FLUORIMETRIA

Autor: MESEGUER LLORET SUSANA.
Año: 2003.
Universidad: VALENCIA .
Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: La quimioluminiscencia, dadas sus características de sensibilidad, bajo coste y facilidad de automatización, puede beneficiar considerablemente al análisis de compuestos orgánicos e inorgánicos en muestras ambientales. En esta Tesis se contribuye a: - Mejorar el análisis de screening de aminas alifáticas en muestras de agua de diferente naturaleza y disminuir sus límites de detección: Para ello, se propone la preconcentración y derivatización de aminas en soporte sólido y posterior HPLC, procedimiento que se ha logrado automatizar completamente. Con la detección quimioluminiscente, los límites de detección mejoraron respecto a los establecidos con detección UV-vis o fluorescente o con otros reactivos utilizados en la bibliografía. - Disminuir los límites de detección de amonio en aguas e incrementar la exactitud de su determinación: Inicialmente se propone un método fluorimétrico selectivo basado en la reacción del amonio con el reactivo OPA-NAC, comparando los resultados con el método de referencia de Nessler y el método del electrodo selectivo; para finalizar con la detección QL del amonio derivatizado en disolución con cloruro de dansilo y HPLC. - Conocimiento de los métodos de screening de muestras: Se propone un método QL automático capaz de discriminar entre muestras que contienen Cu(II) por encima o por debajo del nivel establecido por la legislación (50 ppb). - Mejorar la exactitud en la determinación de iones metálicos controlando los errores sistemáticos y la especiación de Cr(III) y Cr(VI): Utilizando la reacción del luminol se profundizó en la exactitud en la determinación de Cr(III) y Cr(VI), se estudió la influencia de los protocolos de acondicionamiento de muestras en la señal QL y se aplicó la calibración multivariada a la determinación simultánea de Cr y Co. - Estudiar el Nitrógeno Orgánico Disuelto: Mediante el método de OPA/NAC se estudió la determinación simultánea de amonio y grupos amino primario. El método QL permitió la estimación del Nitrógeno orgánico amino (-CH2-NH-) y amoniacal.

Autor: ALEXANDRE FRANCO M. FRANCISCA.
Año: 2002.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En esta tesis se han llevado a cabo estudios encaminados al desarrollo de procedimientos analíticos para el requirimiento de diferentes compuestos cuya determinación en alimentos grasos resulta de interés. Así, el enranciamiento, uno de los problemas de estos alimentos y causa de deterioro de los mismos, es evitado por la presencia de antioxidantes, bien naturales o sintéticos, en concreto de tocoferoles. Se han desarrollado métodos para analizar dichos compuestos, basados en el carácter reductor de los mismos, y por tanto en las señales que se obtienen en su oxidación electroquímica en electrodos de carbón unificado haciendo uno además de técncias de análisis multivariante para la determinación de mezclas de tales compuestos. Por otro lado uno de los alimentos grasos cuya producción resulta de mayor interés en nuestra región, y con mayores beneficios saludables es el aceite de oliva. Su producción requiere un caso creciente de productos fitosanitarios para optimizar el cutlivo de la aceituna. Entre estos, en los nuevos olivares de regadío es muy necesaria la utilización de lbermicidas, cuyos residuos pueden pesar a la cadena alimentaria, sobre todo a través de las agua de riego. Por ello, se han propuesto métodos analíticos para el control de dichos residuos, en concreto de Dicnat y glifoseto. Y por último se examina la utilidad de diferentes parámetros analíticos cuya oblinción es habitual en aceites, en nuestro caso, aceites procedentes de aceituna manzanilla-cacereña, para la tipificación de la procedencia de estos.

Autor: ÁLVAREZ DE CIENFUEGOS GÁLVEZ PEDRO.
Año: 2002.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En la presente Tesis se han establecido diferentes estratégias para el desarrollo de nuévos métodos rápidos de análisis químico empleando sensores ópticos de un solo uso, también llamados tiras reactivas, para determinar tanto calcio como magnesio así como conseguir la determinación simultánea de ambos, basadas en la medida de absorción de radiación visible por transmisión. Se ha establecido una metodología basada en el empleo de agente complejantes convencionales para la determinación de calcio empleando como reactivo clorofosfonza III inmovilizado como par iónico sobre un soporte inerte formando una zona sensora de PVC y empleando Tributilfosfato como plastificante. El tiempo de respuesta es de 15 min., y el intervalo lineal se encuentra entre 0,8 y 3,1 MG/L. Se ha desarrollado otra metodología que pretende disminuir el tiempo de respuesta y aumentar el rango de aplicabilidad, basada en el empleo de ionóforos. En concreto, estas tiras reactivas se basan en el intercambio iónico entre una membrana polimérica plastificada y la disolución que contiene el analito. La zona sensora esta depositada sobre una tira de plástico formando una membrana circular de 6 mm de diámetro compuesta por un polímero, cloruro de polivinilo, que contiene un plastificante, que es el responsable de la permeabilidad de la membrana, un ionóforo selectivo, que responde de forma exclusiva al ión d einterés, un cromoionófor, que en todos los casos es el azul nilo lipofilizado, que es selectivo a la concentración de protones del medio de esta forma tdoas las tiras desarrolladas presenta una idéntica propiedad analítica, aunque son selectivas para cada especie, posibilitando así el empleo de instrumentación específica, y una sal lipofílica, que nos asegur la electroneutralidad en la zona sensora. Cuando una tira con estas características se introduce dentro de una disolución de analito, se dan dos reacciones simultáneamente, por una parte el ionóforo retiene al analito y por otra el cromoionofóro libera protones y como consecuencia cambia su estructura y su color. Este intercambio viene regido por un modelo matemático que se ha desarrollado en esta tesis. De esta forma se ha preparado una tira reactiva reversible para la determinación de la actividad en cálcio donde el ionóforo empleado es el eter 18-corona-6, que se encuentra disponible comercialmente. El tiempo de respuesta del sensor es de 300 S, el intervalo lineal se encuentra entre 0,046 y 134 mM (en actividades). Se ha puesto a punto una tira reactiva reversible para la determinación de cálcio basado en un nuevo ionóforo neutro sintetizado en esta memoria, el 4,13-[bis(N-adamatilcarbamoil)propinoil]-1,7,10,16-tetraoxa-4,13-diazaciclooctadecano. El tiempo de respuesta del sensor es de 200 S, el intervalo lineal se encuentra entre 0,050 y 135 MM (en actividades). Esta tira reactiva es más selectiva que la anterior. Se ha preparado una tira reactiva reversible para la determinación de magnesio empleando el ionóforo N,N'-dimetil-aspartamida, sintetizado en el laboratorio. En este caso el tiempo de respuesta del sensor es de 200 S, el intervalo lineal se encuentra entre 0,009 y 160 mM (en actividades). Usando un sistema ionóforo-cromoionóforo, se ha desarrollado una tira reactiva reversible que responde de forma idéntica y simultánea a la actividad de calcio y magnesio, esto es dureza, empleando como ionóforo 4,13-[bis(n-adamatilcarbamoil)acetil]-1,7,10,16-tetraoxa-4,13-iazacicloocta decano, sintetizado por nosotros. El tiempo de respuesta del sensor es de 200 S, el intervalo lineal se encuentra entre 1,9 y 14.800 MG/L de CaCO3 (en actividades). Se ha aplicado las tiras reactivas desarrolladas a la determinación de calcio en muestras de agua de grifo; pozo, mineral; fuente y de mar y muestras de leche tanto entera como desnatada: a la determinación de magnesio en muestras de agua de grifo; mineral y de pozo. A la determinación de dureza en muestras de agua de grifo; mar; pozo; fuente y mineral, sin necesidad de tratamiento previo de las muestras en ningún caso, salvo dilución y adición de disolución reguladora del pH. Los resultados han sido validados mediante métodos de referencia, obteniéndose resultados satisfactorios para los casos estudiados. En todos los casos, el coste de los sensores de un solo uso desarrollados está en torno a 0,10 euros y el tiempo de vida se encuentra alrededor de un mes y medio. Las tiras reactivas desarrolladas ofrecen una buena alternativa para su empleo en la determinación de los iones estudiados en diversos tipos de muestras, dada su sensibilidad, simplicidad de uso, rapidez y bajo costo.

Autor: FERNÁNDEZ SÁNCHEZ JORGE FERNANDO .
Año: 2002.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS - UNIVERSIDAD DE GRANADA.

Resumen: En la presente Tesis Doctoral se ha llevado a cabo el desarrollo de sensores químicos rápidos, fiables y sencillos, que permiten monitorizar la concentración de una especie o de un grupo de compuestos de forma selectiva, continua y a tiempo real. Entre otras ventajas, los sensores fluorescentes desarrollados proporcionan, además, metodologías analíticas que pueden ser utilizadas en campos tan variados y complejos como son el análisis clínico, el control ambiental y/o de los procesos industriales, para así poder evaluar una determinada especie en fluidos biológicos, el impacto ambiental o la calidad de los productos, respectivamente, proporcionando una herramienta muy útil para el análisis de rutina. La presente Tesis Doctoral se divide en dos apartados: el desarrollo de optosensores fluorescentes para la determinación selectiva de una determinada especie (monoparamétricos) y el desarrollo de optosensores fluorescentes para la determinación conjunta de analitos de una misma familia química (multiparamétricos). Así se han desarrollado cuatro optosensores monoparamétricos convencional y dos de fibra óptica para la determinación de nafronil, naproxeno y propranolol en fármacos y muestras de orina humana y de benzo[a]pireno en muestras de agua de consumo humano. Además se han desarrollado tres optosensores multiparamétricos: uno convencionales, otro de fibra óptica con un detector multicanal y un tercero que hace uso de redes neuronales para el tratamiento de la señales analíticas. Estos tres optosensores se han utilizado para la determinación conjunta de cuatro de los dieciséis hidrocarburos aromáticos policíclicos establecidos como los más relevantes por la agencia de Protección Medioambiental Americana (EPA) (antraceno, benzo[a]pireno, fluoranteno y benzo[b[fluoranteno) en muestras de agua de consumo humano. Para el desarrollo de los optosensores tanto monoparamétricos como para los multiparamétricos se ha hecho uso de todas las herramientas disponibles para la obtención de dispositivos miniaturizables y automatizables, para lo cual se ha llevado a cabo un desarrollo instrumental y se han empleado sistemas de inteligencia artificial en la resolución de mezclas. Todo este trabajo investigador ha concluido que los sensores químicos y en concreto que los optosensores desarrollados en la presente Tesis Doctoral son una potente herramienta en campos tan variados como la Química Analítica Clínica (análisis de principios activos en fluidos biológicos), en el control ambiental (análisis de hidrocarburos aromáticos policíclicos en aguas de consumo humano) y en el control industrial (análisis de principios activos en preparados farmacéuticos).

Autor: GONZÁLEZ TOLEDO ENCARNACIÓN.
Año: 2002.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAT DE QUÍMICA.

Resumen: El trabajo desarrollado en esta Tesis Doctoral ha consistido en el desarrrollo de metodología analítica para la determinación de compuestos organometálicos de estaño (OT), concretamente los mono-, di- y trifenil- y butilestaños, en muestras ambientales. Para ello se han desarrollado métodos de análisis basados en la separación por cromatografía de líquidos con detección fluorimétrica. La separación de los OT se ha estudiado, por un lado, en modalidad de cromatografía de líquidos de intercambio iónico, con columnas de base sílice y base polimérica, con fases móviles consistentes en mezclas de metanol-agua, conteniendo un agente complejante, como el ácido málico. Por otro lado, la separación también se ha estudiado en modalidad de fase invertida, sobre una columna de octadecilsilano con fases móviles consistentes en mezclas de metanol-ácido acético-agua conteniendo ácido oxálico y trietilamina. Dado que los OT no presentan fluorescencia intrínseca, para poder detectarlos ha sido necesaria la formación de un derivado fluorescente mediante la reacción con derivados de la 3-hidroxiflavona, concretamente la morina y la fisetina. El sistema de derivatización en modo post-columna se ha basado en el uso de dos soluciones derivatizantes, una basada en morina, para la detección de mono- y di-OT, y otra basada en fisetina, para la detección de tri-OT. El sistema de determinación propuesto se ha aplicado al análisis de estas especies en muestras ambientales, tales como tejidos de liofilizado de ostra y aguas naturales. La extracción de los analitos en el material de ostra se ha llevado a cabo mediante el uso de acetato de etilo. El análisis de este material ha requerido el desarrollo de un método de clean-up basado en extracción en fase sólida con el fin de hacer compatible el sistema de extracción con el sistema de cromatográfico establecido anteriormente. Las recuperaciones del método propuesto se han evaluado en muestras de ostra dopadas. Para el análisis de aguas se han propuesto métodos basados en la extracción en fase sólida en cartuchos de octadecilsilano, en modo off-line y en modo on-line con el sistema cromatográfico. Las recuperaciones se han evaluado en muestras de agua de mar y de río de diferente procedencia y en todos los casos son elevadas. Los límites de detección se sitúan en el orden de pocos ng1-1, lo que pone de manifiesto la idoneidad del método para el análisis ambiental. La determinación de tributil- y trifenilestaño también se ha estudiado mediante cromatografía de líquidos con detección por espectrometría de masas con ionización por electrospray. La aplicación de este método al análisis de aguas de mar y de río utilizando sistemas de extracción en fase sólida proporciona límites de detección lo suficientemente bajos, lo que permite el análisis de estas especies a los niveles ambientales.

Autor: LUIS LUIS M. LUZ.
Año: 2002.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: La memoria aplica la calibración univariada y multivariante a la determinación simultánea de varios principios activos en mezclas. Los principios activos estudiados pertenecen a las familias de los antihipertensivos y antiepilépticos. En el capítulo primero se presentan las características físico-químicas y farmacológicas más importantes de los principios activos objeto de estudio, así como, su acción en el organismo. El segundo capítulo está dedicado a los fundamentos teóricos de los distintos métodos de calibración que se utilizarán en los capítulos siguientes y que permitirán llevar a cabo las multideterminaciones. En el tercer capítulo se aborda la resolución de las diferentes mezclas binarias estudiadas: dihidralazina-hidroclorotiazida, clortalidona-espironolactona y fenitoína-fenobarbital, aplicando calibración univaridad: métodos del "cruce por cero" y "espectros cocientes derivados" y, calibración multivariante: regresión lineal múltiple (MLR) y regresión en mínimos cuadrados parciales (PLS). En el capítulo cuarto se hace uso de la calibración multivariante para la resolución y cuantificación de las mezclas ternarias dihidralazina-hidroclorotiazida-reserpina y clortalidona-espironolactona-reserpina, resolviéndose la primera por regresión lineal múltiple y por mínimos cuadrados parciales. La mezcla clortalidona-espironolactona-reserpina se resuelve por regresión por mínimos cuadrados parciales. La capacidad predictora de los diferentes métodos de calibración desarrollados en los capítulos anteriores se evalúa mediante el cálculo de los parámetros estimativos del error cometido en las determinaciones, el error estándar de la predicción (RSE), el error relativo medio de la predicción (RMSE) y la suma de los cuadrados del error residual de predicción (PRESS). Los métodos desarollados se aplican con buenos resultados a la determinación de los principios activos en mezclas sintéticas y en preparados farmacéuticos, y se validan por cromatografía líquida. En el capítulo quinto se ponen de manifiesto el alto potencial que muestra de la combinación de la espectrofluorimétrica sincrónica con la calibración multivariante a través de los resultados obtenidos en la determinación de furosemida y triamtereno en preparados farmacéuticos y de triamtereno en orina. Finalmente, en el sexto capítulo se aborda la separación y determinación por calibración univariada de clortalidona, furosemida, hidroclorotiazida y triamtereno mediante cromatrografía micelar electrocinética (MECK) y la de fenitoína y fenobarbital por electroforesis capilar de zona (CZE), respectivamente. Las metodologías establecidas permiten identificar y cuantificar estos analitos en un tiempo de análisis cercano a los cuatro minutos. Los métodos se aplicaron a la determinación de estos principios activos en preparados farmacéuticos.

Autor: GARCÍA BAUTISTA JOSE ANTONIO.
Año: 2002.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUÍMICA .
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS.

Resumen: El objetivo de esta tesis es el empleo de reactores en fase sólida y fotorreactores. Para ello se estudia la inmovilización de diversos reactivos sólidos sobre resinas de poliester y de cobre metal de forma natural. Estos reactores se emplean en el primer trabajo para la determinación de metamizol mediante un método espectofotómetrico catalítico indirecto. Aquí el reactor de dióxido de plomo actúa como fuente de reactivo catalítico al liberar plomo (II) que cataliza la reacción de oxidación entre el rojo de pirogalol y el persulfato potásico, la disminución de absorbancia producida sirve para cuantificar el metamizol. También se emplea un reactor de cobre metal como catalizador heterogéneo de la reacción de descomposición del peróxido y permite el uso del agua oxigenada como reactivo en flujo continuo.Para eliminar la gran cantidad de burbujas generadas se empleo un desburbujeador. Este montaje optimizado se uso para la determinación de iproniacida e isoniacida por fluorimetría, obteniéndose un método extraordinariamente sensible. Se emplea un fotorreactor para la fotodegradación de los nitrocompuestos mediante biamperometría. Los nitrocompuestos liberan nitritos después de la fotólisis, estos reaccionan con el yoduro formando triyoduro. Estas dos formas del par redox reversible provocan una intensidad del corriente que se determina en la celda biamperométrica. Se consigue un método muy sensible y selectivo al usar un exceso de reductor en la detección biamerométrica. Además permite la determinación de diversos nitrocompuestos.

Autor: SEGARRA GUERRERO RAMÓN ONOFRE.
Año: 2002.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS.

Resumen: Se han desarrollado tres nuevos métodos FIA para la determinación de muestras de interés farmacéutico y medioambiental. Los analitos estudiados fueron diazepam, los aniones nitritos y nitratos, y el amarillo de acridina. En el caso del diazepam, se utilizó un fotorreactor con posterior determinación fluorimétrica. La fotodegradación del fármaco ocurría en medio hidroalcohólico/NaOH y en presencia de Cu(II) como catalizador. Los nitritos eran determinados espectrofotométricamente por su reacción con el proflavin en medio HCl, y se utilizó una cámara de mezclado para favorecer la reacción. El estudio se amplió a la determinación de nitratos, previa reducción de los mismos a nitritos mediante el empleo de una columna de Cd-cuperizado. El amarillo de acridina se determinó por quimioluminiscencia directa, la cual se obtenía utilizando el oxidante fuerte permanganato potásico en medio ácido sulfúrico. El intervalo de aplicación fue de 0.5 a 40 ppm para el diazepam, de 0 a 100 ppm para el amarillo de acridina, de 0.06 a 4 ppm para el anión nitrito y dos intervalos para nitratos, de 0.1 a 25 ppm (caudal 3.0 ml/min a través de la columna de Cd-Cu) y de 0.075 a 10 ppm (caudal 0.3 ml/min a través de la columna). Los límites de detección fueron 0.13 ppm para el diazepam, 0.06 ppm para nitritos, 0.075 ppm para nitratos y 5 ppb para el amarillo de acridina. Las velocidades de inyección obtenidas fueron 10 h-1 para el diazepam, 60 h-1 para el amarillo de acridina, 37 h-1 para nitritos y 68 h-1 ó 24 h-1 (empleando el caudal alto a bajo a través de la columna de Cd-Cu) para nitratos. Los tres nuevos métodos analíticos se aplicaron satisfactoriamente al análisis por inyección en flujo de distintas muestras reales. El diazepam se determinó en muestras de interés ambiental: aguas residuales y de mar, así como el amarillo de acridina que fue determinado en muestras de aguas residuales dopadas.

Autor: BALLESTEROS GARCIA OSCAR.
Año: 2001.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAD CIENCIAS(UNIV. GRANADA).

Resumen: Las quinolonas son antimicrobianos sinteticos ampliamente utilizados en medicina humana y veterinaria. Estos compuestos poseen unas caracteristicas estructurales que hacen que la resistencia de las bacterias a la misma sea reducido, sin embargo el amplio uso que de ellos se realiza en veterinaria puede propiciar que los residuos de los mismos se incorporen a la cadena alimentaria, y por tanto, facilitar los fenomenos de resistencia bacteriana. Por estas razones, el uso de la mayoria de estos compuestos esta regulado por diferentes organismos tanto nacionales como internacionales, y la necesidad de su control se ha convertido en una prioridad para la salud humana. El objetivo de esta memoria es el desarrollo de metodologia analitica de buenas caracteristicas (sensibilidad y selectividad) para la identificacion y determinacion de tres quinolonas de primera generacion y ocho de segunda generacion en fluidos biologicos. Para ello, se ha seleccionado la espectrofluorimetria en fase solida y la cromatografia de liquidos acoplada con espectrometria de masas y deteccion UV como tecnicas analiticas para la identificacion y determinacion de estas quinolonas. El trabajo comenzo con el empleo de la espectrofluorimetria en fase solida para la determinacion individual de norfloxacina, ofloxacina y ciprofloxacina en orina y suero humano, y para la determinacion de enrofloxacina en suero de perro. Se utilizo la cromatografia de liquidos para la determinacion de quinolonas, asi como para su identificacion, en fluidos biologicos utilizado para ello un detector UV y un espectrometro de masas. Como consecuencia de esta investigacion se han publicado ocho trabajos en revistas cientificas internacionales.

Autor: ARMAS BERMÚDEZ GRACIELA DE.
Año: 2001.
Universidad: ISLAS BALEARES.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En este trabajo se han desarrollado técnicas en flujo con detección fluorimétrica para la determinación de parámetros de interés ambiental, como iones metálicos y pesticidas. Mediante Análisis por Inyección Secuencial (SIA) se han puesto a punto sendos métodos de para las determinaciones de aluminio y magnesio en medio micelar, basados en la formación de los correspondientes complejos con el ácido 8-hidroxiquinoleín-5-sulfónico en presencia del tensoactivo cloruro de hexadeciltrimetilamonio. Por otra parte se ha estudiado el comportamiento individual de los pesticidas carbarilo, fuberidazol, tiabendazol y warfarina en un sistema SIA al variar el pH y con la presencia de tensoactivos. Empleando la fluorescencia de ángulo variable para la detección y la técnica multicomponente de Regresión Lineal Múltiple para el procesamiento de los datos, ha sido posible la resolución de mezclas de los cuatro compuestos. Se ha desarrollado un sistema de Análisis por Inyección en Flujo Multijeringa (MSFIA) basado en el tiempo para la determinación de aluminio en aguas de bebida. Con este método se han logrado una elevada frecuencia de muestreo y un bajo consumo de reactivos. También por MSFIA se ha desarrollado un método para la determinación de warfarina, que incluye la extracción y preconcentración automáticas del compuesto de interés. La metodología se ha aplicado a la determinación de este pesticida en diferentes tipos de aguas, incluidas las de bebida, y es capaz de verificar el nivel de tolerancia establecido en la legislación vigente.

Autor: HERNÁNDEZ ARTESEROS JOSÉ ALBERTO.
Año: 2001.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: QUÍMICA .
Centro de realización: FACULTAT DE QUÍMICA.

Resumen: La presente tesis doctoral tiene por objetivo global el desarrollo de métodos de análisis para la determinación de residuos de antibacterianos de uso veterinario de la familia de las quinolonas, en muestras de tejidos animales destinados a consumo humano. Con el fin de proteger el consumidor, la Unión Europea (UE) ha propuesto unos valores de límite máximo de residuos (LMR) para los medicamentos veterinarios, que es la máxima concentración de un medicamento que puede encontrarse en un alimento destinado a consumo humano para que no suponga un riesgo para la salud del consumidor. Por esto es de interés disponer de métodos de análisis que permitan la determinación de residuos de estas substancias en alimentos. En una primera etapa se ha realizado una revisión bibliográfica exhaustiva hasta el año 2000 sobre la determinación de quinolonas en alimentos. Puesto que la UE ha propuesto un LMR para la suma de erofloxacina y su metabolito ciprofloxacina, se ha puesto a punto un método para su determinación conjunta por luminiscencia sensibilizada de terbio en un medio micelar de laurilsulfato sódico. También se ha estudiado un sistema de extracción compatible con la determinación que utiliza diclorometano como agente extractante. Este método se ha aplicado al análisis de muestras dopadas de músculo de salmón y trucha. Con la intención de tener un método de análisis multiresiduos de quinolonas, se ha desarrollado un método basado en la cromatografía de líquidos con detección fluorimétrica para determinar siete piperacinilquinolonas: ciprofloxacina, danofloxacina, difloxacina, erofloxacina, marbofloxacina, norfloxacina y sarafloxacina. La optimización de la fase móvil se ha realizado mediante un diseño factorial de Doehlert. El sistema de tratamiento de muestras anteriormente desarrollado se ha modificado y se ha optimizado para ser aplicable a todos los analitos. Se han analizado muestras de músculo de polo, de cerdo y de salmón, adopadas a niveles de concentración alrededor del límite máximo de residuo. A continuación, con la intención de participar en una campaña de certificación de un material de referencia para ácido oxolínico y flumequina en músculo de salmón, se ha puesto a punto un método de análisis para ambas quinolonas. Se ha optimizado un sistema cromatográfico adecuado para separar estos analitos y se ha adaptado y simplificado el sistema de tratamiento de muestra. Los resultados obtenidos al aplicar el método a muestras de músculo de cerdo, pllo y salmón han sido excelentes. Este hecho lo confirma la participación en la compañía de certificación, en la que nuestros resultados han sido siempre aceptados. Finalmente, se ha propuesto el uso de la fluorescencia de barrido rápido como sistema de análisis confirmatorio alternativo al detector de diodos en serie, ya que es mucho más sensible y selectivo que éste. Con él se ha confirmado la presencia de ácido oxolínico y flumequina en tejidos animales.

Autor: FERNÁNDEZ PÉREZ VIRGINIA M..
Año: 2001.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: El contenido de la Tesis Doctoral, orientada al tratamiento de muestras sólidas, se ha estructurado en dos bloques principales A,- Aplicaciones metodológicas B,- Aplicaciones tecnológicas En cada caso uno de estos bloques se ha llevado a cabo la puesta a punto de métodos tanto a muestras de origen medioambiental como de naturaleza alimentaria. Los métodos desarrollados están fundamentados en el uso de modalidades de lixiviación asistidas por energías auxiliares, bien uso de lixiviantes a elevadas temperaturas y presiones adecuadas para mantenerlos en estado líquido o bien la asistencia de los procesos de lixiviación con energía microondas. Las aplicaciones metodológicas en el área medioambiental versaron sobre la lixiviación de colesterol en alimentos sólidos y la obtención del aceite esencial de laurel, usando en ambos casos agua sobrecalentada como agente lixiviante. La determinación posterior de los analitos se llevó a cabo por fotometría mediante una reacción enzimática en el caso del colesterol y cromatografía de gases/espectrometría de masas en el caso del aceite esencial. En lo que se refiere a las aplicaciones metodológicas en el área medioambiental, fueron dos las investigaciones llevadas a cabo, en primer lugar la lixiviación de trazas metálicas en carbón mediante el uso de agua acidificada asistida por elevadas temperaturas y presiones adecuadas o mediante microondas. En ambos casos la determinación fue por fluorescencia atómica. La segunda aplicación en esta área fue la extracción/preconcentración y determinación de PAHs en suelos fortificados mediante el uso de agua sobrecalentada modificada con un surfactante. Las aplicaciones tecnológicas en las áreas alimentarias y medioambiental consistieron en la fabricación de una sopa comercial a partir de subproductos de la industria del jamón curado y la demetalización de aceites industriales usados para su aprovechamiento, respectivamente. En ambos casos la modalidad de lixiviación utilizada fue la que hace uso de agua sobrecalentada, desarrollándose además un proceso de extracción asistido por microondas en el caso de la desmetalización.

Autor: TORIJAS MÍNGUEZ M. CARMEN.
Año: 2000.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS - UNIVERSIDAD DE MÁLAGA.

Resumen: En esta memoria se ha profundizado en los métodos luminiscentes de análisis, empleando la fluorescencia y la quimioluminiscencia como técnicas de trabajo. Se han planteado y desarrollado métodos para resolver problemas analíticos mediante técnicas avanzadas de fluorescencia. Se ha establecido una nueva metodología basada en parámetros no concentracionales como la polarización de fluorescencia, para resolver mezclas binarias. Además, se ha aplciado la reacción quimioluminiscente del sistema luniol/HRP/peródicos de hidrógeno acoplándolo a otras reacciones enzimáticas mediante un sistema de transferencia de energía. Por último se han desarrollado biosensores basados en el sistema quimiolumniniscente luminol1/HRP/peróxido de hidrógeno para la determinación de compuestos de interés.

Autor: FENOLL SERRANO JOSÉ .
Año: 2000.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICAS (UNIVERSIDAD DE MURCIA).

Resumen: Se introducen nuevos métodos analíticos aplicando las técnicas de inyección flujo y de flujo detenido con detección luminiscente para la determinación de diferenes especies de interés biológico y ambiental. Se ha propuesto la determinación del herbicida paraquat formando en un sistema de flujo un compuesto de transferencia de carga con benzaldehído de características fluorescentes que aporta una elevada sensibilidad al procedimiento. La introducción de medios micelares ha hecho posible el desarrollo de un método FI-fluorimétrico para determinar la flavona hesperidina. Así mismo la metodología FI ha dado excelentes resultados en los procesos catalizados. Uno de ellos es la reacción de oxidación del rojo de metilo por el dicromato catalizada pro el oxalato. Este proceso muy rápido, en el que se genera Cr(III), se puede acoplar con la quimioluminiscencia del luminol alcanzando gran sensibilidad, lo que permite la determinación de oxalato en orina y vegetales. La otra reacción catalítica es la oxidación del amarillo de acridina por el bormato catalizada pro el formaldehido, en la que se sigue la evolución de la fluorescencia del colorante y que se ha utilizado para analizar formaldehído en muestras de leche y aire. Otra parte de la Memoria dedicada a la técnica cinética de flujo detenido de indudables ventjas cuando se estudian reacciones rápidas. Con esta técnica se ha abordado la determinación de los pesticidas diqueat y etilentiourea. Para evaluar diquat se ha formado su monocatión radical fuorescente reduciendo con ditionito, mientras que para la etileniourea se ha seguido en flujo detenido su oxidación con Ce(IV), siendo el Ce(III) formado la especie indicadora. Estos métodos se han aplicado al análisis de estos pesticidas en aguas, suelos y productos vegetales. El flujo detenido ha dado excelentes resultados en la determinación de ácido ascórbico mediante la formación de una quinoxalina fluorescente con o-fenilendiamina, sin necesidad de adicionar reactivo oxidante gracias a la técnica empleada.La bondad del método ha sido confirmada con análisis de vitamina C en diversas matrices. Buenos resultados se han encontrado también en la determinación fluorescente de proteínas totales en suero sanguíneo, siguiendo por flujo detenido la formación de un complejo de transferencia de carga entre las proteínas y la rosa bengala. Finalmente, se ha investigado la resolución de mezclas de analitos pro flujo detenido y detección quimioluminiscente, obteniéndose escelentes resultados en la evaluación conjunta de los monosacáridos glucosa y fructosa y de los ácidos pirúvicos y cítricos. Los monosacáridos producen emisión quimioluminiscente con la lucigenina a diferente velocidad, mientras que priruvatoy citrato provocan quimioluminiscencia con el sistema rutenio (II)-trisbipiridilo-Ce(IV).

Autor: PINILLA CALDERON M. JOSÉ.
Año: 2000.
Universidad: CASTILLA-LA MANCHA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS.

Resumen: Se constata la utilidad de la electroforesis capilar electrocinética micelar en la separación y determinación de benzodiazepinas en productos famacéuticos con resultados satisfactorios que permiten proponer esta técnica como alternatia en la laboratorios famacéuticos de control de calidad. La modificación del electrolito por adición conjunta de sales biliares y almidón permite la separación de los enantiómeros de lorazepam al eliminar, en las condiciones propuestas en esta Memoria, el proceso de enantiomerización. Sin embargo, no ha sido posible evitar la enatiomerización en el caso del lormetazepam. El solapamiento de la señal que se produce en los electroferogramas, como consecuencia de la enantiomerización, puede resolverse a través de la primera derivada, si bien sería necesario conocer, previamente, la respuesta electroforética del racémcio. Se simplifaica y disminuye el tiempo de análisis de benzodiazepians en suero, utilizando medios organizados, que permiten la inyección directa de suero en el sistema electeroforético. Igualmente, las muestras de orina pueden inyectarse directamente. Sin embargo, por razones de sensibilidad, es necesario realizar una etapa previa de concentración de las benzodiazepinas. La utilización de capilares con una celda de detección en forma de burbuja permite disminuir sensiblemente los límites de detección de las benzodiazepinas, sin pérdida significativa de resolución. Asimismo, la utilización de un electroferograma, obtenido como la suma de varios a diferentes longitudes de onda, permite disminuir el ruido de fondo exaltando la relación señal-ruido. La aplicación conjunta de ambos métodos proporciona límites de cuantificación adecuados y de intéres clínico y forense.

Autor: MATAIX LECHUGA EVA M..
Año: 2000.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS. DPTO. Q. ANALITICA Y ECOLOGIA.

Resumen: Se han propuesto metodos semiautomaticos para la multideterminacion de parametros enologicos facilmente automatizables, con bajo coste, rapidos y que, en la mayoria de los casos, mejoran la sensibilidad y precision con respecto a los metodos oficiales, para su implantacion en laboratorios de bodega para una futura automatizacion de los analisis que comunmente se llevan a cabo en ella. Las tecnicas analiticas utilizadas a lo largo de la investigacion se adecuan a los problemas concretos de cada analito. Las configuraciones diseñadas son sencillas y los detectores simples y baratos para que implantacion de estos metodos no suponga un fuerte desembolso a la bodega. La tecnica de inyeccion en flujo ha sido el denominador comun de todos los metodos. Con un sistema basico de inyeccion en flujo se consigue la determinacion de parametros globales en vinos como los polifenoles totales y solidos solubles, parameros que determinan familias de compuestos que conjuntamente confieren al vino unas caracteristicas determinadas. Con el acoplamiento de la tecnica de inyeccion en flujo y la pervaporacion se han puesto a punto metodos para la separacion de una especie volatil una no volatil, como la determinacion de etanol y glicerol, y la de la de acidez volatil y total, y la separcion de dos especies volatiles, como la determinacion de dioxido de carbono. Debido a los numerosos compuestos volatiles existentes en vinos, la tecnica de pervaporacion se acoplo a la cromatografia gaseosa como alternativa al espacio de cabeza dinamico o purga y atrapamiento. En este caso se aplico a la determinacion de acetaldehido, acetato de etilo, metanol y etanol. Para la separacion de analitos no volatiles la tecnica de inyeccion en flujo se acoplo a otras tecnicas de separacion como la dialisis y extraccion en fase solida. Tambien la tecnica de inyeccion en flujo se ha acoplado a la dialisis para desarrollar un metodo para la determinacion de los acidos malico y lactico tanto con deteccion fotometrica como fluorimetrica para que sea la bodega quien elija el tipo de deteccion que mas se adecue a sus necesidades.

Autor: DELGADO REYES FLORENTINA.
Año: 2000.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: El contenido de la tesis doctoral se ha estructurado en tres partes distribuidas de las siguientes forma: I) Biosensores y sistemas biosensores en flujo simples. En la que se han utilizado las modalidades de confluencia de zonas y de flujo interrumpido para el diseño de un sistema biosensor para la monitorizacion de la actividad pectinestarasa (PE). Tambien se ha desarrollado un biosensor fluorimétrico para la monitorización de sustratos de enzimas oxidasas en los que el producto de la reaccion se retiene en el paso optico del detector, lo qu permite la monitorización in situ de la evolución de la reacción enzimatica. Se ha desarrollado, asímismo, un sistema biosensor para la determinación de biotina o biotin-derivados basado en la integración de un reactor de avidina y el desarrollo de la reacción de competición entre los analitos biotin derivados y un trazador constituido or biotina-peroxidasa. II) Sistemas biosensores en flujo basados en la integración de la pervaporacion analitica y la derivatización enzimática. Se han propuesto diferentes sistemas biosensores en flujo para la monitorización de sustratos enzimáticos, pesticidas y actividades enzimáticas, en los que se ha incorporado la pervaporación analitica como tecnica de separación continua no cromatográfica que separa a los ingredientes volátiles. Se han propuesto: a) un método para la monitorización de etanol durante el desarrollo de la fermentación alcohólica, b) dos métodos para la determinación de pesticidas organofosforados (diclorvos y metrifonato) en muestras líquidas y solidas y c) un metodo para la determinacion de la actividad PE en alimentos procesdos. III) Sistemas inmunosensores en flujo basados en la interaccion estreptavidina-biotina. En esta tercera parte se han desarrollado tres sistemas inmunosensores en flujo basados en el acoplamiento de la reacción antigeno-anticuerpo con union estreptavidina-biotina para llevar a cabo: a) el anclaje de alguno de los ingredientes de la reacción de inmunoensayo(determinación de TCP) o b) para conseguir inmunocomplejos de mayor tamaño molecular (determinación de TCP y determinación de anticueros monoconales anti-IgG canina).

Autor: AMADOR HERNANDEZ JUDITH.
Año: 1999.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: Esta memoría se divide en tres bloques: Parte A: Nuevas aplicaciones en espectometría luminiscente. En esta parte se incluye un método de "Screening" y determinación semicuantitativa de PAHs mediante fi-fluorimetría inducida por láser y quimiometría, así como un método para la determinación en continuo de cloroquina en plasma tras su reacción fotoquímica y detección fluorimétrica ambas inducidas por láser. Parte B: nuevas aplicaciones enespectrometría de lente térmica, en esta sección se realiza la determinación de beta caroteno en flujo mediante espectrometría de lente térmica con láseres pulsados en condiciones de presión atmosférica y alta, así como se propone la monitorización de lalixiviación con fluidos supecríticos mediatne la espectrometría de lente termica en la región visible y del infrarrojo cercano, utilizando como fuentes de excitación láseres pulsados. Parte C: Nuevas aplicaciones en espectrometría de emisión y atómica, en este apartado se presenta la caracterización en profundidad y superficie de un electrodo impreso en capas mediante l aespecetrometría de emisión atómica inducida por láser y reconocimiento de pautas. También se presenta a la aplicación de la regresión por minimos cuadrados parciales para la solución de problemas en el análisis de metales preciosos mediante la espectrometría de emisión atómica inducida por láser, y la caracterización de piezas de joyeria mediante espectrometria de emisión atómica inducida por láser. En la sección de anexos se presenta dos trabajos de revisión bibliográfica concernientes a la detección en línea de la extracción con fluidos supercríticos, así la aplicación de la pervaporación en el análisis de alimentos

Autor: AGUILAR CABALLOS M. DE LA PAZ.
Año: 1999.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: Se han establecido diversos métodos automáticos para la determinación de componentes básicos, aditivos , adulterantes y contaminantes en alimentos en los que se utilizan diversas estrategias alternativas a la separación física de los analitos, que les confieren el grado de selectividad adecuado y la rapidez necesaria en análisis de rutina. Así se ha propuesto un método para la determinación de casínas, dentro de los componentes básicos, que permite la realización de medidas cinéticas a largas longitudes de onda. Asimismo, se han desarrollado métodos de determinación de aditivos en alimentos; para la determianción simultánea de ácido benzoico y sacarina y butilhidroxianisol (BHA) y galateo de propilo (GP). En el primer caso, se utiliza la luminiscencia sensibilizada del terbio (III) y el diferente comportamiento cinético de ambos aditivos frente al ion lantánido, aplicando un método matemático para la resolución de la mezcla. Para BHA y GP se proponen dos métodos automáticos mediante el uso de dos sistemas de multidetección diferentes: fotométrico de diodos en fila y uno fluorimétrico con óptica en T. El interés de la determinación de una hormona, la progesterona, justifica la utilización del inmunoensayo de tiempo resuelto, junto con el formato de reactivos secos, para facilitar su aplicación a la detección de fraudes alimentarios. Para la determinación de contaminantes en alimentos, se desarrollan dos métodos de inmunoensayo homogéneo para los plaguicidas ácidos 2,4-diclorofenoxiacético y 2,4, 5-triclorofenosiacético utilizando fluoresceína y violeta de cresilo, como marcadores y las medidas de velocidad de reacción como parámetro analítico. Se describe también un método para la determinación de lasalocid basada en la luminiscencia sensibilizada del terbio (III). La utilidad práctica de los métodos propuestos se muestra mediante los resulstados obtenidos con su aplicación al ánalisis de diferentes alimentos o muestras relacionadas con ellos.

Autor: GOMEZ LAGUNA M. ALEJANDRA.
Año: 1999.
Universidad: CASTILLA-LA MANCHA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS.

Resumen: El trabajo expuesto en esta Memoria consta de tres apartados claramente diferenciados,pero con una relacion entre ellos que la constituye la utilización de tecnicas fluorimétricas aplicadas a la determinación de vitaminas. En una primera parte, se aplican las tecnicas fluorimétricas más modernas (fluorescencia sincrónica por isipotenciales de la matriz) que permiten establecer nuevos metodos de determinación de algunas formas activas de la vitamina B6 en fluidos biologicos (piridoxamina en orina y piridoxal en suero), evitando la fluorescencia que estas matrices presentan de forma natural en la zona ultravioleta, sin necesidad de realizar separaciones previas ni reacciones de derivatización. Por otro lado, y considerando las dificultades que entraña las determinaciones fluorimétricas expuestas en la bibliografia para la menadiona, se estudia la reduccion de esta vitamina en diferentes medios y con distintos reactivos, para desarrollar nuevos métodos de determinación fluorimétricos que mejoren la sensibilidad y la selectividad de los propuestos, aprovechando las características intrinsecas de la fluorimetria. Dadas las dimensiones y las caracteristicas hidrofóbica de la menadiona, se propone un metodo de determinacion fluorimétrica por formación de un complejo de inclusión con b-ciclodextrina, estableciéndose su estequiometría y el valor de la constante de equilibrio. Por último, se conoce que la calibración multivariante por regresión por mínimos cuadrados parciales puede mejorar la determinación simultánea de compuestos fluorescentes con espectros solapados. Por primera vez, se utilizan las ventajas de estos metodos quimiométricos combinándolas con las de la fluorescencia sincrónica de angulo variable no lineal, utilizando espectros obtenidos con trayectorias continuas y derivables en un cierto intervalo de longitudes de onda, para la resolución de una mezcla de tres derivados de la vitamina B6 y para la resolución de una mezcla de tocoferol, piridoxina y riboflavina.