on, por lo que una estrategia consistente en el bloqueo de su producci]on puede ser altamente específica. En un sistema de células en cultivo, se ha demostrado que diversos estímulos mitogénicos, así como la transformaci]on mediada por oncogenes como ras producen la activaci]on del enzima colina quinasa con el consiguiente aumento de los niveles intracelulares de PCho. En nuestro laboratorio se ha comprobado que la inhibici]on de este enzima con altas dosis de hemicolinio-3 (HC-3) bloquea la mitogénesis inducida por varios factores de crecimiento. En el presente trabajo se ha utilizado una amplia familia de compuestos sintetizados en base a la estructura de HC-3 para evaluar la relaci]on que existe entre la inhibici]on de la producci]on de PCho y el bloqueo de la mitogénesis, la proliferaci]on y el crecimiento tumoral. En primer lugar se ha demostrado que los compuestos que han ganado potencia inhibitoria frente al enzima ChoK respecto al HC-3 son a su vez mucho más eficaces a la hora de bloquear la mitogénesis inducida por factores de crecimiento. En segundo lugar se ha observado que los nuevos inhibidores de ChoK son capaces de bloquear la proliferaci]on, preferentemente de aquellas líneas celulares que presentan una elevaci]on de la actividad ChoK como consecuencia de la transformaci]on por oncogenes como ras, src, mos y raf. En tercer lugar se aportan datos sobre la capacidad antiproliferativa de estos compuestos frente a líneas celulares procedentes de varios tipos de tumores humanos. Por último se han realizado ensayos de actividad antitumoral en ratones portadores de tumores inducidos por algunas de estas líneas celulares, y se ha comprobado que estas sustancias afectan negativamente al crecimiento tumoral in vivo. Estos resultados refuerzan el papel de la PCho en proliferaci]on celular y sugieren que el bloqueo del enzima ChoK es una estragia válida para el desarrollo de nuevos agentes antitumorales.

Autor: LOPEZ BAENA MANUELA.
Año: 1997.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR.

Resumen: Las topoisomerasas de ADN son enzimas encargadas de regular y controlar el estado topológico del material genético; se presentan por tanto, como fundamentales para un correcto desarrollo de procesos celulares tan importantes como la replicación, la transcripción o la segregación de cromátidas hermanas. En los últimos años las topoisomerasas de ADN han adquirido mayor importancia puesto que se ha descubierto que son el blanco celular de una serie de fármacos ampliamente utilizados en terapia antitumoral conocidos como venenos de topoisomerasas. Desgraciadamente, cuando estas drogas se utilizan como agentes quimioterapeúticos generalmente llevan asociados una serie de efectos secundarios indeseables en el individuo, de manera que el desarrollo de protocolos experimentales que permitan potenciar la efectividad de los venenos de topoisomerasas, evitando el uso de altas concentraciones de estas drogas, se presenta como clínicamente interesante. En este trabajo experimental hemos potenciado la capacidad del veneno de latopoisomerasa de ADN de tipo I (Topo I) Camptotecina y del veneno de latopoisomerasa de ADN de tipo II (Topo II) amsacrina para inducir muerte celular tanto apoptótica como mitótica mediante dos estrategias: una de ellas consistió en la activación prematura de ciertos replicones mediante la utilización del agente hipometilante 5-azacitidina. La segunda estrategia se basó en la utilización de tratamientos simultáneos con venenos de Topo I y Topo II. Por otro lado, realizamos un estudio sobre la participación que tiene la estructura de la cromatina en la formación de intercambios entre cromátidas hermanas (SCEs) inducidos por venenos de topoisomerasas y de cómo el bloqueo de la replicación o de la transcripción afecta a los SCEs inducidos por estas drogas.

Autor: ALVAREZ RODRIGUEZ M. ROSANA.
Año: 1996.
Universidad: VIGO.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA FISICA Y QUIMICA ORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: DESCUBRIMIENTO E ARQUITECTURA BIOMOLECULAR .

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA ABORDADO LA SINTESIS DE RETINOIDES NATURALES DE RECIENTE CARACTERIZACION: ANHIDRORETINOL Y (14R)-14-HIDROXI-4,14-RETRORETINOL. PARA ELLO SE HA LLEVADO A CABO UN ESTUDIO DE DIFERENTES METODOLOGIAS SINTETICAS DE FORMACION DE ENLACES C-C. POR OTRO LADO, SE HAN DISEÑADO Y SINTETIZADO UNA SERIE DE NUEVOS RETINOIDES CON IMPORTANTES ALTERACIONES EN LA DISTRIBUCION ELECTRONICA DEL POLIENO CON EL FIN DE ESTUDIAR LOS REQUERIMIENTOS ESTERICOS Y ELECTRONICOS DEL CENTRO ACTIVO DE LA PROTEINA BACTERIORRODOPSINA. ESTOS ANALOGOS HAN PERMITIDO EXPLORAR EL ESPACIO ESTERICO DEL BOLSILLO DE UNION AL CROMOFORO EN BACTERIORRODOPSINA E INVESTIGAR LA APLICACION DE LOS COMPLEJOS RETINAL-PROTEINA EN EL DESARROLLO DE NUEVOS MATERIALES OPTOELECTRONICOS.

Autor: BARREIRO PARRILLO LAURA.
Año: 1996.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA ENFERMEDAD DE CHAGAS ES CAUSADA POR EL PROTOZOO PARASITO TRYPANOSOMA CRUZI, Y ES ENDEMICA DE AMERICA LATINA, DONDE EL 25% DE LA POBLACION SE ENCUENTRA EN RIESGO DE CONTRAER LA ENFERMEDAD. ANUALMENTE SE REGISTRAN 1 MILLON DE NUEVOS CASOS Y 45.000 MUERTES. POR ELLO ENTRE LOS OBJETIVOS DE ESTA TESIS DOCTORAL SE ENCONTRABAN EL ESTUDIO DE LOS GENES P-GP EN T. CRUZI Y EN PARTICULAR DEL GEN TCPGP1A Y SU RELACION CON LA RESISTENCIA A FARMACOS ASI COMO INVESTIGAR LA EXISTENCIA DE UN FENOTIPO DE MULTIRRESISTENCIA A FARMACOS (MDR) EN ESTE PROTOZOO. ENTRE LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN ESTE TRABAJO MERECE DESTACAR LA CARACTERIZACION DE UN NUEVO GEN P-GP INCLUIDO EN LA FAMILIA TCPGP1, LLAMADO TCPGP1A, CON 3.105 PB QUE CODIFICA PARA UNA PROTEINA DE UNOS 115.252 DA. SE TRATA DE UN GEN DE COPIA UNICA QUE SE LOCALIZA EN DOS CROMOSOMAS HOMOLOGOS DE 1,6 Y 2 MB RESPECTIVAMENTE, QUE SE EXPRESA CONSTITUTIVAMENTE COMO UN TRANSCRITO POLIADENILADO DE 6 KB. EL GEN TCPGP1A CARECE DE LOS SEGMENTOS TRANSMEMBRANA 11 Y 12 ASI COMO DEL SEGUNDO DOMINIO DE UNION AL ATP POR LA INSERCION CON DELECION DE L1TC, UN NON-LTR RETROTRANSPOSON YA DESCRITO EN ESTE PROTOZOO. ASIMISMO SE HA OBTENIDO UNA LINEA DE T. CRUZI (R20) RESISTENTE A 20 MICROGRAMOS DE DAUNOMICINA (DNM) POR ADAPTACION PROGRESIVA A CONCENTRACIONES CRECIENTE DEL FARMACO. R20 PRESENTA UNA AMPLIFICACION GENICA Y DEL GEN TCPGP1A LO QUE SUGIERE LA IMPLICACION DE SU PRODUCTO EN LA RESISTENCIA A LA DNM. PRESENTA ADEMAS UNA RESISTENCIA CRUZADA A FARMACOS TIPICOS, FENOTIPO MDR, ASI COMO A LOS FARMACOS NIFURTIMOX Y BENZNIDAZOL, DE USO HABITUAL EN LA QUIMIOTERAPIA DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS.

Autor: GOBERNADO SERRANO M. CARMEN.
Año: 1995.
Universidad: VALLADOLID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR Y FARMACOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: CURSOS MONOGRAFICOS (PLAN ANTIGUO).

Resumen: SE HA REALIZADO UN ESTUDIO CRITICO Y BIBLIOMETRICO DE LA REVISTA ESPAÑOLA DE QUIMIOTERAPIA PERIODO 1988-1994. SE ELABORO UNA FICHA DE CADA UNA DE LAS PUBLICACIONES DE LA REVISTA RECOGIENDOSE LAS PALABRAS-CLAVE. LOS TRABAJOS SE CATALOGARON DENTRO DE LAS SIGUIENTES SECCIONES: EDITORIALES, FARMACOS ANTIVIRALES, QUIMIOTERAPICOS, ANTIBIOTICOS, FARMACOLOGIA CLINICA Y TERAPEUTICA, FARMACOCINETICA E INMUNOLOGIA. DE ACUERDO CON SU CONTENIDO Y LA METODOLOGIA EMPLEADA. SE PUBLICARON 310 TRABAJOS, CASI TODOS DE INVESTIGACION, SOLO 31 REVISIONES. PREDOMINAN LOS TRABAJOS SOBRE ANTIBIOTICOS (51,9 % DEL TOTAL DE LOS PUBLICADOS), SEGUIDOS POR LOS TRABAJOS DE QUIMIOTERAPICOS (24,3% DEL TOTAL DE LOS PUBLICADOS), EDITORIALES (10,3% DE LOS PUBLICADOS) Y FARMACOLOGIA CLINICA Y TERAPEUTICA (8,4% DEL TOTAL DE LOS PUBLICADOS. PREDOMINAN LOS TRABAJOS FIRMADOS POR 4 O MAS AUTORES. COLABORARON EN LA REVISTA 82 AUTORES EXTRANJEROS. EL 20,3% DE LOS ARTICULOS FUERON REDACTADOS EN INGLES. ESTA REVISTA ES EL ORGANO DE EXPRESION DE LA SOCIEDAD ESPAÑOLA DE QUIMIOTERAPIA.