ANALISIS CROMATOGRAFICO, 2

Autor: RUIZ ÁNGEL M. JOSÉ.
Año: 2002.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUÍMICA .
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: Se presentan una serie de estudios en los que se compara el uso de sistemas cromatográficos de fase inversa micelares y acuo-orgánicos clásicos, para el análisis de varias familias de compuestos de interés en la industria farmacéutica (antidepresivos tricíclicos, beta-bloqueantes, diuréticos, esteroides y sulfonamidas), cuya elución cuando se emplean fases móviles acuo-orgánicas y fases estacionarias alquil-enlazadas convencionales, puede originar serios inconvenientes. Se muestran también tres aplicaciones de la cromatografía líquida micelar (CLM) al control de fármacos en preparados farmacéuticos y muestras de orina. Las investigaciones realizadas se agrupan de la siguiente manera: 1,- Comparación de las capacidades separativas de los sistemas cromatográficos micelares y auco-orgánicos clásicos. 2,- Desarrollo de nuevos procedimientos para la determinación de fármacos. Las investigaciones de tipo fundamental abordan aspectos relacionados con las eficacias y simetrías de los picos cromatográficos, la fueza eluyente, la resolución, la capacidad de "screening" de la CLM y la optimización de las condiciones de separación considerando tanto la composición de la fase móvil como el pH. Se establecen unos principios básicos de selección del disolvente orgánico en las fases micelares basados en la correlación existente entre la retención y la polaridad de los compuestos separados. Se utilizan las mismas herramientas quimiométricas para realizar las comparaciones entre los dos sitemas de fase inversa, micelar y acuo-orgánico. En la bibliografía, no existe antecedente sobre estudios similares. El examen detallado del comportamiento cromatográfico de los compuestos de prueba que poseen una gran diversidad de estructuras, polaridades y comportamiento ácido-base, demuestra que la CLM es una técnica muy competitiva frente a la cromatografía de fase inversa clásica. Como aspectos relevantes presenta su menor toxicidad debido a la importante reducción de disolvente orgánico, las características de retención que evitan la elución en gradiente, su particular sleectividad distinta de la cromatrografía clásica, su versatilidad, la posibilidad de eluir compuestos muy apolares con ayuda de disolventes que se solubilizan gracias a la presencia de las micelas, la mejora espectacular de la forma de los picos de los compuestos básicos que abarata en gran medida su análisis, ya que permite el uso de columnas convencionales, y la posibilidad de inyectar directamente muestras con un elevado contenido en proteínas, como son las muestras fisiológicas. Finalmente, los estudios aplicados se refieren al desarrollo de procedimientos para la determinación de antidepresivos tricíclicos en preparados farmacéuticos empleando fases móviles micelares y acuo-orgánicas, que incluye una comparación de varias fases estacionarias, y la determinación del beta-bloqueante propranolol a través del control de sus metabolitos y del diurético furosemida junto con sus productos de degradación, en muestras de orina y empleando la CLM.

Autor: JAIME CORELLA M. ANGELES.
Año: 2002.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: Se realizan diversos estudios referentes al desarrollo de métodos analíticos basado en el uso de la extracción supercrítica y/o la cromatografía de fluidos supercríticos. En primer lugar, se resumen las propiedades de los fluidos supercríticos que les confieren su interés analítico, así como el tipo de instrumentación a utilizar en estas técnicas y la metodología a seguir, y también se da una breve visión general de sus aplicaciones analíticas en el campo de los productos farmacéuticos. Se estudian los parámetros experimentales de mayor interés en la cromatografía de fluidos supercríticos en el caso de analitos polares, escogiéndose como modelo tresbenzodiazepinas: diazepam, oxazepam y clordiazepóxido, que se utilizan como principios activos en la composición de algunos medicamentos, y demostrando la importancia que tiene su optimización. Se utiliza detector UV. Se propone un método que permite la determinación de vitamina E en productos farmacéuticos y dietéticos, introduciendo las muestras directamente en el extractor de fluidos supercríticos y analizando los extractos obtenidos mediante cromatografía de fluidos supercríticos con detector de ionización de llama. Se propone un método para la determinación de resorcional en productos farmacéuticos mediante extracción supercrítica y análisis de los extractos mediante cromatografía líquida con detector UV. Se propone un método para la determinación de filtros-UV en productos cosméticos para la protección solar, mediante extracción supercrítica y análisis de los extractos mediante cromatografía líquida con detector UV. Durante el desarrollo de la Tesis se ha intentado eliminar o reducir el uso de disolventes orgánicos de elevada toxicidad, en todas las etapas del procedimiento analítico: pretratamiento, separación y determinación, con el fin de que los métodos propuestos fuesen inocuos para el operador y para el medio ambiente. Se han estudiado las características analíticas de los métodos propuestos, que presentan sensibilidad y límites de detección adecuados al problema analítico, y una buena precisión. Se han validado los métodos propuestos mediante la comparación de los resultados obtenidos con los encontrados por la aplicación de otros métodos utilizados como referencia y/o con los valores dados por los fabricantes. Se analiza también la problemática de algunos de los primeros equipos empleados en las técnicas de fluidos supercríticos, y la forma de subsanarla mediante modificaciones en el diseño de los instrumentos.

Autor: MARTÍN GÓMEZ M. TERESA.
Año: 2002.
Universidad: VALLADOLID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: Las premisas actuales de rentabilidad económica facilitan el que la Empresa Farmacéutica moderna emplee en el mayor grado de lo posible las mismas máquinas y áreas de trabajo para la obtención de diferentes formulados. Con el consiguientes riesgos potencial que en las nuevas unidades aprezcan residuos del producto predecesor, produciéndose lo que comúnmente se denominaba contaminación cruzada. Para minimizar este riesgo se recurre a procedimientos de limpieza que aseguren la eliminación de cualquier residuo por debajo de unos límites preestablecidos. Estos procedimientos deber ser validados. En el trabajo se han evaluado las contaminaciones cruzadas que aparecen durante la alternacia en la fabricación de comprimidos de clorhidrato de ranitidina. Para ello se han determinado los residuos del principio activo adherido a superficies de acero inoxidable, vidrio y vinilo, empleando la técnica del doble algodón. Por las diferentes superficies de 20 x 20 cm se pasa de forma vertical y horizontal un vellón del algodón de 0.25 g humedecido con 1 mL.de metanol:agua (50:50), previamente acondicionado lavándolo con metanol y agua y secado a vacío, a continuación se pasa un segundo vellón seco para recoger el disolvente residual. Ambos algodones se introducen en un tubo de muestreo y se añaden de 5 g de mental:agua 1:1, agitándose manualmente durante 1 minuto, 5 minutos en utrasonido y una alícuota se inyecta en el sistema cromatográfico en las siguientes condiciones: columna C18, fase móvil acetato de amonio 0.05 M (pH=6.7); Metanol 40:60, temperatura 25ºC, volumen de inyección 25 uL., y detección a 320 nm. Obteniéndose porcentajes de recuperación de 92.2+-4.8, 85.0+-6.0 y 78.0 +- 7.5 para el acero inoxidable, vidrio y vinilo respectivamente y fijándose como límite de cuantificación en cada una de las superficies de 1 ug y 1.5 ug en el caso del vinilo. Se han establecido condiciones de análisis para muestras de aclarados tras una concentración empleando cartuchos de C18 pasando 1 L volumen de muestra. Se ha validado el procedimiento de limpieza empleado por la empresa GlaxoWellcome tras tomar muestras en diferentes puntos de la línea de producción de las distintas fases que intervienen en la fabricación de comprimidos, encontrándose que el residuo de ranitinida que podría aparecer en el siguiente producto a fabricar no supera nunca el 40% del criterio establecido, que fue 10 ug del contaminante en la máxima dosis terapéutica del contaminado. Se ha evaluado el residuo del principio activo en el aire durante la fabricación comprobándose que se encuentra muy por debajo de los límites establecidos siguiendo la teoría del peor caso.

Autor: GONZÁLEZ URLANGA LORENA.
Año: 2002.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS (LEIOA).

Resumen: En este trabajo de tesis se han desarrollado nuevos métodos analíticos para la determinación de fármacos antihipertensivos, antagonistas de los receptores de la angiotensina II, en fluidos biológicos. Para ello se han estudiado las diferentes variables de los métodos cromatográficos y electroforéticos, con detección fotométrica y fluoresecente. La optimización de los métodos se ha basado en técnicas quimiométricas. Los métodos validados según Guías en Bioanálisis se han aplicado a la determinación de los niveles del fármaco en plasma y orina. Ambas técnicas han resultado ser suficientemente sensibles y específicas para la determinación a estos antagonistas.

Autor: PIÑEIRO IGLESIAS MARÍA.
Año: 2002.
Universidad: A CORUÑA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: La contaminación atmosférica ha recibido una notable atención en los últimos años. El particulado atmosférico y los hidrocarburos son contaminantes emitidos por una gran variedad de fuentes tanto de origen natural como antropogénico. En este trabajo se ha puesto a punto un método de análisis de hidrocarburos (alifáticos y aromáticos policíclicos) en muestras de aire, estudiando cada una de sus etapas.

Autor: CORTÉS DIEGUEZ SANDRA M..
Año: 2002.
Universidad: VIGO.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS DE VIGO.

Resumen: El trabajo se centró en los siguientes objetivos: * Optimización de la destilación en un equipo de arrastre de vapor industrial. * Estudio de la materia prima u orujo: tiempo de fermentación necesario y recipiente más adecuado, condiciones de conservación: pH, grado de anaerobiosis, temperatura, etc. * Estudio de las características del destilado: identificación y cuantificación de los compuestos responsables de las características aromáticas de distintos destilados de orujo y, en particular, los aromas varietales en destilados de Albariño, Godello, Treixadura, Mencía y Catlán Roxo. * Procesos de mejora de las características organolépticas de los destilados: redestilación, afinamiento y dilución. Establecidas las condiciones de destilación, los resultados de los análisis de los destilados reflejaron que el orujo ha de estar poco prensado, conservarse en recipientes pequeños, en ausencia de oxígeno y que la destilación del mismo ha de llevarse a cabo tan pronto como sea posible tras la fermentación alcohólica, observándose una importante pérdida de calidad en el destilado si el tiempo de ensilado del bagazo es superior a un mes. La redestilación es adecuada para la mejora sanitaria y organoléptica de los destilados de malas características, pues con ella se consigue un nuevo fraccionamiento de los compuestos aromáticos. El afinamiento de depósitos de acero, mejora las características de los destilados a partir del quinto mes y su evolucicón es independiente de la temperatura, aunque es importante que el destilado no esté en contacto con oxígeno. La dilución, necesaria para reducir el elevado grado alcohólico de los centros de destilación, supone la eliminación de los ésteres de cadena larga por su insolubilidad lo que, unido a una menor concentración de etanol, mejora considerablemente la apreciación organoléptica de los destilados. La mayoría de los compuestos varietales analizados (terpenoles, norisoprenoides, etc.) se encuentran en concentración superior a su umbral de percepción aportando a los aguardientes de orujo gallegos, aromas afrutados y florales.

Autor: VIÑAS DIEGUEZ LUCIA ELISA.
Año: 2002.
Universidad: VIGO.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS - VIGO.

Resumen: Los Hidrocarburos Aromáticos Policíclicos (HAPs) son compuestos ubicuos en el medio ambiente y aparecen como contaminantes orgánicos en todo tipo de matrices medioambientales. Se ha optimizado un método analítico para su cuantificación en sedimento y biota marinos mediante Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (CLAE). El método analítico consta de extracción, purificación del extracto y etapa de medida en el CLAE con detector de fluorescencia de longitud de onda programable. Finalmente se seleccionaron las diferentes variables de cada una de estas etapas de modo que para la extracción se compararon diversas técnicas, disolventes y tiempos; en cuanto a la fase de purificaicón se contrastaron diferentes técnicas y en la etapa de medida se seleccionaron eluyentes, temperatura de la columna cromatográfica y condiciones del detector. Todo el método fue sometido a un riguroso control de calidad interno y externo, en el que además de análisis de blancos y muestras por duplicado se utilizaron materiales de referencia certificados y se participó en diferentes ejercicios de intercalibración internacionales de manera rutinaria durante los últimos años. Esta técnica se aplicó a muestras de sedimentos y mejillón silvestre de la ría de Vigo y los resultados obtenidos se compararon con los criterios disponibles para identificar áreas de interés potencial para estudios posteriores. Las distribuciones de los diferentes HAPs en los sedimentos fue prácticamente constante en todos los analizados independientemente de las concentraciones totales encontradas y de si se trataba de sedimentos porturarios o no. En cuanto a las distribuciones de HAPs en el tejido de mejillón se pudieron observar variaciones con respecto a la época de muestreo y también a la zona de procedencia del mejillón. Estas variaciones fueron relacionadas con la cantidad de materia en suspensión.

Autor: CAPELLA PEIRÓ M. ELISA.
Año: 2002.
Universidad: JAUME I DE CASTELLON.
Centro de lectura: TECNOLOGÍA Y CIENCIAS EXPERIMENTALES.
Centro de realización: ESCUELA SUPERIOR DE TECNOLOGÍA Y CIENCIAS EXPERIMENTALES.

Autor: MAROTO SÁNCHEZ M. ALICIA.
Año: 2002.
Universidad: ROVIRA I VIRGILI.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA (UNIVERSITAT ROVIRA I VIRGILI).

Resumen: En esta tesis doctoral se han propuesto diversas metodologías para calcular la incertidumbre en métodos analíticos que se utilizan de forma rutinaria en el laboratorio. Estas metodologías están basadas en calcular la incertidumbre globalmente (es decir, agrupando términos de incertidumbre siempre que sea posible) y en utilizar la información obtenida durante el proceso de validación del método. La ventaja de estas metodologías es que pueden aplicarse a todos los métodos analíticos de rutina y que requieren poco trabajo adicional ya que los métodos analíticos siempre deben validarse antes de aplicarlos al análisis de muestras de rutina. En concreto, se han desarrollado metodologías para calcular la incertidumbre a un nivel de concentración y a varios niveles de concentración. En ambos casos, el cálculo de la incertidumbre se ha realizado utilizando fundamentalmente la información obtenida durante la verificación de la trazabilidad de los resultados. Además, también se muestra cómo aprovechar la información obtenida en los estudios de precisión, en los estudios de robustez y en los gráficos de control para calcular la incertidumbre de los resultados. Finalmente, se propone utilizar muestras adicionadas para calcular la variabilidad de las matrices de las muestras de rutina. Por último, en esta tesis doctoral se ha estudiado si la incertidumbre de los resultados está subestimada cuando en la verificación d ela trazabilidad se concluye erróneamente que el método no tiene un sesgo significativo. En estos casos, se ha observado que la incertidumbre de los resultados puede estar muy subestimada cuando la incertidumbre del sesgo contribuye a la incertidumbre total en más de un 3%. Por tanto, es necesario verificar la trazabilidad en los métodos de rutina de forma que la incertidumbre del sesgo no supere el 30% de la incertidumbre total de los resultados. Para ello, es necesario analizar las muestras de referencia al menos 10 veces y utilizar referencias con la menor incertidumbre posible.

Autor: RODRIGUEZ MADRERA ROBERTO.
Año: 2001.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: QUIMICA .
Centro de realización: SERIDA.

Resumen: Se ha estudiado el proceso de elaboracion del aguardiente de sidra mediante el analisis de algunas de las sustancias que influyen en su color, olor y sabor. Estos compuestos estan divididos en tres grupos: volatiles mayoritarios, volatiles minoritarios y derivados fenolicos y furanicos, por lo que ha sido necesario optimizar tres metodos analiticos. El analisis de los compuestos volatiles mayoritarios se realizo por inyeccion directa mediante cromatografia de gases. Los volátiles minoritarios fueron previamente extraidos con freon 113 y a continuacion determinados por cromatografia de gases. Los derivados furanicos y fenolicos se analizaron por HPLC previa concentracion en rotavapor. Para determinar la influencia que tienen los factores tecnologicos estudiados (sistemas destilacion, especie de roble y tiempo de envejecimiento) sobre la composicion quimica de los aguardientes se aplico el analisis de la varianza (ANOVA) y el analisis en componentes principales (ACP). El factor destilacion (alambique charentes frente a columna de rectificacion) influyo significativamente en las concentraciones de los aromas; la destilacion charentes produce destilados con mayor contenido en acetato de etilo, acetal y derivados furanicos (excepto 5-hidroximetilfurfural) debido a los largos tiempos de destilacion empleados, y por el contrario la destilacion con columna produce aguardiantes con mayor contenido en aromas poco solubles en agua (alcoholes superiores, esteres, etc). El factor madera (roble americano frente a roble frances) influyo en la concentracion de los derivados fenolicos y las lactonas del roble; los destilados madurados en roble frances presentaron mayor concentracion de todas estas sustancias excepto la escopoletina y el isomero cis de la lactona del roble. Por otro lado, el mayor tama o de poro del roble frances favorecio una mayor oxidacion del destilado. En cuanto el factor tiempo (32 meses de envejecimiento), destaca por un lado el aumento de los derivados de la madera (compuestos fenólicos y lactonas del roble), formacion de 1,1,3-trietoxipropano y la transesterificacion de acetatos y aumento de acetato de etilo. La aplicación de tecnicas multivariantes sobre matrices de datos formadas por aguardientes de sidra y las 43 variables analiticas estudiadas permitio tipificar los destilados dependiendo de la materia prima (sidra procedente de mosto fresco y procedente de concentrado de manzana) y el tiempo de envejecimiento (destilados jovenes, envejecdos menos de 12 meses, y destilados viejos, envejecidos al menos 12 meses). Ademas, el analisis de regresion multiple permitio establecer ecuaciones de predicion descriptores sensoriales a partir de la composicion quimica.

Autor: PITARCH ARQUIMBAU M. ELENA .
Año: 2001.
Universidad: JAUME I DE CASTELLON.
Centro de lectura: TECNOLOGIA Y CIENCIAS EXPERIMENTALES.
Centro de realización: ESCUELA SUPERIOR DE TECNOLOGIA Y CIENCIAS EXPERIMENTALES.

Resumen: El amplio uso de plaguicidas en zonas agricolas, como el area Mediterranea, hace que la exposición a los mismos suponga un evidente riesgo para la salud, por su demostrada toxicidad. Por esta razón, en este trabajo se han puesto a punto metodos rapidos y eficaces para la determinación de plaguicidas organofosforados y organoclorados en muestras de fluidos biológicos humanos (orina, suero y sangre total). En una primera etapa se desarrollaron métodos tradicionales (microextracción liquido-liquido (LLME) y extracción en fase solido (SPE)) para la determinación multiresidual de plaguicidas en muestras de orina y suero. En segundo lugar, se aplicó la tecnica mas novedosa de microextracción en fase sólida (SPME), la cual permite una mayor simplicidad y un menor tratamiento de muestra. Tambien se analizaron muestras de tejido adiposo humano, las cuales presentan una elevada complejidad por su alto contenido lipidico. HPLC fue la tecnica seleccionada para la etapa de purificación la determinación de compuestos organoclorados en este tipo de matrices. Todos estos metodos unidos con una detección mediante GC-MS o GC-MS/MS, permitieron alcanzar la sensibilidad y la selectividad necesaria para el analisis de muestras reales.

Autor: MARTINEZ PONTEVEDRA JOSE ANGEL.
Año: 2001.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: FACULTADE DE QUIMICA.

Resumen: Este trabajo gira en torno al proceso y metodologia de optimizacion de sistemas de cromatografia liquida de alta resolucion, (HPLC). Esta tecnica cromatografica, aunque nación con unas grandes perpectivas, posiblemente, no ha llegado a desarrollarse con todo el potencial esperado a sus comienzos. Muchas de sus posibilidades, experimentalmente demostradas, permanecen en los libros o en articulos de revistas pero, raramente, son aplicadas de forma rutinaria en el laboratorio, simplemente porque su desarrollo y puesta a punto para nuevos casos concretos resulta compleja o requiere conocimientos y entrenamiento especifico. Por lo tanto, aunque es una tecnica que ha alcanzado su madurez instrumental, sufre limitaciones en el proceso de desarrollo de nuevos metodos. Uno de las causas de esta problemática es el elevado numero de variables que deben ser optimizadas por el cromatografista. En este trabajo, se aborda esta problemática desde la perspectiva de la optimización de las variables que entran en juego para decidir cual sera el gradiente idóneo que permitiria la mejor separación de los componentes que forman una muestra determinada. El estudio se ha llevado a cabo para dos tipos diferentes de gradiantes, atendiendo al número de componentes de la fase móvil utilizada. Asi pues, lograda la modelizacion de los tiempos de retención de un compuesto dado en un gradiente binario (fase movil compuesta por dos disolventes), con splin cubico (natural y filtrante), se empleó un algoritmo genético para detectar el óptimo global dentro de la superficie de respuesta generada por la funcion de evaluación empleada. A su vez, se inició la búsqueda de nuevas funciones objetivo, que pudiesen dar respuesta a ciertas expectativas creadas por los cromatografistas. Estas nuevas funciones objetivo estan mas cerca de la interpretación en conjunto de las variables, frente a las ideas utilizadas hasta el momento, que obligan a trabajar con combinaciones lineales de variables, las cuales no siempre producen el resultado esperado. Una vez resuelto el problema para mezclas binarias de disolventes se inició el proceso de extrapolación de los tiempos de retención de los compuestos. Ello lleva a la busqueda de un metodo para el muestreo de los puntos experimentales que daran las entradas al modelo. Junto a este proceso y muy ligada, se encuentra la selección de un metodo numerico que sea capaz de, con una estrategia que genere el minimo numero posible de datos experimentales, crear un modelo que sea lo suficientemente fiable para predecir los tiempos de retención de cualquier compuesto que forme parte de la mezcla problema, (algoritmo de Shepard). Se adaptó el algoritmo genetico empleado en sistemas binarios para sistemas ternarios (fase movil con tres disolventes). Por último, y una vez logrados los objetivos planteados, se procedió a la integración de todo el proceso descrito en un programa informatico. Este programa ha dado en llamarse PRE-GA. El objetivo de PRE-GA, es tanto aunar las estrategias mencionadas, como dotar de una herramienta facil de utilizar y con un gran potencial al cromatografista que en el laboratorio inicia un proceso de optimizacion. PRE-GA ha sido diseñado cumpliendo con unos requisitos minimos que contemplan: curva de aprendizaje corta para usuarios noveles, facil acceso a las diferentes funciones permitidas por el programa, integracion de todas las conclusiones derivadas de este trabajo, suficientemente abierto como para permitir que un usuario avanzado pueda generar y probar nuevas funciones objetivo, fácil acceso desde otros programas informaticos a los resultados y parametrización de los algoritmos de busqueda.

Autor: MARGOLLES CABRALES INMACULADA.
Año: 2001.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUIMICA.

Resumen: Se ha puesto a punto un método de análisis de ácidos grasos en zumo de manzana y sidra por cromatografia de gases, utilizando para la separación columnas capilares polares y para la cuantificación el detector de ionizacion de llama. El método propuesto incluye la extracción de la fracción lipídica y la derivatización de los ácidos grasos para la obtención de los correspondientes ésteres metílicos. El método optimizado se ha aplicado al análisis de zumos de manzana monovarietales y a sidras pertenecientes a diferentes cosechas. El perfil de ácidos grasos obtenido en ambos casos junto con las técnicas de análisis multivariante (PCA,LDA, Bayes, SIMCA, y PLS) ha permitido, por un lado, la caracterización de zumos de manzana en función su variedad, y por otro, la diferenciación de las sidras en función del origen de la manzana empleada en su elaboración (autóctona o no). Con el fin de establecer las correlaciones existentes entre las propiedades espumantes de la sidra y su composición química, se ha llevado a cabo el análisis de parámetros enológicos clásicos, azúcares, ácidos orgánicos, compuestos volátiles y pectinas, así como un análisis de los atributos sensoriales de espuma más apreciados por los consumidores (comportamiento en vaso) y se midieron, asimismo, la altura y la estabilidad de la espuma. La aplicación de las técnicas de análisis multivariante, correlación canónica y regresión parcial por mínimo cuadrados a los resultados obtenidos ha permitido establecer las correlaciones existentes entre los diferentes componentes de la sidra, en particular en lo referente a sus acidos grados, y sus propiedades espumantes. Por último, se describe un modelo de fermentaciones en condiciones controladas a escala piloto para la elaboración de sidra. Esta tecnología se compara con la convencional en cuanto a su perfil de ácidos grasos. Se ha comprobado que el uso de las técnicas de análisis multivariante y los contenidos en ácidos grasos, permite la diferenciación entre ambos tipos de sidras.

Autor: LANDÍN IGLESIAS PEDRO AMANCIO.
Año: 2001.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: Se han desarrollado metodologías analíticas para la determinación de: * Bifenilos policlorados (PCBs) en matrices acuosas y leche. * La 2,3,7,8-tetracloro-dibenzo-p-dioxina (2,3,7,8-TCDD) en matrices acuosas y * compuestos fenólicos (fenol, clorofenoles, cresoles, xilanoles y clorometilfenoles) en matrices acuosas. Haciendo uso de la Microextracción en Fase Sólida (SPME) acoplada a la cromtografía de gases. Nuestro mayor interés se centró, principalmente, en la optimización de las condiciones experimentales para llevar a cabo la etapa de extracción de los contaminantes citados anteriormente. Los procedimientos de análisis desarrollados, además de poseer buenas características analíticas, son métodos rápidos y sencillos, que no requieren el uso de disolventes (pocos contaminantes), que minimizan la manipulación de la muestra, el contacto entre el operador y los analiticos tóxicos, y reducen los costes del análisis con respecto a los métodos convencionales.

Autor: FERRARELLO CLAUDIO NESTOR.
Año: 2001.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA, UNIVERSIDAD DE OVIEDO.

Resumen: En la presente Tesis Doctoral se llevó a cabo la especiación de proteínas similares a las metalotioneínas (MLPs) en el mejillón Mytilus edulis a niveles basales investigando el potencial de las técnicas híbridas complementarias de separación (SEC, FPLC y RP-HPLC) acopladas a detectores de alta sensibilidad y selectividad (ICP(Q)MS, ICP(DF)MS y ICP (TOF)MS) para evaluar la utilidad de estas proteínas como biomarcadores de la contaminación ambiental por metales pesados. Para ello, el hepatopáncreas de mejillones procedentes de tres regiones costeras en España fueron sometidos a diferentes procesos de separación y determinación del contenido de metales tóxicos (Cd, Hg) y esenciales (Cu y Zn) enlazados a las MLPs. De estos estudios se llegó a la conclusión de que estas proteínas eran inducidas cuando el nivel de metales tóxicos en el ecosistema era elevado. El análisis químico del agua, sedimento y tejido total del animal demostró que aquellos ecosistemas contaminados presentaban un nivel mucho más alto de MLPs en el hepatopáncreas de los mejillones que lo habitan. Por otro lado, se cuantificó el contenido en cadmio unido a MLPs a través de dilución isotópica inversa post-columna acoplada al ICP-MS. Se demostró también el efecto protector del selenio frente a la inducción de MLPs por metales pesados. Y& se establecieron los elementos que se unen a estas proteínas cuando los mejillones fueron expuestos en acuario a 18 elementos químicos. El aspecto más novedoso de esta Tesis Doctoral es la aplicación de varias técnicas de separación complementarias para especiar Cd-MLPs a niveles basales y el uso de esta información como una técnica de alarma para detectar la contaminación real por metales pesados incluso en ecosistemas aparentemente libres de contaminación. Al mismo tiempo, hemos demostrado que el uso de varias técnicas cromatográficas de alta resolución acopladas en línea a un detector sensible multi-isotópico, como el ICP-MS, proporciona una excelente estrategia para llevar a cabo estudios de separación de metales en material biológico.

Autor: ROMERO GONZÁLEZ ROBERTO.
Año: 2001.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: El objetivo de esta Memoria de Doctorado ha sido la validación de la determinación cromatográfica de aminas biógenas, en concreto de triptamina, feniletilamina, putrescina, cadaverina, histamina, tiramina, espermidina y espermina, en muestras de vino, cerveza y malta, previa derivatización con cloruro de dabsilo. Con este enfoque y dentro de lo que se denominó validación característica, se desarrollaron experimentos dirigidos a la reoptimización de las variables implicadas en la reacción de derivatización y separación cromatográfica de los analitos, haciendo uso de las Técnicas Formales de Optimización Multidimensional, con el objeto de mejorar tanto los parámetros de calidad del método como de la resolución cromatográfica. A continuación se procedió a la obtención de estos parámetros de calidad, seleccionando el área de pico como señal instrumental. Además, se realizó un estudio robustez, con objeto de conocer el efecto de las variaciones de las variables experimentales sobre diversas variables respuestas, procediendo a la redifinición de efecto, permitiendo dar una interpretación geométrica del ensayo de robustez al aplicar la Regresión Lineal Múltiple. Dentro de la validación aplicada, se llevaron a cabo estudios centrados en la influencia de la matriz para la obtención de resultados veraces, cuando se aplicó el método en muestras de vino, cerveza, malta y máiz, obteniendo buenos resultados. En relación a la muestras sólidas, y previo a su determinación cromatográfica, fue necesario recurrir a una etapa de extracción sólido-líquido. Mediante la aplicación del análisis multivariante a los resultados obtenidos, se obtuvo información química relevante asociada al proceso de elaboración de los vinos. Además, se estudió la variación en el contenido de aminas biogénas durante el proceso de elaboración de la cerveza, desde la adquisición de la materia prima, hasta la obtención de la cerveza embotellada, comprobando el efecto ejercido por la fermentación y las condiciones higiénicas en las que se produce, sobre el contenido final de aminas. Finalmente, se aplicó la extracción en membrana líquida soportada para la extracción de aminas biógenas en vinos, mostrándose como una alternativa al uso de la extracción líquido-líquido o en fase sólida. Dada la elevada polaridad de las aminas, fue necesario recurrir a la extracción de los analitos mediante la formación de pares iónicos entre las aminas biógenas y el ácido di-2-etilhexilfosfórico.

Autor: ESPINOSA GARCÍA SONIA.
Año: 2001.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAT DE QUÍMICA.

Resumen: En el presente trabajo se ha estudiado la influencia del pH y composición de la fase móvil en la retención cromatográfica de solutos ionizables con el objetivo de establecer un modelo que permita la previsión de la retención de los diferentes analitos que componen una mezcla problema. Las fases móviles estudiadas han sido acetonitrilo/agua y 2,2,2-trifluoroetanol/agua. Se ha estudiado principalmente la influencia del pH, de la composición de la solución amortiguadora i de la fase móvil en la retención cromatográfica de diferentes tipos de sustancias ácidas y básicas (ácidos benzoicos, fenoles, aminas …). Se han establecido ecuaciones que relacionan la retención cromatográfica de estas sustancias ionizables con el pH de la fase móvil medido después de mezclar el tampón acuoso con el modificador orgánico, es decir, siguiendo las recomendaciones de la IUPAC. Este procedimiento proporciona ajustes mucho mejores que los obtenidos con el método habitual en cromatografia de líquidos consistente en medior el pH en el tampón acuoso antes de mezclarlo con el modificador orgánico. Los modelos establecidos predicen la retención de cualquier sustancia a cualquier pH y composición de la fase móvil. Mayoritariamente, los modelos descritos en la bibliografía relacionan la retención únicamente para sustancias neutras con parámetros que describen estas sustancias y con la composición de la fase móvil. Los modelos estudiados se han aplicado fundamentalmente a fases móviles acetonitrilo/agua, aunque también se han caracterizado sistemas cromatográficos con fases móviles, 2,2,2-trifluoroetanol/agua dado que algunos de estos sistemas presentan selectividades muy diferentes de las obtenidas con las fases móviles acetonitrilo/agua y metanol/agua clásicas. Por último, el estudio se ha extendido a la elución en gradiente, estudiándose por un lado, cómo varía el valor de pH de las soluciones amrotiguadoras utilizadas en la elución, y por otro, el pK de los analitos. El interés práctico de este trabajo consiste en que se podrán predecir las mejores condiciones cromatográficas para resolver una mezcla de anlitos mediante HPLC sin necesidad de mucho trabajo experimental previo. Los resultados obtenidos son muy útiles en el desarrollo y optimización de separaciones utilizando la cromatografía de líquidos. Los modelos y ecuaciones establecidos permiten caracterizar la selectividad de los sistemas cromatográficos, así como estimar el pK del analito en una fase móvil particular y el valor de pH de ésta. A partir de estos parámetros y modelos se puede predecir la retención del analito en unas condiciones cromatográficas determinadas (columna y pH y composición de la fase móvil).

Autor: CANALS RIMBAU INMACULADA.
Año: 2001.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAT DE QUÍMICA.

Resumen: La presente tesis ha constatado de los siguientes puntos: 1,- Establecimiento de modelos teóricos que relacionan la retención de ácidos débiles en cromatografía de líquidos de alta resolución en fase invertida (RP-HPLC) en modo isocrático con el pH fuerza iónica de la fase móvil. Debido a que sólo una medida correcta del pH de la fase móvil hidroorgánica conduce a la obtención de resultados satisfactorios, se ha dado un especial énfasis al concepto y medida rigurosa del Ph en mezclas metanol-agua. 2,- Se ha estudiado la variación de las constantes de disociación de ácidos débiles con la composición de metanol presente en la fase móvil. Se ha establecido modelos teóricos que permiten la estimación de valores de estas constantes en agua a partir de los correspondientes valores en mezcla metanol-agua, o viceversa, a partir de expresiones generales propuestas para familias de sustancias. Se ha comprobado la bondad de estos modelos para la predicción de la retención de ácidos débiles en RP-HPLC en modo isocrático. 3,- Se propone un modelo que relaciona la retención de sustancias ionizables en RP-HPLC con el pH, composición y polaridad de la fase móvil. Las predicciones de este modelo concuerdan satisfactoriamente con los valores experimentales. 4,- Se han utilizado las relaciones lineales de energía de solvatación (LSER) para la descripción de la retención con el pH y composición de la fase móvil. Se ha establecido una ecuación global que permite la predicción de la retención de un determinado sistema cromatográfico para cualquier valor de pH y composición de la fase móvil. 5,- Se ha estudiado la variación de la retención de sustancias ionizable con el pH y composición de la fase móvil durante elución en RP-HPLC en modo gradiente. 6,- Se han aplicado los principios elementales del equilibrio químico para la optimización de separaciones en electroforesis capilar de zona (CZE), a partir de pocas determinaciones experimentales previas. Se han estudiado diversos criterios de optimización.

Autor: RIVERO MARABE JOSE JUAN.
Año: 2001.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: El poder identificar inequivocamente el mayor número de metabolitos de cada corticosteroides o esteros de anabolizante, a partir de los guales se pueda demsotrar la utilización d elos mismos, tanto con la necesidad de efectuar esta identificación mediante la metodología más rápida y precisa, es un objetivo continuo en el control analítico del dopaje, convirtiendose este objetivo en prioritario en lo que respecta a realizar investigaciones que permitan poder mejorar y perfeccionar técnicamente la metodología aplicada en el referido control. Tres objetivos principales: - Puesta a punto de métodos analíticos cromtográficos para determinación cuanti y cuali de esteroides anadolizantes y corticosteroides. - Evaluar sobre muestra reales la potencialidad analítica de la metodología aplicada. - Evaluación y determinación de la presencia de esteroides anabolizantes y cortcosteroides en deportistas y personas sedentarias.

Autor: PANIAGUA MARCOS PAULA HENAR.
Año: 2001.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: QUÍMICA .
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS.

Resumen: En este trabajo se han desarrollado procedimientos que permiten simplificar las etapas de tratamiento de muestras previas al análisis cromatográfico, ya que estas etapas (extracción, limpieza y preconcentración), suelen constituir la parte más laboriosa y compleja del análisis multirresiduo de plaguicidas. El trabajo está dividido en tres partes complementarias. En la primera parte se han estudiado las características de la transferencia de viente plaguicidas (organofosforados, triazinas, carbamatos y otros), a través de una membrana homogénea de silicona mediante análisis por inyección en flujo. A partir del comportamiento observado, los pesticidas se dividen en dos clases: los que atraviesan la membrana y los que no la atraviesan en las condiciones de estudio. Puesto que existe esta diferenciación entre los plaguicidas, es posible llevar a cabo estudios quimiométricos de clasificación y predicción de su comportamiento en su paso a través de la membrana, basándose en sus propiedades físico-químicas. Se ha aplicado el Análisis de Agrupamientos, el Análisis Discriminante Lineal y el método de modelado SIMCA. En la segunda parte se ha acoplado la células de extracción a un sistema de cromatografía de líquidos de alta resolución, y se ha puesto a punto un método para determinar los pesticidas que atraviesan la membrana. El procedimiento desarrollado se ha aplicado a la determinación de los pesticidas en huevos, donde se demuestra que la extracción con membrana es efectiva no sólo como etapa de preconcentración sino también como etapa de limpieza en muestras complejas. Finalmente, se ha desarrollado un método para determinar los pesticidas que no atraviesan la membrana mediante Microextracción en Fase Sólida y Cromatografía de Gases acoplada a Espectrometría de Masas. Para la preconcentración se ha utilizado una fibra con recubrimiento de pliacrilato. El método se ha aplicado a la determinación de pesticidas en aguas naturales.