POLIPEPTIDOS Y PROTEINAS

Autor: MARTINEL PEDEMONTE MARC.
Año: 2003.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA.

Resumen: Dada la importancia del reconocimiento de superficies proteicas, este trabajo de tesis doctoral se ha dirigido a la utilización de ligandos peptídicos para el reconocimiento de superficies proteicas ricas en carboxilatos. En concreto, como diana, se ha escogido el dominio de tetramerización de la proteína supresora de tumores p53. La p53 es una importante diana en la investigación contra el cáncer dado su papel clave en el control de la integridad del ADN. Así pues, los ligandos que puedan modular su función, poseen un importante potencial como agentes terapéuticos. En una primera etapa, se ha puesto a punto la metodología necesaria para poder obtener, mediante expresión en cultivos bacterianos, el dominio de tetramerización de la p53 con o sin marca isotópica de 13C y/o 15N. Posteriormente, mediante herramientas de modelado molecular se ha diseñado un péptido (Ac-AGAAGWARGRARSR-NH2) el cual es capaz de reconocer la superficie rica en carboxilatos de la p53. La interacción se ha estudiado mediante resonancia magnética nuclear, resonancia de plasmón superficial (Biacore), espectroscopia de fluoresencia y microcalorimetria, encontrándose una constante de afinidad del orden de 10 micromolar. Además, se ha comprobado que el péptido es capaz de cruzar la membrana celular. A partir de este péptido, se ha diseñado y preparado una quimioteca de 40 péptidos que ha permitido entender cuales son los factores que gobiernan este proceso de reconocimiento, y ha pretendido obtener 4 péptidos con una afinidad hasta un orden de magnitud superior. Finalmente, se han obtenido anticuerpos dirigidos a dos regiones distintas del dominio de tetramerización de la p53.

Autor: JORGE CERRUDO INMACULADA.
Año: 2002.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRÓNOMOS.
Centro de realización: E.T.S.I.A.M..

Resumen: Las Fusariosis Vasculares causadas por diversas formas especiales de Fusarium oxysporum constituyen enfermedades de gran interés agronómico, dado su amplísima distribución a nivel mundial y el alto número de especies vegetales de importancia económica que las padecen. Por ello, es lógico que estas enfermedades hayan sido objeto de numerosos estudios no sólo fitopatológicos sino también fisiológicos, bioquímicos y genéticos. Pese a lo anterior, los mecanismos de patogenicidad y resistencia que operan en estos sistemas siguen siendo bastante desconocidos y el control de muchas Fusariosis Vasculares constituyen aún en la actualidad un problema serio. En cuanto al garbanzo, la Fusariosis Vascular causada por F.oxysporum f.sp.ciceris (Foc) es considerada una de las principales enfermedades de este cultivo a nivel mundial, al que infringe pérdidas anuales de producción del 10-15%, pero que, incluso, pueden llegar a ser del 100% en determinadas condiciones. Con respecto a los mecanismos de patogenicidad de los hongos vasculares, la producción de enzimas degradativos de pared celular vegetal (EDPCV), especialmente enzimas pectolíticos (poligalacturonasas [PG] y pectato liasas [PL]) y xilanasas (XIL), han suscitado el mayor interés. No obstante, pese a las evidencias de la implicación de estos enzimas en la patogénesis de las Fusariosis Vasculares y otras enfermedades fúngicas de plantas, las modernas aproximaciones intentando anular la patogenicidad mediante el bloqueo de genes estructurales de algunos de estos enzimas no han dado resultados positivos. Sein embargo, el hecho de que a nivel molecular estos EDPCV no se hayan confirmado como factores de patogenicidad no implica que pueden totalmente descartados como tales. Esto es así, debido a la gran diversidad de isoformas enzimáticas y su expresión diferencial en diferentes condiciones, que hace muy difícil la supresión completa de una determinada actividad EDPCV por anulación de un número discreto de genes codificantes. Los estudios sobre producción de EDPCV en la Fusariosis Vasculares, se han centrado fundamentalmente en F.oxysporum f.sp.lycopersici, el agente que causa dicha enfermedad en tomate. Myy poco o nada se ha estudiado sobre los enzimas producidos pro otras de las al menos 35 formas especiales fitopatógenas conocidas de F.oxysprum. En lo referente a F.oxysporum f.sp.ciceris estudiso anteriores de nuestro laboratorio establecieron que presenta una compleja dotación isoenzimática de actividades PG y PL, la cual resultó ser diferente cuando se compararon los isoenzimas expresados in vitro por dos razas de F.o.cieris de distinta virulencia, la 0 y la 5. El presente trabajo se planteó con el objetivo general de estudiar la posible existencia de diferencias raciales en F.oxysporum f.sp.ciceris respecto a la expresión de enzimas degradativos de la pared celular y de proteínas extracelulares asociadas. F.oxysporum f.sp.ciceris produjo distintos grupos de proteínas extracelulares in vitro, en presencia de distintas fuentes de carbono (pectina, xilano, preparados de pared celular de garbanzo ó raíces de plantas de garbanzo). El análisis de la expresión de proteínas extracelulares de F.oxysporum mediante la técnica de electroforesis bidimensional resultó ser una herramienta útil a la hora de encontrar marcadores bioquímicos que pudieran diferenciar distintas razas de F.o.ciceris y/o distintos aislados de F.oxysporum. Se han identificado ocho proteínas nuevas presentes en Foc-5 y cinco proteínas nuevas en Foc-0, que no aparecían en Fo 90105. Las razas 0 y 5 de F.oxysporum f.sp.ciceris produjeron actividad xilanasa extracelular cuando se cultivaron con pared celular de garbanzo o xilano como únicas fuentes de carbono, aunque con el primer sustrato ésta fue mayor y alcanzó antes su valor máximo. La producción de xilanasa de desarrolló de manera similar en los cultivos de ambas razas. El patrón isoenzimático de xilanasas producidas por Foc-5 y Foc-0 fue parecido para ambas razas aunque dependió de la fuente de carbono, encontrándose fracciones básicas, neutras y ácidas en los medios con xilano y sólo las dos primeras en los medios con pared celular de garbanzo, Una endo-beta-1,4-xilanasa, común en todos los cultivos, se ha purificado en esa tesis, presentando características similares a las xilanasas de la familia 11. F.oxysporum fue capaz de producir extracelularmente actividades poligalacturonasa y pectato lisa cuando se cultivó con pectina única fuente de carbono. Las razas 0 y 5 de F.o.ciceris produjeron, respectivamente, los niveles más altos de PG y PL mientras que el aislado no patogénico Fo 90105 produjo altos valores de actividad PG y muy bajos de PL. Por cromatografía de filtración molecular se ha evidenciado la presencia de tres isoformas PG (42,7, 51 y 63,5 kDa) y cuatro PL (30,3, 34,4, 38,6 y 46,9 kDa), con claro predominio, entre las primeras, del isoenzima de mayor Mr, que es una exo-PG, y, entre las segundas, de las tres con valores inferiores de Mr, que son endo-PLs. Los perfiles de izoenzimas presentaron ciertas variaciones cualitativas y cuantitativas entre los distintos aislados (razas Foc-5 y Foc-0 y Fo 90105). Las razas 0 y 5 de F.oxysporum f.sp.ciceris se produjeron extracelularmente actividades PG y PL (detectadas en el medio líquido de inoculación, raíz y tallo), CMC (detectada en medio de inoculación y raíz) y XIL (detectada en raíz), durante la interación compatible con garganzo (cv.susceptible P-2245). El nivel de inducción de dichos enzimas, así como el curso temporal y la coordinación espacial de dicha inducción, parecen carácterísticas distintivas de los síndromes de Marchitez Vascular y de Amarillez Vascular. Existió una correlación lineal positiva significativa, salvo excepciones, entre la producción de PG, PL, XIL y CMC y el avance de la enfermedad. El aumento de la cantidad de enfermedad, expresado por el Área Bajo la Curva de Progreso del Índice de Intensidad de Enfermedad Estandarizada (ABCPIIEE), influyó sobre la inducción de las actividades PG, PL, XIL y CMC, ajustándose a un modelo exponencial. Sin embargo, la extensión de este efecto estuvo influenciada tanto por la virulencia de la raza del patógeno como por la zona de la planta donde se analizaron estas actividades F.oxysporum f.sp.ciceris presentó una dotación isoenzimática de actividades pectolíticas in planta diferente, aunque más simple (una isoenzima de PG: 42,7 kDa; dos isoenzimas de PL; 30,3 y 38,6 kDa), que la expresada in vitro, con pectina como única fuente de carbono.

Autor: LÓRENZ FONFRÍA VÍCTOR A. .
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: El transportador ADP/ATP (Anc2) es una proteína de membrana localizada en la membrana interna mitocondrial, y cuya funicón fisiológica es el intercambio del ATP mitocondrial por ADP citosólico. Se estudió el transportador ADP/ATP de la levadura S.cerevisiae (Anc2) inhibiendo con carboxiatractilósido (Anc2*c-atr), tanto solubilizado en el detergente docecilmaltósido como reconstituido en liposomas de fosfatidil colina/ácido fosfatídico. Mediante el análisis de espectros de infrarrojo de proteínas, obtenidos sin radiación polarizada y con radiación polarizada, se puede obtener información sobre su estructura, orientación. Los espectros obtenidos en presencia de D2O permiten determinar la accesibilidad al disolvente. Estos análisis requieren , entre otros, la aplicación de métodos de estrechamiento y de ajuste de bandas, especialmente necesarios para la obtención de información estructural. Se revisaron y ampliaron tres métodos de estrechamiento de bandas basados en la desconvolución: la desconvolución de Fourier, la desconvolución regularizada (lineal y por máxima entropía) y la desconvolución de Fourier combinada con predicción lineal. Asimismo se caracterizó el ejuste de bandas desconvuladas por Fourier. El estudio del Anc2*c-atr en su forma reconstituida reveló un 40% de hélices, 15% de láminas beta, 30% de giros y 15% de estructuras irregulares. El 40% de hélices es coherente en seis hélices transmembrana. La orientación de éstas hélices respecto a la normal de la membrana se determinó en 34-40ºC. El nivel de intercambio hidrógeno/deuterio obtenido fue comparable con el publicado para otros transportadores de moléculas hidrofóbicas, y bastante superior al de los canales.

Autor: MAJO ROCA M. ANTONIA.
Año: 2002.
Universidad: POLITECNICA DE CATALUÑA.
Centro de lectura: INGENIEROS INDUSTRIALES.
Centro de realización: ETSEIB.

Resumen: Cada día está más difundido el uso de los polímeros, por ello este trabajo tiene como objetivo la síntesis, caracterización y degradación de poliamidas. Para el presente trabajo se ha partido de dos compuestos naturales la L-lisina y el ácido tartárico L o D. En el capítulo V se ha preparado las poliamidas ar-PLLT y ar-PLLT, sr-PLLT y sr-PLLT ir-PLLT e ir-PLLT-. La regicidad de cada tipo está determinada por la selección de los monómeros que se emplean en cada caso. En el Capítulo VI las poliamidas PDK-LL y PDK-DL. De cada uno de las poliamidas sintetizados se han evaluado sus características químicas y físicas, como son el peso molecular, la solubilidad, las propiedades ópticas, etc. La estructuta se confirmó por espectroscopía de infrarrojo y resonancia magnética nuclear, así com por análisis elemental, y se observaron las diferencias esperadas según la constitución de cada poliamida. Sus propiedades térmicas se han estudiado por calorimetría diferencial de barrido, observándose los cambios térmicos. Su resistencia térmica se siguió por termogravimetría. El tamaño molecular de las politartaramidas se ha evaluado por cromatrografía de permeabilidad en gel y viscosimetría llegando a pesos moleculares del orden de 50.000 g/mol. Las poliamidas ar-PLLT y ar-PLDT, así como PDK-LL y PDK-DL, son solubles en agua, las demás son insolubles en ácido tartárico. Mediante RMN se ha determinado que las poliamidas ar-PLLT y ar-PLDT tienen un 62% de sr-PLLT o sr-PLLT y un 34% de ir-PLLT e ir-PLLT. En los ensayos de calorimetría diferencial de barrido de las poliamidas ar-PLLT y ar-PLLT, sr-PLLT y sr-PLLT ir-PLLT e ir-PLLT se detectan temperaturas de transición vítrea de alrededor vítrea de alrededor de 100ºC. En los termogramas se pone de manifiesto una endoterma donde hay un incremento de la entalpía en función del tiempo de templado. Dicho dato contrastado con los diagramas de difracción de rayos X sugiere la presencia de fases parcialmente ordenadas. En ningún caso se ha observado fases cristalinas. Todas las poliamidas presentan dos etapas de descomposición térmica, evaluadas por termogravimetría. La primer de ellas es la descomposición del ácido di-O-metil tartárico y la segunda el resto del polímero. En el capítulo VII se ha realizado la degradación hidrolítica de la poliamida ar-PLLT a pH 7.0, y con tres solutos distintos, uno con poliamida, un segundo poliamida y tensioactivo aniónico y un tercero, poliamida con tensioactivo catiónico. Para controlar la cinética de la reacción se modificará la temperatura del medio y la degradación se seguirá por medida de los pesos moleculares de las poliamidas que se degradan. El estudio de degradación hidrolítica de la poliamida ar-PLLT muestra un aumento aparente del peso molecular con el tiempo, para luego disminuir. Ello es explicable por una degradación en dos partes. La primera la hidrólisis del grupo éster lateral, lo que lleva a un polielectrolito, de propiedades en disolución particulares. La segunda es la rotura de la cadena del polímero. Esta conclusión se basa en los datos de cromatografía de permeabilidad en gel y espectroscopía de resonancia magnética nuclear.

Autor: LÓPEZ DEBER PILAR.
Año: 2001.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA .

Resumen: PARTE I Se describe el diseño, síntesis y caracterización de una ligasa peptídica cuya actividad está regulada por la información genética almacenada en secuencias específicas de Ácidos Peptídicos Nucleicos (PNAs). Este sistema ligasa regulado por PNAs consiste en una doble hélice peptídica unida a una doble hélice PNA-PNA. La ligación entre los fragmentos peptídicos es catalizada debido al incremento de su concentración efectiva cuando están unidos al complejo péptido-PNA T.PNA através de hidrógeno e interacciones hidrofóbicas. La introducción de mutaciones en la superficie de reconocimiento electrostática de la doble hélice produce una mejora en las eficiencias catalíticas de los catalizadores combinados T.PNA, y disminuyendo a la vez, el carácter helicoidal y la capacidad de actuar como "template" del patrón T por si solo. El establecimiento de las interacciones características de estos sistemas ligasa ha sido estudiado mediante técnicas de UV y CD, determinándose la estabilidad de la estructura de las especies reactivas mediante estudios de desnaturalización. Asimismo, se han realizado controles con sistemas modificados en la parte PNA para determinar la importancia de la contribución de las interacciones especificas entre pares de bases nucleicas en la catálisis. Por útlimo se han estudiado diseños alternativos como un sistema homólogo regulado por una interacción DNA-PNA, un sistema ligasa con un duplex PNA-PNA totalmente antiparalelo, un sistema análogo autorreplicante y la introducción de una catálisis de grupo funcional en el sitio activo del sistema ligasa. PARTE II Se ha desarrollado una nueva metodología para la síntesis de aminoácidos N-arilalquilados, que consiste en la alquilación selectiva en el enlace amida con el grupo propargilo, seguida del acoplamiento de Sonogashira/Castro-Stephans con haluros de arilo apropiados y finalmente, de la reducción completa del triple enlace mediante hidrogenación catalítica. Para ello se han puesto a punto las condiciones para este acoplamiento efectivo mediante le uso de Pd/C, CuI, K2CO3 y diferentes ligandos en una mezcla DME/H2O, obteniéndose los correspondientes Boc-N-arilpropargilaminoácidos en rendimientos de moderados a alto. Asimismo se han establecido las condiciones experimentales óptimas para la reparación, tanto en fase sólida como en disolución, de péptidos con N-propargilaminoácidos en su secuencia. A su vez, se ha conseguido funcionalizar con éxito péptidos de diversa longitud y naturaleza con anillos de piridina, mediante reacciones de acoplamiento de Sonogashira en disolución acuosa.

Autor: GAVIRA GALLARDO JOSE ANTONIO.
Año: 1999.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: En esta memoria se aborda distintos problemas de la cristalización de proteínas desde un punto de vista metodológico. En primer lugar se demuestra que las técnicas contradifusivas de crecimiento de cristales (en medios gelificados, medios capilares o en condiciones de microgravedad) son las más eficientes para realizar un amplio barrido de condiciones de cristalización en una única expriencia. A partir del acoplamiento entre la precipitación de las proteínas (teoría clásica de cristalización) y el transporte de masa en un medio difusivo (leyes de Fick) se explica la evolución espacio-temporal del sistema como consecuencia de una onda de sobresaturación que recorre la cámara de precipitación. Esta metodología nos ha permitido relacionar por primera vez la calidad de los cristales, tanto limite de resolución como mosaicidad, con la sobresaturación y su variación en el espacio con el tiempo. Por otra parte se demuestra que, escogidas unas condiciones iniciales adecuadas, las técnicas contradifusivas produden los cristales de mayor calidad como se deduce de los datos de difracción de cristales de lisozima (Eng Heg White Lysozyme) crecidos en condiciones de microgravedad y en un medio gelificado con agarosa. En ambos casos el límite de resolución de los cristales es inferior a 1 A. El segundo problema de los cristales de proteínas es su alta labilidad relacionada con el elevado contenido en agua (30-80%). Para evitar las dificultades inherente a estas características se propone el reemplazamiento parcial del agua por fibras de sílice, un material fuertemente higroscópico. Por una parte se demuestra que es posible crecer cristales de proteínas en un medio con hasta un 22% v/v del gel de sílice. Por otra parte se comprueba que los cristales de proteínas incorporan todo la sílice de su entorno durante el crecimiento. Los cristales así obtenidos participan de las características físicas y químicas de ambos componentes. El reforzamiento mecánico e hídrico de los cristales permite manipularlos con facilidad sin perdida de su integridad y difractarlos cubiertos de una fina película de pegamento o aceite sin necesidad de mantener un ambiente hidratado. El uso conjunto de geles de sílice y de las técnicas contradifusivas de crecimiento de cristales nos ha permitido obtener cristales de elevada calidad (la máxima en el caso de thaumatina) poniendo de manifiesto que la incorporación del gel en la estructura del cristal no disminuye la calidad de los mismos. Por último se demuestra que la aplicación de un campo magnético de 7T de intensidad durante la cristalización de lisozima; orienta el 100% de los cristales en ausencia de sedimentación y aumenta el número y tamaño de los cristlaes. Este efecto indica un aumento de la sobresaturación aparente del medio y es dependiente de la sobresaturación inicial del sistema.#

Autor: GONZALEZ NAVARRO HERMINIA.
Año: 1997.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: 030 A BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: En el trabajo se ha profundizado en el mecanismo de activación de lipasas fúngicas utilizándose moléculas de naturaleza anfipática. Se ha demostrado que éstas son capaces de activar las lipasas a concentración submicelar, proponiéndose un modelo de activación en el que se generan estados conformacionales más activos. Por otro lado se ha explorado la estrategia de atrapamiento de confórmeros en presencia de interfases en lipasas de diferente origen. Se ha demostrado la generación durante la estrategia de formas conformacionales más abiertas, que son capaces de llevar las reacciones ensayadas con mayores velocidades de reacción. Las lipasas activadas son capaces de llevar a cabo la reacción con mejoras en la actividad enzimática de hasta tres órdenes de magnitud con respecto a las lipasas no activadas, observándose además cambios en la selectividad de sustrato. Con la aplicación de la estrategia se superan las dificultades que presentan las bio- transformaciones de interés biotecnológico llevadas a cabo en medios no convencionales.

Autor: HERNANDEZ PINZON TOSCANO INMACULADA.
Año: 1997.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA, BROMATOLOGIA Y TOXICOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA, TOXICOLOGIA Y CIENCIA Y TECNOLOGIA DE LOS ALIMENTOS.

Resumen: Del estudio del proceso de microfiltracion tangencial a alta velocidad (MFTAV) para la recuperacion de estreptoquinasa (SK) a partir de caldos de fermentacion se deduce que, a lo largo del transcurso del mismo, la actividad SK se va concentrando en el retenido, recuperandose en el permeado al final del proceso tan solo el 53 % de la actividad de partida y suponiendo una perdida global en el balance de recuperacion del orden del 13 %. En cuanto a la retencion de actividad por la membrana de microfiltracion, ha sido justificada por mecanismos de agregacion de proteinas que originan moleculas de mayor tamaño que se van concentrando en el retenido. Por otro lado, la perdida de actividad SK registrada ha sido explicada por desnaturalizacion de la enzima como consecuencia de las fuerzas de cizalla actuando sobre las moleculas durante el proceso de MFTAV, la cual debe estar originando moleculas SK total o parcialmente inactivas. Tal desnaturalizacion permite explicar ademas, la agregacion de proteinas observada en el proceso. A pesar de las limitaciones asociadas a la MFTAV, dicho proceso garantiza una recuperacion ventajosa de actividad SK frente a procedimientos convencionales de clarificacion de caldos de fermentacion.

Autor: TELLEZ SANZ RAMIRO .
Año: 1997.
Universidad: ALMERIA.
Centro de lectura: CIENCIAS EXPERIMENTALES.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA FISICA, BIOQUIMICA Y QUIM. INORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: AGROQUIMICA AVANZADA.

Resumen: Se ha realizado la caracterización termodinámica mediante estudios de equilibrio en diálisis y calorimetría de dos sistemas de interés desde el punto de vista farmacológico. Así, se ha visto que la timidalato sintasa natural y el mutante N229D une dos moles de dCMP. Ambos sitios en la enzima son iguales e independientes. La enzima natural muestra menos afinidad por el dCMP que la mutante. La unión está dirigida tanto entropicamente como entalpicamente. El valor de ACp sugiere que se produzcan cambios en las superficies polares y apolares expuestas al disolvente tras la unión. Se ha estudiado también la unión de lisinoprilo a la forma holo y apo de la enzima conversora de angiotensina. La unión a la forma apo parece ser típica de la existencia de dos sitios iguales e independientes en el monómero. La forma holo presenta mucha más afinidad por el lisinoprilo que la forma apo a todas las temperaturas estudiadas. El responsable es el cambio favorable de la entropía generado por la interacción de algún grupo negativo del lisinoprilo con el átomo de Cinc de la forma holo, presumiblemente de naturaleza electrostática.

Autor: CABEZAS HERRERA JUAN.
Año: 1993.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR -A- PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: LAS PREPARACIONES DEL TEJIDO MUSCULAR DE LOS RATONES NORMALES Y DISTROFICOS CONTIENEN UNA CANTIDAD APRECIABLE DE ACTIVIDAD ACETILCOLINESTERASA (ACHE), QUE EN EL MUSCULO DISTROFICO SE EXTRAE CON MAS FACILIDAD. EL MUSCULO DE LOS RATONES DISTROFICOS SE CARACTERIZA POR UNA PERDIDA IMPORTANTE DE LA FORMA TETRAMERICA GLOBULAR Y POR UN AUMENTO DE LAS FORMAS ASIMETRICAS Y GLOBULARES LIGERAS. TODAS LAS FORMAS ENZIMATICAS SON GLUCOPROTEINAS. LAS MOLECULAS TETRAMERICAS SON PROCESADAS EN EL TEJIDO NORMAL Y DISTROFICO DE MANERA DISTINTA, PROPONIENDOSE QUE EL DEPOSITO CON DESTINO A LA MEMBRANA PLASMATICA QUEDA AFECTADO POR LA CONDICION DISTROFICA. LAS FRACCIONES MICROSOMALES RICAS EN RETICULO SARCOPLASMICO DEL MUSCULO NORMAL Y DISTROFICO EXPRESAN ACTIVIDAD ACHE. LA COMPOSICION DE FORMAS MOLECULARES Y SU DOTACION DE CARBOHIDRATOS ESTAN ALTERADAS POR LA DISTROFIA MUSCULAR. SE PROPONE QUE EL PROCESAMIENTO DE LAS MOLECULAS PUEDE DEFINIR SU SITIO FUNCIONAL. LAS MODIFICACIONES EN LOS NIVELES DE ACTIVIDAD Y EN LA DISTRIBUCION DE LOS DISTINTOS COMPONENTES MOLECULARES DE LA ACHE INTRA Y EXTRAMUSCULAR PUEDEN AFECTAR AL NIVEL DEL NEUROTRANSMISOR ACETILCOLINA EN LA UNION NEUROMUSCULAR Y, POR TANTO, A LA FUNCIONALIDAD NORMAL DEL SISTEMA MUSCULAR.

Autor: GARCIA FUENTES LUIS.
Año: 1993.
Universidad: ALMERIA.
Centro de lectura: CIENCIAS EXPERIMENTALES.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA FISICA, BIOQUIMICA Y QUIMICA INORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: AGROQUIMICA AVANZADA.

Resumen: SE HA DISEÑADO UN SISTEMA MICROCALORIMETRICO ISOTERMICO DE TITULACION DE ALTA SENSIBILIDAD CON EL QUE SE PRETENDE CARACTERIZAR TERMODINAMICAMENTE LAS INTERACCIONES ENTRE SISTEMAS BIOLOGICOS MOLECULARES UNA VEZ CALIBRADO Y CARACTERIZADO DICHO INSTRUMENTO SE HA INVESTIGADO EL PROCESO DE UNION ENTRE LA PROTEINA TIMIDILATO SINTASA DE LACTOBACILUS CASEI CON EL INHIBIDOR 5-FLUORO-2-DESOXIURIDIN MONOFOSFATO (FDUMP) A TRES TEMPERATURAS Y EN VARIOS TAMPONES. EL ESTUDIO EN DISTINTOS MEDIOS DE REACCION NOS HA PERMITIDO OBTENER EL NUMERO DE PROTONES INTERCAMBIADOS ENTRE EL COMPLEJO TIMIDILATO SINTASA - FDUMP. SE OBTIENE QUE EL COMPLEJO TS-FDUMP SE PROTONIZA EN EL PROCESO DE UNION. EL ESTUDIO A DIVERSAS TEMPERATURAS HA PERMITIDO OBTENER EL CAMBIO DE CAPACIDAD CALORIFICAS. TODOS LOS RESULTADOS APOYAN QUE EN EL PROCESO DE UNION NO SE PRODUZCA UN GRAN CAMBIO CONFORMACIONAL.

Autor: GONZALEZ LIMAS GABRIEL.
Año: 1990.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: HOSPITAL RAMON Y CAJAL.

Resumen: A PARTIR DE EXTRACTOS COMPUESTOS DE MEZCLAS COMPLEJAS DE PROTEINAS DE RESERVA ALMACENADAS EN EL ENDOSPERMO DE TRIGO, CEBADA Y ARROZ SE HA DISEÑADO UNA NUEVA ESTRATEGIA DE PURIFICACION CONSISTENTE EN UN PRIMER PASO DE PURIFICACION MEDIANTE FRACCIONAMIENTO CON BICARBONATO AMONICO Y/O ETANOL SEGUIDO DE UN SEGUNDO PASO CONSISTENTE EN UNA SEPARACION MEDIANTE CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA EFICIENCIA EN FASE REVERSA (RP-HPLC). SE HAN OBTENIDO ASI 5 PROTEINAS PURAS A PARTIR DE UN EXTRACTO DE PROTEINAS SOLUBLES EN CLOROFORMO METANOL OBTENIDO DE ENDOSPERMO DE TRIGO. SE HAN CARACTERIZADO COMO CH2, CH3, ALFA-GLIADINA Y COMO DOS NUEVOS COMPONENTES DEL GRUPO DE GLIADINAS DE ALTO Y DE BAJO PESO MOLECULAR. ASIMISMO SE HA AISLADO PARCIALMENTE UNA NUEVA ALFA-GLIADINA. TAMBIEN SE HAN DETECTADO, POR VEZ PRIMERA, SEIS COMPONENTES INDIVIDUALES QUE RECONOCEN ESPECIFICAMENTE IGA (INMUNOGLOBULINA A) DE SUEROS DE PACIENTES CELIACOS. TAMBIEN SE HAN AISLADO A ESCALA PREPARATIVA 4 PROTEINAS A PARTIR DE UN EXTRACTO DE PROTEINAS SOLUBLES EN NACL OBTENIDO DEL ENDOSPERMO DE CEBADA. HAN SIDO CARACTERIZADOS COMO HORDOTIONINAS (HT): ALFA-HT, BETA-HT Y GAMMA-HT (ESTA ULTIMA ES NUEVA) Y COMO UNA NUEVA GLOBULINA, TAMBIEN EN CEBADA SE HAN PURIFICADO 7 COMPONENTES A PARTIR DE UN EXTRACTO DE PROTEINAS SOLUBLES EN CLOROFORMO-METANOL Y CARACTERIZADAS COMO: CM A,B,C, D Y C Y DOS NUEVOS COMPONENTES DEL GRUPO DE B1-MORDEINAS Y HORDEINAS DE BAJO PESO MOLECULAR. A PARTIR DE UN EXTRACTO DE PROTEINAS SOLUBLES EN NACL OBTENIDO DEL ENDOSPERMO DE ARROZ SE HAN PURIFICADO 11 COMPONENTES SIENDO 10 DE ELLOS NUEVOS Y EL RESTANTE UNA ALFA-GLOBULINA. DOS DE ESTOS COMPONENTES RECONOCEN ESPECIFICAMENTE IGE DE SUEROS DE PACIENTES ALERGICOS A CEREALES. LOS COMPONENTES DE CEBADA ALFA-HT, BETA-HT Y GAMMA-HT, ASI COMO, CUATRO DE LOS COMPONENTES DE ARROZ INHIBEN LA SINTESIS DE PROTEINAS EN UN SISTEMA LIBRE DE CELULAS OBTENIDO DE CEREBRO DE RATA.

Autor: CELMA LEZCANO CARLOS .
Año: 1989.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENT DE QUIMICA ORGANICA FACULTAT DE QUIMICA DIVISIO DE CIENCIES EXPERIM ENTALS I MATEMATIQUES UNIVERSITAT DE BARCELONA.

Resumen: LA TESIS DOCTORAL ESTA DIVIDIDA EN TRES CAPITULOS, EN EL PRIMERO DE DESCRIBEN LOS TRABAJOS SINTETICOS, ANALITICOS Y EL ANALISIS CONFORMACIONAL DE UNA SERIE DE PEPTIDOS CON ESTRUCTURAS DE LA FORMA (VAL-HIS-LEU-PRO-PRO-PRO)X CON X ENTRE 1 Y 8 QUE CONSTITUYEN UN MODELO DE LA ZONA REPETITIVA DEL ESTREMO N-TERMINAL DE LA PROTEINA GLUTELINA 2 QUE SE ENCUENTRA EN LOS CUERPOS PROTEICOS DEL GRANO DE MAIZ. LA ESTRATEGIA SEGUIDA ES DE TIPO CONVERGENTE Y SE ENSAYARON DISTINTAS COMBINACIONES DE GRUPOS PROTECTORES Y MODOS DE DESPROTECCION. LA HIPOTESIS DEFENDIDA SOBRE LA POSIBLE CONFORMACION DE ESTOS PEPTIDOS ES LA DE UNA HELICE DE POLIPROLINA AMFIPATICA. EN EL SEGUNDO CAPITULO SE DESCRIBA LA OPTIMIZACION DEL PROCEDIMIENTO DE OBTENCION DE ESPECTROS DE MASAS CON IONIZACION POR BOMBARDEO CON ATOMOS RAPIDOS UTILIZANDO UN ESPECTROMETRO COMERCIAL CON DETECTOR DE CUADRUPOLO. LOS RESULTADOS DEMUESTRAN QUE ES POSIBLE LLEGAR AL LIMITE DE DETECCION DE MASAS DEL APARATO CON UNA SENSIBILIDAD CONSIDERABLE. EN EL TERCER CAPITULO SE ELABORA LA APLICACION DE UN METODO PARA DETERMINAR LA PUREZA ESTEREOQUIMICA DE UN PEPTIDO SIN LA INCERTIDUMBRE INTRODUCIDA POR LA RACEMIZACION PRODUCIDA DURANTE LA HIDROLISIS. LA TECNICA SE BASA EN LA UTILIZACION DE ACIDO CLORHIDRICO DEUTERADO PARA LA HIDROLISIS, SEPARACION DE LOS AMINOACIDOS CONVENIENTEMENTE DERIVADOS POR CROMATOGRAFIA DE GASES EN DASE QUIRAL Y DETECCION POR ESPECTROMETRIA DE MASAS. EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA AMPLIADO EL RANGO DE UTILIDAD DEL METODO UTULIZANDO IONIZACION QUIMICA Y SE HA APLICADO A AMINOACIDOS NO NATURALES Y A PROLINA.

Autor: CRESPO MIRA JAIME JAVIER.
Año: 1988.
Universidad: ALICANTE.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS DE ALICANTE.

Resumen: EN EL TRABAJO SE PROPONE UN MECANISMO DE FORMACION DE LA IMAGEN EN UN HOLOGRAMA DE VOLUMEN REALIZADO EN GELATINA DICROMATADA, COMPROBANDOSE EXPERIMENTALMENTE LA HIPOTESIS. SE DESCRIBEN LAS TECNICAS EMPLEADAS PARA REALIZAR ESPEJOS PARABOLICOS HOLOGRAFICOS EN CAPAS DE GELATINA ROUSSELOT RS-13311. LOS ESPEJOS TIENEN UN RENDIMIENTO DIFRACCIONAL DEL 85% Y SE COMPRUEBA QUE PUEDEN ACTUAR PERFECTAMENTE COMO CONCENTRADORES SOLARES. SE DESARROLLA UNA TECNICA, CONSISTENTE EN INCORPORAR A LA CAPA DE GELATINA DETERMINADAS SUSTANCIAS DE HINCHADO, QUE PERMITE CONSEGUIR QUE LA LONGITUD DE ONDA DE RESPUESTA DE LOS CONCENTRADORES ESTE POR DEBAJO DE LA LONGITUD DE ONDA DEL LASER EMPLEADO EN LA REALIZACION DE LOS ESPEJOS HOLOGRAFICOS. ASI, SE LOGRA QUE CONCENTRADORES IMPRESIONADOS CON = 488 NM DE UN LASER DE ARGON, TENGAN SU RESPUESTA CENTRADA EN 420 NM. TAMBIEN, MEDIANTE ALTERACIONES EN EL PROCESADO DE LOS ESPEJOS HOLOGRAFICOS SE CONSIGUE AUMENTAR LA ANCHURA DE BANDA DE LA LUZ DIFRACTADA POR ELLOS. POR ULTIMO, SE DESCRIBE UN PROCEDIMIENTO PARA CONSEGUIR, MEDIANTE LA SUPERPOSICION DE DOS HOLOGRAMAS (ESPEJOS HOLOGRAFICOS PARABOLICOS), CONCENTRADORES CON UNA BANDA DE RESPUESTA SUPERIOR A LOS 50 NM, CENTRADA EN LA ZONA AZULVIOLETA DEL ESPECTRO ( 418 NM).

Autor: DOLLET DEL ALAMO M. CRISTINA.
Año: 1986.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE QUIMICA FISICA QUIMICA ANALITICA E INGENIERIA QUIMICA..

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HA APLICADO EL MODELO GENERAL DE ISOMEROS ROTACIONALES JUNTO CON EL METODO DE CALCULO MATRICIAL DE FLORY PARA ESTUDIAR LAS DIMENSIONES MOMENTOS DIPOLARES ANISOTROPIAS OPTICAS CUADRATICAS Y CONSTANTES KERR DE CADENAS DE POLIGLICINA CON DISTINTAS ESTRUCTURAS SECUNDARIA Y TERCIARIA.

Autor: FERNANDEZ SANTIN JOSE M..
Año: 1986.
Universidad: POLITECNICA DE CATALUÑA .
Centro de lectura: INGENIEROS INDUSTRIALES.
Centro de realización: ESCUELA TECNICA SUPERIOR DE INGENIEROS INDUSTRIALES DE BARCELONA. U.P.C..

Resumen: SE HA EFECTUADO LA SINTESIS CARACTERIZACION Y ESTUDIO ESTRUCTURAL POR MICROSCOPIA ELECTRONICA Y DIFRACCION DE RAYOS X DEL NYLON 3 Y DE SU DERIVADO SUSTITUIDO CON UN GRUPO ESTER LATERAL EL POLI (X-ISOBUTIL-L-ASPAR-TATO) (PAIBLA). EL NYLON 3 PRESENTA DOS FORMAS CRISTALINAS (I Y II) QUE DIFIEREN ENTRE SI SOLO EN LA ORIENTACION RELATIVA DE LAS HOJAS MOLECULARES DE PARAMETROS: FORMA I: MONOCLINICA A=9.60 A C=8.96 A B=122.5 FORMA II: ORTORROMBICA A=9.56 A C=7.56 A. EN EL PAIBLA SE HAN ENCONTRADO DOS FORMAS CRISTALINAS (H Y T) AMBAS CON CONFORMACIONES EN HELICE ESTABILIZADAS MEDIANTE PUENTES DE HIDROGENO INTRAMOLECULARES DE PARAMETROS: FORMA H: ORTORROMBICA A=13.5 A B=23.4 A C=19.9 A (13/4) FORMA T: TETRAGONAL A=14.0 A C=4.95 A (4/1).

Autor: RODES MONEGAL MARGARITA.
Año: 1976.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FARMACIA.

Resumen: EN LA RATA LAS PROTEINAS TOTALES DEL CEREBRO Y CEREBELO AUMENTAN CON LA EDAD SIENDO SU AUMENTO PARALELO AL INCREMENTO DEL PESO DEL ORGANO. EL RNA SIGUE UNA LINEA PARALELA AL DNA ALCANZANDOSE EL VALOR FINAL ADULTO HACIA LOS 18 DIAS DE VIDA POSTNATAL. LOS LIPIDOS AUMENTAN MARCADAMENTE EN EL ENCEFALO ENTRE LOS 0 Y 98 DIAS DE EDAD - EN LA ESPECIE HUMANA EL PERIODO DE MAXIMO CRECIMIENTO DEL CEREBELO ESTA RETRASADO CON RESPECTO AL CEREBRO -