ANALISIS BIOQUIMICO

Autor: GONZÁLEZ GÓMEZ NIEVES.
Año: 2003.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS.

Resumen: Las aportaciones originales del estudio se pueden resumir en lo siguiente: 1,- Que el GLP-1, como la insulina, incrementa el transporte de glucosa y el metabolismo del glucógeno en el músculo esquelético del hombre normal - miocitos en cultivo primario -, y que si bien ambas hormonas parecen compartir la activación de algunos enzimas iniciales en las vías de señalización -PI3K, MAPKs y p70s6k-, no parece probable que un incremento en la fosforilación de la p70s6k sea esencial en estas acciones del GLP-1. Que la Ex-4 y la EX9 no sólo mimentizan el efecto del GLP-1, con quién están estructuralmente relacionadas, sino que aparentemente son agonistas de la acción de éste sobre el transporte de la glucosa en el músculo aunque, posiblemente, a través de un mecanismo distinto. De hecho, ambas exendinas también activan la PI3K/PKB y MAPKs, pero en su efecto podrían intervenir, además de estas enzimas, isoformas típicas de la PKC (alfa, beta1, beta3 y gamma); por otro lado, e independientemente de que también ambas inducen la hidrólisis inmediata de GPLs, la EX-4, sin embargo, y a diferencia con el GLP-1 y Ex-9, propicia un pequeño pero claro aumento en le contenido celular de AMPc. 2,- Y que los resultados del estudio en células de pacientes diabéticos tipo 2, permiten concluir que el efecto del GLP-1 sobre el transporte de glucosa, y también el de ambas exendinas, está mantenido, por lo que el deterioro observado en estados basales, previos a su activación por GLP-1, insulina, y también por ambas exendinas, parece pudiera ser compensado por el desarrollo de una mayor sensibilidad en la vía de las MPAKs, no particularmente frente a la insulina, pero sí en lo relativo al GLP-1 y, sobre todo, a la EX-4 y EX-9.

Autor: XIMÉNEZ DE EMBÚN CADARSO PILAR.
Año: 2003.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS.

Resumen: La investigación llevada a cabo en esta memoria presenta una doble vertiente. Por una parte, el desarrollo de nuevas metodologías analíticas basadas en: 1,- Nuevos tratamientos de muestra más rápidos y sencillos que los existentes hasta la fecha mediante el empleo de la sonda de ultrasonidos. 2,- Nuevos sistemas de aislamiento, preconcentración y separación de especies volátiles de una forma rápida y eficaz mediante la microextracción en fase sólida (SPME) unida a una columna multicapilar que permite ser acoplado a distintos detectores de una forma rápida y sencilla (MIP-AES, ICP-MS,AFS). El segundo aspecto posee un enfoque más amplicado y versa sobre el empleo de plantas como posibles agentes limpiadores de suelos. Los elementos estudiados incluyen plomo [Pb (II)], cadmio [Cd (II)], mercurio [Hg (II) y CH3Hg+], cromo [Cr (III) y Cr (VI)], selenio [Se (IV) y Se (VI)]. Entre las especies estudiadas se encuentra la Thlaspi caerulescens, el girasol, la mostaza india y fundamentalmente, el altramuz. Asimismo, la aplicación de la metodología desarrollada ha permitido evaluar la transformación de selenio inorgánico en plantas y levaduras, que incluye la detección e identificación de especies orgánicas volátiles y no volátiles.

Autor: JURADO LÓPEZ ALICIA.
Año: 2002.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS, CAMPUS DE RABANALES.

Resumen: En la presente memoria se pone de manifiesto la utilidad y conveniencia del empleo de técnicas analíticas actuales, principalmente basadas en láser, para el análisis de muestras sólidas de carácter valioso, como son las muestras de joyería y las relacionadas con el patrimonio cultural. La memoria comienza con una introducción sobre las técnicas analíticas utilizadas durante la parte experimental, junto con la exposición de los aspectos fundamentales de la Quimiometría, disciplina de la que se ha hecho uso a lo largo de toda la Tesis para el tratamiento de los datos generados por los equipos de medida. En la parte experimental, en primer lugar se aborda el empleo de la espectrosocpía de rotura fotónica inducida por láser (LIBS) en el campo de la joyería. Mediante los estudios planteados se concluye que, si bien el método propuesto no puede competir con el método oficial (copelación) en los niveles de precisión que éste alcanza, sí lo completa, ya que mediante copelación únicamente se determina la cantidad de oro presente en la joya, mientras que mediante el método basado en LIBS se puede determinar todos los metales que contiene la muestra de una forma simultánea. Además, la resolución espacial de LIBS permite realizar perfiles de profundidad en muestras formadas por capas, como es el caso de las piezas chapadas o las llamadas "goldfilled". En un segundo bloque de la Tesis se estudia la aplicación de otras técnicas espectroscópicas (microscopía Raman y espectroscoía NIR) al análisis de muestras de carácter valioso relacionadas con el patrimonio cultural como, por ejemplo, a la identificación de pigmentos en manuscritos y sellos antiguos o al estudio de los aglutinantes empleados en las técnicas pictóricas tradicionales. El carácter no destructivo de estas técnicas y la posibilidad de no realizar muestreo las hacen idóneas para conocer la composición de muestras valiosas, aspecto necesario para plantear las óptimas condiciones de conservación, así como los tratamientos de restauración adecuados. Finalmente, la Memoria contiene la discusión de los resultados obtenidos, así como las conclusiones más destacadas que derivan de los estudios llevados a cabo.

Autor: JIMENEZ LOZANO EULALIA.
Año: 2002.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA UNIVERSIDAD DE BARCELONA.

Resumen: Las excelentes propiedades terapéuticas y farmacológicas de la familia de las quinolonas han extendido y ampliado sus aplicaciones terapéuticas abarcando no sólo la medicina humana sino que también se emplean en veterinaria. El uso incontrolado y abusivo de estos fármacos en animales destinados al consumo humano puede provocar que residuos de estos compuestos queden en los tejidos pudiendo provocar problemas en la salud de los consumidores, como la aparición de problemas de alergia en individuos sensibles o la aparición de cepas bacterianas resistentes a estos antibióticos. La Unión europea en el reglamento 2377/90 ha establecido procedimientos de regulación de los límites máximos de residuos (LMR) de estos compuestos en los alimentos de origen animal. La existencia de esta normativa supone la necesidad del desarrollo de métodos de análisis de estos fármacos en los tejidos animales, suficientemente sensibles para determinar estos compuestos por debajo de los LMR establecidos. En las últimas décadas de Electroforesis Capilar (CE) ha surgido como una potente técnica separativa de enorme utilidad en el campo farmacéutico, que posee numerosas ventajas siendo las principales su elevada eficiencia, los pequeños volúmenes de muestra requeridos y los bajos costes operacionales, sobretodo cuando se compara con la cromatografía de líquidos, técnica ampliamente utilizada para el estudio de residuos. El objeto de esta tesis doctoral ha sido el desarrollo de métodos de separación y determinación de las quinolonas más ampliamente utilizadas en medicina veterinaria en tejidos de animales mediante la aplicación de la electroforesis capilar. Con este objetivo se ha establecido un modelo de comportamiento electroforético que ha permitido la optimización de las condiciones de separación de las quinolonas de uso veterinarios por CE en medios acuosos e hidroorgánicos. Simultáneamente y utilizando el modelo de comportamiento electroforético establecido, se han evaluado determinando las constatnes de acidez de estas sustancias en los medios estudiados, evaluando la utilidad de la electroforesis capilar en la determinación de las constatnes de disociación, comparando los resultados obtenidos con otras técnicas utilizadas para la determinación de estas constantes. Una vez optimizada la separación electroforética de las quinolonas veterinarias, se han desarrollado y validado métodos de determinación de estos compuestos en tejidos de ave, utilizando extracción líquido-líquido y extracción en fase sólida para la limpieza de muestras y preconcentración de los analitos previo al análisis por CE utilizando los detectores de serie de diodos y la fluorescencia inducida por láser, obteniéndose límites de detección y cuantificación por debajo de los valores de LMR establecidos para estas sustancias. Asimismo se han utilizado métodos de regresión multivariante para la determinación de aquellos compuestos que han presentado una fuerte coelución en esta técnica.

Autor: GONZÁLEZ LA FUENTE JOSE MANUEL.
Año: 2002.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: El selenio es un micronutriente esencial para el ser humano en un estrecho rango de concentraciones, fuera del cual se pueden presentar distintos desórdenes clínicos debidos tanto a su carencia como un exceso. La biodisponibilidad de este elemento depende no solo de la concentración, sino también de factores como forma química, compartiendo ambiental y actividad biológica, fundamentalmente. Por tanto la determinación y especiación de selenio es vital hoy en día para conocer el ciclo biogeoquímico del elemento. Las investigaciones realizadas han permitido desarrollar un acoplamiento en línea para la determinación de selenio total en agua de suministro urbano a niveles de ug.L-1, basado en una digestión de la muestra por microondas focalizadas (usando la mezcla HBr-KBrO3), con posterior generación del hidruro volátil de selenio y detección por espectrometría de absorción atómica de llama en celda de cuarzo (acoplamiento en línea MW-HG-QCFAAS). Este sistema ha permitido posteriormente la especiación de diversos compuestos de selenio (selenito, selenato, selenometionina, selenoetionina y selenocistina) mediante el acoplamiento en líneas de la cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC) con el sistema MW-HG-QCFAAS. La sustitución de la absorción atómica por un detector más sensible como el ICP-MS ha permitido rebajar los límites de detección de todas las especies, y su aplicación a la especiación de selenio en muestras de orina ha revelado la existencia de al menos 3 especies desconocidas en orina humana basal. El empleo de la cromatografía vesicular se ha mostrado más eficaz que la de fase inversa para resolver complicados problemas de especiación como el que no ocupa, en el que se deben separar simultáneamente especies inorgánicas y orgánicas en matrices complejas como la orina (muestras biológicas) y lixiviados de depósitos de seguridad de residuos industriales (muestras ambientales).

Autor: ANDREU MORENO YOLANDA.
Año: 2002.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO QUÍMICA ANALÍTICA.

Resumen: En esta tesis se profundiza en el empleo de la fluorescencia de las enzimas y en su modificación química para la determinación de compuestos de interés clínico y toxicológico. Además, se logra ampliar el campo de aplicación de los métodos enzimáticos y fluorimétricos a compuestos que no son los sustratos naturales de las enzimas. Concretamente, se describe la determinación de ácido úrico, bilirrubina y colina al reaccionar con uricasa, bilirrubina oxidasa y colina oxidasa, respectivamente, mediante seguimiento de la fluorescencia de las propias enzimas. También se desarrolla la determinación de bilirrubina y colina, al reaccionar con bilirrubina oxidasa y colina oxidasa químicamente modificadas con un compuesto derivado de la fluoresceína. Por último, se describe un método para la determinación de zearalenona basado en su reacción con betaNADH en presencia de 3alfa-hidroxiesteroide deshidrogenasa, reacción que es propia de los estrógenos naturales.

Autor: CAÑADA CAÑADA FLORENTINA .
Año: 2001.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En la Tesis se ha realizado un estudio analítico de quimioterápicos utilizados en el tratamiento de la tuberculosis (Rifampicina, rifamicina Sv, isoniacidad y piracionamida). Se han puesto a punto diferentes métodos analíticos para su determinación en presencia de otras sustancias de interés como, acetilisoniacida, principal melabolito de isoniacida y creatinina. Los métodos analíticos se han aplicado a la determinación de los analitos en formulaciones farmacéuticos y fluidos biológicos (orina y suero).

Autor: HERNÁNDEZ DEL RINCÓN JUAN PEDRO.
Año: 2001.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La determinación del tiempo o intervalo transcurrido desde la muerte (data de la muerte) es una cuestión de gran transcendencia médico legal, que entraña grandes dificultades, ya que diversas circunstancias pueden modificar la evolución habitual de los fenómenos cadavéricos. En ocasiones, en la práctica forense, es frecuente que el estudio o peritaje a realizar, lo sea sobre estos esqueléticos o restos óseos. Con el objeto de cimentar la determinación de la data en diversos soportes analíticos y dada la complejidad que reviste el problema; han sido descritos múltiples métodos por diversos autores; sin que se haya podido llegar a una técnica que de forma clara y certera resuelva de forma precisa esta cuestión; siendo quizás la conjunción de los resultados de todos ellos, el método que nos puede aproximar más a una solución. En nuestro estudio, hemos partido, como Hipótesis de Trabajo del hecho de que tras el fallecimiento se instauran una serie de modificaciones bioquímicas y estructurales que tienen como finalidad última, la degradación de la materia orgánica, con un incremento en la proporción relativa de materia inorgánica. Hemos seleccionado como trazadores de la degradación de la materia orgánica las concentraciones de Urea, Potasio, Nitrógeno, Azufre y Fósforo, así como el estudio de los Parámetros de Difracción de Rayos X en restos óseos. Para el estudio objeto de esta tesis se recogió un hueso largo (fémur, tibia, peroné, húmero o radio) de 69 cadáveres, con una edad media de 68,18 + 17,62 (12-97) años. La data de la muerte oscila entre los 7 y los 54 años. Los huesos se limpiaron con un bisturí, tras lo cual, se cortó la diáfisis ósea, obteniendo tres fragmentos (tres rodajas) en cada hueso. De cada fragmento se tomaron dos muestras; una de la zona cortical y otra de la zona medular, las cuales fueron sometidas a trituración (molido). Se han realizado estudios de Difracción de Rayos X, determinaciones de Nitrógeno (mediante el Método de Kjeldahl), de Urea y Potasio (mediante Autoanalizador), de Azufre y Fósforo (utilizando técnicas de ICP-AES) y de Proteínas (mediante Espectrofotometría UV). Los resultados obtenidos han sido sometidos a tratamiento estadístico, aplicando el paquete estadístico SPSS 10.0, para efectuar estudio de las correlaciones bivariadas, realizando así mismo análisis de regresión lineal múltiple y análisis discriminante. Las conclusiones obtenidas del presente trabajo, son las siguientes: 1,- El estudio conjunto de parámetros bioquímicos (Potasio, Urea y Azufre) y la Difracción de rayos X supone una herramienta útil en el establecimiento de la data de unos restos óseos. 2,- La zona cortical del hueso es la zona de elección para la realización de este tipo de estudios, mejorando la eficiencia de los resultados obtenidos en la zona medular. 3,- Deben utilizarse siempre y cuando sea posible, los huesos de mayor tamaño; siendo a nuestro juicio el fémur, el que mejor resultado puede ofrecer de todos los huesos estudiados. 4,- El Potasio yla Urea presentan un comportamiento paralelo que, a nuestro juicio, expresa fenómenos de degradación de la materia orgánica con los procesos putrefactivos, y su difusión fuera del tejido. 5,- En el momento actual carecemos de herramientas analíticas lo suficientemente fiables, para poder establecer con error menor de 5 años, la data de un hueso en el intervalo comprendido entre los siete y los cincuenta y cuatro años. 6,- La edad a partir de los 80 años, supone un factor a tener en cuenta por las interferencias de los procesos ligados al envejecimiento.

Autor: VILANÓ VIVES MARC .
Año: 2000.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAT DE QUÍMICA - UNIVERSITAT DE BARCELONA.

Resumen: En la tesis doctoral se ponen a punto métodos de ataque por microondas que permiten la quantificación de los contenidos totales de arsénico y selenio en distintas muestras de interés biológico, tales como la orina humana, ostras, mejillones y algas. También se optimizan las técnicas usadas para su medición, que básicamente son la generación de hidruros-espectrofotometría de absorción atómica en celda de cuarzo (HG-QCAAS) y la generación de hidruros-espectometría la fluorescenci atómica (HG-AFS). En la mayoría de los casos se valida la nueva metodología analítica con el análisis de Materiales de Referencia Certificados, obteniendo unos resultados satisfactorios. También se desarrollan nuevos métodos para permitir la especiación de las formas orgánicas y inorgánicas de selenio y arsénico. En primer lugar, se desarrollan y se optimizan nuevos métodos de extracción de las especies de estos elementos, siendo ésta una etapa crítica de la nueva metodología. En lo referente a la etapa de medición, se acopla la cromatografía líquida (LC) a los métodos de detección descritos anteriormente (HG-QCAAS y HG-AFS), obteniendo muy buenos resultados. Asimismo, en el caso de la especiación de selenio y de la especiación de formas orgánicas de arsénico de una complejidad más elevada, tales como la AsBet y la AsChol, es necesaria la incorporación dentro del acoplamiento de una etapa de derivatización por radiación ultravioleta (UV), antes de la etapa de detección. Una vez desarrolladas estas nuevas técnicas acopladas, se aplican a la especiación de arsénico y selenio en muestras diversas, tales como la orina humana, las ostras o las algas. Además, se participa en ejercicios de Intercomparación y de Certificación para establecer nuevos Materiales de Referencia, tanto por el contenido total como por la especiación de ambos elementos. Estos ejercicios permiten la validación de las técnicas y los métodos analíticos desarrollados y optimizados a lo largo de la tesis doctoral.

Autor: MARDONES PEÑA CLAUDIA ALEJANDRA.
Año: 1999.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En esta memoria se desarrollaron métodos nuevos de análisis electroforéticos par la determinación de analitos de difícil separación provenientes de muestras líquidas y solidas. Para el tratamiento previo de las muestras se acoplaron y automatizaron distintos sistemas de flujo continuo que permitieron llevar a cabo, de manera automática, reacciones de derivación , extracciones, preconcentraciones y automática,reacciones de derivatización, extracciones, preconcentraciones y " clean-up" de muestras. A través de la utilización de una interfase mixta, desarrollada por nuestro grupo de investigación, se logró acoplar de manera automática dichos sistemas en el equipo de electroforesis capilar, alcanzando un alto grado de robustez y automatización del proceso analítico. Con este sistema due posible analizar 6 tipos diferentes de muestras, determinando 6 grupos de analitos alcanzando un número total de 40 compuestos determinados. Finalmente,los métodos propuestos se presentan como una alternativa a los métodos clásicos de separación y constituyen un avance en el desarrollo de métodos electroforéticos par el análisis de muestras en los ámbitos biomédicos toxicologicos.

Autor: SOLDADO CABEZUELO ANA BELEN.
Año: 1999.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: QUIMICA .
Centro de realización: FACULTAD DE QUIMICA.

Resumen: En la Presente Tesis Doctoral se han puesto a punto metodologías analíticas adecuadas para la especiación cuantitativa de aluminio en suero basal( sin enriquecer con el metal) tanto de personas sanas como de enfermos renales sometidos a diálisis. Para ello, se investigó, en primer lugar, el potencial analítico del acoplamiento de una técnica de separación rápida como es la "Fast Protein Liquid Chromatography" para la separación de los principales proteínas séricas y de los complejos de aluminio de interés(A1-DFO, Al-citratos) con la detección final del aluminio por ETAAS. La metodología desarrollada permitió llevar a cabo la especiación de aluminio basal en las fracciones de alto y bajo peso molecular de suero humano de personas sanas fue necesario recurrir al acoplamiento de la FPLC con el detector específico mas sensible conocido hasta la fecha, que es el ICP-MS( de Cuadrupolo y de Doble Enfoque). Los resultados obtenidos con dichas metodologías permiten establecer que la transferrina es la única proteína que enlaza al aluminio en el suero humano. Por último, en un intento de disponer de una nueva herramienta analítica, que pueda proporcionar información complementaria, a la adquirida con las metodologías desarrolladas anteriormente se evaluó el potencial analítico de la técnica de separación de alta eficacia que es la Electroforesis Capilar acoplada en linea mediante una interfase adecuada al ICP-MS para llevar a cabo estudios de especiación de aluminio en suero humano.

Autor: MUÑOZ FARIÑA OCIEL RICARDO.
Año: 1999.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE VALENCIA.

Resumen: Se ha planteado como objetivo general de esta investigación el desarrollo de metodologias analiticas para la determinación de arsénico inorgánico en un amplio muestrario de productos pesqueros. Los resultados se evaluaron desde el punto de vista medio-ambiental sanitario y toxicologico. Para el cumplimiento de este objetivo general se han desarrollado metodologias para la determinacion de arsenico inorganico en aguas y productos pesqueros. Dichas metodologias se han aplicado a un amplio muestrario de productos pesqueros del Estuario Guadalquivir y de productos de la pesca pertenecientes a un estudio de dieta total. Los resultados obtenidos han permitido ponen de manifiesto la necesidad de regular los contenidos de arsenico en productos de la pesca en función de sus contenidos de arsenico inorganico.

Autor: JURKIEWICZ GONZALEZ MAREK .
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA.

Resumen: En el presente trabajo se describe el desarrollo automatización, optimización y evaluación de tres sistemas analizadores por inyección en flujo para análisis de amonio y urea, y de creatinina y urea simultaneamente. La base de los tres analizadores es un sistema de inyección en flujo en la que se realiza una difusión gaseosa para eliminar interferencias y la detección es potenciométrica mediante un electrodo selectivo a ion amonio. Los biosistemas de inyección en flujo de urea y el biparamétrico de urea y creatinina incorporan reactores enzimáticos de flujo continuo que han sido optimizados y evaluados. Se desarrolló un sistema electrónico y un software que permitió el control de los diferentes analizadores y la adquisición y procesamiento de la señal de forma automática. Los analizadores desarrollados fueron validados y aplicados en la monitorización de parámetros bioquímicos en órganos artificiales: i) Monitorización de amonio durante la digestión de glíadinas en estómagos artificiales y en ratas para obtener información sobre la cinética de estas reacciones. ii) Monitorización on-line de urea y creatinina en líquidos de hemodiálisis y plasma sanguíneo con el fin de determinar de forma automática, a tiempo quasi real y sin extracción de sangre, parámetros médicos relacionados con los procesos de hemodiálisis.

Autor: CASTELLO PONCE ANA.
Año: 1996.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MED. PREV. Y S.P., B., T. Y MEDICINA LEGAL PROGRAMA DE DOCTORADO: 265A "MEDIO AMBIENTE Y SALUD" .

Resumen: LA PRUEBA DE ADLER ES UNA DE LAS MAS UTILIZADAS EN EL DIAGNOSTICO DE ORIENTACION PARA MANCHAS DE SANGRE. UN RESULTADO NEGATIVO INDICA LA AUSENCIA DE SANGRE EN LA MUESTRA. SE ESTUDIA LA POSIBILIDAD DE OBTENER FALSOS NEGATIVOS POR LA PRESENCIA DE SUSTANCIAS CONTAMINANTES. SE COMPRUEBA EXPERIMENTALMENTE QUE DETERMINADOS COMPUESTOS POR SUS CARACTERISTICAS REDUCTORAS, PUEDEN IMPEDIR QUE SE VERIFIQUE LA REACCION. SE ESTUDIA EN QUE CONDICIONES DE CONCENTRACION SE PRODUCE LA INTERFERENCIA, HACIENDO UN PREVIO AJUSTE DE LA SENSIBILIDAD DE LA PRUEBA SOBRE DISTINTOS SOPORTES Y VARIANDO FACTORES COMO EL TIEMPO Y LA PROCEDENCIA DE LA MUESTRA. COMO CONCLUSION, SE PUEDE AFIRMAR QUE SE PUEDEN OBTENER FALSOS NEGATIVOS Y QUE LA ACCION DEL CONTAMINANTE ES DEPENDIENTE DEL TIPO DE SOPORTE SOBRE EL QUE SE ESTUDIA LA MUESTRA, VARIANDO TAMBIEN CON LA ANTIGUEDAD Y PROCEDENCIA DE LA MISMA. EN CONSECUENCIA UN RESULTADO NEGATIVO NO ES EXCLUYENTE DE LA NATURALEZA SANGUINEA DE LA MUESTRA.

Autor: GARGALLO GOMEZ RAIMUNDO.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA ANALITICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA ANALITICA DEL MEDIO AMBIENTE I DE LA POLUCION.

Resumen: LA TESIS DOCTORAL SE CENTRA EN EL ESTUDIO DE LOS EQUILIBRIOS DE PROTONACION Y DE COMPLEJACION CON EL ION COBRE (II) DE LOS COMPONENTES DE LOS POLINUCLEOTIDOS (BASES NITROGENADAS, NUCLEOTIDOS Y NUCLEOTIDOS CICLICOS), DE DIVERSOS HOMOPOLINUCLEOTIDOS SINTETICOS (POLI(U), POLI (I), POLI (C) Y POLI (I)-POLI (C)) Y DE UNA MEZCLA DE RNAS NATURALES DE TRANSFERENCIA. EL ESTUDIO DE ESTOS EQUILIBRIOS SE HA REALIZADO UTILIZANDO DIFERENTES TECNICAS INSTRUMENTALES ANALITICAS COMO SON LA POTENCIOMETRIA CON ELECTRODO INDICADOR DE VIDRIO, LA ESPECTROFOTOMETRIA UV-VISIBLE Y LAS ESPECTROSCOPIAS DE DICROISMO CIRCULAR, DE FLUORESCENCIA MOLECULAR Y DE RESONANCIA DE ESPIN ELECTRONICO. DEBIDO A LA NATURALEZA MACROMOLECULAR DE LOS POLINUCLEOTIDOS, COBRA ESPECIAL RELEVANCIA LA APLICACION DE METODOS QUIMIOMETRICOS DE RESOLUCION DE MEZCLAS. SE HAN APLICADO ESPECIALMENTE LOS METODOS BASADOS EN EL ANALISIS DE FACTORES, TANTO LOS YA DESCRITOS (EFA, PCA, SIMPLISMA) COMO DESARROLLADOS EN EL MARCO DE LA TESIS DOCTORAL (ALS). PARA CADA UNO DE LOS SISTEMAS ESTUDIADOS, SE HA DETERMINADO EL NUMERO DE ESPECIES QUIMICAS PRESENTES, SU DIAGRAMA DE DISTRIBUCION, SU ESPECTRO UNITARIO Y LA CONSTANTE DE EQUILIBRIO ASOCIADA AL PROCESO DE PROTONACION, COMPLEJACION O DESNATURALIZACION.

Autor: MANZANO MUÑOZ M. TERESA.
Año: 1996.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: QUIMICA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA ANALITICA, NUTRICION Y BROMATOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: METODOS ANALITICOS PARA LA DETERMINACION DE ESPECIES DE INTERES CLINICO BIOLOGICO Y AMBIENTAL.

Resumen: BAJO EL TERMINO ANALISIS ENZIMATICO SE ENGLOBA LA DETERMINACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA Y DE LA CONCENTRACION DE SUSTRATOS, INHIBIDORES O ACTIVADORES QUE AFECTAN DIRECTAMENTE A LA VELOCIDAD EN UNA REACCION ENZIMATICA. LA ALTA SELECTIVIDAD DE LAS ENZIMAS PERMITE LA CUANTIFICACION DIRECTA DE ANALITOS EN MATRICES COMPLEJAS. LAS ENZIMAS DE USO ANALITICO DEBEN SER DE ALTO GRADO DE PUREZA, LO QUE CONLLEVA, EN LA GRAN MAYORIA DE LOS CASOS, UN PRECIO ELEVADO. AL EJERCER LAS ENZIMAS FUNCIONES DE CATALIZADOR EN LAS REACCIONES IMPLICADAS, CABE LA POSIBILIDAD DE SU REUTILIZACION, ESTO SE CONSIGUE MEDIANTE LA INMOVILIZACION SOBRE SOPORTES INERTES. POR OTRO LADO, LAS CARACTERISTICAS DE VERSATILIDAD, RAPIDEZ, ECONOMIA, POSIBILIDAD DE MINIATURIZACION, FACIL AUTOMATIZACION, ETC., INHERENTES AL ANALISIS POR INYECCION EN FLUJO (FIA) CONSTITUYEN UN EXCELENTE COMPLEMENTO A LOS METODOS ENZIMATICOS. DENTRO DEL ABANICO DE POSIBILIDADES QUE OFRECE LA UNION FIA-METODOS ENZIMATICOS, SE PRESENTAN ALGUNAS APLICACIONES QUE APARECEN ESTRUCTURADAS EN TRES BLOQUES. EN CADA UNO DE ELLOS SE HAN ESTUDIADO LA ELECCION DE LAS CONDICIONES EXPERIMENTALES Y DE LAS CONFIGURACIONES FIA (CON DETECCION ESPECTROFOTOMETRICA O FLUORIMETRICA) MAS ADECUADAS A LOS OBJETIVOS QUE SE PRETENDEN ALCANZAR. 1.- ENZIMAS EN DISOLUCION. DETERMINACION DE ACIDO L-MALICO Y APLICACION AL ANALISIS EN PRODUCTOS ENOLOGICOS. 2.- ENZIMAS INMOVILIZADAS. INMOVILIZACION Y COINMOVILIZACION DE ALCOHOLOXIDASA (AO), FORMALDEHIDO DESHIDROGENASA (FDH) Y CATALASA (CAT) SOBRE VIDRIO DE POROSIDAD CONTROLADA (CPG). DETERMINACION DE FORMALDEHIDO Y DE METANOL. 3.- INHIBICION/REACTIVACION ENZIMATICA. ESTUDIO DE LA REACTIVACION DE LA ACETILCOLINESTERASA (ACHE) INMOVILIZADA SOBRE CPG, TRAS SU INHIBICION CON PESTICIDAS ORGANOFOSFORADOS. DETERMINACION DE PARAOXON.

Autor: ORTEGA BARRALES PILAR.
Año: 1996.
Universidad: JAEN.
Centro de lectura: CIENCIAS EXPERIMENTALES.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA FISICA Y ANALITICA PROGRAMA DE DOCTORADO: METODOLOGIA Y TECNICAS DE INVESTIGACION EN QUIMICA FISICA Y ANALITICA.

Resumen: SE DESARROLLAN, RESPECTIVAMENTE, TRES METODOS DE DETERMINACION DE HIDRAZINA, ACIDO ASCORBICO Y TIAMINA POR ESPECTROMETRIA EN FASE SOLIDA. LA HIDRAZINA SE DETERMINA POR REACCION CON DIMETILAMINOBENZOALDEHIDO Y MEDIDA DE LA ABSORBANCIA DE LA ALDAZINA FORMADA FIJADA SOBRE RESINA DOWEX 50WX8. EL ACIDO ASCORBICO SE DETERMINA POR SU ACCION REDUCTORA SOBRE FE(III), REACCION DEL FE(II) FORMADO CON FERROZINA, Y FIJACION DEL COMPLEJO FE(II)-FERROZINA SOBRE RESINA ANIONICA SEPHADEX QAE-A-25 Y MEDIDA DE LA ABSORBANCIA EN FASE SOLIDA. LA TIAMINA (VITAMINA B1) SE DETERMINA POR MEDIDA DIRECTA DE SU ABSORBANCIA INTRINSECA PREVIA FIJACION EN RESINA SEPHADEX CMC-25. FINALMENTE SE DESARROLLA UN SENSOR FOTOMETRICO DE FLUJO PARA TIAMINA COMBINANDO LA ESPECTROFOTOMETRIA U.V EN FASE SOLIDA CON UN SISTEMA DE FLUJO NO SEGMENTADO. LOS METODOS PROPUESTOS HAN DEMOSTRADO EN CADA CASO SU APLICABILIDAD A UNA GRAN VARIEDAD DE MUESTRAS REALES, PRINCIPALMENTE FARMACOS, ALIMENTOS LIQUIDOS (ZUMOS) Y LIQUIDOS CONSERVANTES.

Autor: CASTRO ROMERO PEDRO.
Año: 1993.
Universidad: A CORUÑA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA ANALITICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA AMBIENTAL.

Resumen: SE HACE UN ESTUDIO SOBRE LOS NIVELES EN SANGRE DE COLESTEROL Y LIPOPROTEINAS EN JOVENES DE LA COMARCA DE FERROL Y SE COMPARAN LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON LOS VALORES HALLADOS EN OTROS ESTUDIOS EN OTRAS ZONAS GEOGRAFICAS TAMBIEN SE ESTUDIAN SUS HABITOS ALIMENTICIOS Y HABITOS SOCIALES QUE AFECTAN A LOS FACTORES DE RIESGO PARA EL DESARROLLO DE UNA ENFERMEDAD CARDIOVASCULAR Y VALORAR LA SITUACION DE ESTE GRUPO DE POBLACION DE JOVENES EN RELACION CON LA POSIBILIDAD DE SUFRIR COMPLICACIONES DERIVADAS DE LA ATEROSCLEROSIS A PARTIR DE LA EDAD ADULTA.

Autor: MARTIN MATA ROSA M..
Año: 1990.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Autor: MARCOS MORENO M. LUISA.
Año: 1987.
Universidad: NACIONAL DE EDUCACION A DISTANCIA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNED..

Resumen: LAS SULFONILUREAS SON AGENTES HIPOGLUCEMIANTES ORALES UTILIZADOS EN EL TRATAMIENTO DE LA DIABETES MELLITUS DE TIPO II, EN LA CUAL NO SE PRECISA, EN GENERAL, DE LA ADMINISTRACION DE INSULINA EXOGENA. EL HECHO DE QUE EL F2, 6P2 SEA EL MAS POTENTE ACTIVADOR CONOCIDO DE LA 6-FOSFOFRUCTO 1-KINASA, ASI COMO INHIBIDOR DE LA FRUCTOSA 1,6 BISFOSFATASA, NOS LLEVO A PENSAR QUE LA ACCION HIPOGLUCEMIANTE DE LAS SULFONILUREAS PODRIA ESTAR MEDIADA POR UNA VARIACION DE LOS NIVELES INTRACELULARES DE ESTE METABOLITO EN EL HIGADO. EL F2, 6P2 SE SINTETIZA EN LA REACCION CATALIZADA POR LA 6-FOSFOFRUCTO 2-KINASA, A PARTIR DE FRUCTOSA 6-FOSFATO Y ATP; SU DEGRADACION ESTA CATALIZADA POR LA FRUCTOSA 2,6 BISFOSFATASA. ESTAS DOS ACTIVIDADES ENZIMATICAS RESIDEN EN UNA UNICA PROTEINA BIFUNCIONAL CON DOS CENTROS ACTIVOS DIFERENTES, QUE PUEDE SER FOSFORILADA POR LA PROTEINA KINASA DEPENDIENTE DE AMP CICLICO, LO QUE PRODUCE UNA DISMINUCION DE LA ACTIVIDAD 6 FOSFOFRUCTO 2 KINASA Y UN AUMENTO DE LA ACTIVIDAD FRUCTOSA 2,6 BISFOSFATASA). EL OBJETIVO DEL PRESENTE TRABAJO SE CENTRO EN EL ESTUDIO DEL MECANISMO POR LO CUAL LA GLIPIZIDA Y LA TOBULTAMIDA, SULFONILUREAS, DISMINUYEN LA PRODUCCION HEPATICA DE GLUCOSA. PARA ELLO NOS PROPUSIMOS ESTUDIAR EL EFECTO DE LA GLIPIZIDA Y DE LA TOBULTAMIDA SOBRE LA GLUCOGENOLISIS BASAL Y SOBRE LA GLUCOLISIS, GLUCONEOGENESIS Y SOBRE LOS NIVELES INTRACELULARES DE F2, 6P2 EN HEPATOCITOS AISLADOS DE RATA Y EN MUSCULO ESQUELETICO.